阅读说明：本技术 产生基因治疗制剂的系统和方法 (System and method for producing gene therapy formulations ) 是由 J·J·卡迪奈尔 R·施泰宁格 L·B·卡尔佩斯 C·J·莫里森 D·S·胡威特 M·卢瑟 于 2019-07-24 设计创作，主要内容包括：本公开描述了用于生产腺相关病毒(AAV)颗粒和AAV制剂的方法和系统,包括重组腺相关病毒(rAAV)颗粒和制剂。在某些实施方案中,本公开提出了用于澄清、纯化、配制、过滤和加工AAV颗粒和AAV制剂的方法和系统。本公开还描述了用于设计、制备、制造、使用和/或配制包含调节性多核苷酸的AAV颗粒的组合物、方法和过程,所述调节性多核苷酸例如编码靶向亨廷顿蛋白(HTT)基因(例如野生型或突变型CAG扩增的HTT基因)的小干扰RNA(siRNA)分子的多核苷酸。还公开了使用配制的包含调节性多核苷酸的AAV颗粒在患有欧洲退行性疾病(例如,亨廷顿舞蹈病(HD))的受试者中抑制HTT基因表达的方法。(The present disclosure describes methods and systems for producing adeno-associated virus (AAV) particles and AAV formulations, including recombinant adeno-associated virus (rAAV) particles and formulations. In certain embodiments, the present disclosure presents methods and systems for clarifying, purifying, formulating, filtering, and processing AAV particles and AAV preparations. The present disclosure also describes compositions, methods, and processes for designing, preparing, making, using, and/or formulating AAV particles comprising regulatory polynucleotides, such as polynucleotides encoding small interfering rna (sirna) molecules that target huntingtin protein (HTT) genes (e.g., wild-type or mutant CAG amplified HTT genes). Also disclosed are methods of inhibiting HTT gene expression in a subject having a european degenerative disease (e.g., huntington's chorea (HD)) using a formulated AAV particle comprising a regulatory polynucleotide.)

产生基因治疗制剂的系统和方法

相关申请的引用

本申请要求以下优先权的权益：2018年7月24日提交的标题为“GENE THERAPYFORMULATIONS(基因治疗制剂)”的美国临时专利申请号62/702,687；2018年7月24日提交的标题为“COMPOSITIONS AND METHODS FOR TREATING HUNTINGTON'S DISEASE(治疗亨廷顿舞蹈病的组合物和方法)”的美国临时专利申请号62/702,679；2018年8月31日提交的标题为“COMPOSITIONS AND METHODS FOR TREATING HUNTINGTON'S DISEASE(治疗亨廷顿舞蹈病的组合物和方法)”的美国临时专利申请号62/725,432；2018年10月4日提交的标题为“SYSTEMS AND METHODS FOR CLARIFYING GENE THERAPY FORMULATIONS(澄清基因治疗制剂的系统和方法)”的美国临时专利申请号62/741,508；2019年1月18日提交的标题为“METHODS AND SYSTEMS FOR PRODUCING AAV PARTICLES(产生AAV颗粒的方法和系统)”的美国临时专利申请号62/794,199；2019年1月18日提交的标题为“SYSTEMS AND METHODSFOR CLARIFYING GENE THERAPY FORMULATIONS(澄清基因治疗制剂的系统和方法)”的美国临时专利申请号62/794,212；2019年1月18日提交的标题为“FORMULATIONS FOR AAVPARTICLES(AAV颗粒制剂)”的美国临时专利申请号62/794,213；2019年3月29日提交的标题为“SYSTEMS AND METHODS FOR CLARIFYING AND PURIFYING GENE THERAPY FORMULATIONS(澄清和纯化基因治疗制剂的系统和方法)”的美国临时专利申请号62/826,363；2019年4月29日提交的标题为“COMPOSITIONS AND METHODS FOR TREATING HUNTINGTON'S DISEASE(治疗亨廷顿舞蹈病的组合物和方法)”的美国临时专利申请号62/839,880；其各自内容通过引用整体并入本文。

参考序列表

本申请与电子格式的序列表一起提交。序列表以标题为20571527PCTSL.txt的文件形式提供，该文件创建于2019年7月24日，大小为352,382字节。序列表的电子格式中的信息通过引用整体并入本文。

发明领域

本公开描述了用于生产腺相关病毒(AAV)颗粒和AAV制剂的方法和系统，包括重组腺相关病毒(rAAV)颗粒和制剂。在某些实施方案中，本公开提出了用于澄清、纯化、配制、过滤和加工AAV颗粒和AAV制剂的方法和系统。

本公开还描述了用于设计、制备、制造、使用和/或配制包含调节性多核苷酸的AAV颗粒的组合物、方法和过程，所述调节性多核苷酸是例如编码靶向亨廷顿蛋白(HTT)基因(例如野生型或突变型CAG扩增的HTT基因)的小干扰RNA(siRNA)分子的多核苷酸。还公开了使用配制的包含调节性多核苷酸的AAV颗粒在患有神经退行性疾病(例如，亨廷顿舞蹈病(HD))的受试者中抑制HTT基因表达的方法。

背景技术

AAV已经成为最广泛研究和利用的用于将基因转移到哺乳动物细胞的病毒载体之一。参见例如Tratschin等人,Mol.Cell Biol.,5(11):3251-3260(1985)和Grimm等人,Hum.Gene Ther.,10(15):2445-2450(1999)，其内容通过引用整体并入本文。腺相关病毒(AAV)载体是治疗性基因递送的有希望的候选物，并且在临床试验中已被证明安全有效。为此目的，改进的AAV颗粒的设计和生产是一个活跃的研究领域。

随着AAV领域的发展的到来，仍然需要用于生产AAV载体(例如AAV颗粒)和用于AAV颗粒的储存和递送的相应治疗制剂的改进的系统和方法。这些包括用于澄清、纯化、配制、过滤和加工AAV颗粒和AAV制剂的改进方法和系统。