具体实施方式

本发明的尿酸排出促进用组合物含有选自不具有或具有1个甲氧基的黄烷酮及黄烷酮糖苷中的1种以上的黄烷酮化合物作为有效成分。

本发明的URAT1抑制用组合物含有选自不具有或具有1个甲氧基的黄烷酮及黄烷酮糖苷中的1种以上的黄烷酮化合物作为有效成分。

以下也仅将本发明中使用的上述的黄烷酮化合物简单称作黄烷酮化合物。本发明的尿酸排出促进用组合物及URAT1抑制用组合物中，对于有效成分而言，可使用1种黄烷酮化合物也可使用2种以上。

本发明中使用的黄烷酮化合物为不具有或具有1个甲氧基(具有0个或1个甲氧基)的黄烷酮及/或黄烷酮糖苷。这样的黄烷酮及黄烷酮糖苷具有URAT1抑制作用。

作为不具有或具有1个甲氧基的黄烷酮，可列举下述通式(1)所表示的化合物。

[化学式1]

上述通式(1)中，R¹表示氢原子或甲基。R²表示氢原子、二甲基烯丙基或牻牛儿基。R³表示氢原子或羟基。R⁴表示氢原子或甲基。其中，R¹及R⁴的至少1个表示氢原子。

R²优选为氢原子或二甲基烯丙基。

作为不具有或具有1个甲氧基的黄烷酮，可列举异黄腐酚、柚皮素、橙皮素、圣草酚等。作为不具有或具有1个甲氧基的黄烷酮糖苷，可列举异黄腐酚糖苷、柚皮素糖苷、橙皮素糖苷(橙皮苷等)、圣草酚糖苷等。

作为本发明中的黄烷酮化合物，优选选自异黄腐酚、异黄腐酚糖苷、柚皮素、柚皮素糖苷、橙皮素、橙皮素糖苷(橙皮苷等)、圣草酚及圣草酚糖苷中的1种以上的化合物，更优选选自异黄腐酚、柚皮素、橙皮苷及圣草酚中的1种以上的化合物。这些黄烷酮及黄烷酮糖苷具有高URAT1抑制作用。其中，因其URAT1抑制作用高，作为黄烷酮化合物，进一步优选异黄腐酚。

关于用于获得本发明中的黄烷酮化合物的来源、制法并无特别限制。上述黄烷酮化合物，可来自天然物，也可为合成物。此外，如果有市售品，可使用该市售品。

例如，异黄腐酚可通过加热等工序由大麻科植物啤酒花(Humulus lupulus)萃取物来制备。通过加热啤酒花萃取物，可在该萃取物中生成异黄腐酚。啤酒花萃取物通常可用溶剂对啤酒花的球花进行萃取，根据需要可通过和提纯相关的工序来制备，可根据公知的啤酒花萃取物的制备方法获得。作为萃取方法，例如可列举作为啤酒酿造中使用的啤酒花萃取物的制备方法而使用的基于乙醇溶剂的萃取方法。市面上销售有啤酒花萃取物，也可以使用市售的啤酒花萃取物。为了生成异黄腐酚而对啤酒花萃取物的加热优选于80～140℃(更优选85～100℃)下实施15分钟～5小时(更优选20分钟～3小时)。为了制备异黄腐酚而对啤酒花萃取物的提纯以公知的方法实施。作为提纯方法，例如可列举使用HPLC或吸附柱等，或利用溶解度的变化的析出等方法。此外，异黄腐酚也可通过加热黄腐酚进行异构化来制造。此时的加热温度可优选采用80～140℃(更优选85～100℃)下15分钟～5小时(更优选20分钟～3小时)。通过异构化处理而得的异黄腐酚，根据需要可通过公知的方法(例如过滤、减压浓缩、冷冻干燥等)浓缩、提纯。

报告称异黄腐酚在例如100℃的高温条件下也稳定。日本食品卫生法中作为清凉饮料水等的规格标准规定了杀菌条件，例如pH4.0以上的物质(pH4.6以上且水分活性超过0.94的物质除外)需要于85℃下加热30分钟。考虑这样的杀菌工序中的成分转换时，认为异黄腐酚的饮料适性高。

根据本发明的一种方式，可提供对热稳定，有助于健康的维持、增进的各种功能性食品、功能性饮料等。

柚皮素、橙皮素、圣草酚及它们的糖苷，含有于例如柠檬、酸橙、葡萄柚、温州蜜柑、酸橘等柑橘类中。例如可通过以下工序来获得柚皮素糖苷、橙皮素糖苷或圣草酚糖苷：将这些柑橘类的叶、果实或果皮作为原料，用极性溶剂(甲醇、乙醇、水等)进行萃取，通过色谱法等对所得的萃取物进行提纯。柚皮素、橙皮素或圣草酚，可作为对萃取上述原料而得的萃取物实施β-葡萄糖苷酶处理而得的酶处理物，或通过对该酶处理物进一步实施提纯处理来获得。通过β-葡萄糖苷酶处理，由糖苷生成作为其糖苷配基的柚皮素、橙皮素或圣草酚。从来自柑橘类的原料的萃取、提纯及酶处理可通过公知的方法实施。

本发明中，只要能发挥本发明的效果，作为黄烷酮化合物源，本发明的组合物中可含有：含有黄烷酮化合物的植物来源原料的萃取物等。

如实施例所示，异黄腐酚等不具有或具有1个甲氧基的黄烷酮及黄烷酮糖苷(黄烷酮化合物)具有抑制URAT1活性的作用(URAT1抑制作用)。此外，就本发明的黄烷酮化合物的URAT1抑制作用而言，黄腐酚也高。

抑制尿酸转运体URAT1的活性时，自尿中的尿酸排出得到促进。由于本发明中的黄烷酮化合物具有URAT1抑制作用，因此适合用于抑制URAT1或促进尿酸排出。本发明中的黄烷酮化合物，作为尿酸排出促进用组合物及URAT1抑制用组合物的有效成分使用，可用于制造这些组合物。

本发明的尿酸排出促进用组合物可通过抑制URAT1来促进尿酸排出。本发明的尿酸排出促进用组合物，适合用于通过抑制URAT1来促进尿酸排出。

本发明还包含含有异黄腐酚作为有效成分的血液中尿酸值降低用组合物。

异黄腐酚具有优异的URAT1抑制作用。如上所述，抑制尿酸转运体URAT1的活性时，自尿中的尿酸排出得到促进。由此，可期待血液中尿酸值的降低。本发明的血液中尿酸值降低用组合物，可用于通过促进尿酸排出来降低血液中尿酸值。

以下，也将本发明的尿酸排出促进用组合物、URAT1抑制用组合物及血液中尿酸值降低用组合物统称为尿酸排出促进用组合物等。

本发明的尿酸排出促进用组合物等对于通过促进尿酸排出或降低血液中尿酸值而可看到预防或改善效果的状态或疾病的预防或改善有用。作为这样的状态或疾病，可列举高尿酸血症、痛风、尿路结石等。在一种方式中，本发明的血液中尿酸值降低用组合物用于高尿酸血症的预防或改善、痛风的预防或改善。本说明书中状态或疾病的预防，是指防止状态或疾病的发生、延迟状态或疾病的发生、降低状态或疾病的发生率、减轻状态或疾病的发生风险等。状态或疾病的改善，是指使对象从状态或疾病中恢复、减轻状态或疾病的症状、延迟或防止状态或疾病的进展等。

本发明中使用的黄烷酮化合物，含于天然物或饮食品，为具有饮食经验的化合物。因此从安全性的观点出发，认为例如即使每日摄取上述黄烷酮化合物也少有问题。从而，根据本发明，可提供含有安全性高的成分作为有效成分的尿酸排出促进用组合物等。

本发明的尿酸排出促进用组合物等适用于治疗用途(医疗用途)或非治疗用途(非医疗用途)的任意一种均可。

本发明的尿酸排出促进用组合物等可以饮食品、医药、医药部外品、饲料等方式提供。本发明的尿酸排出促进用组合物等其自身可为用于促进尿酸排出、抑制URAT1或降低血液中尿酸值的饮食品、医药、医药部外品、饲料等，也可为这些中调配使用的原料或制剂等。

尿酸排出促进用组合物等，作为一个示例，可以制剂的形式提供，但并不限定于本形式。该制剂可直接以组合物，或以含有该制剂的组合物的方式提供。本发明的尿酸排出促进用组合物、URAT1抑制用组合物及血液中尿酸值降低用组合物可分别称作尿酸排出促进剂、URAT1抑制剂及血液中尿酸值降低剂。本发明的尿酸排出促进用组合物等为固体、液体、膏体等的任意一种形态均可。

在一种方式中，本发明的尿酸排出促进用组合物等优选为口服用组合物。作为口服用组合物，可列举饮食品、口服用的医药、医药部外品、饲料，优选为饮食品或口服用医药，更优选为饮食品。

本发明的尿酸排出促进用组合物等，只要不影响本发明的效果，除上述黄烷酮化合物外，可含有任意的添加剂、任意的成分。这些添加剂及成分，可根据组合物的形式等来选择，可使用可用于一般的饮食品、医药、医药部外品、饲料等的物质。

将本发明的尿酸排出促进用组合物等制成饮食品、医药、医药部外品、饲料等时，其制造方法并无特别限定，可通过一般的方法来制造。在本发明的尿酸排出促进用组合物等的制造中，作为黄烷酮化合物，可使用经提纯的化合物，只要可发挥本发明的效果，作为黄烷酮化合物源，也可使用含有上述黄烷酮化合物的植物来源原料的萃取物等。此外，例如含有异黄腐酚的尿酸排出促进用组合物等在其制造中，可通过调配啤酒花萃取物并对该啤酒花萃取物进行加热的工序来制造。

例如将本发明的尿酸排出促进用组合物等制成饮食品时，可向黄烷酮化合物中调配可用于饮食品的成分(例如食品原料、根据需要而使用的食品添加物等)，从而制成各种各样的饮食品。饮食品并无特别限定，例如可列举一般的饮食品、健康食品、健康饮料、功能性标示食品、特定保健用食品、患者用饮食品。上述健康食品、功能性标示食品、特定保健用食品等可制成例如细粒剂、片剂、颗粒剂、粉剂、胶囊剂、咀嚼剂、糖浆剂、液剂、流食等各种制剂形式。

作为本发明的尿酸排出促进用组合物等的优选方式的一个例子，可列举饮料。例如，由于异黄腐酚对热稳定，因此含有异黄腐酚的尿酸排出促进用组合物等适合于饮料。

饮料为无酒精饮料、酒精饮料的任一种均可。作为无酒精饮料，例如可列举茶类饮料、咖啡饮料、无酒精啤酒风味饮料、碳酸饮料、功能性饮料、果实及蔬菜类饮料、乳性饮料、豆乳饮料、风味水等。在一种方式中，本发明的尿酸排出促进用组合物等优选为这样的无酒精饮料或酒精饮料。

本发明的尿酸排出促进用组合物等为茶类饮料时，优选为红茶饮料或无糖茶饮料。作为无糖茶饮料，可列举绿茶饮料、乌龙茶饮料、大麦茶饮料、糙米茶饮料、薏仁茶饮料、无糖的红茶饮料等。

本发明的尿酸排出促进用组合物等为咖啡饮料时，优选为容器装咖啡或液态咖啡。

本说明书中的“无酒精啤酒风味饮料”是指具有啤酒般的风味的碳酸饮料，通常为非发酵的无酒精类型，其实质上不含酒精。在此，无酒精啤酒风味饮料不排除含有无法检测的程度的极微量的酒精的饮料。

本发明的尿酸排出促进用组合物等为碳酸饮料时，优选为可乐风味饮料、透明碳酸饮料、姜汁汽水、果汁类碳酸饮料、含奶类碳酸饮料或无糖碳酸饮料。

本发明的尿酸排出促进用组合物等为功能性饮料时，优选为运动饮料、能量饮料、健康补给饮料或袋装果冻饮料。

本发明的尿酸排出促进用组合物等为果实及蔬菜类饮料时，优选为100％果实饮料、含果实饮料、低含量果汁清凉饮料、含果粒的果实饮料或果肉饮料。

本发明的尿酸排出促进用组合物等为乳性饮料时，优选牛奶、饮用酸奶、乳酸菌饮料或含乳类清凉饮料。

本发明的尿酸排出促进用组合物等为豆乳饮料时，优选豆乳或大豆饮料。

作为酒精饮料，可列举啤酒、啤酒类饮料、啤酒及啤酒类饮料以外的酒精饮料。

本发明的尿酸排出促进用组合物等为啤酒类饮料时，优选为发泡酒或第三啤酒。

本发明的尿酸排出促进用组合物等为啤酒及啤酒类饮料以外的酒精饮料时，优选为烧酒、碳酸烧酒、利口酒、鸡尾酒、烈酒、威士忌。

饮料形态并无特别限定，可制成容器装饮料。容器装饮料的容器并无特别限定，可使用任意形态及材质的容器，例如使用铝罐、钢罐等金属制容器；PET瓶等树脂制容器；纸盒等纸容器；玻璃瓶等玻璃制容器；木桶等木制容器等通常所用容器的任一种均可。通过将饮料填充及密封至这样的容器中，可获得容器装饮料。

将本发明的尿酸排出促进用组合物等制成医药或医药部外品时，例如可向黄烷酮化合物中调配药理学所允许的载体、根据需要而添加的添加剂等制成各种剂型的医药或医药部外品。这样的载体、添加剂等，只要为可用于医药或医药部外品且药理学所允许的物质即可，例如可列举赋形剂、结合剂、崩解剂、润滑剂、抗氧化剂、着色剂等的1种或2种以上。作为医药或医药部外品的投用(摄取)方式，从更充分地获得本发明的效果的观点出发，优选口服投用方式。将尿酸排出促进用组合物等制成医药时，优选制成口服用医药。作为用于口服投用的制剂的剂型，可列举液剂、片剂、粉剂、细粒剂、颗粒剂、糖衣片剂、胶囊剂、悬浊液、乳剂、咀嚼剂等。医药也可为非人类动物用医药。

将本发明的尿酸排出促进用组合物等制成饲料时，例如可向黄烷酮化合物中调配可用于饲料的成分制成饲料。饲料中也可含有饲料添加剂。作为饲料，例如可列举家畜用饲料；用于大鼠、小鼠等的小动物用饲料；用于狗、猫等的宠物食物等。

本发明的尿酸排出促进用组合物等的黄烷酮化合物的含量，可根据该组合物的形态等适当设定。在一种方式中，就本发明的尿酸排出促进用组合物等的黄烷酮化合物的含量而言，黄烷酮化合物的总含量在尿酸排出促进用组合物等中优选0.0001重量％以上，更优选0.001重量％以上，此外优选90重量％以下。在一种方式中，黄烷酮化合物的总含量在组合物中优选0.0001～90重量％，更优选0.001～90重量％。就上述黄烷酮化合物的总含量而言，黄烷酮化合物含有2种以上时，为它们的合计含量。在一种方式中，将本发明的尿酸排出促进用组合物等制成饮食品、医药、医药部外品、饲料等时，优选将该组合物中的黄烷酮化合物的总含量设置为上述范围。

黄烷酮化合物的含量可依照公知的方法进行测定，例如可使用高效液相色谱法(HPLC)或LC-MS/MS等进行测定。

本发明的尿酸排出促进用组合物等，根据其形态可以适当的方法来摄取或投用。从充分获得本发明的效果的观点出发，本发明的尿酸排出促进用组合物等优选口服摄取(口服投用)。

本发明的尿酸排出促进用组合物等的摄取量(也可称投用量)并无特别限定，为可获得尿酸排出促进效果、URAT1抑制效果或血液中尿酸值降低效果的量(有效量)即可，根据投用形态、投用方法、对象的体重等适当设定即可。在一种方式中，以人类(成人)为对象口服摄取或投用时，本发明的尿酸排出促进用组合物等的摄取量，以黄烷酮化合物的总摄取量计，每1日60kg体重，优选为1～200mg，更优选为5～60mg。所谓黄烷酮化合物的总摄取量，摄取2种以上黄烷酮化合物时，为它们的合计摄取量。上述量优选1日1次以上，例如分1日1次～数次(例如2～3次)来摄取。在一种方式中，本发明的尿酸排出促进用组合物等可为用于使成人摄取或对其投用每60kg体重，每1日上述量的黄烷酮化合物的口服用组合物。

本发明的尿酸排出促进用组合物等的摄取对象(也可称投用对象)并无特别限定。上述对象优选为哺乳动物(人类或非人类哺乳动物)，更优选为人类。此外，作为本发明的尿酸排出促进用组合物等的摄取对象，优选例如需要或希望促进尿酸排出的对象。此外，作为本发明的血液中尿酸值降低用组合物的摄取对象，优选需要或希望降低血液中尿酸值的对象。对于这样的对象，不仅包含高尿酸血症等血液中尿酸值高的对象，还含有虽然血液中尿酸值不高，但在意血液中尿酸值的升高的对象、想要预防高尿酸血症的对象、想要预防痛风的对象、使血液中尿酸值升高的饮食品的摄取量高的对象等，希望预防血液中尿酸值的升高的对象。

在一种方式中，本发明的尿酸排出促进用组合物等，以通过促进尿酸排出可期待改善的状态或疾病的预防为目的，可用于处于健康状态的对象。

对于本发明的尿酸排出促进用组合物等而言，在包装、容器或说明书等上可标示用途、有效成分的种类、上述效果、使用方法(例如摄取方法、投用方法)等的1种或2种以上。本发明的尿酸排出促进用组合物等上可附有具有URAT1抑制作用或尿酸排出促进作用，或基于这些作用的作用的意思的标示。作为这样的标示，也可附有降低血液中尿酸值的意思等的标示。

本发明还包含以下促进尿酸排出的方法、抑制URAT1的方法、降低血液中尿酸值的方法。

一种促进尿酸排出的方法，其特征在于，向对象投用或使其摄取选自不具有或具有1个甲氧基的黄烷酮及黄烷酮糖苷中的1种以上的黄烷酮化合物。

一种抑制URAT1的方法，其特征在于，向对象投用或使其摄取选自不具有或具有1个甲氧基的黄烷酮及黄烷酮糖苷中的1种以上的黄烷酮化合物。

一种降低血液中尿酸值的方法，其特征在于，向对象投用或使其摄取异黄腐酚。

上述方法可以为治疗性的方法，也可以为非治疗性的方法。所谓“非治疗性”为不包含医疗行为，即人类的手术、治疗或诊断的概念。上述方法中，对象优选哺乳动物(人类或非人类哺乳动物)，更优选人类。

本发明还包含以下应用等。

一种黄烷酮化合物的应用，其特征在于，所述黄烷酮化合物选自不具有或具有1个甲氧基的黄烷酮及黄烷酮糖苷中的1种以上，用于促进尿酸排出。

一种黄烷酮化合物的应用，其特征在于，所述黄烷酮化合物选自不具有或具有1个甲氧基的黄烷酮及黄烷酮糖苷中的1种以上，用于抑制URAT1。

一种异黄腐酚的应用，其特征在于，用于降低血液中尿酸值。

应用可为治疗性的应用，也可为非治疗性的应用。上述应用，优选为哺乳动物(人类或非人类哺乳动物)，更优选人类中的应用。

上述方法及应用中，只要向对象投用或使其摄取可获得尿酸排出促进效果、URAT1抑制效果或血液中尿酸值降低效果的量(即有效量)的黄烷酮化合物即可。黄烷酮化合物及其优选方式，与上述尿酸排出促进用组合物等中相同。黄烷酮化合物的优选摄取量、投用对象等，与上述本发明的尿酸排出促进用组合物等的情况相同。黄烷酮化合物，可直接投用或摄取，也可作为含有黄烷酮化合物的组合物来投用或摄取。例如，可投用或摄取上述本发明的尿酸排出促进用组合物等。

本发明在一种方式中，还包含一种黄烷酮化合物的应用，其特征在于，所述黄烷酮化合物选自不具有或具有1个甲氧基的黄烷酮及黄烷酮糖苷中的1种以上，用于制造尿酸排出促进用组合物或URAT1抑制用组合物。本发明还包含一种异黄腐酚的应用，其特征在于，用于制造血液中尿酸值降低用组合物。黄烷酮化合物及优选方式等，与上述尿酸排出促进用组合物等中相同。

实施例

以下，通过实施例进一步详细地说明本发明，但并不由此限定本发明的范围。

＜实施例1＞

被测物质使用异黄腐酚(株式会社岐阜紫胶制造所)、柚皮素(Funakoshi株式会社)、橙皮苷(东京化成工业株式会社)、圣草酚(Funakoshi株式会社)。

用Hank's平衡盐溶液(HBSS)(Nacalai株式会社)将使人类URAT1稳定表达的来自猪肾的MDCK2细胞(Shin et al.,Nephrology 16(2011)156-163)洗净后，于含有被测物质及经14C标记的尿酸的HBSS中培养10分钟。另外，使各被测物质溶解于二甲基亚砜(DMSO)，并以被测物质浓度达到1、5、10、15、20、40、60、80、100或200μg/mL的方式添加于HBSS中。此时，使HBSS中的DMSO浓度达到1.5％以下。尿酸以达到20μM的方式添加于HBSS中。然后再次用HBSS将细胞洗净后，通过0.1N的氢氧化钠水溶液来溶解细胞，并通过液体闪烁计数器测定溶解液中的14C放射线量，测定吸收至细胞内的尿酸量。作为阳性对照，设置添加有30μM苯溴马隆的组。在对照的被测物质无添加组中，仅向HBSS中添加DMSO(DMSO浓度：1％)。对照及各浓度的被测物质各以n＝3的方式进行试验。URAT1的抑制率(％)通过将被测物质无添加组的尿酸吸收量作为100％时的被测物质添加组的尿酸吸收量来计算。尿酸吸收量使用n＝3的平均值。URAT1抑制率(％)的计算式如下所示。对照组为被测物质无添加组。

抑制率(％)＝100×{(对照组的尿酸吸收量-被测物质添加组的尿酸吸收量)/对照组的尿酸吸收量}

＜比较例1＞

除了作为被测物质，使用黄腐酚(Alexis Biochem.公司)以外，用与实施例1相同的方法求取URAT1的抑制率(％)。

将评价实施例1及比较例1的各被测物质的添加培养对URAT1活性产生的影响的结果示于图1～4。图1为表示异黄腐酚的URAT1抑制率的图表。图1中，为了对比，还示出比较例1的黄腐酚的URAT1抑制率。图1中，IXN(黑圈)为异黄腐酚，XN(白圈)为黄腐酚。

图2为表示柚皮素的URAT1抑制率的图表，图3为表示橙皮苷的URAT1抑制率的图表，图4为表示圣草酚的URAT1抑制率的图表。

通过异黄腐酚、柚皮素、橙皮苷或圣草酚的黄烷酮化合物的添加培养，确认了抑制率的显著提升。另一方面，在虽然为黄酮类，但属于其中的查尔酮类的黄腐酚(比较例1)的添加培养中，未能确认显著的抑制率的提升。苯溴马隆(30μM)的抑制率为99～100％。此外，关于实施例1中使用的被测物质，作为化合物的生物学上或生化学上的抑制作用的有效度的指标，计算对URAT1进行50％抑制时的被测物质浓度(IC₅₀)。IC₅₀的计算结果示于表1。

[表1]

在被测物质中，异黄腐酚表现出最低的IC₅₀，由此认为具有最高的URAT1抑制活性。

工业实用性

本发明在饮食品领域、医药领域等中有用。