结合nkg2d、cd16和肿瘤相关抗原的蛋白质

文档序号:639070 发布日期:2021-05-11 浏览:30次 >En<

阅读说明:本技术 结合nkg2d、cd16和肿瘤相关抗原的蛋白质 (Proteins that bind NKG2D, CD16 and tumor-associated antigens ) 是由 格雷戈里·P·常 安·F·张 杜金燕 阿斯亚·格林贝格 威廉·哈尼 布拉德利·M·伦德 于 2019-08-08 设计创作,主要内容包括:描述了结合NKG2D受体、CD16和肿瘤相关抗原(例如B7-H3、L1CAM、FLT1、KDR、TNC、TNN、CSPG4、BST1、SELP、CD200、INSR(HHF5)、ITGA6、MELTF、PECAM1或SLC1A5)多特异性结合蛋白,以及可用于治疗癌症的药物组合物和治疗方法。(Multispecific binding proteins that bind the NKG2D receptor, CD16, and tumor associated antigens (e.g., B7-H3, L1CAM, FLT1, KDR, TNC, TNN, CSPG4, BST1, SELP, CD200, INSR (HHF5), ITGA6, MELTF, PECAM1, or SLC1a5) are described, as well as pharmaceutical compositions and methods of treatment useful for treating cancer.)

结合NKG2D、CD16和肿瘤相关抗原的蛋白质

与相关申请的交叉引用

本申请要求2018年8月8日提交的美国临时专利申请号62/716,106、2018年8月8日提交的美国临时专利申请号62/716,109、2018年8月8日提交的美国临时专利申请号62/716,113的利益和优先权,每个所述临时申请的公开内容为所有目的整体通过引用并入本文。

序列表

本申请含有以ASCII格式电子提交并整体通过引用并入本文的序列表。所述在2019年8月7日生成的ASCII拷贝被命名为DFY-059WO_ST25.txt,大小为367,901字节。

技术领域

本发明涉及结合到NKG2D、CD16和肿瘤相关抗原(例如B7-H3、L1CAM、FLT1、KDR、TNC、TNN、CSPG4、BST1、SELP、CD200、INSR(HHF5)、ITGA6、MELTF、PECAM1或SLC1A5)的多特异性结合蛋白。

背景技术

尽管在文献中已报道了治疗癌症的大量研究尝试和科学进展,但这种疾病依然是显著的健康问题。一些最频繁被诊断到的癌症包括前列腺癌、乳腺癌、肺癌和结肠直肠癌。前列腺癌是男性中最常见的癌症形式。乳腺癌仍然是女性中主导的死亡原因。血液和骨髓癌症、包括多发性骨髓瘤、白血病和淋巴瘤,也是频繁被诊断到的癌症类型。当前用于这些癌症的治疗选项不对所有患者有效和/或可能具有实质性不利副作用。其他类型的癌症对于使用现有治疗选项治疗来说也仍然具有挑战性。

癌症免疫疗法是理想的,因为它们是高度特异性的,并且可以使用患者自己的免疫系统来促进癌细胞的破坏。融合蛋白例如双特异性T-细胞接合器是文献中描述的结合到肿瘤细胞和T-细胞以促进肿瘤细胞破坏的癌症免疫疗法。结合到某些肿瘤相关抗原和结合到某些免疫细胞的抗体在文献中已有描述。参见例如WO 2016/134371和WO 2015/095412。

自然杀伤(NK)细胞是先天性免疫系统的组分并占循环淋巴细胞的大约15%。NK细胞事实上浸润所有组织,并且最初因它们不需前期致敏即可杀死肿瘤细胞的能力而被表征。活化的NK细胞通过与细胞毒性T细胞相似的手段杀死靶细胞,即通过含有穿孔蛋白和颗粒酶的细胞溶解颗粒以及通过死亡受体途径。活化的NK细胞还分泌炎性细胞因子例如IFN-γ和促进其他白细胞向靶组织的召集的趋化因子。

NK细胞通过它们表面上的各种不同活化和抑制受体对信号做出响应。例如,当NK细胞遇到健康的自体细胞时,它们的活性通过杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)的活化而被抑制。或者,当NK细胞遇到外来细胞或癌细胞时,它们通过它们的活化受体(例如NKG2D、NCR、DNAM1)而被活化。NK细胞也通过它们表面上的CD16受体被某些免疫球蛋白的恒定区活化。NK细胞对活化的总体灵敏度取决于刺激性和抑制性信号的总和。

也被称为CD276的B7-H3是一种在抗原呈递细胞(APC)上表达的重要糖蛋白。它与免疫检查点例如PD-1和CTLA4一起,充当T-细胞活性的辅助刺激分子。B7-H3在肿瘤和肿瘤相关细胞例如肺癌、乳腺癌、脑癌、肾癌和前列腺癌上大量表达。B7-H3似乎与对癌症迁移、侵入和血管生成有贡献的不同蛋白质广泛结合(参见Castellanos等,Am J Clin ExpImmunol.2017;6(4):66-75)。

L1细胞粘附分子(L1CAM)是一种200–220kDa的免疫球蛋白(Ig)超家族的跨膜糖蛋白,并由6个Ig样结构域和5个纤连蛋白III型重复序列以及跟在后面的跨膜区和高度保守的胞质尾区构成。它是密切相关的神经细胞粘附分子(CAM)的L1家族的原型成员,并在神经细胞粘附和迁移中发挥必不可少的作用。此外,已发现L1CAM与人类癌症的进展包括不良预后、肿瘤进展和向淋巴结的迁移相关。L1CAM在许多癌症中表达,例如在膀胱癌、肾癌、乳腺癌、宫颈癌、肉瘤、肺癌、头颈部癌、成胶质细胞瘤、成神经细胞瘤、黑素瘤、卵巢癌、子宫内膜癌、食管癌、胃癌、胃肠道基质肿瘤(GIST)、胆管癌、结肠直肠癌、胰腺癌和前列腺癌中(参见Altevogt等,Int.J.Cancer.2016;138:1565-1576)。

也被称为FLT1的血管内皮生长因子受体1(VEGFR1)是一种与VEGF-A、VEGF-B和胎盘生长因子(PGF)结合的受体酪氨酸激酶。它在血管内皮细胞、胎盘滋养层细胞和外周血单核细胞中表达,并在血管生成和血管发生中发挥重要作用。已发现了FLT1的全长跨膜受体亚型和缩短的可溶性亚型。所述可溶性亚型与先兆子痫的发作相关。

激酶插入结构域受体(KDR)是一种与VEGF-A、VEGF-C和VEGF-D结合的受体酪氨酸激酶。它在血管内皮细胞中表达,并在VEGF诱导的内皮增殖、存活、迁移、管形态发生和出芽中发挥重要作用。KDR的突变与婴儿毛细血管瘤有牵连。

肌腱蛋白C(TNC)是一种细胞外基质蛋白,具有含有二硫键连接的亚基的同六聚体结构。TNC具有许多细胞外结合配偶体,包括基质组分、可溶性因子和病原体以及细胞表面受体。TNC蛋白合成受到严格调控,并在胚胎组织中具有广泛的蛋白质分布,但在成体组织中分布受限。TNC也在慢性炎症和癌症期间表达。

肌腱蛋白N(TNN)是一种同六聚体细胞外基质蛋白。TNN在正常的成人乳腺组织和脑中未检测到,但在乳腺肿瘤和脑肿瘤例如成胶质细胞瘤、星形细胞瘤和少突神经胶质瘤中表达。在脑肿瘤中,它在血管的内皮细胞层周围被检测到。

硫酸软骨素蛋白聚糖4(CSPG4)是一种由人类恶性黑素瘤细胞表达的整合膜硫酸软骨素蛋白聚糖。它通过其细胞外N-端与生长因子和细胞外基质蛋白酶结合。CSPG4在黑素瘤细胞在内皮基底膜上扩散的早期事件中在稳定细胞与基质相互作用中起作用。

骨髓基质细胞抗原1(BST1)是一种糖基磷脂酰肌醇锚定的酶,用于第二信使环ADP-核糖和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸的合成。在源自于类风湿性关节炎患者的骨髓基质细胞系中BST1的表达增强。类风湿性关节炎中的多克隆B-细胞异常可能至少部分归因于基质细胞群体中的BST1过表达。BST1还促进前B-细胞生长。

选择素P(SELP)是一种钙依赖性受体,与嗜中性粒细胞和单核细胞上的路易斯血型糖抗原的唾液酸化形式结合。它储存在血小板的α-颗粒和内皮细胞的Weibel-Palade体中,但在血小板活化和脱颗粒期间重新分布到质膜,用于介导活化的内皮细胞或血小板与白细胞的相互作用。

CD200是一种I型跨膜糖蛋白,含有两个细胞外免疫球蛋白结构域、跨膜和胞质结构域。它在各种不同的细胞类型包括B细胞、一部分T细胞、胸腺细胞、内皮细胞和神经元中表达。CD200在免疫抑制和抗肿瘤活性的调控中发挥重要作用。

胰岛素受体(INSR)是一种受体酪氨酸激酶。它被翻译成前蛋白原,并被蛋白水解加工以产生α和β亚基,它们形成异四聚体受体。INSR主要在肝脏、脂肪组织和骨骼肌中表达。胰岛素或其他配体与INSR的结合激活胰岛素信号传导途径,其调控葡萄糖摄入和释放以及糖类、脂类和蛋白质的合成和储存。

整合蛋白亚基α6(ITGA6)是整合蛋白α链家族的成员。整合蛋白是由α链和β链组成的异二聚体整合膜蛋白,在细胞表面粘附和信号传导中起作用。它被翻译成前蛋白原,并被蛋白水解加工以产生构成所述α6亚基的轻链和重链。这个亚基可以与β1或β4亚基结合,以形成与细胞外基质蛋白包括层粘连蛋白家族成员相互作用的整合蛋白。所述α6β4整合蛋白可能促进肿瘤发生,而所述α6β1整合蛋白可能负调控erbB2/HER2信号传导。

黑素转铁蛋白(MELTF)是一种转铁蛋白超家族的细胞表面糖蛋白。它在黑素瘤细胞和某些胎儿组织中表达。MELTF与铁结合,但它的铁结合活性的重要性仍不清楚。

血小板和内皮细胞粘附分子1(PECAM1)是一种免疫球蛋白超家族的细胞表面蛋白。它存在于血小板、单核细胞、嗜中性粒细胞和某些类型的T细胞的表面上,并构成了内皮细胞胞间连接的很大一部分。PECAM1可能参与白细胞迁移、血管生成和整合蛋白活化。

溶质载体家族1成员5(SLC1A5)是一种钠依赖性氨基酸转运蛋白,具有广泛的底物特异性,并对两性离子氨基酸具有偏好性。它接受包括谷氨酰胺、天冬酰胺和支链和芳香族氨基酸在内的所有中性氨基酸作为底物,并排除甲基化、阴离子和阳离子性氨基酸。它在许多组织例如脂肪、前列腺、肺、肾、结肠和胎盘中表达。SLC1A5也可以充当RD114/D型反转录病毒的受体。

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