一种用于治疗类风湿性关节炎的组合物及其应用
阅读说明：本技术 一种用于治疗类风湿性关节炎的组合物及其应用 (Composition for treating rheumatoid arthritis and application thereof ) 是由 张海龙 张代铭 郑忠辉 潘西海 聂云波 于 2020-03-26 设计创作，主要内容包括：本发明公开一种用于治疗类风湿性关节炎的组合物及其应用,所述组合物包括组分A和组分B,组分A为托法替布或其药学上可接受的盐,组分B为非甾体抗炎药(NSAIDs)中的一种或/和多种；组合物中组分A与组分B的重量比为1：30～240。本发明提供的组合物可以通过两种成分作用于类风湿性关节炎的不同靶点,发挥协同治疗类风湿性关节的作用,同时显著降低组分B的用量,降低毒副作用。另外,组分B可降低服用组分A导致的不良反应。(The invention discloses a composition for treating rheumatoid arthritis and application thereof, wherein the composition comprises a component A and a component B, the component A is tofacitinib or pharmaceutically acceptable salt thereof, and the component B is one or/and a plurality of non-steroidal anti-inflammatory drugs (NSAIDs); the weight ratio of the component A to the component B in the composition is 1: 30 to 240. The composition provided by the invention can act on different targets of rheumatoid arthritis through two components, play a role in synergistically treating rheumatoid arthritis, and simultaneously remarkably reduce the dosage of the component B and reduce toxic and side effects. In addition, the component B can reduce adverse reactions caused by taking the component A.)
技术领域
本发明属于药物制剂
技术领域
，具体涉及一种用于治疗类风湿性关节炎的组合物及其应用。背景技术
类风湿关节炎是临床上的多发病症，发病率约为1％，疾病涉及全身多个关节，最终导致骨和关节功能的丧失，严重影响病人的生活质量。目前临床上虽能对疾病进程进行控制，但尚缺乏有效的治愈手段，而且所用的药物还有强烈的副作用。
托法替布是Janus激酶（JAK）抑制剂，2012年通过美国食品药品监督管理局FDA批准上市，主要用于类风湿性关节炎的治疗，但长期服用容易降低机体的免疫力导致严重感染；布洛芬为非甾体抗炎药的一种，具有解热、镇痛的作用，临床也可用于类风湿性关节炎的治疗，但用量极大，可达到2.4g/天，长期使用副作用大。
研究表明，长期服用托法替布会引起全身性感染，布洛芬可改善细胞免疫功能，提高抗感染能力。托法替布与布洛芬联用，能显著降低布洛芬剂量，并保持或提高疗效，同时降低托法替布的不良反应，这对患者具有重大意义。
发明内容
有鉴于此，本发明的主要目的在于提供一种用于治疗类风湿性关节炎的组合物，以解决现有技术中存在的问题。
为实现上述目的，本发明的技术方案如下：
一种用于治疗类风湿性关节炎的组合物，所述组合物包括组分A和组分B，所述组分A为托法替布或其药学上可接受的盐，所述组分B为非甾体抗炎药（NSAIDs）中的一种或/和多种。
优选地，所述组分B为阿司匹林、对乙酰氨基酚、双氯芬酸、吲哚美辛、布洛芬、舒林酸、萘普生、萘丁美酮、吡罗昔康、塞来昔布中的一种或/和多种。进一步优选地，所述组分B为布洛芬。
优选地，所述组分A为枸橼酸托法替布。
托法替布是Janus激酶（JAK）抑制剂。JAK是细胞内酶，其在细胞膜上传递由细胞因子或生长因子-受体相互作用产生的信号，以影响造血作用和免疫细胞功能的细胞过程。在信号传导途径中，JAK磷酸化并激活信号转导子和转录激活子（STATs），后者调节细胞内活性，包括基因表达。托法替布会抑制JAK调节信号通路，从而阻止STAT的磷酸化和激活。JAK酶通过JAK配对（例如JAK1/JAK3，JAK1/JAK2，JAK1/TyK2，JAK2/JAK2）传输细胞因子信号。托法替布抑制JAK1 /JAK2，JAK1/JAK3和JAK2/JAK2组合的体外活性，IC50分别为406、56和1377 nM。
布洛芬能够抑制COX-2的活性，阻断前列腺素（PGE2）的合成。布洛芬可以直接抑制白细胞的活化和聚集并减少白三烯B4（白细胞趋化因子和激活因子）的生成。布洛芬可改善细胞免疫功能，提高抗感染能力。
RA中的炎症通路中，细胞因子通过JAK途径传导诱导炎症基因表达增强，磷酸化的STATs在细胞核内进行基因调控，上调免疫细胞因子的表达，活化炎症从而高表达COX-2，高表达的COX-2会合成大量的PGE2，引起炎症、水肿和疼痛。因此，在上游端通过抑制JAK途径来抑制JAK/STATs通路的传导，降低细胞因子的表达从而可能会中断炎症部位白细胞募集、激活和促炎细胞因子表达的周期。在下游端，通过抑制COX-2的活性可以降低PGE2的表达。因此，联合应用托法替布和布洛芬在RA的上游端和下游端同时阻断细胞因子的通路，可以起到协同治疗RA的作用。联合应用托法替布和布洛芬托法替布和布洛芬协同作用机理见图1。
由于协同作用的存在，布洛芬的日服用剂量可由2.4g/天降到800mg/天以下。同时，由于布洛芬可改善细胞免疫功能，提高了抗感染能力，从而降低了长期服用托法替布导致严重感染的不良反应。
托法替布和布洛芬的药物组合物，给药途径包括但不限于以下方式：经胃肠道给药，例如口服给药；不经胃肠道给药，例如肌肉注射给药、静脉注射给药或经皮给药。在治疗类风湿性关节炎中，优选口服给药。
所述用于治疗类风湿性关节炎的组合物，其中，所述组分A与所述组分B的重量比为1：30~240。优选地，所述组分A与所述组分B的重量比为1：50~200。进一步优选地，所述组分A与所述组分B的重量比为1：60~120。更进一步优选地，所述组分A与所述组分B的重量比为1：60~80。
优选地，所述用于治疗类风湿性关节炎的组合物，所述组分A为枸橼酸托法替布，所述组分B为布洛芬，且枸橼酸托法替布（以托法替布计）与布洛芬的重量比为1：40～240。优选地，枸橼酸托法替布（以托法替布计）与布洛芬的重量比为1：50～200。进一步优选地，枸橼酸托法替布（以托法替布计）与布洛芬的重量比1：60～120。更进一步优选地，枸橼酸托法替布（以托法替布计）与布洛芬的重量比为1：60~80。
其中，所述的布洛芬低于单用有效剂量。所述的低于单用有效剂量是指联合药物中布洛芬的剂量低于单独给予各组分时通常预期可产生有效治疗应答的量。
本发明的目的还在于提供上述任一所述组合物在制备治疗类风湿性关节炎的药物中的应用。
所述用于治疗类风湿性关节炎的组合物口服给药可选的剂型包括但不限于：片剂、颗粒剂、胶囊剂、溶液剂。其中，优选缓释胶囊剂。
所述缓释胶囊剂由包含托法替布和包含布洛芬的颗粒组成，其中所述颗粒可由微片、微丸的一种或/和多种组成。
所述颗粒其有效成分为托法替布或/和布洛芬，还包括药学上可接受的辅料，所述的辅料包括但不限于：空白丸芯、粘合剂。
空白丸芯包括蔗糖丸芯、淀粉丸芯、微晶纤维素丸芯、酒石酸丸芯、二氧化硅丸芯、甘露醇丸芯。
粘合剂包括聚维酮、羟丙甲纤维素、羟丙纤维素。
优选地，所述颗粒由包含托法替布的速释颗粒和包含布洛芬的缓释颗粒组成。
所述托法替布速释颗粒处方组成包含但不限于：
组分A：5%-20%
蔗糖丸芯：80%-95%
聚维酮：1%-5%
所述布洛芬缓释颗粒处方组成包含但不限于：
组分B：70%-90%
蔗糖丸芯：10%-30%
聚维酮：1%-5%
所述托法替布速释颗粒在1小时内释放完全，所述布洛芬缓释颗粒可持续释放12小时以上。
所述布洛芬缓释颗粒不包含缓释材料。
优选地，所述缓释胶囊剂由包含托法替布的速释层和包含布洛芬的缓释层的同一种颗粒组成。
所述颗粒处方组成包含但不限于：
组分A：0.5%-5%
组分B：65%-90%
蔗糖丸芯：10%-30%
聚维酮：1%-5%
所述颗粒中包含托法替布的速释层在1小时内释放完全，包含布洛芬的缓释层可持续释放12小时以上。
所述颗粒中不包含缓释材料。
本发明的有益效果为：
本发明提供了一种用于治疗类风湿性关节炎的组合物。托法替布与布洛芬联合使用减少了布洛芬的用量，增加药物疗效，降低药物的毒副作用，从而达到更好的治疗类风湿关节炎的作用。
附图说明
图1 RA病理过程及托法替布和布洛芬作用点。
具体实施方式
在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本发明。但是本发明能够以很多不同于在此描述的其它方式来实施，本领域技术人员可以在不违背本发明内涵的情况下做类似改进，因此本发明不受下面公开的具体实施的限制。
除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本发明的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在于限制本发明。
实施例1
速释颗粒制备
(1)处方
托法替布 5mg/粒
蔗糖丸芯80 mg/粒
聚维酮 1 mg/粒
纯化水 适量（qs）
(2)制备方法
在配置容器中，加入处方量纯化水，分次缓缓加入聚维酮，搅拌使完全溶解，分次缓缓加入微粉化托法替布，搅拌均匀得混悬液。在包衣设备中投入处方量蔗糖丸芯，缓慢喷入混悬液，喷液完毕后干燥，得速释颗粒。
缓释颗粒的制备
(1)处方
布洛芬 300 mg/粒
蔗糖丸芯80 mg/粒
聚维酮 8 mg/粒
纯化水 qs
(2)制备方法
在配置容器中，加入处方量纯化水，分次缓缓加入聚维酮，搅拌使完全溶解，分次缓缓加入微粉化布洛芬，搅拌均匀得混悬液。在包衣设备中投入处方量蔗糖丸芯，缓慢喷入混悬液，喷液完毕后干燥，得缓释颗粒。
缓释胶囊的制备
按照托法替布剂量5mg/粒以及布洛芬剂量300mg/粒将速释颗粒与缓释颗粒填充于同一个胶囊即得。
实施例2
速释颗粒制备
(1)处方
托法替布 5mg/粒
蔗糖丸芯80 mg/粒
聚维酮 1 mg/粒
纯化水 qs
(2)制备方法
在配置容器中，加入处方量纯化水，分次缓缓加入聚维酮，搅拌使完全溶解，分次缓缓加入微粉化托法替布，搅拌均匀得混悬液。在包衣设备中投入处方量蔗糖丸芯，缓慢喷入混悬液，喷液完毕后干燥，得速释颗粒。
缓释颗粒的制备
(1)处方
布洛芬 400 mg/粒
蔗糖丸芯80 mg/粒
聚维酮 10 mg/粒
纯化水 qs
(2)制备方法
在配置容器中，加入处方量纯化水，分次缓缓加入聚维酮，搅拌使完全溶解，分次缓缓加入微粉化布洛芬，搅拌均匀得混悬液。在包衣设备中投入处方量蔗糖丸芯，缓慢喷入混悬液，喷液完毕后干燥，得缓释颗粒。
缓释胶囊的制备
按照托法替布剂量5mg/粒以及布洛芬剂量400mg/粒将速释颗粒与缓释颗粒填充于同一个胶囊即得。
实施例3
(1)处方
托法替布5 mg/粒
布洛芬 300 mg/粒
蔗糖丸芯80 mg/粒
聚维酮 8 mg/粒
纯化水 qs
(2)制备方法
在配置容器1中，加入纯化水适量，分次缓缓加入部分聚维酮，搅拌使完全溶解，分次缓缓加入微粉化托法替布，搅拌均匀得混悬液1。在配置容器2中，加入纯化水适量，分次缓缓加入剩余聚维酮，搅拌使完全溶解，分次缓缓加入微粉化布洛芬，搅拌均匀得混悬液2。在包衣设备中投入处方量蔗糖丸芯，缓慢喷入混悬液2，喷液完毕后干燥，得布洛芬缓释层颗粒。以布洛芬缓释层颗粒为底物继续缓慢喷入混悬液1，喷液完毕后干燥，得同时含布洛芬缓释层和托法替布速释层颗粒。将颗粒填充于胶囊即得缓释胶囊。
实施例4
(1)处方
托法替布5 mg/粒
布洛芬 400 mg/粒
蔗糖丸芯80 mg/粒
聚维酮 10 mg/粒
纯化水 qs
(2)制备方法
在配置容器1中，加入纯化水适量，分次缓缓加入部分聚维酮，搅拌使完全溶解，分次缓缓加入微粉化托法替布，搅拌均匀得混悬液1。在配置容器2中，加入纯化水适量，分次缓缓加入剩余聚维酮，搅拌使完全溶解，分次缓缓加入微粉化布洛芬，搅拌均匀得混悬液2。在包衣设备中投入处方量蔗糖丸芯，缓慢喷入混悬液2，喷液完毕后干燥，得布洛芬缓释层颗粒。以布洛芬缓释层颗粒为底物继续缓慢喷入混悬液1，喷液完毕后干燥，得同时含布洛芬缓释层和托法替布速释层颗粒。将颗粒填充于胶囊即得缓释胶囊。
实施例5
以下实验证明本发明的有益效果
（1）受试药物
枸橼酸托法替布(购自湖北鑫润德)；布洛芬(购自山东新华药业)。
（2）动物
二型胶原性关节炎的小鼠模型：取8周龄的DBA/1J雄性小鼠，于第0天在小鼠尾根部皮下注射含50μl 2mg/ml的牛二型胶原和50μl 1mg/ml的完全弗氏佐剂的乳化剂。并于第21天在尾根部皮下注射含50μl 2mg/ml的牛二型胶原和50μl不完全弗氏佐剂的乳化剂。
（3）受试动物按所给药物分组：
1)正常组
2)二型胶原性关节炎模型组
3)枸橼酸托法替布(1 mg/kg，以托法替布计，下同)组
4)枸橼酸托法替布(2 mg/kg)组
5)布洛芬(100mg/kg)组
6)布洛芬(150mg/kg)组
7)布洛芬(200mg/kg)组
8)枸橼酸托法替布(1 mg/kg)+布洛芬(60 mg/kg)组
9)枸橼酸托法替布(1mg/kg)+布洛芬(70mg/kg)组
10)枸橼酸托法替布(1 mg/kg)+布洛芬(80 mg/kg)组 。
（4）给药方案
从第21天开始按照设定的药物分组进行给药，均为灌胃给药。
（5）小鼠炎症病变评分及脾脏和胸腺组织指数
所有小鼠均在初次免疫后第42日处死，分别取出血清，四肢关节，胸腺组织和脾脏组织。将后肢关节组织用4％福尔马林及EDTA的溶液固定脱钙，石蜡包埋，作4-5微米厚的冠状切片，并用苏木精－伊红染色。
1）按照以下标准对关节的组织学变化进行评分
关节滑膜被覆上皮细胞有无变性、坏死，有无纤维组织增生，间质有无充血、炎细胞浸润。关节软骨和骨组织有无破坏或纤维化。根据关节各部位病变轻重程度，依次定量为“1分(轻度)”，“2分(中度)”，“3分(重度)”，“4分(极重度)”，无病变组织计为“0分”。累加所有分数，得出总分，计算出每组每只动物的均分 进行t检验。
组织切片检查发现模型组动物的关节组织发现滑膜细胞变性、坏死，滑膜组织充血、有多量炎细胞浸润和纤维组织增生。关节软骨和骨组织严重破坏，大量纤维组织增生致关节腔消失；而托法替布与布洛芬联用组，低剂量组治疗后对动物炎症局部的炎症反应和滑膜组织病变及软骨、骨组织破坏都有显著改善。各组的组织病变学评分结果如表1所示。*P<0.05,**P<0.01,vs模型小鼠。
表1各组的组织病变学评分
组别
动物（只）
病变评分（`X±SD）
(1)正常组
5
0.00±0.00**
(2)二型胶原性关节炎模型组
5
10.90±2.65*
(3)枸橼酸托法替布(1 mg/kg)组
5
6.70±3.02
(4)枸橼酸托法替布(2 mg/kg)组
5
5.20±2.36
(5)布洛芬(100mg/kg)组
5
8.40±3.79**
(6)布洛芬(150mg/kg)组
5
7.90±3.21*
(7)布洛芬(200mg/kg)组
5
7.50±2.53*
(8)枸橼酸托法替布(1 mg/kg)+布洛芬(60 mg/kg)组
5
1.50±1.36
(9)枸橼酸托法替布(1 mg/kg)+布洛芬(70 mg/kg)组
5
1.50±1.86**
(10)枸橼酸托法替布(1 mg/kg)+布洛芬(80 mg/kg)组
5
1.40±2.33*
2）脾脏和胸腺指数的检测
取关节炎小鼠的脾脏和胸腺组织，分别称量它们的重量，按以下公式分别计算脾脏和胸腺指数：
脾脏指数＝脾脏重量(mg)/体重(g)×10
胸腺指数＝胸腺重量(mg)/体重(g)×10
各组脾脏指数、胸腺指数结果如表2所示。*P<0.05vs模型小鼠。
表2各组的脾脏指数和胸腺指数
组别
脾脏指数（mg/10g重量）
胸腺指数（mg/10mg重量）
(1)正常组
26.3±3.6**
12.0±3.2**
(2)二型胶原性关节炎模型组
46.2±3.1**
11.0±2.2**
(3)枸橼酸托法替布(1 mg/kg)组
18.2±2.3*
8.2±1.5
(4)枸橼酸托法替布(2 mg/kg)组
15.5±2.9
7.5±2.6
(5)布洛芬(100mg/kg)组
45.3±1.8**
11.2±2.7**
(6)布洛芬(150mg/kg)组
43.7±2.3
10.1±1.3**
(7)布洛芬(200mg/kg)组
42.5±2.3**
10.6±2.9*
(8)枸橼酸托法替布(1 mg/kg)+布洛芬(60 mg/kg)组
24.5±1.5**
10.8±2.4
(9)枸橼酸托法替布(1 mg/kg)+布洛芬(70 mg/kg)组
25.3±1.9**
11.8±2.6
(10)枸橼酸托法替布(1 mg/kg)+布洛芬(80 mg/kg)组
23.3±2.7
10.8±3.0*
在本实验所使用的剂量中托法替布组的脾脏指数和胸腺指数最低，免疫抑制作用很强，托法替布和布洛芬联合使用中未表现出明显的降低脾脏和胸腺指数的毒副作用，说明托法替布和布洛芬联合应用可以减轻其毒副作用。
（6）血清中抗体及细胞因子水平检测
取动物血清，依照CBA试剂盒说明书检测其中TNFα，IFNγ，IL-2，IL-4，IL-6，IL-10和IL17A的水平，并使用ELISA试剂盒检测其中IL-1β的水平，使用免疫球蛋白试剂盒检测其中的IgG，IgG1，IgG2a，IgG2b，IgG3，IgA和IgM的表达水平。各组IL-1β，IL-6，IgG以及IgG2b的结果如表3所示。*P<0.05vs模型小鼠。
表3关节炎小鼠血清中抗体及细胞因子的表达
组别
IgG（OD450mm）
IgG2b（OD450mm）
IL-1β（pg/ml）
IL-6（pg/ml）
(1)正常组
1.25±0.17*
0.72±0.26**
156.2±21.7*
10.3±1.7**
(2)二型胶原性关节炎模型组
1.42±0.12**
1.30±0.23*
436.2±35.5
30.5±3.4**
(3)枸橼酸托法替布(1 mg/kg)组
1.29±0.21
1.21±0.15**
323.2±45.1
22.3±3.4
(4)枸橼酸托法替布(2 mg/kg)组
1.25±0.23**
1.19±0.26
273.2±29.3*
18.5±2.5*
(5)布洛芬(100mg/kg)组
1.35±0.19*
1.23±0.16**
377.2±30.5**
27.2±1.9**
(6)布洛芬(150mg/kg)组
1.29±0.21**
1.20±0.13**
368.6±26.4**
23.1±2.6*
(7)布洛芬(200mg/kg)组
1.25±0.22**
1.12±0.19**
346.7±29.2**
21.8±2.7**
(8)枸橼酸托法替布(1 mg/kg)+布洛芬(60 mg/kg)组
1.02±0.15*
0.93±0.15*
162.6±26.3**
12.5±3.6
(9)枸橼酸托法替布(1 mg/kg)+布洛芬(70 mg/kg)组
1.08±0.16
1.01±0.25**
159.7±30.4*
13.0±3.1**
(10)枸橼酸托法替布(1 mg/kg)+布洛芬(80 mg/kg)组
1.05±0.21*
1.05±0.22*
152.2±23.5**
12.6±2.8**
结果表明，托法替布和布洛芬联合应用组能够比药物单用组更加显著的降低IL-1β，IL-6，IgG以及IgG2b的水平。
本发明中，虽然托法替布、布洛芬都可以用于治疗类风湿性关节炎，但是两者配伍使用的剂量及其效果是不可预料的，特别是现有技术缺乏预测对降低剂量后治疗效果的技术启示。本发明将低于各自有效剂量的两种药物联合使用，不但降低了托法替布的毒副作用，并且产生了协同增效的有益效果，为类风湿性关节炎患者提供了重要的治疗选择。
以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。