一种含超敏蛋白的抗病虫害组合物及其应用
阅读说明：本技术 一种含超敏蛋白的抗病虫害组合物及其应用 (Disease and pest resistant composition containing hypersensitive protein and application thereof ) 是由 田明汉 杨金惠 李远建 田宝 刘兴志 杨震军 于 2020-06-09 设计创作，主要内容包括：本发明涉及农药技术领域,更具体地,本发明第一方面提供一种含超敏蛋白的抗病虫害组合物,所述抗病虫害组合物包括活性组分A和活性组分B；其中,活性组分A包括Harpin蛋白,活性组分B选自氨基寡糖素、香菇多糖、烯啶虫胺、吡蚜酮、吡虫啉、啶虫脒、环虫腈、乙虫腈、丁烯氟虫腈、双炔酰菌胺、氟啶酰菌胺、啶酰菌胺、氟吡菌酰胺、戊唑醇、氟环唑、环丙唑醇、四氟醚唑、苯醚甲环唑、己唑醇、粉唑醇、丙硫菌唑、戊菌唑、腈菌唑、氟硅唑、丙环唑、吡唑醚菌酯、大蒜素、乙蒜素中的任一种,活性组分A和活性组分B的重量比为100：1～1：100；所述氨基寡糖素包括高分子量氨基寡糖素和低分子量氨基寡糖素。(The invention relates to the technical field of pesticides, and more specifically provides a disease and pest resistant composition containing a hypersensitive protein, which comprises an active component A and an active component B; the active component A comprises Harpin protein, the active component B is selected from any one of amino-oligosaccharin, lentinan, nitenpyram, pymetrozine, imidacloprid, acetamiprid, dicyclanil, ethiprole, butene-fipronil, mandipropamid, fluopicolide, boscalid, fluopyram, tebuconazole, epoxiconazole, cyproconazole, tetraconazole, difenoconazole, hexaconazole, flutriafol, prothioconazole, penconazole, myclobutanil, flusilazole, propiconazole, pyraclostrobin, allicin and ethylicin, the weight ratio of the active component A to the active component B is 100: 1-1: 100, respectively; the amino-oligosaccharin includes high molecular weight amino-oligosaccharin and low molecular weight amino-oligosaccharin.)
技术领域
本发明涉及农药技术领域，更具体地，本发明提供了一种含超敏蛋白的抗病虫害组合物及其应用。
背景技术
在农业生产的实际过程中，真菌是最重要的植物病原物类群，许多重要的病害如霜霉病、晚疫病、黑胫病和绵疫病等都是由真菌引起的。植物病毒是仅次于真菌的病原物。病毒是由一个核酸分子(DNA或RNA)与蛋白质构成的非细胞形态的营寄生生活的生命体，具有很强的侵染活力和破坏力。植物病毒作为植物的一种寄生生命体，对植物的生长和发育及人类的生存和发展造成了很大的威胁。目前，已研究和命名的植物病毒有1000余种，其中许多为重要的农作物病原。据统计，植物病毒在全世界造成的年均损失是600亿美元。
Harpin蛋白是由采用含有天然Harpin蛋白基因的工程菌发酵获得，易被植物表面受体识别，可以激活植物体内内源信号传导，是一类广谱的植物机能激活剂。氨基寡糖素是一类开发较早的生物农药，在植物与病原菌的相互作用中，病原菌分泌的细胞壁降解酶通过水解植物细胞壁而释放出寡糖信号分子，并以极低浓度传达给植物受侵染的信息，诱导植物编码植保素和其他防御化合物合成酶基因的表达，启动植物细胞的防御反应。香菇多糖是从优质香菇子实体中提取的有效活性成分，香菇多糖中的活性成分是具有分支的β-(1-3)-D-葡聚糖，主链由β-(1-3)-连接的葡萄糖基组成，沿主链随机分布着由β-(1-6)连接的葡萄糖基，呈梳状结构。香菇多糖具有免疫抗病作用，能够钝化病毒侵染活性，抑制病毒增殖，同时增强植株抗性，可以显著提高作物的品质和产量。
目前，施用农药是防治作物真菌或病毒病害最为有效的手段，但是现有的农药产品只能对单一种类的植物病害进行防治，对于不同种类的病害往往需要分别采用不同的农药品种进行防治，防治效果较差，且防治周期长、成本高，还会造成严重的环境污染以及抗病抗性。申请公布号为CN109744243A的发明专利公开了防治烟草病毒病的氨基寡糖素复配制剂及制备方法和应用，其有效成分为氨基寡糖素，以及小蘖碱或宁南霉素或香菇多糖或超敏蛋白或葡聚烯糖或混合脂肪酸中的一种或多种复配而成，应用于防治烟草病毒病，但并未提及到对其他植物病毒病的防治效果。因此，亟需开发一种针对多种植物病害，尤其是对植物病毒病，可以进行综合防治且防治效果突出，储存稳定并可长期存放的农药产品。
发明内容
为解决上述技术问题，本发明第一方面提供一种含超敏蛋白的抗病虫害组合物，所述组合物包括活性组分A和活性组分B；其中，活性组分A包括Harpin蛋白，活性组分B选自氨基寡糖素、香菇多糖、烯啶虫胺、吡蚜酮、吡虫啉、啶虫脒、环虫腈、乙虫腈、丁烯氟虫腈、双炔酰菌胺、氟啶酰菌胺、啶酰菌胺、氟吡菌酰胺、戊唑醇、氟环唑、环丙唑醇、四氟醚唑、苯醚甲环唑、己唑醇、粉唑醇、丙硫菌唑、戊菌唑、腈菌唑、氟硅唑、丙环唑、吡唑醚菌酯、大蒜素、乙蒜素中的任一种，活性组分A和活性组分B的重量比为100：1～1：100；
所述氨基寡糖素包括高分子量氨基寡糖素和低分子量氨基寡糖素。
作为本发明的一种优选技术方案，所述Harpin蛋白包括与HarpinEccs蛋白具有较高同源性的Harpin类蛋白质。
作为本发明的一种优选技术方案，所述Harpin蛋白还包括通过基因重组方式获得的具有Harpin功能活性的HarpinEccs融合蛋白及其它Harpin融合蛋白。
作为本发明的一种优选技术方案，所述高分子量氨基寡糖素是指分子量在2000～3000Da的氨基寡糖素；所述低分子量氨基寡糖素是指分子量在800～1000Da的氨基寡糖素。
作为本发明的一种优选技术方案，所述高分子量氨基寡糖素和低分子量氨基寡糖素的重量比为(1.1～1.5)：1。
作为本发明的一种优选技术方案，所述抗病虫害组合物由活性成分和辅助剂制成农药上允许的剂型。
作为本发明的一种优选技术方案，所述辅助剂选自分散剂、润湿剂、防冻剂、增稠剂、乳化剂、消泡剂、崩解剂、防腐剂、填料中的一种或几种组合。
作为本发明的一种优选技术方案，所述分散剂选自木质素磺酸钙、木质素磺酸钠、聚乙烯吡咯烷酮、亚甲基双萘磺酸钠、萘甲醛缩聚物磺酸盐、聚羧酸、聚氧乙烯聚氧丙烯醚嵌段共聚物、脂肪醇聚氧乙烯醚磷酸酯中的一种或几种组合；所述聚氧乙烯聚氧丙烯嵌段共聚物的平均分子量为2800～3000。
作为本发明的一种优选技术方案，所述剂型为悬浮剂、油悬浮剂、微囊悬浮剂、悬乳剂、水乳剂、微乳剂、可湿性粉剂、水分散粒剂、水剂、可溶性粉剂、可溶性片剂、可溶性粒剂、可溶液剂、微粒剂、粉剂、可湿性颗粒剂、种衣剂中的任一种。
本发明的第二方面提供一种根据所述含超敏蛋白的抗病虫害组合物的应用于防治瓜果、蔬菜、烟草、油菜、水稻、玉米的病虫害。
有益效果：
(1)本发明提供了一种含超敏蛋白的抗病虫害组合物，Harpin蛋白在作用过程中不直接杀灭或抑制病原生物生长，作为激发子能够与植物叶片或根系上细胞表面受体接触，发出病原体攻击警报，然后通过构型变化激活胞内有关酶的活性和蛋白质磷酸化，形成第二信使，信号得到放大，最终通过对特殊基因的调节而激发植物产生防卫反应，可以大大增强作物对病毒、细菌、真菌和干旱、高温、冻灾等多类型不良环境危害的防御能力；从内在激发作物对病害和多类型不良环境造成的危害可产生强大的抵抗修复能力，可较快促进再生、恢复，能大幅度减轻或消除因灾害对作物造成的危害；传统农药是通过进入植物体和病原体内去杀灭或阻止病原菌生长以达到防治效果，很容易加速诱导病原菌的耐药性和抗药性，而Harpin蛋白是可以激活植物体内内源信号传导的天然蛋白，不会改变病原生物结构，长期或多次诱导不会使植物病原菌产生抗药性，也不会杀害和有益生物，且在自然环境中极易分解，安全无害，对环境友好，符合国际发展前景；
(2)本发明组合物的Harpin蛋白和活性组分B具有不同作用机制，不仅能直接抑制植物病害，而且能激活植物的免疫活性，提高植物对病害的抗性，减少化学农药的施用量，可应用于防治瓜果、蔬菜、烟草、油菜、水稻、玉米等农作物的霜霉病、疫霉病、炭疽病、早疫病、水稻稻瘟病、小麦白粉病、病毒病、细菌性角斑病、基腐病、软腐病、溃疡病、青枯病病害、菌核病等，具有广谱的防治植物病害，尤其是对植物病毒病效果显著；
(3)本发明组合物通过特定活性组分和辅助剂的复配，组合物具有优异的储存稳定性与持久性，能够最大限度的发挥Harpin蛋白和活性组分B各自的药效，使药剂的活性有了很大提高，药剂的使用剂量和使用成本有了很大的降低，发展前景广阔。
具体实施方式
参选以下本发明的优选实施方法的详述以及包括的实施例可更容易地理解本发明的内容。除非另有限定，本文使用的所有技术以及科学术语具有与本发明所属领域普通技术人员通常理解的相同的含义。当存在矛盾时，以本说明书中的定义为准。
本文中所用的术语“包含”、“包括”、“具有”、“含有”或其任何其它变形，意在覆盖非排它性的包括。例如，包含所列要素的组合物、步骤、方法、制品或装置不必仅限于那些要素，而是可以包括未明确列出的其它要素或此种组合物、步骤、方法、制品或装置所固有的要素。
当量、浓度、或者其它值或参数以范围、优选范围、或一系列上限优选值和下限优选值限定的范围表示时，这应当被理解为具体公开了由任何范围上限或优选值与任何范围下限或优选值的任一配对所形成的所有范围，而不论该范围是否单独公开了。例如，当公开了范围“1至5”时，所描述的范围应被解释为包括范围“1至4”、“1至3”、“1至2”、“1至2和4至5”、“1至3和5”等。当数值范围在本文中被描述时，除非另外说明，否则该范围意图包括其端值和在该范围内的所有整数和分数。
此外，本发明要素或组分前的不定冠词“一种”和“一个”对要素或组分的数量要求(即出现次数)无限制性。因此“一个”或“一种”应被解读为包括一个或至少一个，并且单数形式的要素或组分也包括复数形式，除非所述数量明显只指单数形式。
为解决上述技术问题，本发明第一方面提供一种含超敏蛋白的抗病虫害组合物，所述抗病虫害组合物包括活性组分A和活性组分B；其中，活性组分A包括Harpin蛋白，活性组分B选自氨基寡糖素、香菇多糖、烯啶虫胺、吡蚜酮、吡虫啉、啶虫脒、环虫腈、乙虫腈、丁烯氟虫腈、双炔酰菌胺、氟啶酰菌胺、啶酰菌胺、氟吡菌酰胺、戊唑醇、氟环唑、环丙唑醇、四氟醚唑、苯醚甲环唑、己唑醇、粉唑醇、丙硫菌唑、戊菌唑、腈菌唑、氟硅唑、丙环唑、吡唑醚菌酯、大蒜素、乙蒜素中的任一种，活性组分A和活性组分B的重量比为100：1～1：100；
所述氨基寡糖素包括高分子量氨基寡糖素和低分子量氨基寡糖素。
在一种优选的实施方式中，所述活性组分A和活性组分B的重量比为50：1～1：50；更优选的，所述活性组分A和活性组分B的重量比为3：7。
活性组分A
本发明所述活性组分A包括Harpin蛋白。
本发明所述Harpin蛋白是由革兰氏阴性植物病原细菌hrp(hypersensitivereaction and pathogenicity gene)基因编码的一种多功能蛋白，富含甘氨酸(Gly)、缺少半胱氨酸(Cys)、遇热稳定、对蛋白酶敏感。
在一种优选的实施方式中，所述Harpin蛋白包括与HarpinEccs蛋白具有较高同源性的Harpin类蛋白质，如HarpinEcc、HarpinEa、HarpinEch、Harpinpst、Harpinpsg、Harpinpss等。
在一种优选的实施方式中，所述Harpin蛋白还包括通过基因重组方式获得的具有Harpin功能活性的HarpinEccs融合蛋白及其它Harpin融合蛋白，如HarpinEccs+HarpinEcc、HarpinEccs+HarpinEa、HarpinEccs+HarpinEch、HarpinEcc+HarpinEca、HarpinEcc+HarpinEch、HarpinEa+HarpinEch等。
本发明所述Harpin蛋白可通过市售购买得到，包括但不限于购买自湖南农大哥科技开发有限公司。
活性组分B
本发明所述活性组分B包括杀虫剂或抗菌剂。
在一种优选的实施方式中，所述杀虫剂选自吡蚜酮、环虫腈、氟啶酰菌胺、氟吡菌酰胺、啶酰菌胺、阿维菌素、乙酰甲胺磷、啶虫脒、双炔酰菌胺、棉铃威、涕灭威、烯丙菊酯、甲基吡磷、益棉磷、保棉磷、苏云金杆菌、虫威、四氟苯菊酯、丙硫克百威、杀虫磺、联苯菊酯、生物烯丙菊酯、生物苄呋菊酯、双三氟虫脲、噻嗪酮、丁酮威、甲萘威、克百威、丁硫克百威、杀螟丹、氯虫酰胺、氯氧磷、虫螨腈、毒虫畏、氟啶脲、氯甲硫磷、毒死蜱、甲基毒死蜱、环虫酰肼、噻虫胺、杀螟腈、氰虫酰胺、环溴虫酰胺、乙氰菊酯、氟氯氰菊酯、高效氟氯氰菊酯、氯氟氰菊酯、精高效氯氟氰菊酯、高效氯氟氰菊酯、氯氰菊酯、顺式氯氰菊酯、高效氯氰菊酯、zeta-氯氰菊酯、苯醚氰菊酯、灭蝇胺、溴氰菊酯、丁醚脲、二嗪磷、敌敌畏、除虫脲、乐果、甲基毒虫畏、呋虫胺、苯虫醚、乙拌磷、甲氨基阿维菌素苯甲酸盐、右旋烯炔菊酯、硫丹、α-硫丹、苯硫膦(EPN)、S-氰戊菊酯、乙硫苯威、乙虫腈、醚菊酯、乙嘧硫磷、杀螟硫磷、仲丁威、苯氧威、倍硫磷、氰戊菊酯、氟虫腈、氟啶虫酰胺、啶蜱脲、氟虫酰胺、氟环脲、氟氰戊菊酯、嘧虫胺、氟虫脲、丁烯氟虫腈、氟氯苯菊酯、氟吡呋喃酮、氟胺氰菊酯、τ-氟胺氰菊酯、地虫硫磷、呋线威、氯虫酰肼、氟铃脲、氟蚁腙、吡虫啉、唑磷、马拉硫磷、氯氟醚菊酯、氰氟虫腙、四聚乙醛、虫螨畏、甲胺磷、杀扑磷、灭多威、烯虫酯、甲氧苄氟菊酯、烯啶虫胺、氟酰脲、多氟脲、氧乐果、亚砜磷、甲基对硫磷、氯菊酯、苯醚菊酯、稻丰散、甲拌磷、伏杀硫磷、抗蚜威、丙硫磷、乙基多杀菌素、多杀霉素、螺虫乙酯、治螟磷、氟啶虫胺腈、七氟菊酯、特丁硫磷、杀虫畏、胺菊酯、右旋胺菊酯、四氟醚菊酯、氟氰虫酰胺、噻虫啉、噻虫嗪、杀虫环、硫双威、久效威、甲基乙拌磷、敌百虫、三氟苯嘧啶、杀铃脲中的任一种；所述抗菌剂选自氨基寡糖素、香菇多糖、戊唑醇、氟环唑、环丙唑醇、四氟醚唑、苯醚甲环唑、己唑醇、粉唑醇、丙硫菌唑、戊菌唑、腈菌唑、氟硅唑、丙环唑、阿莫西林、氨苄西林、硫氯酚、溴硝醇、头孢匹林、头孢唑林、头孢喹肟、头孢噻呋、金霉素、克拉维酸、达氟沙星、二氟沙星、二硝托胺、恩氟沙星、氟苯尼考、林可霉素、洛美沙星、马波沙星、米洛沙星、米罗米星、三氯甲基吡啶、诺氟沙星、辛噻酮、氧氟沙星、奥比沙星、奥索利酸、土霉素、青霉素、链霉素、甲砜霉素、富马酸硫姆林、磷酸替米考星、乙酸异戊酸泰乐菌素、磷酸泰乐菌素、妥拉霉素、伐奈莫林、吡唑醚菌酯、大蒜素、乙蒜素中的任一种。
在一种更优选的实施方式中，所述活性组分B选自氨基寡糖素、香菇多糖、烯啶虫胺、吡蚜酮、吡虫啉、啶虫脒、环虫腈、乙虫腈、丁烯氟虫腈、双炔酰菌胺、氟啶酰菌胺、啶酰菌胺、氟吡菌酰胺、戊唑醇、氟环唑、环丙唑醇、四氟醚唑、苯醚甲环唑、己唑醇、粉唑醇、丙硫菌唑、戊菌唑、腈菌唑、氟硅唑、丙环唑、吡唑醚菌酯、大蒜素、乙蒜素中的任一种。
在一种实施方式中，所述活性组分B包括香菇多糖。
在另一种实施方式中，所述活性组分B包括氨基寡糖素。
在一种优选的实施方式中，所述氨基寡糖素包括高分子量氨基寡糖素和低分子量氨基寡糖素。
在一种更优选的实施方式中，所述高分子量氨基寡糖素是指分子量在2000～3000Da的氨基寡糖素；所述低分子量氨基寡糖素是指分子量在800～1000Da的氨基寡糖素。
在一种更优选的实施方式中，所述高分子量氨基寡糖素是指分子量为3000Da的氨基寡糖素；所述低分子量氨基寡糖素是指分子量为1000Da的氨基寡糖素。
在一种更优选的实施方式中，所述高分子量氨基寡糖素和低分子量氨基寡糖素的重量比为(1.1～1.5)：1；更优选的，所述高分子量氨基寡糖素和低分子量氨基寡糖素的重量比为1.3：1。
本发明所述高分子量氨基寡糖素可通过市售购买得到，包括但不限于购买自湖北远成赛创科技有限公司；所述低分子量氨基寡糖素可通过市售购买得到，包括但不限于购买自深圳市中发源生物科技有限公司；所述香菇多糖可通过市售购买得到，包括但不限于购买自北京三浦百草绿色植物制剂有限公司。
申请人发现在体系中加入Harpin蛋白和活性组分B并控制活性组分A和活性组分B的重量比为100：1～1：100，特别是在活性组分A和活性组分B的重量比为50：1～1：50时，可以带来较好的抗病虫害效果，这可能是因为Harpin蛋白可作为激发子能够与植物叶片或根系上细胞表面受体接触，发出病原体攻击警报，通过构型变化激活胞内有关酶的活性和蛋白质磷酸化，形成第二信使，信号得到放大，最终通过对特殊基因的调节而激发植物产生防卫反应，可从内在激发作物对病害和多类型不良环境造成的危害可产生强大的抵抗修复能力，可较快促进再生、恢复，能大幅度减轻或消除因灾害对作物造成的危害；而活性组分B中的香菇多糖能够钝化病毒侵染活性，抑制病毒增殖，同时增强植株抗性，可以显著提高作物的品质和产量；氨基寡糖素能激发植物体内基因，产生具有抗病作用的几丁酶、葡聚糖酶及PR蛋白等，并具有细胞活化作用，有助于受害植株的恢复，同时可以促根壮苗，增强作物的抗逆性，促进植物生长发育。活性组分A和活性组分B共同作用于植物体，不仅能直接抑制植物病害，而且能激活植物的免疫活性，提高植物对病害的抗性。
申请人发现在体系中加入氨基寡糖素能够带来较好的抗病效果，但此时得到的抗病虫害组合物稀释后在室温放置较长时间时其中的有效成分易于挥发，而当在体系中同时加入高分子量和低分子量的氨基寡糖素时，可以明显减少有效成分的流失，延长组合物的储存时间，同时也提高组合物作用于植物表面的渗透性，使得有效成分释放较快，带来更为明显的抗病效果。这可能是因为高分子量氨基寡糖素会相对增大体系粘度，可减缓小分子的扩散与流失速度，使得组合物的储存时间得到延长，而低分子量氨基寡糖素能较快渗入植物内层，从而能够更好作用于植物细胞，诱导植物的抗病性，从而对多种真菌、细菌和病毒产生免疫和杀灭作用，对小麦花叶病、棉花黄萎病、水稻稻瘟病、番茄晚疫病等病害具有良好的防治作用。此外氨基寡糖素也具有较好的成膜性，可与Harpin蛋白相互作用，在其表面形成一层保护膜，能够延长作为激发子与植物细胞表面受体接触的时间，从而可较长时间提高作物对病毒、细菌、真菌和干旱、高温、冻灾等多类型不良环境危害的防御能力。
辅助剂
本发明所述抗病虫害组合物由活性成分和辅助剂制成农药上允许的剂型；所述农药上允许的剂型是指将活性成分与辅助剂一起均匀混合、研磨，制备成所需要的剂型。
在一种优选的实施方式中，所述辅助剂选自分散剂、润湿剂、抗冻剂、增稠剂、乳化剂、消泡剂、崩解剂、防腐剂、填料中的一种或几种组合。
在一种更优选的实施方式中，所述分散剂选自木质素磺酸钙、木质素磺酸钠、聚乙烯吡咯烷酮、亚甲基双萘磺酸钠、萘甲醛缩聚物磺酸盐、聚羧酸、聚氧乙烯聚氧丙烯醚嵌段共聚物、脂肪醇聚氧乙烯醚磷酸酯中的一种或几种组合；
所述润湿剂选自十二烷基硫酸钠、月桂醇硫酸钠、拉开粉、十二烷基苯磺酸钠、二异丁基磺酸钠、脂肪醇聚氧乙烯醚中的一种或几种组合；
所述抗冻剂选自乙二醇、1,2-丙二醇、丙三醇、聚乙二醇、山梨醇中的一种或几种组合；
所述增稠剂选自海藻酸钠、***树胶、硅酸铝镁、黄原胶、聚乙烯醇、有机膨润土、白炭黑中的一种或几种组合；
所述乳化剂选自十二烷基苯磺酸钙、苯乙烯基酚聚氧乙烯醚磷酸酯、苄基酚聚氧乙烯醚磷酸酯、失水山梨醇三油酸酯、失水山梨醇三硬脂酸酯、聚乙二醇单硬脂酸酯、甘油单硬脂酸酯、失水山梨醇单油酸酯、失水山梨醇单月桂酸酯、聚氧乙烯月桂醇醚、聚氧乙烯山梨醇酐单月桂酸酯、聚氧乙烯单棕榈酸酯、聚氧乙烯月桂醇醚、失水山梨醇聚氧乙烯醚、聚氧乙烯失水山梨醇醚单油酸酯、苯乙烯基酚聚氧乙烯醚、脂肪醇聚氧乙烯醚、脂肪胺聚氧乙烯醚、蓖麻油聚氧乙烯醚中的一种或几种组合；
所述消泡剂选自聚醚消泡剂、有机硅消泡剂、聚醚改性聚硅氧烷消泡剂中的一种或几种组合；
所述崩解剂选自羧甲基淀粉钠、羧丙基纤维素、交联羧甲基纤维素钠中的一种或几种组合；
所述防腐剂选自卡松、甲醛、苯甲酸钠、山梨酸、山梨酸钾中的一种或几种组合；
所述填料选自硫酸铵、硫酸钠、氯化钠、氯化钾、可溶性淀粉、葡萄糖、尿素中的一种或几种组合。
在一种优选的实施方式中，所述剂型为悬浮剂、油悬浮剂、微囊悬浮剂、悬乳剂、水乳剂、微乳剂、可湿性粉剂、水分散粒剂、水剂、可溶性粉剂、可溶性片剂、可溶性粒剂、可溶液剂、微粒剂、粉剂、可湿性颗粒剂、种衣剂中的任一种。
对于各种剂型的组合物可以采用本领域常用的方法进行制备。所述组合物可以以成品形式提供，即成品组合物中各成分已混合均匀，或者，所述组合物也可以以单独制剂的形式提供，即在临使用前将各组分混合均匀即可。
上述各剂型中活性成分和其它成分含量无特殊要求，可以采用本领域常规的配比。
在一种更优选的实施方式中，所述剂型为水剂、可溶性粉剂、可溶性片剂、可溶性粒剂、可溶液剂中的任一种。
在一种更优选的实施方式中，所述剂型为水剂或可溶性粉剂。
在一种更优选的实施方式中，所述剂型为可溶性粉剂；以100重量份组合物为基准，所述可溶性粉剂含有0.5～50重量份活性成分(活性组分A和活性组分B)、3～12重量份分散剂、1～8重量份润湿剂、填料补足余量。
在一种更优选的实施方式中，以100重量份组合物为基准，所述可溶性粉剂含有10重量份活性成分(活性组分A和活性组分B)、7重量份分散剂、5重量份润湿剂、填料补足余量。
本发明将活性成分A、活性组分B、分散剂、润湿剂、填料一起在混合缸中混合均匀，经气流粉碎机粉碎后再混合均匀，制得所述可溶性粉剂。
在一种更优选的实施方式中，所述分散剂包括聚氧乙烯聚氧丙烯嵌段共聚物和聚羧酸；所述润湿剂为十二烷基硫酸钠；所述填料为葡萄糖。
在一种更优选的实施方式中，所述聚氧乙烯聚氧丙烯嵌段共聚物的平均分子量为2800～3000。
在一种更优选的实施方式中，所述聚氧乙烯聚氧丙烯嵌段共聚物和聚羧酸的质量比为1：(1.2～1.4)；更优选的，所述聚氧乙烯聚氧丙烯嵌段共聚物和聚羧酸的质量比为1：1.3。
本发明所述聚氧乙烯聚氧丙烯嵌段共聚物购买自南通展亿化工有限公司，型号为L64；所述聚羧酸购买自日本竹本油脂株式会社，牌号为YUS-WG5。
申请人发现当氨基寡糖素加入较多，特别是高分子量氨基寡糖素加入较多时，植物抗病效果减弱，当控制高分子量氨基寡糖素和低分子量氨基寡糖素的重量比为(1.1～1.5)：1时，可以较为有效地提高植物抗病效果，这可能是因为高分子量氨基寡糖素过多时，容易使得稀释后的体系粘度较大，均一性下降，作用于植物体时使得有效成分释放较慢，无法较好激发植物去产生防卫反应。申请人发现，加入的聚氧乙烯聚氧丙烯嵌段共聚物和聚羧酸可以提高体系的分散效果，同时也使得有效成分的稳定性和抗病效果得到了提升，这可能是因为聚羧酸可以和富含氨基和羟基的氨基寡糖素之间形成较强作用力，提高分散效果；另外，聚羧酸带有一定的酸性，与氨基寡糖素的碱性发生中和，减少了有效分子在碱性下的水解，使得抗病效果得到提升。
申请人意外发现，当选用平均分子量为2800～3000的聚氧乙烯聚氧丙烯嵌段共聚物并控制聚氧乙烯聚氧丙烯嵌段共聚物和聚羧酸的质量比为1：(1.2～1.4)会使得稀释后产生的絮凝现象得到改善，这可能是因为由氨基酸以“脱水缩合”的方式组成的多肽链经过盘曲折叠形成的具有一定空间结构的蛋白物质，稳定性较高，在水中容易聚结在一起，而聚羧酸的强极性可以和蛋白形成较强作用力，平均分子量为2800～3000聚氧乙烯聚氧丙烯嵌段共聚物也可以提供更好的空间位阻效应，两者相互协同改善了蛋白加入带来的絮凝现象。
本发明所述抗病虫害组合物除上述必要成分以外，在不损害本发明效果的范围内，可以适当地配合蛋白质保护剂和稳定剂。
作为这样的成分，可以列举多羟基化合物、糖、氨基酸等，但不仅限于这些示例。
作为多羟基化合物的实例，列举有甘油、甘露醇、山梨醇、肌醇、硫醇、聚乙二醇等；作为糖的实例，列举有蔗糖、乳糖、纤维二糖、甘露糖、麦芽糖、肌糖、棉白糖、菊糖、右旋糖酐、麦芽糖糊精、麦芽多糖、八硫酸蔗糖、肝素、2-羟丙基-β环糊精等；作为氨基酸的实例，列举有脯氨酸、L-色氨酸、谷氨酸钠、丙氨酸、甘氨酸、赖氨酸盐酸盐、肌氨酸、L-酪氨酸、苯丙氨酸、精氨酸等。
本发明的第二方面提供一种含超敏蛋白的抗病虫害组合物应用于防治瓜果、蔬菜、烟草、油菜、水稻、玉米的病虫害。
本发明对于防止病虫害的类型没有特别的限制，例如，所述真菌引起的作物病害可以包括霜霉病、晚疫病、黑胫病、绵疫病等；所述病毒引起的作物病害可以包括条纹叶枯病、黑条矮缩病、病毒病等。
本发明所述抗病虫害组合物可以按普通方法兑水施用，兑水的量可以自行根据需要调控，可用于喷雾茎叶处理，也可土壤处理，比如固体根部撒施或液体灌根，还能拌种、浸种或种子包衣使用。其中，上述抗病虫害组合物在每亩地上的用量没有特别限制，具体可以根据活性成分的亩用量及制剂的活性成分含量调节。
实施例
为了更好的理解上述技术方案，下面将结合具体的实施方式对上述技术方案进行详细的说明。有必要在此指出的是，以下实施例只用于对本发明作进一步说明，不能理解为对本发明保护范围的限制，该领域的专业技术人员根据上述本发明的内容做出的一些非本质的改进和调整，仍属于本发明的保护范围。另外，如果没有其它说明，所用原料都是市售的。
实施例1
本发明的实施例1提供一种含超敏蛋白的抗病虫害组合物，所述抗病虫害组合物包括活性组分A和活性组分B；其中，活性组分A包括Harpin蛋白，活性组分B包括氨基寡糖素，活性组分A和活性组分B的重量比为3：7；所述氨基寡糖素包括高分子量氨基寡糖素和低分子量氨基寡糖素。
所述高分子量氨基寡糖素是指分子量为3000Da的氨基寡糖素；所述低分子量氨基寡糖素是指分子量为1000Da的氨基寡糖素。
所述高分子量氨基寡糖素和低分子量氨基寡糖素的重量比为1.3：1。
所述高分子量氨基寡糖素购买自湖北远成赛创科技有限公司；所述低分子量氨基寡糖素购买自深圳市中发源生物科技有限公司。
所述抗病虫害组合物由活性成分和辅助剂制成农药上允许的剂型。
所述剂型为可溶性粉剂；以100重量份组合物为基准，所述可溶性粉剂含有10重量份活性成分(活性组分A和活性组分B)、7重量份分散剂、5重量份润湿剂、填料补足余量。
将活性成分A、活性组分B、分散剂、润湿剂、填料一起在混合缸中混合均匀，经气流粉碎机粉碎后再混合均匀，制得所述可溶性粉剂。
所述分散剂包括聚氧乙烯聚氧丙烯嵌段共聚物和聚羧酸；所述润湿剂为十二烷基硫酸钠；所述填料为葡萄糖。
所述聚氧乙烯聚氧丙烯嵌段共聚物的平均分子量为2800～3000。
所述聚氧乙烯聚氧丙烯嵌段共聚物和聚羧酸的质量比为1：1.3。
所述Harpin蛋白购买自湖南农大哥科技开发有限公司；所述聚氧乙烯聚氧丙烯嵌段共聚物购买自南通展亿化工有限公司，型号为L64；所述聚羧酸购买自日本竹本油脂株式会社，牌号为YUS-WG5。
实施例2
本发明的实施例2提供一种含超敏蛋白的抗病虫害组合物，其具体实施方式同实施例1，不同之处在于，无高分子量氨基寡糖素。
实施例3
本发明的实施例3提供一种含超敏蛋白的抗病虫害组合物，其具体实施方式同实施例1，不同之处在于，高分子量氨基寡糖素和低分子量氨基寡糖素的重量比替换为3：1。
实施例4
本发明的实施例4提供一种含超敏蛋白的抗病虫害组合物，其具体实施方式同实施例1，不同之处在于，无聚羧酸。
实施例5
本发明的实施例5提供一种含超敏蛋白的抗病虫害组合物，其具体实施方式同实施例1，不同之处在于，聚氧乙烯聚氧丙烯嵌段共聚物的平均分子量为1900，购买自南通展亿化工有限公司，型号为L35。
实施例6
本发明的实施例6提供一种含超敏蛋白的抗病虫害组合物，其具体实施方式同实施例1，不同之处在于，聚氧乙烯聚氧丙烯嵌段共聚物的平均分子量为2000，购买自南通展亿化工有限公司，型号为P65。
实施例7
本发明的实施例7提供一种含超敏蛋白的抗病虫害组合物，其具体实施方式同实施例1，不同之处在于，无聚氧乙烯聚氧丙烯嵌段共聚物。
性能测试
1.储存持久性测试
将实施例1～7制备得到的组合物配制成500倍的稀释液在室温下条件无尘敞口下放置一周后，计算组合物质量损失，记为w，计算公式如下：
其中，m0为原始组合物的质量，m1为组合物放置一周的质量。
2.体系稳定性测试
将实施例1～7制备得到的组合物配制成500倍的稀释液，观察稀释时是否有分层、絮凝现象，每个实施例分别设置100个平行样品，记录分层、絮凝的概率即分层、絮凝的数占总测试组合物的数量的百分比。
表1
3.油菜田间药效试验
试验地点：陕西省汉中市汉台武乡镇王家湾村
试验田基本情况：面积1.2亩，土质二坭(灰色冲积土)，肥力中等，地势平坦，排灌方便，四周远离荫蔽。前作糯玉米(品种：甜玉糯3号，亩施纯N10.0公斤，P2O54.0公斤，K206.0公斤)。
试验对象及设置：长江早油3号，随机区组排列，重复3次，小区长6.13米，宽4.60米，面积28.198平方米，折小区面积0.0423亩，区间走道70.0cm，重复间走道60.0cm，四周设置保护行3.0米，东西行向。9月28日播种，播种方式采用免耕挖窝点播，每小区挖窝11行，每行16窝，每小区共计176窝；播量150克/亩。
试验方法：将实施例1制备得到的含超敏蛋白的抗病虫害组合物配制成500倍的稀释液为试验组，设置有清水、“绿宝”农药对照组，具体处理过程为：
CK(喷等量清水)：喷雾至喷湿所有叶片。“绿宝”农药处理：播种后25天2000倍稀释液灌根，每窝150毫升；间隔7天第二次灌根，用量、方法同第一次。本发明组合物处理：第一次喷施：播种出苗后真叶2-3片叶，喷雾至喷湿所有叶片；第二次喷施：间隔20-25天，喷雾至喷湿所有叶片；第三次喷施：角果膨大期，喷雾至喷湿所有角果。其他田间管理措施相同。
对于不同处理带来的病虫害防治效果以及产量统计如表2和表3。
表2
表3
前述的实例仅是说明性的，用于解释本发明所述方法的一些特征。所附的权利要求旨在要求可以设想的尽可能广的范围，且本文所呈现的实施例仅是根据所有可能的实施例的组合的选择的实施方式的说明。因此，申请人的用意是所附的权利要求不被说明本发明的特征的示例的选择限制。在权利要求中所用的一些数值范围也包括了在其之内的子范围，这些范围中的变化也应在可能的情况下解释为被所附的权利要求覆盖。