母乳化的低致敏型鲜活婴幼儿配方奶及其制备方法
阅读说明：本技术 母乳化的低致敏型鲜活婴幼儿配方奶及其制备方法 (Maternal emulsified hypoallergenic fresh and alive infant formula milk and preparation method thereof ) 是由 荀一萍 王世杰 袁庆彬 魏立华 贾晓江 封肖颖 冯丽莉 张栋 薛玉玲 刘建光 闫 于 2020-12-08 设计创作，主要内容包括：本发明属于食品技术领域,公开了一种母乳化的低致敏型鲜活婴幼儿配方奶及其制备方法,是取牛乳/羊乳经巴氏杀菌后,加入营养剂混匀,再经均质、杀菌、冷却,然后加入辅料混匀,制得适于婴幼儿食用的母乳化的低致敏型鲜活婴幼儿配方奶。本发明通过模拟母乳(中国)的营养成分,合理配比蛋白质,调整油脂比例,优化原料配比和加工工艺,在降低因动物源乳成分差异引起的婴幼儿食源性过敏风险的同时,最大程度的保留生牛乳/生羊乳中的生物活性成分,解决了因动物源乳成分差异引起的婴幼儿食源性过敏风险。(The invention belongs to the technical field of food, and discloses a maternal emulsified hypoallergenic fresh and alive infant formula milk and a preparation method thereof. According to the invention, by simulating the nutritional ingredients of breast milk (China), reasonably proportioning protein, adjusting the proportion of grease, optimizing the proportion of raw materials and the processing technology, the food-borne allergy risk of infants caused by the difference of animal-derived milk ingredients is reduced, the bioactive ingredients in raw milk/raw goat milk are retained to the greatest extent, and the food-borne allergy risk of infants caused by the difference of animal-derived milk ingredients is solved.)
技术领域
本发明属于食品技术领域，涉及一种婴幼儿液态奶，具体地说是一种母乳化的低致敏型鲜活婴幼儿配方奶及其制备方法。
背景技术
研究表明，在婴儿能够自己摄入和消化其他外源食品之前，母乳是婴儿生长发育、抵御外界细菌和病毒入侵的最重要的营养成分来源，能够为其提供免疫球蛋白、乳铁蛋白、骨桥蛋白等多种能够增强婴幼儿免疫力的活性蛋白质，以及低聚糖、核苷酸、神经节苷脂等生物活性成分。母乳喂养受到极大的重视，婴幼儿配方奶粉及液态奶的研发也越来越趋向于母乳组成。婴幼儿配方液态奶与奶粉的功能相同，是一种可直接喂食婴幼儿的液态乳制品，具有无需冲调、温热后即食的优点。配方奶依赖于牛乳、羊乳等，由于物种差异，动物源乳与母乳中的各种营养素存在着较大差异，同时也增加了婴幼儿发生食源性过敏的风险。而氨基酸、脂质结构及脂肪酸、其它生物活性成分的含量等影响着婴幼儿成长发育，因此，依据母乳营养组成以及婴幼儿的生长发育需求，研制更接近母乳、致敏风险小且食用简单方便的婴幼儿配方奶具有重要意义。
发明内容
本发明的目的，是要提供一种母乳化的低致敏型鲜活婴幼儿配方奶，以解决因动物源乳成分差异引起的婴幼儿食源性过敏风险的问题；
本发明的另一个目的，是要提供上述母乳化的低致敏型鲜活婴幼儿配方奶的一种制备方法。
为了实现上述目的，本发明采用的技术方案是：
一种母乳化的低致敏型鲜活婴幼儿配方奶，以重量份数计，制成它的有效成分的原料包括：
①牛乳/羊乳40～55份；
②营养剂：脱盐乳清粉20～35份、浓缩乳清蛋白粉0.5～10份、乳糖5～8份、无水奶油2～5份、复合植物油2～5份、1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯粉3～5份、复合母乳低聚糖0.5～3份、磷脂0.1～1份、DHA藻油粉0.1～0.5份、花生四烯酸粉剂0.1～0.3份、碳酸钙0.2～0.6份、核苷酸0.01～0.06份、复合维生素0.1～0.5份和复合矿物质0.1～0.3份；
③辅料：复合果粉0.1～1份和后生元0.1～2份。
作为一种限定，所述后生元是动物双歧杆菌乳亚种i797、鼠李糖乳杆菌x253、副干酪乳杆菌N1115及植物乳杆菌N3117的热灭活菌体和/或动物双歧杆菌乳亚种i797培养上清液浓缩物、鼠李糖乳杆菌x253培养上清液浓缩物、副干酪乳杆菌N1115培养上清液浓缩物及植物乳杆菌N3117培养上清液浓缩物的混合物。
作为另一种限定，以重量份数计，所述复合植物油是由玉米油3～5重量份、葡萄籽油1～3重量份、亚麻籽油1～3重量份和椰子油1～3重量份混合而成。
作为第三种限定，所述复合母乳低聚糖是由2'-岩藻糖基乳糖8～10重量份、乳糖-N-新四糖2～4重量份、乳糖-N-四糖2～4重量份、3'-唾液酸乳糖1～3重量份和6'-唾液酸乳糖1～3重量份混合而成。
作为第四种限定，以重量份数计，所述复合果粉是由樱桃粉1～3重量份、树莓粉0.5～1重量份和猕猴桃粉0.5～1重量份混合而成。
作为第五种限定，所述牛乳/羊乳是生牛乳/生羊乳经标准化、杂质分离制得。
本发明还提供了上述母乳化的低致敏型鲜活婴幼儿配方奶的一种制备方法，它是取牛乳/羊乳经巴氏杀菌后，加入营养剂混匀，再经均质、杀菌、冷却，然后加入辅料混匀，即得所述母乳化的低致敏型鲜活婴幼儿配方奶。
作为一种限定，所述加入营养剂混匀后且所述均质前，还需预热至60～65℃。
作为第二种限定，所述均质的压力为190～210bar。
作为第三种限定，所述巴氏杀菌的温度为52～58℃、时间为5～10s；
所述杀菌的温度为90～100℃、时间为5～10s。
由于采用了上述技术方案，本发明与现有技术相比，所取得的技术进步在于：
本发明通过模拟母乳(中国)的营养成分，合理配比蛋白质，调整油脂比例，优化原料配比和加工工艺，在降低因动物源乳成分差异引起的婴幼儿食源性过敏风险的同时，最大程度的保留生牛乳/生羊乳中的生物活性成分；
本发明中添加了后生元，为动物双歧杆菌乳亚种i797、鼠李糖乳杆菌x253、副干酪乳杆菌N1115和植物乳杆菌N3117的热灭活菌体及其培养上清浓缩物，具有促进肠道发育、调节婴幼儿胃肠道健康、抑制致病菌等健康功能，其还能够与复合母乳低聚糖、复合果粉协同增益，发挥提高免疫力、改善过敏反应和慢性炎症反应的功能；
本发明中添加了玉米油、葡萄籽油、亚麻籽油和椰子油。其中，葡萄籽油含有丰富的不饱和脂肪酸，以亚油酸和油酸为主要组成成分，亚油酸是人体必需脂肪酸，代谢后可产生花生四烯酸，花生四烯酸和DHA对视网膜和神经系统的发育有重要作用。葡萄籽油还含有植物甾醇和多酚类物质，具有良好的抗氧化活性，有助于预防婴幼儿成长后期的的肥胖发生；
亚麻籽油含有丰富的人体必需氨基酸，α-亚麻酸含量高达40％以上，能够直接成为细胞膜的组成物质，参与代谢形成EPA和DHA等重要的多不饱和脂肪酸促进大脑发育和保护视力。亚麻籽油还含有丰富的维生素E、甾醇、膳食纤维以及其特有的亚麻肽等，能够提高人体的免疫功能、预防过敏反应和慢性炎症反应；
椰子油具有椰香味，且富含中链脂肪酸，能不经酶解过程直接被小肠吸收，减少在体内的蓄积，迅速为婴幼儿提供能量；
本发明添加了2'-岩藻糖基乳糖、乳糖-N-新四糖、乳糖-N-四糖、3'-唾液酸乳糖和6'-唾液酸乳糖等多种母乳低聚糖，使配方奶更贴近母乳成分，同时能够促进婴幼儿肠道内双歧杆菌增殖，维护肠道微生态稳定。其中，3'-唾液酸乳糖和6'-唾液酸乳糖还能够提供唾液酸，促进婴幼儿大脑发育；
本发明中也添加了樱桃粉、树莓粉、猕猴桃粉，除了提供独特的果味外，还富含花青素、矿物质和维生素，能够增强婴幼儿体质、改善大脑功能、缓解慢性炎症和抗氧化等功能；
本发明的母乳化的低致敏型鲜活婴幼儿配方奶适用于婴幼儿食用。
附图说明
图1是本发明实施例8中测定的对照组与干预组GY11～GY13的小鼠粪便中双歧杆菌总数变化曲线；
图2是本发明实施例9中测定的对照组与干预组GY21～GY24的小鼠生长速率变化曲线；
图3是本发明实施例9中测定的对照组与干预组GY21～GY24的小鼠粪便中IgA含量对比图；
图4是本发明实施例9中测定的对照组与干预组GY21～GY24的小鼠血清中IgA含量对比图；
图5是本发明实施例9中测定的对照组与干预组GY21～GY24的小鼠血清中IgE含量对比图；
图6是本发明实施例9中测定的对照组与干预组GY21～GY24的小鼠血清中组胺含量对比图。
具体实施方式
下面通过具体实施例对本发明做进一步详细说明，应当理解所描述的实施例仅用于解释本发明，并不限定本发明。
实施例1一种母乳化的低致敏型鲜活婴幼儿配方奶的制备方法
一)后生元的制备
取动物双歧杆菌乳亚种i797、鼠李糖乳杆菌x253、副干酪乳杆菌N1115及植物乳杆菌N3117分别接种至MRS液体培养基37℃培养至菌数为1×1010CFU/mL时离心，分别收集相应的菌体和相应的培养上清液；
其中，动物双歧杆菌乳亚种i797菌体、鼠李糖乳杆菌x253菌体、副干酪乳杆菌N1115菌体及植物乳杆菌N3117菌体，按活菌数3：1：1：2：1的比例混合后，经110℃热灭活，得热灭活菌体；
分别取动物双歧杆菌乳亚种i797菌体培养上清液、鼠李糖乳杆菌x253菌体培养上清液、副干酪乳杆菌N1115菌体培养上清液及植物乳杆菌N3117培养上清液采用超滤技术进行浓缩，所得相应的培养上清液浓缩物按重量比3：1：1：2：1混合后，得培养上清液浓缩物的混合物；
热灭活菌体与培养上清液浓缩物的混合物混合，即为后生元。
需要注意，这里也可单独使用热灭活菌体或培养上清液浓缩物作为后生元使用。另，这里的相应的菌株培养条件仅为实际工业生产中的培养条件和处理条件，并不仅仅限于本实施例的范围，其中，处理方法按一般操作方法进行，培养条件的范围可参考相应菌株对应专利所保护的范围，具体参考如下。
其中，鼠李糖乳杆菌x253(Lactobacillus rhamnosus x253)已于2019年8月20日，在位于北京市朝阳区北辰西路1号院3号的中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(国家专利局指定专利微生物保藏中心)进行保藏，保藏编号：CGMCC No.18404，其在专利申请号为202010258772.0的在先专利中首次公开；
动物双歧杆菌乳亚种i797(Bifidobacterium animalis subsp.lactis i797)已于2019年8月20日，在位于北京市朝阳区北辰西路1号院3号的中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(国家专利局指定专利微生物保藏中心)进行保藏，保藏编号：CGMCCNo.18403，其在专利申请号为202010259210.8的在先专利中首次公开；
副干酪乳杆菌N1115(Lactobacillus paracasei N1115)，已于2011年3月17日，在位于北京市朝阳区北辰西路1号院3号的中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(国家专利局指定专利微生物保藏中心)进行保藏，保藏编号：CGMCC No.4691，其在专利号为201110357058.8的中国发明专利中首次公开；
植物乳杆菌N3117(Lactobacillus plantarum N3117)，已于2014年12月5日，在位于北京市朝阳区北辰西路1号院3号的中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(国家专利局指定专利微生物保藏中心)进行保藏，保藏编号：CGMCC No.10133，其在专利号为201510936243.0的中国发明专利中首次公开。
二)母乳化的低致敏型鲜活婴幼儿配方奶的制备
1)验收、净乳
取生牛乳进行标准化后，再经杂质分离，得牛乳。
2)预巴杀
取50kg牛乳经55℃巴氏杀菌8s后，降至室温，得巴氏奶。
3)混料
取2.22kg玉米油、0.56kg葡萄籽油、1.11kg亚麻籽油和1.11kg椰子油，作为复合植物油。其中，玉米油、葡萄籽油、亚麻籽油和椰子油的比例关系记作LB11，LB11＝4：1：2：2。
取1kg的2'-岩藻糖基乳糖、0.22kg乳糖-N-新四糖、0.45kg乳糖-N-四糖、0.11kg的3'-唾液酸乳糖和0.22kg的6'-唾液酸乳糖，作为复合母乳低聚糖。其中，2'-岩藻糖基乳糖、乳糖-N-新四糖、乳糖-N-四糖、3'-唾液酸乳糖和6'-唾液酸乳糖的比例关系记作LB21，LB21＝9：2：4：1：2。
取78.61g碳酸钙、131.00g柠檬酸钾、78.61g氯化钠、10.48g硫酸镁、0.26g硫酸亚铁、0.26g氯化钾、0.26g硫酸锌、0.26g亚硒酸钠和0.26g硫酸铜，作为复合矿物质；
取0.5g维生素A、1g维生素D、5g维生素E、0.5g维生素K、5g维生素B1、5g维生素B2、0.5g维生素B6、0.5g维生素B12、50g维生素C、1.5g泛酸、10g烟酸、220g胆碱、0.5g生物素，作为复合维生素；
巴氏奶中加入30kg脱盐乳清粉、5kg浓缩乳清蛋白粉、6kg乳糖、2kg无水奶油、5kg复合植物油、4kg的1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯粉、2kg复合母乳低聚糖、0.5kg磷脂、0.5kg的DHA藻油粉、0.2kg花生四烯酸粉剂、0.5kg碳酸钙、0.05kg核苷酸、0.3kg复合维生素、0.3kg复合矿物质，搅拌混合均匀并充分溶解，得料液M1。
4)取0.2kg樱桃粉、0.1kg树莓粉和0.1kg猕猴桃粉，作为复合果粉。其中樱桃粉、树莓粉和猕猴桃粉的比例关系记作LB31，LB31＝2：1：1。
料液M1预热至60℃，于200bar的压力下进行均质，均质完成后，加热至95℃杀菌5s，冷却至室温，加入0.4kg复合果粉、1.8kg后生元，搅拌充分溶解至完全混合均匀，即得母乳化的低致敏型鲜活婴幼儿配方奶，标记为N1。
本实施例制备的母乳化的低致敏型鲜活婴幼儿配方奶适用于婴幼儿食用。
实施例2～6母乳化的低致敏型鲜活婴幼儿配方奶的制备方法
实施例2～6分别为一种母乳化的低致敏型鲜活婴幼儿配方奶的制备方法，它们的步骤与实施例1基本相同，不同之处仅在于原料用量的不同，具体详见表1～3：
表1母乳化的低致敏型鲜活婴幼儿配方奶中的原料用量及参数一览表
其中复合维生素和复合矿物质的具体成分见表2～3。
表2复合维生素的原料用量一览表
表3复合矿物质的原料用量一览表
实施例2～6其它部分的内容，与实施例1相同。
实施例7母乳化的低致敏型鲜活婴幼儿配方奶的脂肪酸含量测定
分别取实施例1～6制备的母乳化的低致敏型鲜活婴幼儿配方奶N1～N6、母乳(补充来源)、传统1段配方牛奶粉(按说明书冲调)、传统1段配方羊奶粉(按说明书冲调)，按《食品中脂肪酸的测定》(GB5009.168-2016)中的方法，检测棕榈酸(C16:0)、油酸(C18:0)、亚油酸(C18:2)、α-亚麻酸(C18:3)、花生四烯酸(C20:4)和DHA(C22:6)的含量，具体结果如下：
表4脂肪酸含量测定结果一览表
母乳中的脂质具有多种重要功能，其中的脂肪酸不仅能够通过氧化分解产生能量，促进骨骼生长发育，维持机体正常的生命活动功能，还是婴幼儿脑部及神经组织的组成成分，在视力与智力发育中不可或缺。由表4可以看出，本发明提供的母乳化的低致敏型鲜活婴幼儿配方奶中含有的脂肪酸比例更接近母乳，更适合婴幼儿食用，优于传统1段配方牛奶粉和传统1段配方羊奶粉。其中，实施例1制备的母乳化的低致敏型鲜活婴幼儿配方奶N1最接近母乳。
实施例8母乳化的低致敏型鲜活婴幼儿配方奶的促进肠道双歧杆菌增殖实验
选取28只新出生C57BL/6小鼠，随机分为4组，每组7只，分别为对照组和干预组GY11～GY13，其中对照组每天早上灌胃0.2mL传统配方奶粉(按说明书冲调后0.2mL)，干预组GY11～GY13一一对应灌胃0.2mL实施例1～3制备的母乳化的低致敏型鲜活婴幼儿配方奶N1～N3，持续3周，并跟踪检测1周，于第0、3、5、7、9、11、13、15、21、28天检测小鼠粪便中双歧杆菌的量。
参见图1可知，与对照组相比，母乳化的低致敏型鲜活婴幼儿配方奶能够很好的促进乳鼠肠道双歧杆菌的增殖。而双歧杆菌的增殖有助于婴幼儿肠道菌群的建立，降低过敏风险的发生，因此，母乳化的低致敏型鲜活婴幼儿配方奶更适合婴幼儿食用。其中，实施例1制备的母乳化的低致敏型鲜活婴幼儿配方奶N1最佳。
实施例9母乳化的低致敏型鲜活婴幼儿配方奶的肠道健康和免疫力影响实验
一)对照配方奶的制备
按实施例1的方法和用量制备对照配方奶，区别仅在于对照配方奶D1中不添加复合果粉和后生元，对照配方奶D2不添加复合母乳低聚糖和后生元，对照配方奶D3不添加复合母乳低聚糖和复合果粉。
二)肠道健康和免疫力影响实验
选取40只新出生C57BL/6小鼠，雌雄各半，随机分为5组，分别为对照组、干预组GY21～GY24。其中，对照组饲喂传统配方奶粉(按说明书冲调后)，干预组GY21饲喂实施例1制备的母乳化的低致敏型鲜活婴幼儿配方奶N1，干预组GY22～GY24一一对应饲喂对照配方奶D1～D3。连续喂养3周，每2天记录一次体质量，每7天采集一次小鼠粪便和尾静脉血，21天时取各组小鼠的肠道组织，进行检测，检测结果见下表。
表5回肠组织中T-AOC、MDA和CAT的检测结果一览表
回肠组织中的T-AOC、CAT和MAD指标都是反映抗氧化相关的重要指标，T-AOC是全面反映抗氧化能力的指标，越高表明能力越强，越健康；同样，CAT是与过氧化物分解相关的酶，促进体内过氧化物代谢，越高表明酶活性越强。MDA是脂质发生过氧化的产物，体内的自由基可使脂质发生过氧化反应产生MDA，越高表明体内的自由基越高，过氧化反应越强，与T-AOC和CAT是指示相反的指标，越高越不健康。
由表5可以看出，干预组GY21～GY24的小鼠回肠组织中的T-AOC和CAT明显高于对照组，其中干预组G21最优。干预组GY21～GY24的小鼠回肠组织中的MAD明显低于对照组，其中干预组GY21最优。复合果粉中含有丰富的花青素和维生素C等具有抗氧化能力的物质，与复合母乳低聚糖及后生元协同增益，具有改善肠道氧化应激反应、促进乳鼠肠道健康的作用。上述实验结果证明，本发明的母乳化的低致敏型鲜活婴幼儿配方奶具有改善肠道氧化应激反应、促进乳鼠肠道健康的作用。
由图2可以看出，虽然所有的小鼠体重都有增加，但干预组GY21的增长速度明显高于其它组，说明本发明的母乳化的低致敏型鲜活婴幼儿配方奶能够加快生长速率。
分别对各组小鼠粪便和血清中IgA的含量进行测试，其中IgA越高免疫力越好。由图3可以看出，干预组GY21～GY24小鼠的粪便中IgA均高于对照组，其中GY21组最优，说明饲喂本发明的母乳化的低致敏型鲜活婴幼儿配方奶的小鼠粪便中IgA含量最高。
由图4可以看出，干预组GY21～GY24小鼠的血清中IgA均高于对照组，其中GY21组最优，说明饲喂本发明的母乳化的低致敏型鲜活婴幼儿配方奶的小鼠血清中IgA含量最高。
综上所述，本发明的母乳化的低致敏型鲜活婴幼儿配方奶中的复合母乳低聚糖、复合果粉和后生元具有协同增益的功效，能够有效增强小鼠免疫力。
进一步对各组小鼠的血清中IgE和组胺含量(IgE和组胺为过敏反应的标志物)进行测定，IgE和组胺含量越高说明小鼠越容易过敏。
由图5、图6可以看出，干预组GY21～GY24小鼠的血清中IgE和组胺均低于对照组，其中GY21组最优，说明饲喂本发明的母乳化的低致敏型鲜活婴幼儿配方奶的小鼠血清中IgE和组胺含量最低。因此，本发明的母乳化的低致敏型鲜活婴幼儿配方奶能够降低因乳源差异引起的过敏反应，降低过敏风险。