阅读说明：本技术 一种利用癞葡萄叶/苦瓜叶制备的β-环糊精组合物及其制备方法 (β -cyclodextrin composition prepared from fructus Momordicae Charantiae leaf/folium Momordicae Charantiae, and its preparation method ) 是由 任勇 陈洋 李文玎 郁桦 王荣昌 饶安平 于 2019-12-11 设计创作，主要内容包括：本发明公开了一种利用癞葡萄叶/苦瓜叶制备的β-环糊精组合物及其制备方法,所述组合物是由癞葡萄叶粗粉和/或苦瓜叶粗粉与β-环糊精混合粉碎后再进行包合所制得,其中癞葡萄叶粗粉和/或苦瓜叶粗粉与β-环糊精的质量比为1:(0.2～3.0)。相对于现有技术,本发明提供了一种新型的癞葡萄叶、苦瓜叶的相关产品及加工技术,有效利用了现有植物资源,扩大了癞葡萄或苦瓜保健食品的原料品种,所得组合物产品的溶解性强,癞葡萄叶和苦瓜叶的多种成分与β-环糊精存在明显包合作用,对改进粉体性能性质影响显著,并且产品稳定性好。(The invention discloses an β -cyclodextrin composition prepared from pellago grape leaves/bitter gourd leaves and a preparation method thereof, wherein the composition is prepared by mixing and crushing pellago grape leaf coarse powder and/or bitter gourd leaf coarse powder and β -cyclodextrin and then performing inclusion, wherein the mass ratio of the pellago grape leaf coarse powder and/or bitter gourd leaf coarse powder to β -cyclodextrin is 1 (0.2-3.0). compared with the prior art, the invention provides a novel relative product of pellago grape leaves and bitter gourd leaves and a processing technology, effectively utilizes the existing plant resources, enlarges the raw material varieties of pellago grape or bitter gourd health-care food, the obtained composition product has strong solubility, and the various components of the pellago grape leaves and bitter gourd leaves and β -cyclodextrin have obvious inclusion effect, have obvious influence on the performance and properties of improved powder, and have good product stability.)

一种利用癞葡萄叶/苦瓜叶制备的β-环糊精组合物及其制备 方法

技术领域

本发明涉及一种利用癞葡萄叶/苦瓜叶制备的β-环糊精组合物及其制备方法，属于β-环糊精组合物技术领域。

背景技术

癞葡萄和苦瓜均为葫芦科苦瓜属植物，含有多糖、蛋白多肽、黄酮、皂苷等活性成分，具有降血糖、降血脂，抗肿瘤等生物活性，两者皆可食用和药用。癞葡萄和苦瓜果实及苦瓜叶已经有食品药品的研究报道，其中苦瓜叶的产品近年开发比较多，而癞葡萄叶产品的报道少见。

已经报道的苦瓜叶用法有煎煮、提取及直接食用粉末等多种方式，如传统的煎汤(去渣服用)治疗小儿夏季热(医学理论与实践，1989.2.4：38)、鲜苦瓜叶汁兑等量石灰水防治作物幼苗根部的“地老虎”(乡镇论坛，1994-08-15：30)、苦瓜叶的有机溶剂提取物对多种危害作物的幼/成虫的生长发育有明显抑制作用(现代农业科技，2012，22：107-114)；苦瓜叶粉与其他食品配伍(CN103329957A等)用于制作快餐面、营养米粉、面点等食品，这些直接食用苦瓜叶粉的产品中，对粉体的研究少，常常采用粗粉使用以简化制备工艺，因此，其苦瓜叶的使用效率难以得到很好的发挥，进而将影响产品的保健效果。而癞葡萄叶的食用技术还没见有报道，目前也未见能够直接食用癞葡萄叶的产品上市。

发明内容

发明目的：为了解决上述技术问题，本发明提供了一种利用癞葡萄叶/苦瓜叶制备的β-环糊精组合物及其制备方法。

技术方案：为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种利用癞葡萄叶/苦瓜叶制备的β-环糊精组合物，所述组合物是由癞葡萄叶粗粉和/或苦瓜叶粗粉与β-环糊精混合粉碎后再进行包合所制得，其中癞葡萄叶粗粉和/或苦瓜叶粗粉与β-环糊精的质量比为1:(0.2～3.0)。

优选，所述癞葡萄叶粗粉和/或苦瓜叶粗粉与β-环糊精的质量比为1:(0.3～2.00)，最佳质量比1:1.5。

优选，所述组合物是由癞葡萄叶粗粉和苦瓜叶粗粉与β-环糊精混合粉碎后再进行包合所制得，其中癞葡萄叶与苦瓜叶的质量比为1:(0.5～2)。

优选，所述癞葡萄叶粗粉是由新鲜癞葡萄叶干燥后粉碎所得，所述苦瓜叶粗粉是由新鲜苦瓜叶干燥后粉碎所得。

所述的利用癞葡萄叶/苦瓜叶制备的β-环糊精组合物的制备方法，包括将癞葡萄叶粗粉和/或苦瓜叶粗粉与β-环糊精混合，粉碎后得细粉，然后与纯水混合，拌和均匀后减压烘干，即得所述β-环糊精组合物。

优选，所述细粉与纯水的质量比为1:(1.5-2.5)。

优选，所述细粉的粒度为60-800目，所述β-环糊精组合物可以制成60～800目的粉体。

本发明还提供了包含所述的利用癞葡萄叶/苦瓜叶制备的β-环糊精组合物的制剂。

优选，所述制剂包括利用所述β-环糊精组合物与药学上可接受的辅料所制成的制剂。该制剂可以按照通常的技术要求及操作步骤制备，以方便使用。

优选，所述制剂包括胶囊、片剂或颗粒剂等。所述的胶囊剂型包括：普通胶囊，硬胶囊、软胶囊、缓释胶囊等胶囊剂型；所述的片剂剂型包括：普通速溶片、分散片、缓释片、咀嚼片等片剂剂型；所述的颗粒剂剂型包括：普通颗粒、速溶颗粒等颗粒剂型。

本发明中所述癞葡萄叶粗粉和/或苦瓜叶粗粉，是指可以单独使用癞葡萄叶粗粉，或者单可以独使用苦瓜叶粗粉，或者也可以癞葡萄叶粗粉和苦瓜叶粗粉同时使用。

技术效果：相对于现有技术，本发明具有以下优势：

1、提供了一种新型的癞葡萄叶、苦瓜叶的相关产品及加工技术；

2、有效利用了现有植物资源，扩大了癞葡萄或苦瓜保健食品的原料品种；

3、癞葡萄叶口服无毒性，开发癞葡萄叶产品安全性高；

4、组合物产品的溶解性强；

5、癞葡萄叶和苦瓜叶的多种成分与β-环糊精存在明显包合作用，对改进粉体性能性质影响显著；

6、产品稳定性好。

附图说明

图1：本发明所得样品不同比例环糊精对样品成分的增溶倍数。

图2：组合物(1：1.5)与混合物样品的固体粉末紫外-可见漫反射光谱(UV-VisDRS)图

具体实施方式

下面结合具体实例，进一步阐明本发明。

实施例1

苦瓜叶干燥后粉碎成约40目的粗粉；取粗粉1公斤，加入0.2公斤β-环糊精混合均匀后粉碎成800目粉体，与2.4公斤水混合，搅拌均匀，减压烘干，即制得苦瓜叶β-环糊精粉状组合物1.2公斤(苦瓜叶:β-环糊精＝1:0.2)。

实施例2

苦瓜叶干燥后粉碎成约40目的粗粉；取粗粉1.0公斤，加入1.0公斤β-环糊精混合均匀后粉碎成100目粉体，然后粉体与4.0公斤纯水混合，搅拌均匀，减压烘干，即制得苦瓜叶β-环糊精粉2.0公斤(苦瓜叶:β-环糊精＝1:1)。

实施例3

干燥的癞葡萄叶粉碎成约40目的粗粉；取1公斤粗粉，加入1.5公斤干燥的β-环糊精混合均匀后粉碎成100目粉体，然后粉体与5.0公斤纯水混合，搅拌均匀，减压烘干，即制得癞葡萄叶β-环糊精粉2.5公斤(癞葡萄叶:β-环糊精＝1:1.5)；将其2.5公斤癞葡萄叶β-环糊精粉与1.7公斤75％乙醇混合，拌和均匀，摇摆机制粒，减压烘干，以每粒0.5克规格灌制胶囊，共制得含有β-环糊精的癞葡萄叶胶囊4867粒。

实施例4

干燥的癞葡萄叶及苦瓜叶分别粉碎成约40目的粗粉；各取1.0公斤粗粉，与3.0公斤干燥的β-环糊精混合均匀，然后粉碎成100目粉体，然后粉体与10.0公斤纯水混合，搅拌均匀，减压烘干，将所得的干燥粉体与3.5公斤75％乙醇混合，拌和均匀，摇摆机制粒，减压烘干，过筛制成0.2-0.4毫米的粒子，以1克/袋分装，即制得含有β-环糊精的癞葡萄叶苦瓜叶颗粒剂4865袋(癞葡萄叶:苦瓜叶:β-环糊精＝1:1:3)。

实施例5

与实施例3基本相同，以每粒0.5克规格灌制肠溶胶囊中，共制得含有β-环糊精的癞葡萄叶肠溶胶囊剂4822粒。

实施例6

干燥的癞葡萄叶及苦瓜叶分别粉碎成约40目的粗粉；各取1.0公斤粗粉，与3.0公斤干燥的β-环糊精混合均匀，然后粉碎成100目粉体，粉体与10.0公斤纯水混合，搅拌均匀，减压烘干，将所得的干燥粉与0.5公斤微晶纤维素混合均匀，再与4.0公斤75％乙醇混合，拌和均匀，摇摆机制粒，减压烘干，过筛制成0.2-0.4毫米的粒子，以2.5克/袋分装，即制得含有β-环糊精的癞葡萄叶苦瓜叶速溶颗粒剂2163袋(癞葡萄叶:苦瓜叶:β-环糊精＝1:1:3)。

实施例7

癞葡萄叶干燥后粉碎成粗粉(40目)；取1公斤粗粉，加入0.5公斤β-环糊精混合均匀后粉碎成100目粉体，然后混合3.0公斤纯水，拌和均匀，减压烘干，制得含有β-环糊精的癞葡萄叶粉1500克(癞葡萄叶:β-环糊精＝1:0.5)。将粉体与100克微晶纤维素混合均匀，用75％乙醇制软材，过20目筛，烘干，所得颗粒与80克立崩、70克微晶纤维素及16克硬脂酸镁混合均匀，压片，制得规格0.6克/片的分散片剂2791片，崩解时限测定结果：1.0分钟内崩解完全。

实施例8

癞葡萄叶干燥后粉碎成粗粉(40目)；取1公斤粗粉，加入0.2公斤β-环糊精混合均匀后粉碎成60目粉体，然后粉体与2.4公斤纯水混合，拌和均匀，减压烘干，制得含有β-环糊精的癞葡萄叶粉1.2公斤(癞葡萄叶:β-环糊精＝1:0.2)。将粉体与60克微晶纤维素及60克羧甲基纤维素钠混合均匀，用75％乙醇制软材，过20目筛，烘干，所得细颗粒与15克硬脂酸镁混合均匀，压片，制得规格0.6克/片的普通片剂2143片，溶出测定结果：40分钟溶出率达到95％以上。

实施例9

与实施例8基本相同，加入0.3公斤β-环糊精制得含有β-环糊精的癞葡萄叶粉(癞葡萄叶:β-环糊精＝1:0.3)，再制成规格0.6克/片的普通片剂，溶出测定结果：40分钟溶出率90％以上。

实施例10

与实施例6基本相同，分别取癞葡萄叶粗粉1.5公斤，苦瓜叶粉0.5公斤，与3.0公斤干燥的β-环糊精制备组合物，再制得速溶颗粒剂(癞葡萄叶:苦瓜叶:β-环糊精＝1.5:0.5:3)。

实施例11

与实施例6基本相同，分别取癞葡萄叶粗粉0.5公斤，苦瓜叶粉1.5公斤，与3.0公斤干燥的β-环糊精制备组合物，再制得速溶颗粒剂(癞葡萄叶:苦瓜叶:β-环糊精＝05:1.5:3)。

实施例12

癞葡萄叶干燥后粉碎成粗粉(40目)；取1公斤粗粉，加入3.0公斤β-环糊精混合均匀后粉碎成100目粉体，然后粉体与8.0公斤纯水混合，拌和均匀，减压烘干，制得含有β-环糊精的癞葡萄叶粉4公斤(癞葡萄叶:β-环糊精＝1:3)。将粉体用75％乙醇制软材，过20目筛，烘干，所得细颗粒与200克硬脂酸镁混合均匀，压片，制得规格0.6克/片的普通片剂6602片，溶出测定结果：40分钟溶出率达到99％。

实施例13

与实施例12基本相同，以苦瓜叶代替癞葡萄叶，制得规格0.6克/片的普通片剂6579片，溶出测定结果：40分钟溶出率达到98％以上。

实施例14

癞葡萄叶干燥后粉碎成粗粉(40目)；取1公斤粗粉，加入2.0公斤β-环糊精混合均匀后粉碎成800目粉体，然后粉体与6.0公斤纯水混合，拌和均匀，减压烘干，制得含有β-环糊精的癞葡萄叶粉3公斤(癞葡萄叶:β-环糊精＝1:2)。将粉体与500克木糖混合均匀后，用75％乙醇制软材，过20目筛，烘干，所得细颗粒150克硬脂酸镁混合均匀，压片，制得规格0.6克/片的咀嚼片剂4962片。

实施例15

癞葡萄叶干燥后粉碎成粗粉(40目)；取1.5公斤粗粉，加入1.0公斤β-环糊精混合均匀后粉碎成800目粉体，然后粉体与5.0公斤纯水混合，拌和均匀，减压烘干，制得含有β-环糊精的癞葡萄叶粉2.5公斤(癞葡萄叶:β-环糊精＝1:2)。将粉体与与400克乙基纤维素、50克羧甲基纤维素钠混合均匀，75％乙醇制成软材，过20目筛，烘干，所得细颗粒与60克微晶纤维素及30克硬脂酸镁混合均匀，压片，制得规格0.65克/片的癞葡萄缓释片剂3004片。溶出度测定结果：30分钟溶出20％；90分钟溶出35％；150分钟溶出54％；240分钟溶出66％；360分钟溶出82％，基本符合缓释片剂要求。

实施例16本发明优势验证试验

1、有效利用了现有植物资源，扩大了癞葡萄或苦瓜保健食品的原料品种，癞葡萄叶与(同产地同季节收获)果实及苦瓜植物中总皂苷含量的对比见下表；

癞葡萄叶与相关原料总皂苷含量对比

对比发现，四种原料中总皂苷含量，叶原料皆高于果实，说明癞葡萄叶、苦瓜叶具有比果实更好的保健作用，测定结果表明癞葡萄叶总皂苷含量最高，其含量是通常食用苦瓜果实的6.6倍，可见癞葡萄叶具有比苦瓜果、苦瓜叶及癞葡萄果更高的应用开发价值。

2、癞葡萄叶口服无毒性，开发癞葡萄叶产品安全性高；

样品：癞葡萄叶60目粉(批号：20190828)

方法：采用GB 15193.3-2014食品安全国家标准急性经口毒性试验

结果：20只ICR小鼠mg/kg·bw灌胃给予癞葡萄叶粉，14天试验观察期间，动物饮食和活动正常，生长良好，未见中毒表现及异常体征，无动物死亡，结果见下表：

癞葡萄叶粉的小鼠急性经口毒性试验结果

经口给予ICR小鼠10000mg/kg·bw癞葡萄叶粉后，未见中毒表现。动物体重增长无明显异常，观察期内无动物死亡。因此，癞葡萄叶粉雌雄性小鼠急性经口毒性试验LD₅₀大于10000mg/kg·bw。

依据GB 15193.3-2014急性毒性(LD₅₀)剂量分级表，癞葡萄叶粉实际无毒，服用癞葡萄叶粉很安全。

3、组合物产品的溶解性强：产品溶解度测定(与原料粉对比)

原料：癞葡萄叶100目粉(批号：20180702)

样品制备：将原料与不同比例β-环糊精混合，粉碎，加水、搅拌、烘干制得100目组合物粉体，备用。称取等药物量的各样品，加入药物量50倍水中，震荡3小时，滤取清液测定。

皂苷含量：以三七皂苷为对照(中国药品生物制品)，紫外分光光度法测定各样品溶液总皂苷浓度；蛋白多肽含量：考马斯亮蓝法测定；总黄酮含量：芦丁对照品，紫外分光光度法测定；

对比原料粉溶液，计算各成分浓度的增溶倍数得下表结果：

不同比例环糊精对样品成分的增溶倍数

结果显示，癞葡萄叶与β-环糊精共同粉碎制得的组合物，体系中β-环糊精对多成分具有明显增溶作用，且增溶强度与β-环糊精比例有关，但组合物中β-环糊精比例并不是越高越好；另外，各种成分的溶解度增加也不相同，如附图1所示，各比例的组合物成分溶解度皆高于等溶线，加有β-环糊精的组合物增溶作用十分明显。随着组合物中β-环糊精的增加，小分子的皂苷先随β-环糊精比例的增加而增大，再出现降低，大分子的蛋白则总体是β-环糊精比例增溶效果越好，而酚类分子对β-环糊精比例的变化更加敏感。由附图1所示的结果，不难得到组合物的优选比例，相似的苦瓜叶的试验也得到相同的增溶结果。成分溶解性的改善，是组合物设计选择的科学依据，更对提高产品的保健效果具有及其重要的意义。

4、癞葡萄叶和苦瓜叶的多种成分与β-环糊精存在明显包合作用，对改进粉体性能性质影响显著。

粉体-环糊精包合常数(Ka)的测定：

样品：100目癞葡萄叶粉及苦瓜叶粉

试剂：β-环糊精；纯水；

样品约20毫克与50毫升纯水混合，超声15分钟，滤取上清液约30毫升得A液；精确称取450毫克β-环糊精，用滤液溶解，并用25毫升容量瓶定容，得B液；

以水为空白，测定A液200～500nm吸光度得A₀；向A液中加入0.15毫升B液，测定体系200～500nm吸光度得A₁，再重复加入相同量B液测定，共测定8次，读取204nm处吸光度得A₀～A₈，计算得样品包合常数(Ka)如下表：

癞葡萄叶和苦瓜叶粉β-环糊精包合常数(Ka)

测定中，保持药物浓度不变，仅递次增加β-环糊精浓度，多波长扫描结果发现：体系的紫外吸收强度随β-环糊精浓度的增加而增大，说明β-环糊精与体系中多种成分存在明显包合作用；进一步将各浓度下体系204nm吸收强度用Benesi-Hildebrand公式关系作图，拟合得直线计算得Ka(见上表)。大小适度的Ka值结果表明，癞葡萄叶或苦瓜叶中各成分与β-环糊精有较牢固的结合，适度的包合强度对改进粉体溶解性质及产品稳定性具有明显效果，测定结果说明本发明制备的组合物具有坚实的技术基础。

5、产品稳定性好

本发明的含有癞葡萄叶β-环糊精组合物中总皂苷含量稳定性与相应混合物(物理混合)的对比测试。

按照2010版《中国药典》二部附录XIXC药物制剂稳定性试验指导原则，测定本发明的含有β-环糊精的癞葡萄叶粉的稳定性。

样品：癞葡萄叶β-环糊精1:1.5组合物(本发明实施例3制备)、同比例癞葡萄叶β-环糊精混合物；

皂苷含量：三七皂苷为对照(中国药品生物制品)，紫外分光光度法测定。

高温试验：样品放入开口玻璃瓶(未封闭)于40℃密闭遮光放置14天，于第7、14天取样，提取样品皂苷，显色，代入标准曲线计算总皂苷含量，与0天的结果进行对比计算相对含量。

光照试验：样品在光照强度4500lx±500lx条件下放置14天，于第7天和第14天取样，提取皂苷，显色，代入标准曲线计算总皂苷含量与0天结果进行对比计算相对含量。

样品总皂苷相对含量测定结果

测定显示，粉体在光热条件下，癞葡萄叶β-环糊精混合物中总皂苷的热、光稳定性不强，含量下降显著，而加入β-环糊精的癞葡萄叶β-环糊精2:3组合物则有明显的改善。进一步试验发现：采用组合物制备成为片剂后，稳定性进一步得到显著改善，制备的产品在同条件下其总皂苷相对含量可达到96％以上，可以满足制备制剂产品的要求。

6、组合物固体的包合作用测定：

样品：癞葡萄叶100目粉4克与β-环糊精6克混合均匀(得混合物样品)；癞葡萄叶粗粉20克与β-环糊精30克混合均匀然后将混合物料粉碎成300目粉体与60毫升纯水混合，拌和均匀，减压烘干，制得含有2：3组合物样品(癞葡萄叶:β-环糊精＝2:3)。

UV-vis DRS测定：分别称取适量混合物及组合物样品，检测条件：以BaSO₄参比；测定波长为250～2500nm；狭缝为1nm，扫描测定，取250-2500nm紫外-可见光近红外区对比，如附图2所示：

测定结果显示，250-1000nm及1331-2500测定区间，组合物样品吸收皆明显强于混合物，组合物固态粉末样品中环糊精与癞葡萄叶存在明显的包合作用，证明本发明方法制备的组合物不是混合物。