阅读说明：本技术 一种高纯度***二酚的制备方法 (Preparation method of high-purity cannabidiol ) 是由 刘欣 曹亮 于 2019-04-30 设计创作，主要内容包括：一种高纯度大麻二酚的制备方法,属于天然药物制备技术领域。针对目前大麻二酚提取工艺流程复杂,提取率及纯度低的问题,本发明提供了一种高纯度大麻二酚的制备方法,包括如下步骤：1)萃取：以工业大麻为原料,通过超临界二氧化碳流体萃取,获得初提取物；2)分离：将初提取物经动态轴向压缩工业色谱分离,获得大麻二酚。本发明适用于高纯度大麻二酚的工业化生产。(A preparation method of high-purity cannabidiol, belonging to the technical field of natural medicine preparation. Aiming at the problems of complex extraction process flow and low extraction rate and purity of the existing cannabidiol, the invention provides a preparation method of high-purity cannabidiol, which comprises the following steps: 1) and (3) extraction: extracting industrial hemp as a raw material by supercritical carbon dioxide fluid to obtain a primary extract; 2) separation: and (3) carrying out dynamic axial compression industrial chromatographic separation on the primary extract to obtain the cannabidiol. The invention is suitable for the industrial production of high-purity cannabidiol.)

一种高纯度***二酚的制备方法

技术领域

本发明属于天然药物制备技术领域，具体涉及一种高纯度***二酚的制备方法。

背景技术

二氢***酚(CBD)不溶于水，溶于乙醇、***、石油醚、苯、碱溶液、正己烷、6号溶剂油、二氯甲烷、乙酸乙酯、乙醇、甲醇。熔点67℃、沸点185℃。***叶子和花絮中***二酚含量较高，***二酚可阻碍四氢***酚对人体神经系统的影响，并具有抗痉挛、抗风湿关节炎、抗焦虑等药理活性。

目前***二酚提取大多采用醇提法、柱层析或单纯超临界萃取等技术，技术相对老旧，且生产效率低，纯度低。

发明内容

针对目前***二酚提取工艺流程复杂，提取率及纯度低的问题，本发明提供了一种高纯度***二酚的制备方法，包括如下步骤：

1)萃取：以工业***为原料，通过超临界二氧化碳流体萃取，获得初提取物；

2)分离：将初提取物经动态轴向压缩工业色谱分离，获得***二酚。

进一步地限定，步骤1)所述萃取，具体方法为：将原料烘干后粉碎，过10～100目筛，装入萃取釜内，经萃取后收集萃取馏分，得***二酚初提取物；所述萃取温度30～60℃，萃取压力10～35Mpa，CO₂流量10～180L/h，分离釜Ⅰ温度为20℃～55℃，分离釜Ⅰ压力为5～30Mpa，分离釜Ⅱ温度为15～35℃，分离釜Ⅱ压力为2～18Mpa，萃取时间为60～360min；所述原料为工业***的花絮和叶片中的一种或两种的混合物。

进一步地限定，步骤1)中所述烘干条件为40℃～90℃条件下烘干6～12h。

进一步地限定，步骤1)中所述烘干后，原料含水量低于3％～5％。

进一步地限定，步骤2)所述分离，具体方法为：将获得的初提取物加入柱层析硅胶填料，加甲醇拌匀后烘干，过动态轴向压缩工业制备色谱柱，进行梯度洗脱，梯度洗脱所用流动相由流动相A与流动相B组成，其中流动相A为正己烷、石油醚、二氯甲烷或氯仿，流动相B为丙酮、乙酸乙酯、甲醇或乙醇；分别收集含***二酚成分的主段洗脱液，合并后经浓缩后80-120目滤网或板框压滤机过滤，滤液经回收溶剂后干燥获得***二酚结晶。

进一步地限定，步骤2)所述流动相为下述几种情况中的一种：

①正己烷与丙酮的混合物，所述正己烷与丙酮的体积比为(12:1)～(3:1)；

②正己烷与乙酸乙酯的混合物，所述正己烷与乙酸乙酯的体积比为(10:1)～(2:1)；

③正己烷与甲醇的混合物，所述正己烷与甲醇的体积比为(15:1)～(5:1)；

④正己烷与乙醇的混合物，所述正己烷与乙醇的体积比为(12:1)～(4:1)；

⑤二氯甲烷与甲醇的混合物，所述二氯甲烷与甲醇的体积比为(90:1)～(10:1)；

⑥二氯甲烷与乙醇的混合物，所述二氯甲烷与乙醇的体积比为(95:1)～(15:1)；

⑦二氯甲烷与乙酸乙酯的混合物，所述二氯甲烷与乙酸乙酯的体积比为(60:1)～(5:1)；

⑧二氯甲烷与丙酮的混合物，所述二氯甲烷与丙酮的体积比为(80:1)～(20:1)；

⑨石油醚与丙酮的混合物，所述石油醚与丙酮的体积比为(15:1)～(3:1)；

⑩石油醚与乙酸乙酯的混合物，所述石油醚与乙酸乙酯的体积比为(12:1)～(3:1)；

石油醚与甲醇的混合物，所述石油醚与甲醇的体积比为(20:1)～(8:1)；

石油醚与乙醇的混合物，所述石油醚与乙醇的体积比为(18:1)～(6:1)；

氯仿与丙酮的混合物，所述氯仿与丙酮的体积比为(80:1)～(15:1)；

氯仿与乙酸乙酯的混合物，所述氯仿与乙酸乙酯的体积比为(75:1)～(10:1)；

氯仿与甲醇的混合物，所述氯仿与甲醇的体积比为(95:1)～(20:1)；

氯仿与乙醇的混合物，所述氯仿与乙醇的体积比为(96:1)～(30:1)；

进一步地限定，步骤2)所述柱层析硅胶填料粒径为300～1400目。

进一步地限定，步骤2)所述浓缩为减压浓缩。

进一步地限定，步骤2)所述干燥为冷冻干燥、喷雾干燥或减压干燥。

更进一步地限定，步骤2)冷冻干燥条件：预冻温度-35℃～-45℃，预冻时间7h～9h，隔板温度50℃～60℃，干燥时间28h～32h；喷雾干燥条件为进风温度:70～80℃，雾化压力：28～36psi，物料温度:50～60℃，出风温度：35～50℃；减压干燥条件为真空度-0.09～-0.1Mpa，45-60℃，干燥至水分在3％以下。

有益效果

本发明采用超临界二氧化碳萃取与动态轴向压缩(DAC)工业制备色谱，两步法相结合的技术，制备获得的***二酚纯度可高达98％。

具体实施方式

本发明涉及的仪器、设备或试剂，如无特殊说明，均可通过商业化途径购买获得。

实施例1.高纯度***二酚的制备方法。

1)萃取：以工业***为原料，通过超临界二氧化碳流体萃取，获得初提取物。具体方法为：将工业***的花絮和叶于40℃条件下烘干12h，控制含水量控制在5％，烘干后粉碎，过10目筛，装入萃取釜内；萃取温度30℃，萃取压力10Mpa，CO₂流量10L/h，分离釜Ⅰ温度为20℃，分离釜Ⅰ压力为5Mpa，分离釜Ⅱ温度为15℃，分离釜Ⅱ压力为2Mpa，萃取时间为60min，收集萃取馏分，得***二酚初提取物。

2)分离：将初提取物经动态轴向压缩工业色谱分离，获得***二酚。具体方法为：将获得的初提取物加入1000目的柱层析硅胶填料，加适量甲醇拌匀后烘干(甲醇用量为能够溶解初提取物，使其与硅胶填料混合即可)过动态轴向压缩工业制备色谱柱，进行梯度洗脱，梯度洗脱所用流动相由流动相A与流动相B组成，其中流动相A为正己烷，流动相B为丙酮；梯度洗脱是指流动相A与流动相B按照(12:1)～(3:1)的体积比例(流动相A与流动相B的体积比从12:1降低至3:1)进行梯度洗脱。分别收集含***二酚成分的主段洗脱液，合并后依次经减压浓缩、120目滤网过滤，滤液经减压回收溶剂后，冷冻干燥，条件为预冻温度-35℃，预冻时间7h，隔板温度60℃，干燥时间30h。

本实施例制备方法获得的***二酚结晶，经HPLC检测纯度95％。

实施例2.高纯度***二酚的制备方法。

1)萃取：以工业***为原料，通过超临界二氧化碳流体萃取，获得初提取物。具体方法为：将工业***的花絮和叶于90℃条件下烘干6h，控制含水量低于3％，烘干后粉碎，过100目筛，装入萃取釜内；萃取温度60℃，萃取压力35Mpa，CO₂流量180L/h，分离釜Ⅰ温度为55℃，分离釜Ⅰ压力为30Mpa，分离釜Ⅱ温度为35℃，分离釜Ⅱ压力为18Mpa，萃取时间为360min，收集萃取馏分，得***二酚初提取物。

2)分离：将初提取物经动态轴向压缩工业色谱分离，获得***二酚。具体方法为：将获得的初提取物加入1400目的柱层析硅胶填料，加适量甲醇拌匀后烘干(甲醇用量为能够溶解初提取物，使其与硅胶填料混合即可)，过动态轴向压缩工业制备色谱柱，进行梯度洗脱，梯度洗脱所用流动相由流动相A与流动相B组成，其中流动相A为石油醚，流动相B为乙酸乙酯；梯度洗脱是指流动相A与流动相B按照(12:1)～(3:1)的体积比例(流动相A与流动相B的体积比从12:1降低至3:1)进行梯度洗脱。分别收集含***二酚成分的主段洗脱液，合并后依次经减压浓缩、板框压滤机过滤，滤液经减压回收溶剂后，喷雾干燥，喷雾干燥条件为进风温度:70℃，雾化压力：36psi，物料温度:60℃，出风温度：50℃。

本实施例制备方法获得的***二酚结晶，经HPLC检测纯度98％。

实施例3.高纯度***二酚的制备方法。

1)萃取：以工业***为原料，通过超临界二氧化碳流体萃取，获得初提取物。具体方法为：将工业***的花絮和叶于60℃条件下烘干9h，控制含水量低于4％，烘干后粉碎，过50目筛，装入萃取釜内；萃取温度40℃，萃取压力20Mpa，CO₂流量90L/h，分离釜Ⅰ温度为30℃，分离釜Ⅰ压力为18Mpa，分离釜Ⅱ温度为20℃，分离釜Ⅱ压力为10Mpa，萃取时间为200min，收集萃取馏分，得***二酚初提取物。

2)分离：将初提取物经动态轴向压缩工业色谱分离，获得***二酚。具体方法为：将获得的初提取物加入800目的柱层析硅胶填料，加适量甲醇拌匀后烘干(甲醇用量为能够溶解初提取物，使其与硅胶填料混合即可)，过动态轴向压缩工业制备色谱柱，进行梯度洗脱，梯度洗脱所用流动相由流动相A与流动相B组成，其中流动相A为二氯甲烷，流动相B为丙酮；梯度洗脱是指流动相A与流动相B按照(80:1)～(20:1)的体积比例(流动相A与流动相B的体积比从80:1降低至20:1)进行梯度洗脱。分别收集含***二酚成分的主段洗脱液，合并后依次经减压浓缩、80目滤网过滤，滤液经减压回收溶剂后，减压干燥，真空度-0.09Mpa，45℃，干燥至水分在3％以下。

本实施例制备方法获得的获得***二酚结晶，经HPLC检测纯度78％。

实施例4.高纯度***二酚的制备方法。

1)萃取：以工业***为原料，通过超临界二氧化碳流体萃取，获得初提取物。具体方法为：将工业***的花絮和叶于60℃条件下烘干9h，控制含水量低于3％，烘干后粉碎，过50目筛，装入萃取釜内；萃取温度40℃，萃取压力20Mpa，CO₂流量90L/h，分离釜Ⅰ温度为30℃，分离釜Ⅰ压力为18Mpa，分离釜Ⅱ温度为20℃，分离釜Ⅱ压力为10Mpa，萃取时间为300min，收集萃取馏分，得***二酚初提取物。

2)分离：将初提取物经动态轴向压缩工业色谱分离，获得***二酚。具体方法为：将获得的初提取物加入300目的柱层析硅胶填料，加适量甲醇拌匀后烘干，过动态轴向压缩工业制备色谱柱，进行梯度洗脱，梯度洗脱所用流动相由流动相A与流动相B组成，其中流动相A为氯仿，流动相B为甲醇；梯度洗脱是指流动相A与流动相B按照(95:1)～(20:1)体积比例(流动相A与流动相B的体积比从95:1降低至20:1)进行梯度洗脱。分别收集含***二酚成分的主段洗脱液，合并后依次经减压浓缩、板框压滤机过滤，滤液经减压回收溶剂后，减压干燥，真空度-0.09Mpa，45℃，干燥至水分在3％以下。

本实施例制备方法获得的获得***二酚结晶，经HPLC检测纯度74％。