一种固定化酵母凝胶及其制备方法和应用
阅读说明：本技术 一种固定化酵母凝胶及其制备方法和应用 (Immobilized yeast gel and preparation method and application thereof ) 是由 傅丽君 于 2019-11-05 设计创作，主要内容包括：本发明公开了一种固定化酵母凝胶及其制备方法和应用,其包括丙烯酸酯凝胶和固定于该丙烯酸酯凝胶中的啤酒酵母。本发明以丙烯酸酯凝胶作为包埋剂固定化酵母,吸附重金属离子具有良好的吸附效果,在适当的条件下,对Pb～(2+)和Cd～(2+)的吸附率分别为97.15％和92.25％,且吸附后容易过滤除去,同时可对重金属进行回收,并减少对环境二次污染。(The invention discloses an immobilized yeast gel and a preparation method and application thereof, wherein the immobilized yeast gel comprises acrylate gel and beer yeast fixed in the acrylate gel. The invention takes the acrylate gel as the embedding agent to immobilize the yeast, has good adsorption effect on adsorbing heavy metal ions, and can adsorb Pb under proper conditions 2+ And Cd 2+ The adsorption rates of the metal oxide particles are respectively 97.15% and 92.25%, and the metal oxide particles are easy to filter and remove after adsorption, and meanwhile, the heavy metal can be recovered, and the secondary pollution to the environment is reduced.)
技术领域
本发明属于酵母固定化技术领域，具体涉及一种固定化酵母凝胶及其制备方法和应用。
背景技术
现代工业迅速发展，产生了大量含重金属废水，对水体结构造成了严重污染。重金属因其具有毒性强、易富集和不易被生物代谢等特点，通过食物链富集最终危害人体健康。目前水体重金属污染常用的修复法有生物吸附、电化学、离子交换、化学沉淀、反渗透和过滤等。其中生物吸附法是以利用生物体或其衍生物吸附水体中的金属离子，具有选择性好、材料来源广、吸附率高、成本低且不会造成二次污染等优点而受到广泛关注。已被开发用于水体重金属吸附的微生物种类有细菌、霉菌、酵母和藻类等。其中酵母菌因具有对外界条件耐性强，廉价易得等优点，使得利用酵母菌做生物吸附剂具有巨大的潜力。
近年来研究发现死体酵母菌细胞和活体一样具有吸附性能，吸附材料的选择从单一的活生物体扩大到“半存活”、“半完整”生物体，甚至死细胞，许多学者发现死细胞或是“半存活”、“半完整”状态的细胞能以相等甚至更高的效率吸附金属，从而解决了由于高浓度金属离子对活生物体毒性作用而使其应用受到限制的问题。但是游离态或悬浮态酵母机械强度低，且吸附重金属离子后难以分离而再生。同时凝胶作为吸附剂因其固有构造的不均匀性及有效能量耗散机制的不足，致使它们的机械强度不强，在很大程度上也限制了其发展。如果采用凝胶将酵母细胞固定化，可以增加凝胶吸附剂的多孔性、稳定性和亲水性，不仅能提高吸附剂吸附效率，而且也有利于酵母细胞与吸附物的分离，不易造成二次污染。丙烯酸酯凝胶是一种聚合物，电导率高、稳定性好，较海藻酸钠具有更好的吸水性和溶胀性，因此本研究采用丙烯酸酯凝胶包埋法对酵母菌进行固定，开展其对水体重金属Pb2+和Cd2+污染的吸附研究，制备的固定化酵母菌吸附剂因此具有处理能力大、固液分离操作简便、金属回收与吸附剂再生方便等优点，为新型生物质吸附剂的开发提供了技术支持。
发明内容
本发明的目的在于提供一种固定化酵母凝胶。
本发明的另一目的在于提供上述固定化酵母凝胶的制备方法。
本发明的再一目的在于提供上述固定化酵母凝胶的应用。
本发明的技术方案如下：
一种固定化酵母凝胶，包括丙烯酸酯凝胶和固定于该丙烯酸酯凝胶中的啤酒酵母，该啤酒酵母限位并富集于丙烯酸酯凝胶的褶皱中，且啤酒酵母表面的羧基与丙烯酸酯凝胶中的胺基发生酰胺化反应而相连；上述丙烯酸酯凝胶由包括NaOH、去离子水、丙烯酰胺、N，N-亚甲基双丙烯酰胺、丙烯酸和Irgacure 1173的原料制成，其中N，N-亚甲基双丙烯酰胺、丙烯酸和丙烯酰胺质量比为1∶15-17∶3-5，且啤酒酵母在丙烯酸酯凝胶中的浓度为4-6g/L。
在本发明的一个优选实施方案中，所述N，N-亚甲基双丙烯酰胺、丙烯酸和丙烯酰胺质量比为1∶16∶3.6。
在本发明的一个优选实施方案中，所述啤酒酵母在丙烯酸酯凝胶中的浓度为5g/L。
本发明的另一技术方案如下：
上述固定化酵母凝胶的制备方法，包括如下步骤：
(1)将NaOH于0-4℃溶解于去离子水中，然后加入丙烯酸反应0.4-0.6h；
(2)在步骤(1)所得的物料中加入丙烯酰胺混合均匀，再加入适量N，N-亚甲基双丙烯酰胺超声分散溶解，接着加入啤酒酵母搅拌均匀，最后加入Irgacure 1173，充分超声至均匀，获得悬浮液；
(3)将上述悬浮液置于模具中，固化后再烘干，即得所述固定化酵母凝胶。
在本发明的一个优选实施方案中，所述烘干的温度为65-75℃，时间为20-25h。
本发明的再一技术方案如下：
上述固定化酵母凝胶用于处理含有重金属离子的废水中的应用。
在本发明的一个优选实施方案中，所述重金属离子包括Pb2+和Cd2+。
进一步优选的，所述处理的具体条件包括：废水的pH为3.8-4.0，重金属离子在废水中的起始浓度为95-105mg/L，环境温度为24-26℃，处理时间为1.8-2.2h，啤酒酵母在废水中的浓度为8-10g/L。
更进一步优选的，所述处理的具体条件包括：废水的pH为4.0，重金属离子在废水中的起始浓度为100mg/L，环境温度为25℃，处理时间为2h，啤酒酵母在废水中的浓度为9g/L。
本发明的有益效果是：
1、本发明以丙烯酸酯凝胶作为包埋剂固定化酵母吸附重金属离子具有良好的吸附效果，在适当的条件下，对Pb2+和Cd2+的吸附率分别为97.15％和92.25％，且吸附后容易过滤除去，同时可对重金属进行回收，并减少对环境二次污染。
2、本申请中的丙烯酸酯凝胶具有更好的吸水性和溶胀性，且自身对重金属离子也具有良好的吸附作用，能够为固定于其中的啤酒酵母提供吸附通道，对重金属离子的吸附效果产生促进作用。
附图说明
图1为本发明实施例1中酵母菌红外图。
图2为本发明实施例1中丙烯酸酯固定酵母凝胶和丙烯酸酯空白凝胶红外图。
图3为本发明实施例1中丙烯酸酯空白凝胶表面SEM形态观察图(600×)。
图4为本发明实施例1中丙烯酸酯固定酵母凝胶表面SEM形态观察图(1200×)。
图5为本发明实施例1中丙烯酸酯空白凝胶吸附重金属Pb2+效应曲线图。
图6为本发明实施例1中丙烯酸酯空白凝胶吸附重金属Cd2+效应曲线图。
图7为本发明实施例1中pH对重金属离子吸附率的影响图。
图8为本发明实施例1中吸附温度对重金属离子吸附率的影响图。
图9为本发明实施例1中重金属离子起始浓度对重金属离子吸附的影响图。
图10为本发明实施例1中吸附时间对重金属离子吸附率的影响图。
图11为本发明实施例1中酵母菌用量对重金属离子吸附的影响图。
具体实施方式
以下通过具体实施方式结合附图对本发明的技术方案进行进一步的说明和描述。
实施例1
1材料与方法
1.1实验材料及仪器
实验材料：CY啤酒活性干酵母(安琪酵母股份有限公司)；2-羟基-2-甲基-1-苯基-1-丙酮(Irgacure1173)、丙烯酰胺(AM)、N，N-亚甲基双丙烯酰胺(MBA)、丙烯酸(AA)均为AR(天津化学试剂公司)；氢氧化钠(NaOH)AR(天津红岩化学试剂厂)；氯化镉、硝酸铅、硝酸、无水乙醇AR(国药集团化学有限公司)；铅标准溶液、镉标准溶液均为GR(国家有色金属及电子材料分析测试中心)。
主要仪器：扫描电镜(日立高新技术公司)；AA-3510型火焰原子吸收分光光度计(日本岛津企业管理有限公司)；手提式UV固化机(涿州百思得科技发展有限公司)；TENSOR27傅立叶型红外光谱仪(德国BRUKER)；DGG-9053A电热恒温鼓风干燥箱(上海森信仪器实验有限公司)；隔膜真空泵(天津赛普瑞实验设备有限公司)；恒温振荡培养箱(上海世平实验设备有限公司)；超声波振荡清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。
1.2试验方法
1.2.1丙烯酸酯空白凝胶的制备
制备固化凝胶样品，称取4.2500gNaOH于4℃下溶解于13.948g去离子水中，然后加入适量AA中，反应0.5h后，将适量的AM加入混合液中混匀，加适量的MBA超声震荡致溶解，搅匀后加0.1241g的Irgacure 1173，充分超声至均匀。将悬浮液倒入玻璃模具中，经固化机固化5s，即制得一定形状的凝胶。置于70℃的电热恒温鼓风干燥箱里烘1d，切片置于干燥器中保存备用。
1.2.2丙烯酸酯固定化酵母菌凝胶的制备
于1.2.1步骤制备的丙烯酸酯凝胶悬浮液，再加5g/L啤酒酵母搅匀后加0.1241g的Irgacure 1173，充分超声至均匀。将悬浮液倒入玻璃模具中，经固化机固化5s，即制得一定形状的凝胶。置于70℃的干燥箱里干燥24h，置于干燥器中保存备用。
1.2.3丙烯酸酯空白凝胶及固定化酵母凝胶红外光谱扫描
将制备的丙烯酸酯空白凝胶(制备见下文)、丙烯酸酯固定化酵母菌凝胶(制备见下文)、游离酵母菌置于70℃电热恒温鼓风干燥箱干燥24h，玛瑙研钵研成粉末，于400-4000cm-1范围采用傅里叶红外光谱进行扫描分析其吸收峰。
1.2.4丙烯酸酯空白凝胶及固定化酵母凝胶电镜扫描
将制备的丙烯酸酯空白凝胶、丙烯酸酯固定化酵母菌凝胶、游离酵母菌置于70℃电热恒温鼓风干燥箱干燥1d，烘干后研磨成粉末，将样品粉末喷金，通过电镜对样品进行扫描分析。
1.2.5丙烯酸酯固定化酵母菌凝胶制备工艺优化
以N，N-亚甲基双丙烯酰胺质量(A)、丙烯酸的质量(B)、丙烯酰胺质量(C)为影响因素，每个因素选取三水平进行正交试验，得出最佳吸附效果的包埋材料最佳比例，正交的因素水平表见表1
表1丙烯酸酯空白凝胶制备工艺因素水平表
1.2.6不同条件下丙烯酸酯固定酵母凝胶吸附Pb2+、Cd2+试验
分别取50m1浓度为100mg/L的Pb2+和Cd2+溶液于5个锥形瓶中，用0.1mol/L的NaOH和HCl调节溶液pH值分别为2、3、4、5和6，加入1g浓度为5g/L的固定化酵母菌凝胶，置于180r/min、25℃恒温振荡培养箱吸附2h，过滤，用原子吸收分光光度计进行测定重金属Pb2+和Cd2+离子含量，分析不同pH对丙烯酸酯固定酵母凝胶吸附重金属离子效果的影响；控制其他条件不变，设置恒温振荡培养箱的温度分别为10℃、15℃、20℃、25℃和30℃，分析温度对丙烯酸酯固定酵母凝胶吸附重金属离子效果的影响；选择重金属离子的起始浓度作为影响因素，用重金属盐配制离子的浓度为20mg/L、40mg/L、60mg/L、80mg/L和100mg/L，分析不同重金属起始离子浓度对丙烯酸酯固定酵母凝胶吸附重金属离子效果的影响；控制其他因素不变，每隔一段时间进行取样，恒温振荡培养箱的时间设置为1h、1.5h、2h、2.5h和3h，分析振荡时间对丙烯酸酯固定酵母凝胶吸附重金属离子效果的影响；控制其他条件不变，在3g/L-12g/L范围内选择添加酵母菌的浓度，分析酵母菌浓度对丙烯酸酯固定酵母凝胶吸附重金属离子效果的影响。
1.3数据处理
用原子吸收分光光度计测定溶液中吸附完成后重金属Pb2+和Cd2+的浓度，Pb2+的标准曲线方程A＝0.0258C0+0.0027，(R2＝0.9976)，Cd2+的标准曲线方程A＝0.6110C0+0.0002，(R2＝0.9983)。
单位凝胶吸附率[12]的计算公式如下：
A＝(Co-C)/Co
式中：A：单位凝胶吸附率，％
C0：重金属离子的起始浓度，mg/L
C：吸附完成后重金属离子的浓度，mg/L
2结果与分析
2.1酵母菌、丙烯酸酯空白凝胶、丙烯酸酯固定化酵母凝胶的表征
2.1.1红外光谱分析
由图1可知，在整个波数范围内均有明显的吸收，3296.38cm-1处的强宽峰为缔合的O-H伸缩振动峰和-NH的伸缩振动峰；2962.79cm-1和2931.04cm-1处为CH2和CH3的不对称伸缩振动峰；1452.10cm-1和1400.72cm-1处为CH2和CH3的不对称弯曲振动峰；1655.94cm-1处为酰胺C＝O伸缩振动峰；1540.70cm-1为酰胺N-H的弯曲振动和C-N的伸缩振动峰；1236.07cm-1为酰胺C-N的伸缩振动峰，可能还有P＝O伸缩振动；1057.43cm-1处为S＝O的伸缩振动峰。
由图2可知，丙烯酸酯空白凝胶在3000-3600cm-1有一处宽吸收带，最大吸收在3400cm-1处，是H-O伸缩振动引起，在1039cm-1处的特征吸收峰是多糖骨架振动吸收带，在1338cm-1处的特征吸收峰是环状C-H引起，在1086cm-1处的吸收峰是醇中的C-O伸缩振动引起的，在1615cm-1附近的特征吸收峰主要是H-O弯曲振动引起，在2941cm--1处的特征吸收峰是丙烯酸酯中-CH2-(大分子六圆环)不对称伸缩振动引起，在1421cm-1处的特征吸收峰是-COO-对称伸缩振动引起。
丙烯酸酯固定化酵母凝胶与丙烯酸酯空白凝胶的红外光谱相比吸收峰基本不变，在3400cm-1附近的宽带吸收峰还可能来自几丁质中的-OH和仲胺中的N-H的伸缩振动，但在954cm-1增加一个吸收峰，为酯羧基的特征峰，说明酵母细胞表面的羧基可能与醇发生酯化反应，酯化后的酵母主要成分和结构依然保持完整。
2.1.2丙烯酸酯空白凝胶和丙烯酸酯固定化酵母凝胶扫描电镜分析
丙烯酸酯空白凝胶和丙烯酸酯固定化酵母凝胶扫描电镜的形态图见图3和图4。
利用NaOH、去离子水、丙烯酸、丙烯酰胺、N，N-亚甲基双丙烯酰胺和Irgacure1173制得丙烯酸酯凝胶。丙烯酸酯凝胶中N，N-亚甲基双丙烯酰胺、丙烯酸和丙烯酰胺的质量比例为1∶16∶3.6，在丙烯酸酯制备过程中加入5ml 5g/L的酵母菌制得丙烯酸酯固定化酵母凝胶，将表面形态观察图对比如图3和图4所示，丙烯酸酯空白凝胶与丙烯酸酯固定化酵母凝胶直观形态方面无差异，均为聚合物凝胶状。丙烯酸酯固定化酵母凝胶表面形态图可见到固定化酵母菌后的凝胶表面呈现出较多的褶皱，这些褶皱有利于酵母菌富集，从而提高对重金属离子的吸附效果。M.Fomina等利用扫描电子显微镜技术(SEM)和X光吸收能谱技术(XAS)证实酵母菌在与Zn2+、Cu2+和Pb2+的相互作用中，酵母细胞表面的含氧官能团(如磷酸基、羧基等)发挥重要作用，并提出离子配位模型。
2.2丙烯酸酯固定酵母凝胶制备工艺优化结果
2.2.1优化后丙烯酸酯凝胶对Pb2+的吸附率
利用L9(33)正交表开展了丙烯酸酯空白凝胶对Pb2+的吸附试验，试验结果见表2。
表2丙烯酸酯空白凝胶L9(33)正交试验对重金属铅的吸附效果
极差的大小可反映因素水平改变时对试验结果的影响大小。根据表2中的极差值，可知各因素的主次顺序为：A(N，N-亚甲基双丙烯酰胺)＞B(丙烯酸)＞C(丙烯酰胺)，表明N，N-亚甲基双丙烯酰胺的质量对丙烯酰胺空白凝胶吸附铅的能力具有显著影响，丙烯酸和丙烯酰胺的质量分数对丙烯酰胺空白凝胶吸附铅的能力影响较小。因此可判断A以水平1最佳，B以水平2最佳，C以水平2最佳，即最佳条件为N，N-亚甲基双丙烯酰胺0.5g，丙烯酸8g，丙烯酰胺1.8g，此条件下丙烯酸酯空白凝胶对铅的吸附率达到73.2％。各因素效应曲线图5。
图5为三个因素水平质量变化对丙烯酸酯空白凝胶吸附Pb2+的效果影响的效应曲线图。由图可示，N，N-亚甲基双丙烯酰胺质量效应曲线随质量增加而下降，丙烯酸在质量为8g时候达到最佳吸附效果，丙烯酰胺质量效应曲线随质量增加先上升后下降。
2.2.2丙烯酸酯空白凝胶对Cd2+的吸附率
利用L9(33)正交表开展了丙烯酸酯空白凝胶对Cd2+的吸附试验，试验结果见表3。
根据表3中的极差值，可知各因素的主次顺序为：B(丙烯酸)＞A(N，N-亚甲基双丙烯酰胺)＞C(丙烯酰胺)，其中丙烯酸的质量分数对丙烯酸酯空白凝胶吸附重金属镉的吸附性能影响较大，N，N-亚甲基双丙烯酰胺和丙烯酰胺的质量对丙烯酸酯空白凝胶吸附重金属镉的吸附性能影响较小。通过K1，K2，K3取值的大小，可判断A以水平1最佳，B以水平2最佳，C以水平2最佳，即最佳条件为A1B2C2，对重金属镉吸附率达65.3％，各因素效应曲线图见图6。
表3丙烯酸酯凝胶L9(33)正交试验对重金属镉的吸附效果
图6为三个因素质量变化对丙烯酸酯空白凝胶吸附Cd2+效果影响而呈现出来的效应曲线图。由该图可知，丙烯酸质量的增加会抑制丙烯酸酯空白凝胶对重金属离子的吸附，N，N-亚甲基双丙烯酰胺的质量是0.5g时吸附效果最佳，丙烯酰胺质量效应曲线整体起伏平稳。
2.3不同条件对丙烯酸酯丙烯酸酯固定化酵母凝胶吸附Cd2+、Pb2+的影响
2.3.1pH值对吸附的影响
由图7可知，当pH处于2-5范围内，重金属离子吸附率随着pH上升呈现上升趋势。pH值上升，促进了丙烯酸酯固定化酵母凝胶对重金属离子的吸附效果，pH值为5时Pb2+吸附效果最佳，吸附率为80.6％。Cd2+与Pb2+略有区别，Cd2+在pH值为6时吸附效果最佳，吸附率为76.5％。
模拟重金属污染废水样中pH值较低时，大量的H2O3+与重金属离子竞争细胞表面的活性吸附位点，导致吸附率降低，且在低pH值条件下官能团如-COOH和-OH，也会阻碍Pb2+的吸附。随着pH的升高，细胞表面的质子化使官能团解离，暴露出更多带负电荷的位点，有利于与重金属离子的结合；当pH值较高时，金属离子易形成不溶解的氧化物和氢氧化物等沉淀微粒并覆盖于细胞表面，酵母菌无法与重金属离子结合，不利于重金属离子的吸附甚至会终止吸附
2.3.2温度对吸附的影响
由图8可知，在酵母吸附重金属离子的过程中，温度对吸附效率也会产生重要影响。随着温度的升高，Pb2+与Cd2+的吸附率逐渐上升，在20℃-25℃范围时上升的幅度较大，当温度为25℃时，Pb2+与Cd2+的吸附效果达到最佳，吸附率分别为83.2％和79.3％％。蔡佳亮等认为生物吸附是一个放热过程，而较大幅度升高温度则不利于生物吸附。同时温度过高或过低都会使饱和吸附率有所降低。
2.3.3不同Pb2+、Cd2+的初始浓度对吸附的影响
由图9可知，随着Pb2+和Cd2+初始浓度的上升，吸附率呈现上升趋势。当浓度为100mg/L时吸附效果最佳，吸附率分别为84.6％和83.9％。当加入吸附剂为一定量时，金属离子的吸附率总体上是随着初始浓度的升高而趋于平缓，说明当金属离子达到一定浓度时，尽管吸附系统中还残留着大量的金属离子，但由于酵母菌的菌体上能结合金属离子的位点已被饱和，菌体对金属离子的吸附率就不再明显增加。
当重金属离子浓度偏高时导致细胞内活性自由基增多，打破活性自由基原来的平衡，自由基与细胞膜上的不饱和脂肪酸反应，使其过氧化，改变细胞膜通透性和结构，使细胞正常新陈代谢受阻，并且重金属离子大量进入细胞后也会抑制酶的活性，使其消除自由基作用的酶活性降低，加剧了细胞膜脂质过氧化，破坏酵母的结构，使丙烯酸酯固定化酵母凝胶对Pb2+与Cd2+的吸附效果下降。
2.3.4不同时间对吸附的影响
由图10可知，丙烯酸酯固定化酵母凝胶对重金属离子的吸附率会随着吸附时间延长而上升，但由于酵母菌吸附重金属离子过程中通常可以在较短的时间内吸附完成达到饱和，故表现出吸附率不再上升趋势。在2h时吸附率达到最大后吸附率趋于饱和，Pb2+和Cd2+的吸附率分别为87.5％和85.9％。在起始吸附时，Pb2+和Cd2+先吸附到细胞表面，后重金属离子以极其缓慢的速度透过细胞膜逐渐进入细胞内部，并逐渐达到吸附平衡，但是随着处理时间的继续延长，重金属离子也会发生脱吸附现象。
2.3.5酵母菌用量对吸附的影响
由图11可知，酵母菌浓度的升高使固定化后酵母对重金属离子Pb2+、Cd2+的吸附率逐渐上升，但是当吸附位点达到饱和时吸附率不在继续升高，丙烯酸酯固定化酵母凝胶的浓度为9.0g/L时吸附达到平衡，吸附率分别为94.5％和90.3％。可能原因是酵母细胞的组成结构大多属两性基团，酵母菌浓度的升高增加了吸附位点间的互相作用的几率，从而占据了一部分有效的吸附位点，因此酵母吸附的最佳浓度为9.0g/L。
实施例2
根据实施例1的结果确定本实施例所使用的丙烯酸酯固定化酵母凝胶的具体制备工艺包括：称取4.2500g NaOH于4℃下溶解于13.948g去离子水中，然后加入适量丙烯酸中，反应0.5h后，将适量的丙烯酰胺加入混合液中混匀，加适量的N，N-亚甲基双丙烯酰胺超声震荡致溶解，再加5g/LCY啤酒活性干酵母搅匀后加0.1241g的Irgacure 1173，充分超声至均匀；将悬浮液倒入玻璃模具中，经固化机固化5s，即制得一定形状的凝胶；置于70℃的干燥箱里烘1d，切片置于干燥器中保存备用。其中，N，N-亚甲基双丙烯酰胺、丙烯酸和丙烯酰胺质量比为1∶16∶3.6。
用于对比的丙烯酸酯空白凝胶的制备包括：称取4.2500g NaOH于4℃下溶解于13.948g去离子水中，然后加入适量丙烯酸中，反应0.5h后，将适量的丙烯酰胺加入混合液中混匀，加适量的N，N-亚甲基双丙烯酰胺超声震荡致溶解，搅匀后加0.1241g的Irgacure1173，充分超声至均匀。将悬浮液倒入玻璃模具中，经固化机固化5s，即制得一定形状的凝胶。置于70℃的电热恒温鼓风干燥箱里烘1d，切片置于干燥器中保存备用。其中，N，N-亚甲基双丙烯酰胺、丙烯酸和丙烯酰胺质量比为1∶16∶3.6。
将以上制得的丙烯酸酯固定化酵母凝胶、丙烯酸酯空白凝胶和CY啤酒活性干酵母于以下工艺条件下进行废水处理的对比：废水的pH为4.0，重金属离子(Pb2+和Cd2+)在废水中的起始浓度为100mg/L，环境温度为25℃，处理时间为2h，啤酒酵母在废水中的浓度为9g/L；对比结果如下表4所示：
表4三种吸附剂对重金属Pb2+和Cd2+吸附效果比较
且丙烯酸酯固定化酵母凝胶经5次吸附-解析试验，对Pb2+和Cd2+的吸附率仍分别高于70％和60％。
以上所述，仅为本发明的较佳实施例而已，故不能依此限定本发明实施的范围，即依本发明专利范围及说明书内容所作的等效变化与修饰，皆应仍属本发明涵盖的范围内。
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