阅读说明：本技术 一种具有祛斑美白功效的组合提取物 (Combined extract with freckle removing and whitening effects ) 是由 杜志云 张泽钧 潘春杏 王珊珊 刘冠廷 徐雅妮 韩萍 林丽 李志威 于 2020-07-10 设计创作，主要内容包括：本发明涉及化妆品领域,公开了一种具有祛斑美白功效的组合提取物在美白功效方面的应用。该组合提取物由下述按重量的原料提取物制备而成：松树皮提取物10-40份,山楂提取物10-40份和杜仲雄花10-30份。通过胞外实验证明,该组合物对酪氨酸酶和非酶糖基化终末产物有明显的抑制效果且具有协同增效的效果,达到抑制黑色素和黄色素生成的效果,使得该组合物具有美白的功效。这为深入开发该组合物的美白价值开辟了新方向,同时该美白活性成分来源于植物,具有安全性好、协同增效等特点,具有非常高的开发预防和/或缓解皮肤色素沉着的化妆品的可行性。(The invention relates to the field of cosmetics, and discloses application of a combined extract with freckle removing and whitening effects in the aspect of whitening effects. The combined extract is prepared from the following raw material extracts by weight: 10-40 parts of pine bark extract, 10-40 parts of hawthorn extract and 10-30 parts of eucommia male flower. Extracellular experiments prove that the composition has obvious inhibition effect on tyrosinase and non-enzymatic glycosylation end products and synergistic effect, achieves the effect of inhibiting the generation of melanin and yellow pigment, and has the effect of whitening. The whitening active ingredients are derived from plants, have the characteristics of good safety, synergy and the like, and have very high feasibility of developing cosmetics for preventing and/or relieving skin pigmentation.)

一种具有祛斑美白功效的组合提取物

技术领域

本发明属于化妆品领域，具体涉及一种具有祛斑美白功效的组合提取物。

背景技术

随着科技日益发展，人们生活水平不断提高，美白成为了人们热议的话题之一。黑色素和黄色素是一种主要分布在人体表皮细胞和角质细胞中的高分子色素，决定了人的肤色和发色。简单来说，黑色素的合成通过以下过程：酪氨酸酶通过催化L-酪氨酸来发生羟基化反应生成左旋多巴（Levodopa，L-DOPA），并进一步催化L-DOPA氧化生成多巴醌（Dopaquinone，DQ）。多巴醌（DQ）经过分子内除氨基生成无色多巴色素（环多巴），最后生成黑色素。此外，人类皮肤色素除了由酪氨酸酶催化酪氨酸生成的黑色素外，还与非酶糖基化反应（Non-Enzymatic Glycation, NEG）的糖基化终末产物（Advanced Glycation EndProducts, AGEs）有关。NEG反应的羰基化合物与不同生物分子以交联或聚合的方式生成棕色、具荧光性的物质即AGEs，AGEs会累积在皮肤细胞及色素细胞上。

酪氨酸酶及AGEs的异常，可产生皮肤雀斑、黄褐斑、黑色素瘤等皮肤色素沉着性疾病。因此，抑制酪氨酸酶及AGEs，是调控皮肤色泽的重要途径。可用来预防和治疗色素沉着的化妆品的研发。

目前，对酪氨酸酶抑制剂的研究非常多，如氢醌、熊果苷、VC、VC衍生物、曲酸等，但是随着化妆品行业的发展，具有很大细胞毒性的物质(如氢醌等)已很少采用，而VC不稳定易氧化，曲酸对皮肤有刺激作用，来自植物等提取物的天然成分则很少有负面影响。随着高安全性并具有一定生理功效的化妆品逐渐被消费者接受，“组份天然化”及“回归大自然”的呼声已成为世界化妆品工业的潮流。

本发明将松树皮、山楂和杜仲雄花提取物应用于美白皮肤中，大大提高了安全性和实用性。

根据徐璐等人的《松树皮提取物的研究进展》提到，松树皮具有延缓皮肤衰老的功效，有较强的清除自由基效果。可以有效的美容美白。

根据李建华等人的《山楂的药理作用与临床应用》提到，山楂具有消食健胃,行气散瘀的作用。现代药理研究表明,山楂具有降血压、降血脂、降血糖、抗氧化、抗肿瘤、抗菌消炎、抗疲劳、活血化瘀、增强免疫等功能。同时根据胡艳颖等人的《山楂黄酮抗氧化作用的研究进展》，山楂黄酮其主要机制可能为提高组织中SOD和全血中SOD和GSH-Px活力, 降低MDA、LF和ET含量, 增加NO含量来防止人体衰老导致的色素沉着、黄褐斑。

根据刘聪等人的《中国中药杂志》和郭洋静的《杜仲雄花中抗皮肤光老化活性成分的研究》中提到，杜仲雄花能够显著的降低皮肤组织中MDA 含量、提高SOD活力、T-AOC能力，改善小鼠皮肤组织老化。已达到抗衰老，防止色素沉着的目的。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的是提供一种具有祛斑美白功效的组合提取物。

为实现本发明的目的，本发明采用如下技术方案：

本发明提供了一种具有祛斑美白功效的组合提取物在制备用于预防和/或缓解皮肤色素沉着的化妆品中的运用

在本发明的一些具体实施方案中，所述松树皮提取物、山楂提取物和杜仲雄花提取物，由95%乙醇浸提，然后滤液浓缩，离心，冷冻干燥获得。

本发明具有以下优点：

1.松树皮因为其抗氧化能力，被认为能保护皮肤免受多余紫外辐射和自由基伤害。大量证据表明松树皮保护并加强了皮肤中的胶原质和弹性蛋白，因此防止皱纹产生和保持皮肤弹性。理论上说通过修补皮肤胶原质和弹性蛋白可令皮肤重新焕发青春光彩。

2.山楂含有丰富的维生素C和黄酮类物质，还含有钙、钾等微量元素，可改善皮肤微循环，有美白祛斑的作用。

3.杜仲雄花含丰富的黄酮类化合物，可明显改善胶原蛋白质的衰老，加速新陈代谢，提高胶原蛋白质的合成能力，从而防止或推迟皮肤起皱及老化，增加皮肤光泽。

4.本发明配方提取物为天然植物，克服了现在大多数美白产品含有的有机物对皮肤的刺激作用，更安全。

附图说明

图1为各实施例对酪氨酸酶的抑制率实验结果图。

图2为各实施例对AGEs的抑制率实验结果图。

具体实施方式

为了进一步理解本发明，下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

如无特殊说明，本发明实施例中所涉及的试剂均为市售产品，均可以通过商业渠道购买获得。

实施例1

松树皮20份

将药材松树皮粉碎成50目，加入药材质量10倍的95%乙醇，于50℃浸提4 h，重复3次，过滤；滤液浓缩，离心，冷冻干燥，获得本发明所需要的松树皮提取物。

实施例2

山楂20份

将药材山楂粉碎成50目，加入药材质量10倍的95%乙醇，于50℃浸提4 h，重复3次，过滤；滤液浓缩，离心，冷冻干燥，获得本发明所需要的山楂提取物。

实施例3

杜仲雄花15份

将药材杜仲雄花粉碎成50目，加入药材质量10倍的95%乙醇，于50℃浸提4 h，重复3次，过滤；滤液浓缩，离心，冷冻干燥，获得本发明所需要的杜仲雄花提取物。

实施例4

松树皮20份、山楂20份

将药材松树皮和山楂按比例粉碎成50目，加入药材质量10倍的95%乙醇，于50℃浸提4h，重复3次，过滤；滤液浓缩，离心，冷冻干燥，获得本发明所需要的松树皮和山楂提取物。

实施例5

松树皮20份、杜仲雄花15份

将药材松树皮和杜仲雄花按比例粉碎成50目，加入药材质量10倍的95%乙醇，于50℃浸提4 h，重复3次，过滤；滤液浓缩，离心，冷冻干燥，获得本发明所需要的松树皮和杜仲雄花提取物。

实施例6

山楂20份、杜仲雄花15份

将药材山楂和杜仲雄花按比例粉碎成50目，加入药材质量10倍的95%乙醇，于50℃浸提4 h，重复3次，过滤；滤液浓缩，离心，冷冻干燥，获得本发明所需要的山楂和杜仲雄花提取物。

实施例7

松树皮20份、山楂20份、杜仲雄花15份

将药材松树皮、山楂和杜仲雄花按比例粉碎成50目，加入药材质量10倍的95%乙醇，于50℃浸提4 h，重复3次，过滤；滤液浓缩，离心，冷冻干燥，获得本发明所需要的松树皮、山楂和杜仲雄花提取物。

实施例8

1材料与方法：

1.1样品

实施例1提取物、实施例2提取物、实施例3提取物、实施例4提取物、实施例5提取物、实施例6提取物、实施例7提取物。

1.2实验方法

1.2.1胞外实验（酪氨酸酶抑制率）

在96孔板上设置A、B、C、D四组，每组设置4 个复孔。

ABCD组先加入0.1 mL 10.0 mmol/L左旋多巴溶液，A组加入0.1 mL 不同浓度的待测样品溶液，B组加入0.1 mL 蒸馏水，C组分别加入0.1 mL的待测样品溶液和蒸馏水，D组加入0.2 mL蒸馏水，室温静置5 min，5 min后A、B组分别加入0.1 mL 10.0 mmol/L的酪氨酸酶，混匀后在37 ℃微生物培养箱中静置25 min，然后用酶标仪在475 nm处测定吸光度，A、B、C、D组吸光度分别记为OD_A、OD_B、OD_C、OD_D。

酪氨酸酶二酚酶抑制率公式如下：

抑制率(%)=[(OD_B-OD_A+OD_C)/(OD_B-OD_D)]*100%

1.2.1胞外实验（AGEs抑制率）

配制反应液：称取1.125 g牛血清蛋白（7.5 mg/mL），称取0.065 g D-葡萄糖（6.75 mg/mL），加已配制好的PBS溶解至150 mL。配置好溶液后，溶液进行避光处理并在60 ℃下孵育24 h。

设置对照组A、对照组B、对照组C、模型组D和加药组E，对照组A为0.1 mL不同浓度提取物+0.2 mL PBS；对照组B为0.1 mL BSA+0.1 mL 不同浓度提取物+0.1 mL PBS；对照组C为0.1mL 葡萄糖+0.1 mL 不同浓度提取物+0.1 mL PBS；模型组D为0.1 mL 反应液+0.2mL PBS；加药组E为0.1 mL 反应液+0.1 mL 不同浓度提取物+0.1 mL PBS。

将溶液以0.2 mL/孔加到黑色96孔板中，每组设置4个复孔，使用荧光酶标测定荧光强度。AGEs抑制率公式如下：

抑制率(%)=1-[IF_E-(IF_B+IF_C-IF_A)/IF_D-(IF_B+IF_C-IF_A)]*100%

2实验结果

从图1可以明显看出，实施例7的酪氨酸酶抑制率最强，为44.57%.具有明显抑制酪氨酸酶的效果，该组合提取物有效的抑制了L-多巴的氧化，减少了黑色素的生成。

图2可以明显看出，实施例7的AGEs抑制率最强，为55.40%，山楂黄酮类提取物具有良好的清除糖基化终产物的能力，该组合提取物有效的清除糖基化终产物，抑制了黄褐斑的生成。