阅读说明：本技术 一种肝门部胆管癌的取材方法及其应用 (Material taking method for hepatoportal cholangiocarcinoma and application thereof ) 是由 金烁 曾建平 王思远 姜楠 于劭勍 于 2021-06-15 设计创作，主要内容包括：本发明涉及病理取材技术领域,尤其涉及一种肝门部胆管癌的取材方法及其应用。所述取材方法包括纵向取材和辐向取材,纵向取材包括：远端胆管取材,即沿着肿瘤和胆总管一端切缘的连线进行纵向取材；近端胆管取材,即沿着肿瘤和胆管靠近肝脏的一端切缘的连线进行纵向取材；在胆管靠近肝脏的一端切缘处进行横向取材。辐向取材包括：以肝总管远端2～2.5cm为起始部位,以1.25～1.5mm为间距向肝内进行连续切片,采用与轴位腹部增强CT平行的平面进行取材。本发明提供的取材方法制备得到的肝门胆管癌全景病理切片可以准确地对肝门胆管癌纵向和辐向浸润范围进行判断,为肝门胆管癌的定型和定量诊断提供更充分的依据。(The invention relates to the technical field of pathological material taking, in particular to a material taking method for hepatic portal cholangiocarcinoma and application thereof. The material taking method comprises longitudinal material taking and radial material taking, wherein the longitudinal material taking comprises the following steps: taking materials from a distal bile duct, namely taking materials longitudinally along a connecting line of a tumor and a cut edge at one end of a common bile duct; taking materials from a proximal bile duct, namely longitudinally taking materials along a connecting line of a tumor and a cut edge of one end of the bile duct close to the liver; the material is transversely taken at the incisal margin of one end of the bile duct close to the liver. The radial material drawing comprises: taking the distal end of the common hepatic duct at 2-2.5 cm as an initial part, continuously slicing the common hepatic duct into the liver at the interval of 1.25-1.5 mm, and taking materials by adopting a plane parallel to axial abdomen reinforcement CT. The panoramic pathological section of the hepatoportal cholangiocarcinoma prepared by the material taking method provided by the invention can accurately judge the longitudinal and radial infiltration ranges of the hepatoportal cholangiocarcinoma and provides a more sufficient basis for the typing and quantitative diagnosis of the hepatoportal cholangiocarcinoma.)

一种肝门部胆管癌的取材方法及其应用

技术领域

本发明涉及病理取材技术领域，尤其涉及一种肝门部胆管癌的取材方法及其应用。

背景技术

肝门胆管癌是胆管癌中最常见一种，是指原发于胆囊管开口以上肝总管与左、右二级肝管起始部之间，主要浸润肝总管、肝总管分叉部和左、右肝管的胆管癌，但有时其可侵及周围肝脏等组织。肝门胆管癌因其发生部位特殊、呈浸润性生长及与肝门部血管关系密切等特点给手术切除造成了极大的困难。

肝门胆管癌浸润的方式呈多极化浸润，一方面可纵向累及肝外及肝内胆管；另一方面可向辐向浸润累及肝脏。然而，针对这一复杂的多极化浸润的胆管恶性肿瘤，目前仍无有效的指南及专家共识以指导该疾病的病理取材，现有病理取材以定性诊断为主，大部分医院停留在主要对肿瘤取材进行定性诊断部分。目前急需一种创新的病理取材方式以指导肝门胆管癌定性及定量的诊断方法。

发明内容

为了解决现有技术存在的问题，本发明提供一种肝门部胆管癌的取材方法及其应用，提供了一种兼顾纵向及辐向浸润方位的肝门胆管癌全景病理取材方法，可准确对肝门部胆管癌进行病理诊断及分期。

第一方面，本发明提供了一种肝门部胆管癌的取材方法，包括：

针对肝门部胆管癌术后的胆管，进行远端胆管取材和近端胆管取材；

所述远端胆管取材包括：

沿着肿瘤和胆总管一端切缘的连线的方向进行纵向取材；

在胆总管一端切缘处进行横向取材；

所述近端胆管取材包括：

沿着肿瘤和胆管靠近肝脏的一端切缘的连线的方向进行纵向取材；

在胆管靠近肝脏的一端切缘处进行横向取材。

进一步地，还包括：

沿着肿瘤和切除侧胆管连线进行纵向条形取材，取材宽度为0.8～1.2mm；

和/或，

以肝总管远端2～2.5cm为起始部位，以1.25～1.5mm为间距向肝内进行连续切片，采用与轴位腹部增强CT平行的平面进行取材；

所述采用与轴位腹部增强CT平行的平面进行取材为：

以胆管为轴心，以人体轴位为切面，以横断面厚度为8～10mm进行取材。

进一步地，所述纵向取材为截面平行于胆管中轴线所在平面的取材方式；

所述横向取材为截面平行与胆管中轴线垂直的取材方式。

进一步地，所述纵向取材的取材宽度为0.8～1.2mm；

和/或，所述横向取材的取材宽度为0.8～1.2mm。

进一步地，所述肝门部胆管癌术后的胆管在取材前经过预处理；所述预处理为浸泡在10～12倍体积的福尔马林中24～28小时。

作为一种优选的技术方案，本发明提供一种肝门部胆管癌的取材方法，包括：

1)取肝门部胆管癌术后的胆管，浸泡在10～12倍体积的福尔马林中24～28小时；

(2)沿着肿瘤和胆总管一端切缘的连线的方向进行纵向取材；

(3)在胆总管一端切缘处进行横向取材；

(4)沿着肿瘤和胆管靠近肝脏的一端切缘的连线的方向进行纵向取材；

(5)在胆管靠近肝脏的一端切缘处进行横向取材；

所述纵向取材的取材宽度为0.8～1.2mm；

所述横向取材的取材宽度为0.8～1.2mm。

(6)沿着肿瘤和切除侧胆管连线进行纵向条形取材，取材宽度为0.8～1.2mm；

(7)以肝总管远端2～2.5cm为起始部位，以1.25～1.5mm为间距向肝内进行连续切片，采用与轴位腹部增强CT平行的平面进行取材；

所述采用与轴位腹部增强CT平行的平面进行取材为：

以胆管为轴心，以人体轴位为切面，以横断面厚度为8～10mm进行取材。

第二方面，本发明提供一种病理切片，所述病理切片包括所述取材方法得到的病理材料。

本发明进一步提供所述病理切片在测量肝门胆管癌浸润范围或浸润方式中的应用。

本发明进一步提供所述取材方法在制备肝门部胆管癌病理切片中的应用。

本发明进一步提供所述取材方法在制备用于测量肝门胆管癌浸润范围或浸润方式的生物材料中的应用。

本发明具备如下有益效果：

本发明提供了一种肝门部胆管癌的全景病理取材方法，依据此取材方法得到的病理材料，在制备得到相应的病理切片后，可以准确对肝门胆管癌纵向和辐向浸润范围进行精确判断，进而对肝门部胆管癌进行定性和定量诊断。

具体地，①在纵向浸润距离测量方面：肝门胆管癌可沿胆管进行轴向浸润(沿胆管树双向扩散)，本取材方法可有效对胆管癌浸润距离及距切缘距离进行有效判断，有利于判断患者临床预后的同时，可对该疾病进行临床研究。②辐向浸润状态方面；肝门胆管癌可以胆管为轴心浸润肝门区血管及临近肝实质，本研究进行的辐向取材方法可有效对肝门胆管癌肝脏浸润范围及浸润深度进行有效针对及研究。

本发明所探究出的取材方法可准确对肝门胆管癌与周围组织关系进行观察及研究，有利于肝门胆管癌的病理诊断，同时可进一步探索肝门胆管癌的生物学特征。

附图说明

图1为本发明实施例1提供的肝脏标本纵向取材示意图。

图2为本发明实施例1提供的肝脏标本辐向向取材示意图。

图3为本发明实施例1提供的实施纵向远端胆管取材方法。

图4为本发明实施例1提供的实施纵向近端胆管取材方法。

图5为本发明实施例1提供的辐向肝脏取材方法。

图6为本发明实施例1提供的肝门部胆管癌病理大切片扫描图片；大小为127×102mm。

图7为本发明实施例1提供的肝门部胆管癌辐向取材方法得到的病变起源胆管图。

图8为本发明实施例1提供的肝门部胆管癌辐向取材方法得到的肝实质细胞图。

具体实施方式

以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。

实施例1肝门胆管癌全景病理取材

将术后肝脏组织置于10倍于标本的10％福尔马林浸泡24小时，

1、远端胆管(靠近胆总管一端)纵向取材：为确定胆管癌远端胆管纵向浸润范围及防止跳跃浸润，在两侧肿瘤与远端切缘连线上，进行不破坏肿瘤与肝脏关系的纵向取材，取材宽度约为1mm(纵向取材示意图如图1所示，其中1为远端胆管纵向条形取材，2远端胆管断端横向取材·，3为近端保留侧胆管纵向条形取材，4为近端保留侧胆管断端横向取材，5为近端切除侧胆管纵向取材。远端胆管纵向取材方法如图2所示)。

2、远端胆管切缘横向取材：应用型号为F260P的16cm取材刀，首先对胆管远端切缘进行横向取材。

3、近端胆管(靠近肝脏一端的左、右肝管处)切缘纵向：为确定胆管癌近端胆管纵向浸润范围及防止跳跃浸润，在肿瘤与近端切缘(保留侧)连线上进行不破坏肿瘤与肝脏关系的纵向条形取材，宽度约1mm(如图3)。

4、近端胆管切缘横向取材：对保留侧的胆管断端进行切缘横向取材。

5、保留侧胆管近段纵向：为确定胆管癌分期，在肿瘤与切除侧胆管连线上进行不破坏肿瘤与肝脏关系的纵向条形取材，宽度约1mm。

6、以肝总管远端2cm为起始部位，以1.25mm为间距向肝内进行连续切片，采用与轴位腹部增强CT平行的平面进行取材；

所述采用与轴位腹部增强CT平行的平面进行取材为：

以胆管为轴心，以人体轴位为切面，以横断面厚度为8～10mm进行取材(取材示意图如图4所示，取材方法如图5所示)。

7、将取材后的组织，置于10倍于组织的10％中性福尔马林充分浸泡组织进行再次固定24小时，随后进入脱水阶段。

8、完成脱水后应用30cm圆形玻璃培养皿完成蜡块制备，应用樱花IVS-410切片机完成切片后，在切片中我们可以发现组织脱水程度良好，可完整切片，切片大小尺寸均为8cm以上，厚度为4um。随后进行HE染色，最后应用Olympus VS200全景数字扫描机，完成扫描后进行阅片。

图6-图8为切片扫描图片，图6为病理大切片扫描图片，图7为辐向取材方法所示病变起源胆管图，图8为辐向取材方法所示肝实质细胞图。

经病理科医师阅片后，本实发明发现癌细胞显示清楚，放大200倍后可清晰辨别异型性细胞，可以准确清晰地确定肝门部胆管癌浸润的区域和范围，可用于肝门部胆管癌的定性和定量诊断。除此之外，针对图6-图8的切片，可清楚观察癌组织周围血管、神经及纤维结缔组织，可准确观察癌周微环境及与周围组织的关系，肝实质细胞及细胞核显示清楚。

虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。