阅读说明：本技术 一种蛋氨酸锌含量高的富锌酵母的生产方法 (Production method of zinc-rich yeast with high zinc methionine content ) 是由 朱振华 于 2019-10-10 设计创作，主要内容包括：本发明公开了一种蛋氨酸锌含量高的富锌酵母的生产方法,通过将酿酒酵母菌种接种到含锌的葡萄糖培养基中培养筛选出锌的酵母菌种,然后采用含有小球藻抑菌肽粉和多种微量元素的培养基进行菌种培养,流加硫酸锌溶液,直至发酵结束,最终得到的富锌酵母,蛋氨酸锌的含量可以提升至75%以上,该方法生产的富锌酵母稳定性好、生物学效价较高。(The invention discloses a method for producing zinc-rich yeast with high zinc methionine content, which comprises the steps of inoculating a saccharomyces cerevisiae strain into a zinc-containing glucose culture medium to culture and screen out zinc yeast strains, then adopting a culture medium containing chlorella antibacterial peptide powder and a plurality of trace elements to culture the strains, and adding zinc sulfate solution in a flowing manner until fermentation is finished, wherein the zinc-rich yeast finally obtained has the zinc methionine content which can be increased to more than 75 percent.)

一种蛋氨酸锌含量高的富锌酵母的生产方法

技术领域

本发明涉及酵母技术领域，尤其涉及一种蛋氨酸锌含量高的富锌酵母的生产方法。

背景技术

锌是动物机体所必需的微量元素，被称为“生命元素”。人体缺锌时，可发生生长迟缓；少年期发育不良，味觉障碍和伤口愈合缓慢等；孕妇缺锌甚至可出现胎儿畸形。我国幅源辽阔，膳食的构成基本以谷为主，食物中锌的摄入不足或是膳食中纤维摄人太多影响锌的吸收导致缺锌，特别是儿童缺锌情况较为普遍。我国推荐成年人每日锌摄取量为10-15mg，根据中国预防医学科学院对北京等19个省市学龄儿童头发中含锌量的分析，大约有60％儿童低于正常值。从儿童生长发育不良、侏儒、痴呆等缺锌的病理状况看，缺锌情况相当严重。天然食物中的锌含量普遍较低，仅靠天然食物中的锌含量一般不够满足人体的正常需要的问题。

目前，国内大多采用高剂量氧化锌、硫酸锌等无机锌作为锌营养添加剂，但无机锌生物效价低、添加量大、易造成了严重的环境污染；而稳定性好、生物学效价较高的氨基酸络合锌盐(如蛋氨酸锌、葡萄糖酸锌等)由于其生产工艺复杂、价格较高限制其应用。而富锌酵母不仅可以满足动物机体对于锌的需要，而且酵母中有很丰富的营养成分，可以发挥协同作用。

中国发明专利CN107119038A公开了一种富锌酵母产品的生产方法，该方法可以生产出锌含量为每千克酵母1000-5000mg的富锌酵母，但是该富锌酵母中蛋氨酸锌含量不足30％，不利于动物吸收，故有必要研究一种蛋氨酸锌含量高的富锌酵母的生产方法。

发明内容

基于背景技术存在的技术问题，本发明提出了一种蛋氨酸锌含量高的富锌酵母的生产方法。

本发明的技术方案如下：

一种蛋氨酸锌含量高的富锌酵母的生产方法，包括以下步骤：

A、制备有机锌转化能力强的酵母菌种：酿酒酵母菌种接种到含锌的葡萄糖培养基甲中培养，筛选出抗锌能力强的菌种，作为诱变菌种；将有机锌转化能力强的酵母菌种接种到诱变培养基中进行诱变培养20-45h；将诱变后的菌株进行分离筛选，接种到含锌的葡萄糖培养基乙中培养，筛选出有机锌转化能力强的菌种，即为高转化富锌酵母菌种；

B、菌种培养：将培养基投入到种子罐中，灭菌，然后使用高转化富锌酵母菌种接种至种子罐中的培养基中进行培养；种子罐温度33±3℃，起始pH4.0-4.8，培养时间16±2小时；

C、扩大培养：将菌种转移至发酵罐中扩大培养；发酵罐温度30±2℃，pH5.2-5.8(以氢氧化钠调节pH)，当菌体湿重达到2.1-2.3g/10ml时，开始流加硫酸锌溶液，直至发酵结束，培养时间36±2小时；

D、灭活：灭活温度75-77℃，灭活时间25-35min；

E、喷雾干燥：进口温度205-230℃，出口温度85-95℃，过筛、混合后包装即可。

优选的，所述的步骤A中，所述的诱变培养基中含有诱变剂，所述的诱变培养基中的诱变剂为N-甲基-N-硝基-N-亚硝基胍。

优选的，所述的步骤B中，所述的培养基成分为碳源、氮源、无机盐、小球藻抑菌肽粉和少量的微量元素。

优选的，所述的氮源为含氨基氮的有机氮源，进一步优选的，所述的含氨基氮的有机氮源为植物蛋白或者氨基酸。

进一步优选的，所述的培养基成分，由以下重量份比例的成分组成：可发酵还原糖500份、含氨基氮的有机氮源50-70份、磷酸二氢铵6-10份、硫酸镁5-8份、小球藻抑菌肽粉1-3份和微量元素0.1-0.3份。

优选的，所述的微量元素包括：Ca²⁺、Fe²⁺、Mo²⁺和Mn²⁺。

进一步优选的，所述的开始流加硫酸锌溶液后每4-8小时补加一次有机氮源，在这个过程中用氨水控制pH值。

本发明的有益之处在于：本发明通过将酿酒酵母菌种接种到含锌的葡萄糖培养基中培养筛选出锌的酵母菌种，然后采用含有小球藻抑菌肽粉和多种微量元素的培养基进行菌种培养，流加硫酸锌溶液，直至发酵结束，最终得到的富锌酵母，蛋氨酸锌的含量可以提升至75％以上，该方法生产的富锌酵母稳定性好、生物学效价较高。

具体实施方式

实施例1：

一种蛋氨酸锌含量高的富锌酵母的生产方法，包括以下步骤：

A、制备有机锌转化能力强的酵母菌种：酿酒酵母菌种接种到含锌的葡萄糖培养基甲中培养，筛选出抗锌能力强的菌种，作为诱变菌种；将有机锌转化能力强的酵母菌种接种到诱变培养基中进行诱变培养35h；将诱变后的菌株进行分离筛选，接种到含锌的葡萄糖培养基乙中培养，筛选出有机锌转化能力强的菌种，即为高转化富锌酵母菌种；葡萄糖培养基乙的含锌量高于葡萄糖培养基甲的含锌量；

B、菌种培养：将培养基投入到种子罐中，灭菌，然后使用高转化富锌酵母菌种接种至种子罐中的培养基中进行培养；种子罐温度33±3℃，起始pH4.0-4.8，培养时间16±2小时；

C、扩大培养：将菌种转移至发酵罐中扩大培养；发酵罐温度30±2℃，pH5.2-5.8(以氢氧化钠调节pH)，当菌体湿重达到2.15g/10ml时，开始流加硫酸锌溶液，直至发酵结束，培养时间36±2小时；

D、灭活：灭活温度75-77℃，灭活时间30min；

E、喷雾干燥：进口温度225℃，出口温度90℃，过筛、混合后包装即可。

所述的步骤A中，所述的诱变培养基中含有诱变剂，所述的诱变培养基中的诱变剂为N-甲基-N-硝基-N-亚硝基胍。

所述的步骤B中，所述的培养基成分，由以下重量份比例的成分组成：可发酵还原糖500份、植物蛋白65份、磷酸二氢铵8份、硫酸镁6份、小球藻抑菌肽粉1.5份和微量元素0.2份。

所述的小球藻抑菌肽粉为小球藻抑菌肽浓缩液的冻干粉。

所述的微量元素包括：Ca²⁺、Fe²⁺、Mo²⁺和Mn²⁺。

所述的开始流加硫酸锌溶液后每6小时补加一次有机氮源，在这个过程中用氨水控制pH值。

实施例2：

一种蛋氨酸锌含量高的富锌酵母的生产方法，包括以下步骤：

A、制备有机锌转化能力强的酵母菌种：酿酒酵母菌种接种到含锌的葡萄糖培养基甲中培养，筛选出抗锌能力强的菌种，作为诱变菌种；将有机锌转化能力强的酵母菌种接种到诱变培养基中进行诱变培养45h；将诱变后的菌株进行分离筛选，接种到含锌的葡萄糖培养基乙中培养，筛选出有机锌转化能力强的菌种，即为高转化富锌酵母菌种；葡萄糖培养基乙的含锌量高于葡萄糖培养基甲的含锌量；

B、菌种培养：将培养基投入到种子罐中，灭菌，然后使用高转化富锌酵母菌种接种至种子罐中的培养基中进行培养；种子罐温度33±3℃，起始pH4.0-4.8，培养时间16±2小时；

C、扩大培养：将菌种转移至发酵罐中扩大培养；发酵罐温度30±2℃，pH5.2-5.8(以氢氧化钠调节pH)，当菌体湿重达到2.3g/10ml时，开始流加硫酸锌溶液，直至发酵结束，培养时间36±2小时；

D、灭活：灭活温度75-77℃，灭活时间25min；

E、喷雾干燥：进口温度230℃，出口温度85℃，过筛、混合后包装即可。

所述的步骤B中，所述的培养基成分，由以下重量份比例的成分组成：可发酵还原糖500份、植物蛋白70份、磷酸二氢铵6份、硫酸镁8份、小球藻抑菌肽粉1份和微量元素0.3份。

所述的小球藻抑菌肽粉为小球藻抑菌肽浓缩液的冻干粉。

所述的微量元素包括：Ca²⁺、Fe²⁺、Mo²⁺和Mn²⁺。

所述的开始流加硫酸锌溶液后每4小时补加一次有机氮源，在这个过程中用氨水控制pH值。

实施例3：

一种蛋氨酸锌含量高的富锌酵母的生产方法，包括以下步骤：

A、制备有机锌转化能力强的酵母菌种：酿酒酵母菌种接种到含锌的葡萄糖培养基甲中培养，筛选出抗锌能力强的菌种，作为诱变菌种；将有机锌转化能力强的酵母菌种接种到诱变培养基中进行诱变培养20h；将诱变后的菌株进行分离筛选，接种到含锌的葡萄糖培养基乙中培养，筛选出有机锌转化能力强的菌种，即为高转化富锌酵母菌种；葡萄糖培养基乙的含锌量高于葡萄糖培养基甲的含锌量；

B、菌种培养：将培养基投入到种子罐中，灭菌，然后使用高转化富锌酵母菌种接种至种子罐中的培养基中进行培养；种子罐温度33±3℃，起始pH4.0-4.8，培养时间16±2小时；

C、扩大培养：将菌种转移至发酵罐中扩大培养；发酵罐温度30±2℃，pH5.2-5.8(以氢氧化钠调节pH)，当菌体湿重达到2.1g/10ml时，开始流加硫酸锌溶液，直至发酵结束，培养时间36±2小时；

D、灭活：灭活温度75-77℃，灭活时间35min；

E、喷雾干燥：进口温度205℃，出口温度95℃，过筛、混合后包装即可。

所述的步骤A中，所述的诱变培养基中含有诱变剂，所述的诱变培养基中的诱变剂为N-甲基-N-硝基-N-亚硝基胍。

所述的步骤B中，所述的培养基成分，由以下重量份比例的成分组成：可发酵还原糖500份、氨基酸50份、磷酸二氢铵10份、硫酸镁5份、小球藻抑菌肽粉3份和微量元素0.1份。

所述的小球藻抑菌肽粉为小球藻抑菌肽浓缩液的冻干粉。

所述的微量元素包括：Ca²⁺、Fe²⁺、Mo²⁺和Mn²⁺。

所述的开始流加硫酸锌溶液后每8小时补加一次有机氮源，在这个过程中用氨水控制pH值。

对比例1

将实施例1中的小球藻抑菌肽粉去除，其余配比和制备方法不变。

对比例2

将实施例1中的小球藻抑菌肽粉替换为鹰嘴豆抑菌肽粉，其余配比和制备方法不变。

对比例3

将实施例1中微量元素中的Ca²⁺和Mo²⁺去除，其余配比和制备方法不变。

以下对实施例1-3和对比例1-3生产的富锌酵母进行检测，得到如下检测结果，具体结果见表1。

表1：实施例1-3和对比例1-3生产的富锌酵母的检测结果；

由以上测试数据可以知道，采用本发明的蛋氨酸锌含量高的富锌酵母的生产方法，得到的蛋氨酸锌含量占富锌酵母中总锌含量的75％以上，而无机锌的含量低于1.5％。

以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。