具体实施方式

天然植物精油与有机酸复合而成的家禽用混合物对常规致病菌有良好的抑菌杀菌效果，可替代或减少抗生素的使用，能增强动物免疫力，同时具有促进动物消化，提高饲料转化率等作用。因此，本发明优选将植物精油与有机酸作为有效成分制成家禽用混合物。

目前大多数产品将有效成分混合后直接添加到饲料中进行饲喂，然而该类产品添加量大，种类多，生产运输不便，其质量受到原料产地、贮藏条件等诸多因素的影响，效果稳定性差，极大的限制了其商品化的应用与推广。而通过将植物精油和有机酸制备成水乳剂，可以降低有效成分的挥发，减少植物精油和有机酸对肠道的刺激性，并且通过饮水方式添加可以使其均匀地分布，操作方便。因此，本发明优选将所述家禽用混合物制成水乳剂。

由此，本发明提供的家禽用混合物的特征在于，该家禽用混合物含有：植物精油、有机酸、乳化剂、助乳化剂、增稠剂和水，所述家禽用混合物的剂型为水乳剂。

另外，香芹酚、肉桂醛和甲酸具有抗菌和杀菌功能。植物精油易与细菌脂质膜发生接触继而穿透细菌细胞膜，通过改变细胞膜双磷脂层的相变而提高细胞膜的通透性触发细胞内容物外溢。同时甲酸更易于渗透进入菌体内解离，改变细胞内液pH水平而导致细菌代谢系统紊乱，最终促使细菌活性降低并衰竭死亡，达到杀菌目的。香芹酚、肉桂醛和甲酸相互协调，具有高效杀菌的效果。香芹酚、肉桂醛可以增强动物对营养物质的消化和吸收，提高饲料消化率。香芹酚、肉桂醛与甲酸复合物可通过改善及维持动物健康生理状态，提高机体抗病能力，促进动物生长。因此，本发明中，所述植物精油优选为香芹酚和肉桂醛，所述有机酸优选为甲酸。

本发明通过实验研究表明，植物精油与有机酸具有一定的科学配比时，所述家禽用混合物对常规致病菌的抑菌杀菌效果更好。因此，在本发明中，以家禽用混合物的总量为100％计，以体积百分比计，优选所述香芹酚为5-10％，所述肉桂醛为10-15％，所述甲酸为3-5％。此时，所述家禽用混合物对常规致病菌的抑菌杀菌效果更好。

本发明人研究发现，当所述乳化剂为PEG40、所述助乳化剂为甘油，且以家禽用混合物的总量为100％计，以体积百分比计，所述乳化剂为10-20％，所述助乳化剂为1-5％时，得到的水乳剂没有分层现象，混合更均匀，效果更好，因此优选。

所述增稠剂可以为黄原胶；以家禽用混合物的总量为100％计，以体积百分比计，所述增稠剂可以为0.01-0.1％，所述水可以为44.9-70.9％。

本发明提供的家禽用混合物的制备方法的特征在于，步骤如下：

将有机酸溶解于水中，再加入助乳化剂和增稠剂并溶解，成为溶液A，将溶液A加入均质机，调节转速，搅拌混合5-10分钟；

将乳化剂溶解于植物精油，成为溶液B；

将溶液A加入溶液B，控制匀质机转速为7000r/min，乳化10-20min，然后过滤，即得到家禽用混合物。

在制备工艺上，采用均质机的乳化的工艺方法，使其精油和有机酸的乳滴更小，分散更均匀，稳定更好，有效解决了植物精油和有机酸易挥发、刺激性大、添加不方便的问题。由此制得的乳化剂在家禽饮水中添加可以提高生长性能、免疫力和改善肠道菌群，大大提高了家禽养殖的生产效益。

本发明还涉及家禽用混合物在提高家禽生长性能中的应用。

本发明还涉及家禽用混合物在提高家禽免疫性能中的应用。

本发明还涉及家禽用混合物在改善家禽肠道菌群中的应用。

本发明中所述的家禽可以为常见的家禽，如鸡、鸭等。

实施例

下面结合具体实施例对本发明做进一步说明，但本发明不受实施例的限制。本发明所述技术方案，如未特别说明，均为本领域的常规方案；所述试剂或材料，如未特别说明，均来源于商业渠道。

实施例1

实施例1用于说明本发明的家禽用混合物。

该实施例的家禽用混合物中，以家禽用混合物的总量为100％计，以体积百分比计，各成分的用量如下：香芹酚10％，肉桂醛15％，甲酸3％，PEG4010％，甘油1％，黄原胶0.1％，水60.9％。

该实施例的家禽用混合物的制备方法，步骤如下：

将甲酸溶解于适量纯化水中，再将助乳化剂甘油和增稠剂黄原胶一起溶解于水中，成为溶液A，将溶液A加入均质机，调节转速，搅拌混合5分钟；将乳化剂PEG40溶解于植物精油香芹酚、肉桂醛中，成为溶液B；将溶液A缓慢加入溶液B，控制匀质机转速7000r/min，乳化10min，然后过滤，即得到水乳剂型的家禽用混合物。

本实施例中制备的水乳剂在鸡饮水中的添加量为50g/t。

实施例2

实施例2用于说明本发明的家禽用混合物。

该实施例的家禽用混合物中，以家禽用混合物的总量为100％计，以体积百分比计，各成分的用量如下：香芹酚5％，肉桂醛10％，甲酸3％，PEG4015％，甘油5％，黄原胶0.05％，水61.95％。

该实施例的家禽用混合物的制备方法，步骤如下：

将甲酸溶解于适量纯化水中，再将助甘油和增稠剂黄原胶一起溶解于水中，成为溶液A，将溶液A加入均质机，调节转速，搅拌混合10分钟；将PEG40溶解于植物精油香芹酚、肉桂醛，成为溶液B；将溶液A缓慢加入溶液B，控制匀质机转速6000r/min，乳化20min，然后过滤，即得到水乳剂型的家禽用混合物。

本实施例中制备的水乳剂在鸡饮水中的添加量为100g/t。

实施例3

实施例3用于说明本发明的家禽用混合物。

该实施例的家禽用混合物中，以家禽用混合物的总量为100％计，以体积百分比计，各成分的用量如下：香芹酚10％，肉桂醛10％，甲酸3％，PEG4020％，甘油1％，黄原胶0.1％，水55.9％。

该实施例的家禽用混合物的制备方法，步骤如下：

将甲酸溶解于适量纯化水中，再将助甘油和增稠剂黄原胶一起溶解于水中，成为溶液A，将溶液A加入均质机，调节转速，搅拌混合10分钟；将PEG40溶解于植物精油香芹酚、肉桂醛，成为溶液B；将溶液A缓慢加入溶液B，控制匀质机转速8000r/min，乳化15min，然后过滤，即得到水乳剂型的家禽用混合物。

本实施例中制备的水乳剂在鸡饮水中的添加量为150g/t。

实施例4

实施例4用于说明本发明的家禽用混合物。

该实施例的家禽用混合物中，以家禽用混合物的总量为100％计，以体积百分比计，各成分的用量如下：香芹酚5％，肉桂醛10％，甲酸5％，PEG4010％，甘油1％，黄原胶0.1％，水68.9％。

水乳剂的制备方法，步骤如下：

将甲酸溶解于适量纯化水中，再将助甘油和增稠剂黄原胶一起溶解于水中成为溶液A，将溶液A加入均质机，调节转速，搅拌混合10分钟；将PEG40溶解于植物精油香芹酚、肉桂醛成为溶液B；将A液缓慢加入B液，控制匀质机转速7000r/min，乳化15min，然后过滤，即得到水乳剂型的家禽用混合物。

本实施例中制备的水乳剂在鸡饮水中的添加量为200g/t。

实施例5

实施例5用于与实施例1对比，说明本发明的家禽用混合物中优选的植物精油与有机酸的组合的效果。

在该实施例中，除了使用香芹酚25％代替香芹酚10％与肉桂醛15％的组合以外，其他与实施例1的制备方法相同，得到水乳剂型的家禽用混合物。

实施例6

实施例6用于与实施例1对比，说明本发明的家禽用混合物中优选的植物精油与有机酸的组合的效果。

在该实施例中，除了使用肉桂醛25％代替香芹酚10％与肉桂醛15％的组合以外，其他与实施例1的制备方法相同，得到水乳剂型的家禽用混合物。

实施例7

实施例7用于与实施例1对比，说明本发明的家禽用混合物中优选的植物精油与有机酸的配比的效果。

在该实施例中，除了使用肉桂醛8％、甲酸10％代替肉桂醛15％、甲酸3％的配比以外，其他与实施例1的制备方法相同，得到水乳剂型的家禽用混合物。

实施例8

实施例8用于与实施例1对比，说明本发明的家禽用混合物中优选的乳化剂与助乳化剂的选择及配比的效果。

在该实施例中，除了使用PEG4010.9％、甘油0.1％代替PEG4010％、甘油1％的配比以外，其他与实施例1的制备方法相同，得到水乳剂型的家禽用混合物。

对比例1

对比例1用于与实施例1对比，说明本发明的家禽用混合物选用植物精油与有机酸的组合作为有效成分、且制成水乳剂的效果。

在该对比例中，使用香芹酚10％、肉桂醛18％的组合来代替香芹酚10％、肉桂醛15％、甲酸3％的组合，且未使用PEG40和甘油，用水补足，得到对比例1的家禽用混合物溶液，未形成水乳剂。

下面通过具体实验来评价实施例1-8及对比例1的家禽用混合物。

1、稳定性实验

稀释稳定性：将1ml水乳剂，用自来水稀释20倍，搅拌均匀，静置1h，无沉淀或浮油为合格。

热贮稳定性：密封样品置于54±2℃、相对湿度60％±5％的条件下观察是否出现分层。

冷贮稳定性：制备的水乳剂分装于10ml离心管中，4℃冰箱中保存7d，若低温出现析油、沉淀或分层，置于室温或适当振摇可恢复原状，则低温稳定性合格，否则不合格。

平均粒径：通过显微图像照像系统对600个以上的粒子的粒径大小进行测定，进行平均值计算，观察是否达到亚微乳水平。

稳定常数：乳剂离心前后光密度变化百分率称为稳定常数，用Ke表示，Ke值愈小乳剂愈稳定，其表达式如下：

Ke＝(Ao-A)/A×100％

式中，Ao－未离心乳剂稀释液的吸光度；A－离心后乳剂稀释液的吸光度。

采用上述方法对实施例1-8及对比例1的家禽用混合物进行稳定性评估，结果如表1所示。

表1稳定性评估

由表1结果所示，实施例1-8中的水乳剂稳定性都比较好，对比例1没有形成水乳剂，稳定性较差。

2、试验动物与试验设计

试验1日龄雏鸡500只，随机分为10组(1个对照组、8个实施例组(分别对应实施例1-8)、1个对比例组(对应对比例1))，每组100只(具体分组情况见表2)，家禽用混合物按以下方案添加到鸡的日常饮水中，每组10个重复，每个重复10只鸡。试验周期为42d。试验期间，为控制疾病使用的其余药物完全相同。饲养试验结束时，称重后屠宰，颈静脉采血，对肉鸡生长性能、血液生化指标进行分析，并从每组内随机选择10只鸡进行屠宰(共50只)，检测肠道及粪便中细菌的数量。采集小肠样品，测定小肠绒毛高度和隐窝深度，进行数据统计分析。

试验开始前和结束后以重复为单位称重，记录体重数据。平均日增重＝(末重－始重)/试验天数，平均日采食量＝总采食量/试验天数。

取解冻后血清采用免疫透射比浊法测定IgA、IgG和IgM含量，采用ELISA检测血液抗氧化指标。

细菌含量检测：采用荧光定量PCR方法检测大肠杆菌、沙门氏菌和乳酸杆菌的表达量和相对表达量。

为了确定肠道组织形态，将组织样品脱水并用石蜡包埋，然后切成6μm厚度，并用苏木精和曙红染色。使用光学显微镜系统(Olympus Corporation，日本)观察组织切片。用ImagePro plus 6.0测定肠绒毛高度(绒毛顶端至绒毛与隐窝交界处)和隐窝深度(肠绒毛交界处至肠腺底部的垂直距离)，并计算绒毛高度/隐窝深度。

试验数据采用SPSS19.0统计软件进行统计分析，结果见下表。

表2试验分组及处理

表3生长性能指标

由表3结果所示，实施例1-8中鸡的日采食量和日增重，相对于对照组和对比例1都出现了显著的上升，说明实施例1-8均可起到提高鸡的生产性能，改善免疫力的效果，其中以实施例3的效果最优。

另外，与未采用香芹酚、肉桂醛和甲酸的组合作为有效成分的实施例5-6相比，采用了香芹酚、肉桂醛和甲酸的组合作为有效成分的实施例1的日采食量和日增重的效果更好，这表明采用香芹酚、肉桂醛和甲酸的组合作为有效成分时，能进一步提高鸡的生产性能。

与肉桂醛、甲酸的配比未在本发明优选的肉桂醛为10-15％、甲酸为3-5％的范围内的实施例7相比，肉桂醛、甲酸的配比在优选范围内的实施例1的日采食量和日增重的效果更好，这表明肉桂醛、甲酸的配比在优选范围内，能进一步提高鸡的生产性能。

与乳化剂、助乳化剂的配比未在本发明优选的乳化剂为10-20％、助乳化剂为1-5％的范围内的实施例8相比，乳化剂、助乳化剂的配比在优选范围内的实施例1的日采食量和日增重的效果更好，这表明乳化剂、助乳化剂的配比在优选范围内时，能进一步提高鸡的生产性能。

与未选用植物精油与有机酸的组合作为有效成分、且未制成水乳剂的对比例1相比，选用植物精油与有机酸的组合作为有效成分、且制成水乳剂的实施例1的日采食量和日增重显著增加，这表明选用植物精油与有机酸的组合作为有效成分、且制成水乳剂时，能显著提高鸡的生产性能。

表4血清抗氧化、免疫指标

由表4结果所示，实施例1-8中的血清总抗氧化能力、谷胱甘肽过氧化物酶的含量、球蛋白IgA、IgM、IgG含量相对于对照组都有一定或者显著的上升，这表明实施例1-4均可起到提高机体免疫力的作用，其中以实施例3的效果最优。

另外，与未采用香芹酚、肉桂醛和甲酸的组合作为有效成分的实施例5-6相比，采用了香芹酚、肉桂醛和甲酸的组合作为有效成分的实施例1的血清总抗氧化能力、谷胱甘肽过氧化物酶的含量、球蛋白IgA、IgM、IgG含量都有一定的上升，这表明采用香芹酚、肉桂醛和甲酸的组合作为有效成分时，能起到进一步提高机体免疫力的作用。

与肉桂醛、甲酸的配比未在本发明优选的肉桂醛为10-15％、甲酸为3-5％的范围内的实施例7相比，肉桂醛、甲酸的配比在优选范围内的实施例1的血清总抗氧化能力、谷胱甘肽过氧化物酶的含量、球蛋白IgA、IgM、IgG含量都有一定的上升，这表明肉桂醛、甲酸的配比在优选范围内时，能起到进一步提高机体免疫力的作用。

与乳化剂、助乳化剂的配比未在本发明优选的乳化剂为10-20％、助乳化剂为1-5％的范围内的实施例8相比，乳化剂、助乳化剂的配比在优选范围内的实施例1的血清总抗氧化能力、谷胱甘肽过氧化物酶的含量、球蛋白IgA、IgM、IgG含量都有一定的上升，这表明乳化剂、助乳化剂的配比在优选范围内时，能起到进一步提高机体免疫力的作用。

与未选用植物精油与有机酸的组合作为有效成分、且未制成水乳剂的对比例1相比，选用植物精油与有机酸的组合作为有效成分、且制成水乳剂的实施例1的血清总抗氧化能力、谷胱甘肽过氧化物酶的含量、球蛋白IgA、IgM、IgG含量都有显著上升，这表明选用植物精油与有机酸的组合作为有效成分、且制成水乳剂时，能起到有效提高机体免疫力的作用。

表5小肠绒毛高度和隐窝深度

小肠的绒毛高度、隐窝深度及绒毛高度/隐窝深度是评价动物消化道对养分消化吸收的重要指标。肠绒毛高度越大表明肠上皮细胞发育越好，绒毛高度影响养分吸收能力的强弱，相反，隐窝深度越浅表明肠上皮细胞成熟率越高。绒毛高度/隐窝深度降低表明吸收功能受到损伤，进而导致腹泻的可能性增加。

由表5结果所示，实施例1-8中的小肠绒毛高度相对于对照组都有增加，这表明实施例1-8均可起到改善肠道健康及功能的作用，能够降低隐窝深度，缓解小肠绒毛的萎缩，其中以实施例3的效果最优。

另外，与未采用香芹酚、肉桂醛和甲酸的组合作为有效成分的实施例5-6相比，采用了香芹酚、肉桂醛和甲酸的组合作为有效成分的实施例1的小肠绒毛高度有一定的增加，隐窝深度有一定的降低，这表明采用香芹酚、肉桂醛和甲酸的组合作为有效成分时，能起到进一步改善肠道健康及功能的作用。

与肉桂醛、甲酸的配比未在本发明优选的肉桂醛为10-15％、甲酸为3-5％的范围内的实施例7相比，肉桂醛、甲酸的配比在优选范围内的实施例1的小肠绒毛高度有一定的增加，隐窝深度有一定的降低，这表明肉桂醛、甲酸的配比在优选范围内时，能起到进一步改善肠道健康及功能的作用。

与乳化剂、助乳化剂的配比未在本发明优选的乳化剂为10-20％、助乳化剂为1-5％的范围内的实施例8相比，乳化剂、助乳化剂的配比在优选范围内的实施例1的小肠绒毛高度有一定的增加，隐窝深度有一定的降低，这表明乳化剂、助乳化剂的配比在优选范围内时，能起到进一步改善肠道健康及功能的作用。

与未选用植物精油与有机酸的组合作为有效成分、且未制成水乳剂的对比例1相比，选用植物精油与有机酸的组合作为有效成分、且制成水乳剂的实施例1的小肠绒毛高度有显著的增加，隐窝深度有显著的降低，这表明选用植物精油与有机酸的组合作为有效成分、且制成水乳剂时，能起到有效改善肠道健康及功能的作用。

表6肠道及粪便中的大肠杆菌含量(Log10(cfu/g))

由表6结果所示，实施例1-8中的各肠道内(盲肠、结肠、直肠)和粪便中大肠杆菌的含量相对于对照组都有显著的下降，这表明实施例1-8均可起到抵抗肠道有害菌大肠杆菌的作用，其中以实施例3的效果最优。

另外，与未采用香芹酚、肉桂醛和甲酸的组合作为有效成分的实施例5-6相比，采用了香芹酚、肉桂醛和甲酸的组合作为有效成分的实施例1在各肠道内(盲肠、结肠、直肠)和粪便中大肠杆菌的含量都有一定的下降，这表明采用香芹酚、肉桂醛和甲酸的组合作为有效成分时，能起到进一步抵抗肠道有害菌大肠杆菌的作用。

与肉桂醛、甲酸的配比未在本发明优选的肉桂醛为10-15％、甲酸为3-5％的范围内的实施例7相比，肉桂醛、甲酸的配比在优选范围内的实施例1在各肠道内(盲肠、结肠、直肠)和粪便中大肠杆菌的含量都有一定的下降，这表明肉桂醛、甲酸的配比在优选范围内时，能起到进一步抵抗肠道有害菌大肠杆菌的作用。

与乳化剂、助乳化剂的配比未在本发明优选的乳化剂为10-20％、助乳化剂为1-5％的范围内的实施例8相比，乳化剂、助乳化剂的配比在优选范围内的实施例1在各肠道内(盲肠、结肠、直肠)和粪便中大肠杆菌的含量都有一定的下降，这表明乳化剂、助乳化剂的配比在优选范围内时，能起到进一步抵抗肠道有害菌大肠杆菌的作用。

与未选用植物精油与有机酸的组合作为有效成分、且未制成水乳剂的对比例1相比，选用植物精油与有机酸的组合作为有效成分、且制成水乳剂的实施例1在各肠道内(盲肠、结肠、直肠)和粪便中大肠杆菌的含量都有显著下降，这表明选用植物精油与有机酸的组合作为有效成分、且制成水乳剂时，能起到有效抵抗肠道有害菌大肠杆菌的作用。

表7肠道及粪便中的沙门氏菌含量(Log10(cfu/g))

由表7结果所示，试验组1-8中的各肠道内(盲肠、结肠、直肠)和粪便中沙门氏菌的含量相对于对照组都有显著的下降，这表明试验组1-8均可起到抵抗肠道有害菌沙门氏菌的作用，其中以试验组3的效果最优。

另外，与未采用香芹酚、肉桂醛和甲酸的组合作为有效成分的实施例5-6相比，采用了香芹酚、肉桂醛和甲酸的组合作为有效成分的实施例1在各肠道内(盲肠、结肠、直肠)和粪便中沙门氏菌的含量都有一定的下降，这表明采用香芹酚、肉桂醛和甲酸的组合作为有效成分时，能起到进一步抵抗肠道有害菌沙门氏菌的作用。

与肉桂醛、甲酸的配比未在本发明优选的肉桂醛为10-15％、甲酸为3-5％的范围内的实施例7相比，肉桂醛、甲酸的配比在优选范围内的实施例1在各肠道内(盲肠、结肠、直肠)和粪便中沙门氏菌的含量都有一定的下降，这表明肉桂醛、甲酸的配比在优选范围内时，能起到进一步抵抗肠道有害菌沙门氏菌的作用。

与乳化剂、助乳化剂的配比未在本发明优选的乳化剂为10-20％、助乳化剂为1-5％的范围内的实施例8相比，乳化剂、助乳化剂的配比在优选范围内的实施例1在各肠道内(盲肠、结肠、直肠)和粪便中沙门氏菌的含量都有一定的下降，这表明乳化剂、助乳化剂的配比在优选范围内时，能起到进一步抵抗肠道有害菌沙门氏菌的作用。

与未选用植物精油与有机酸的组合作为有效成分、且未制成水乳剂的对比例1相比，选用植物精油与有机酸的组合作为有效成分、且制成水乳剂的实施例1在各肠道内(盲肠、结肠、直肠)和粪便中沙门氏菌的含量都有显著下降，这表明选用植物精油与有机酸的组合作为有效成分、且制成水乳剂时，能起到有效抵抗肠道有害菌沙门氏菌的作用。

表8肠道及粪便中的乳酸菌含量(Log10(cfu/g))

由表8结果所示，试验组1-8中的各肠道内(盲肠、结肠、直肠)和粪便中乳酸菌的含量相对于对照组都有显著的上升，这表明试验组1-8均可起到促进肠道有益菌乳酸菌的作用，其中以试验组3的效果最优。

另外，与未采用香芹酚、肉桂醛和甲酸的组合作为有效成分的实施例5-6相比，采用了香芹酚、肉桂醛和甲酸的组合作为有效成分的实施例1在各肠道内(盲肠、结肠、直肠)和粪便中乳酸菌的含量都有一定的上升，这表明采用香芹酚、肉桂醛和甲酸的组合作为有效成分时，能起到进一步促进肠道有益菌乳酸菌的作用。

与肉桂醛、甲酸的配比未在本发明优选的肉桂醛为10-15％、甲酸为3-5％的范围内的实施例7相比，肉桂醛、甲酸的配比在优选范围内的实施例1在各肠道内(盲肠、结肠、直肠)和粪便中乳酸菌的含量都有一定的上升，这表明肉桂醛、甲酸的配比在优选范围内时，能起到进一步促进肠道有益菌乳酸菌的作用。

与乳化剂、助乳化剂的配比未在本发明优选的乳化剂为10-20％、助乳化剂为1-5％的范围内的实施例8相比，乳化剂、助乳化剂的配比在优选范围内的实施例1在各肠道内(盲肠、结肠、直肠)和粪便中乳酸菌的含量都有一定的上升，这表明乳化剂、助乳化剂的配比在优选范围内时，能起到进一步促进肠道有益菌乳酸菌的作用。

与未选用植物精油与有机酸的组合作为有效成分、且未制成水乳剂的对比例1相比，选用植物精油与有机酸的组合作为有效成分、且制成水乳剂的实施例1在各肠道内(盲肠、结肠、直肠)和粪便中乳酸菌的含量都有显著上升，这表明选用植物精油与有机酸的组合作为有效成分、且制成水乳剂时，能起到有效促进肠道有益菌乳酸菌的作用。

以上通过具体的实施例对本发明进行了说明，但本发明并不限于这些具体的实施例。另外，本申请说明书和权利要求书所使用的一些术语并不是限制性的，仅仅是为了便于描述。