阅读说明：本技术 一种免疫调节剂hdc及其制备方法 (Immunomodulator HDC and preparation method thereof ) 是由 回晶 张业崎 白琦琦 韩凯 于 2021-10-14 设计创作，主要内容包括：本发明公开一种免疫调节剂HDC及其制备方法。取HDC对大鼠进行灌胃,饲养,显微镜观察大鼠粪便,当大鼠粪便中的缩小膜壳绦虫虫卵达到15个以上,收集带有虫卵的粪便；将谷物甲虫放至自然通风且干净的容器中,每天用燕麦喂养,每隔2-3天予以收集的新鲜的带有虫卵的粪便喂养,49天后,取完成接种的谷物甲虫的腹部,在解剖显微镜下观察腹腔内的内容物,对HDC进行阳性鉴定,使用移液管的尖端将鉴定完的HDC吸出,洗涤,储藏。本发明,将大鼠作为终宿主,谷物甲虫作为中间寄主,用来生产免疫调节剂HDC,可大量获得HDC。其在充足的营养条件下是良性的,以不损害免疫功能的方式调节自身紊乱的免疫功能,为进一步研究蠕虫在疾病治疗中的作用打下了坚实的基础。(The invention discloses an immunomodulator HDC and a preparation method thereof. Taking HDC to irrigate the stomach of a rat, feeding the rat, observing feces of the rat by a microscope, and collecting the feces with eggs when the number of eggs of the tapeworm in the rat feces reaches more than 15; putting grain beetles into a naturally ventilated and clean container, feeding the grain beetles with oats every day, feeding the grain beetles with fresh excrement with worm eggs collected every 2-3 days, taking the abdomen of the grain beetles after inoculation after 49 days, observing contents in the abdominal cavity under a dissecting microscope, carrying out positive identification on HDC, sucking out the identified HDC by using the tip of a pipette, washing and storing. The invention uses rat as final host and grain beetle as intermediate host to produce immune regulator HDC, which can obtain HDC in large quantity. It is benign under sufficient nutritional conditions, regulates self-disturbed immune function in a manner that does not impair immune function, and lays a solid foundation for further studies of the role of worms in disease treatment.)

一种免疫调节剂HDC及其制备方法

技术领域

本发明涉及免疫调节剂技术领域，具体涉及一种免疫调节剂的制备方法。

背景技术

免疫调节剂是指增强、促进和调节免疫功能的药物，对免疫系统的调控发挥重要作用，用于治疗机体对自身抗原发生免疫反应而导致自身组织损害所引起的疾病。目前，对于自身免疫性疾病的临床治疗，仍主要依赖于广谱免疫抑制剂和皮质类固醇，且需长期服用，而这些药物长期服用后导致的身体损害甚至超过自身免疫性疾病本身，所以亟需探究新的、更安全的治疗药物。

发明内容

本发明的目的是为了解决现有药物中存在的缺点，提供一种近天然的，以膜壳绦虫囊尾蚴时期的蠕虫作为一种免疫调节剂即HDC(Hymenolepis diminuta Cysticercoids)及其制备方法。

本发明采用的技术方案是：一种免疫调节剂HDC，所述免疫调节剂HDC是膜壳绦虫囊尾蚴时期的蠕虫。

一种免疫调节剂HDC的制备方法，包括如下步骤：

1)取HDC对大鼠进行灌胃，饲养3周后，显微镜观察大鼠粪便，评估产卵量，当大鼠粪便中的缩小膜壳绦虫虫卵达到15个以上，收集带有虫卵的粪便；

2)将谷物甲虫放至自然通风且干净的容器中，每天用燕麦喂养，每隔2-3天予以收集的新鲜的带有虫卵的粪便喂养，49天后，取完成接种的谷物甲虫的腹部，在解剖显微镜下观察腹腔内的内容物，对HDC进行阳性鉴定，使用移液管的尖端将鉴定完的HDC吸出；

3)将吸出的HDC进行洗涤，储藏。

优选的，上述的制备方法，所述洗涤是，将吸出的HDC转移至含有0.6％盐水的无菌培养皿中，以圆周运动轻轻涡旋，进行洗涤HDC。

优选的，上述的制备方法，所述储藏是，将洗涤后的HDC放入无菌且含有0.6％盐水的离心管中，在4℃的条件下进行储藏。

本发明的有益效果是：

1、本发明，将大鼠作为终宿主，谷物甲虫作为中间寄主，用来生产免疫调节剂HDC，从而研究其治疗自身免疫疾病的过程。HDC在长期进化的过程中获得了有效调控宿主免疫反应的能力，从而抑制或者缓解宿主自身免疫性疾病的发生与发展。其在充足的营养条件下是良性的，以不损害免疫功能的方式调节自身紊乱的免疫功能，为进一步研究蠕虫在疾病治疗中的作用打下了坚实的基础。

2、本发明，生产的免疫调节剂HDC，是一种膜壳绦虫囊尾蚴时期的蠕虫，其进入宿主后在消化道内存活，在长期进化过程中可诱导宿主肠道中Th2细胞增长，调控Th1与Th2细胞的比例，从而使宿主能够避免因免疫应答能力过度造成的组织与器官损伤。此外，HDC可诱导负向免疫调节作用且缓解特定的免疫性疾病。与现有免疫性疾病治疗药物对宿主造成的不良反应相比，HDC(Hymenolepis diminuta Cysticercoids)的这种负向调节方式理论上更加温和。因此，制备出具有显著调节作用的蠕虫源性免疫调节剂具有重大的实际意义和应用前景。

附图说明

图1是显微镜下的HDC。

具体实施方式

下面通过实施例对本发明做进一步的详细说明，但不作为对本发明的任何限制。

实施例1

一种免疫调节剂HDC的制备方法，包括如下步骤：

(一)HDC的定殖

动物饲养及处理：雄性SPF级SD大鼠适应性喂养7d，室内无菌无毒，饲养温度为20-24℃，相对湿度为55±10％，12h明暗交替。确保大鼠肠道无其他蠕虫。

取适量的HDC对大鼠进行灌胃，HDC在大鼠肠道中定殖，饲养3周后，生长在大鼠肠道中的缩小膜壳绦虫开始产卵，显微镜观察大鼠的粪便，评估产卵量。若产卵量过少，可再次予以HDC灌胃大鼠。当大鼠粪便中的缩小膜壳绦虫虫卵达到15个后，收集带有虫卵的粪便。

(二)接种谷物甲虫

购买谷物甲虫。将谷物甲虫放至自然通风且干净的容器中，以一些谷物类作为食物、以蔬菜作为水源进行饲养。

将已成熟到成虫阶段的谷物甲虫转移至新的自然通风且干净的容器中，每天用燕麦喂养，每隔2-3天予以收集的新鲜的带有虫卵的粪便喂养，确保每个谷物甲虫都可以吃到新鲜湿润且带有虫卵的大鼠粪便，49天后，完成第一次接种，成熟的HDC生长在谷物甲虫腹腔的肠外空间中。

(三)提取与鉴定HDC

在无菌操作台上，将完成第一次接种的谷物甲虫置于无菌培养皿中进行解剖，取其腹部，并放至解剖显微镜下观察腹腔内的内容物，鉴定HDC的特征形态。具体而言，在显微镜下对HDC进行观察，鉴定每个的形态特征，如图1所示，即为阳性。使用无菌的一次性移液管的尖端将鉴定为阳性的HDC吸出，注意避免转移谷物甲虫的其他部分。

(四)洗涤储藏

将吸出的HDC转移至一个新的含有0.6％盐水的无菌培养皿中，以圆周运动轻轻涡旋约20次，达到洗涤HDC的目的。然后将洗涤后的HDC放入无菌且含有0.6％盐水的离心管中，在4℃的条件下进行储藏，获得免疫调节剂HDC。

(五)形成循环实验

取适量从谷物甲虫中获得的免疫调节剂HDC再次予以大鼠灌胃，重复步骤(一)至步骤(四)，从而得到更多的HDC。

从谷物甲虫中获得的HDC具有治疗作用，可用于药物领域，对人体自身免疫性疾病进行调节。