阅读说明：本技术 一类作用于mll融合蛋白的拟肽类小分子化合物 ([db:专利名称-en]) 是由 孙海鹰 杜蕾 姚爱红 于 2018-06-22 设计创作，主要内容包括：本发明涉及一类作用于MLL融合蛋白的拟肽类小分子化合物、它们的制备方法以及它们的医疗用途。特别是作为阻断MLL融合蛋白与甲基转移酶DOT1L间相互作用的小分子化合物在治疗癌症方面的医疗用途。<Image he="170" wi="700" file="DSA0000165884710000011.GIF" imgContent="drawing" imgFormat="GIF" orientation="portrait" inline="no"></Image>([db:摘要-en])

一类作用于MLL融合蛋白的拟肽类小分子化合物

技术领域

本发明涉及一类作用于MLL融合蛋白的拟肽类小分子化合物及它们的制备方法。本发明进一步涉及这类拟肽类化合物作为阻断MLL融合蛋白与甲基转移酶DOT1L间相互作用的小分子化合物在治疗癌症方面的医疗用途。

背景技术

带有MLL融合基因的人类急性白血病大约占成年白血病5-10％和婴儿白血病的70％(Nat.Rev.Cancer.，2007，7，823-833.)，另外，因拓扑异构酶II抑制剂治疗而诱发的白血病也经常带有MLL融合基因(Leukemia，2001，15，987-989.)。正常的MLL基因解码一种在胚胎发育和造血作用中有重要功能的蛋白MLL1。MLL1可以调控多种下游基因，如Hox、Meis-1等基因的正常表达(Differentiation，2003，71，461-476.)。Hox基因的正常表达对胚胎发育和血细胞分化有关键作用，但有些Hox基因，如HoxA9的持续表达则是带有MLL重排基因的白血病的重要特征，而且在白血病的产生及发展中起着重要作用(Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.，2005，102，8603-8608.)。染色体易位可以导致MLL基因与多种伙伴基因形成融合基因，目前已发现了超过70种由MLL融合基因表达的MLL融合蛋白，其中很多可以促进Hox基因的持续表达(Mol.Cell.，2010，38，853-863)。MLL融合蛋白中的很多都已被证实与急性淋巴性白血病(ALL)和急性骨髓性白血病(AML)有关，其中一些已被动物实验证明可直接诱发ALL和AML(Blood，2003，102，262-268.)。染色体的易位通常只发生在一条MLL等位基因上，因此MLL白血病细胞中会同时存在野生型的MLL1和MLL融合蛋白，而且最近的研究表明野生型的MLL1的存在是MLL融合蛋白促进下游基因持续表达的功能所必须的(Mol.Cell.，2010，38，853-863)。尽管MLL融合蛋白已发现的有超过70种，但其中最主要的是MLL-AF9、MLL-ENL、MLL-AF4、MLL-AF10和MLL-ELL等五种细胞核转录因子蛋白，大约80％左右的MLL白血病与这五种融合蛋白有关(Nat.Rev.Cancer，2007，7，823-33.)。

近年来的生物学研究表明MLL-AF9和MLL-ENL促进Hox和Meis-1等基因的表达主要机制之一是招募一种甲基转移酶DOT1L并促使受MLL1调控的基因位点处的H3K79异常的高度甲基化，而H3K79的甲基化是转录活跃的标志之一(Cancer Cell，2008，14，355-368.)。敲除DOT1L均会降低位于HoxA9基因位点的H3K79的甲基化，并抑制带有MLL融合基因的白血病细胞的生长(Epigenomics，2011，3，667-670.)。阻断MLL融合蛋白与DOT1L的相互作用，可以在不改变细胞中整体的H3K79甲基化水平的情况下抑制血细胞的癌变(Blood，2011，117，4759-4768.)，因此，阻断MLL融合蛋白，如MLL-AF9和MLL-ENL对DOT1L的招募是一种新的治疗带有MLL重排基因的白血病的潜在方法，抑制MLL融合蛋白与DOT1L相互作用的小分子化合物不仅可以作为研究MLL融合蛋白作用机制的工具，并且有可能从中发展出新型的治疗MLL白血病的药物。

最近，Kuntimaddi等人通过¹⁵N-¹H HSQC发现AF9中的一个结构域(氨基酸序列499-568)可以跟DOT1L中的三个不同位置的多肽片段结合，其中片段1与AF9的结合较弱，而片段2和3与AF9的结合较强(Cell Reports，2015，11，808-820.)。段2和3中与AF9结合最重要的7肽片段几乎完全相同，在片段1中同样有一个多肽片段具有与这个7肽类似的氨基酸组成，因此这三个片段很可能是以类似的构像与AF9中的同一个区域结合。另外，在一项独立的研究中，密西根大学Nikolovska-Coleska的研究组同样发现含DOT1L中的氨基酸残基865-874的十肽(位于片段2中)可以与AF9和ENL结合，并能有效阻断DOT1L与MLL-AF9/ENL的结合，因此DOT1L中与AF9结合的多肽片段可以作为设计MLL融合蛋白抑制剂的先导化合物(J.Biol.Chem.，2013，288，30585-30596.)。

本发明中我们以从DOT1L的片段2和3中截取的能够与MLL融合蛋白结合并阻断MLL融合蛋白与DOT1L相互作用的7肽为模板，设计并合成了一类将用于治疗MLL白血病的阻断MLL融合蛋白与甲基转移酶DOT1L相互作用的拟肽类小分子化合物。

发明内容

本发明中的化合物优选式I的结构：

其中X和Y分别为1-3个取代或非取代的亚甲基，其中一个或多个亚甲基可以被氧、硫或NR所替换，NR中N为氮原子，R为氢原子、非取代或取代的烃基、非取代或取代的环状烃基、取代或非取代的单环或多环芳基、芳香性的杂环或各种取代的芳香性的杂环，其中一个或多个亚甲基可以被羰基、酰胺基、硫代酰胺基、磺酰胺基、氧、硫所替换；R₁-R₉为1-20碳的非取代或取代的烃基、非取代或取代的环状烃基、取代或非取代的单环或多环芳基、芳香性的杂环或各种取代的芳香性的杂环，其中一个或多个亚甲基可以被羰基、酰胺基、硫代酰胺基、磺酰胺基、氧、硫或NR所替换，NR中N为氮原子，R为氢原子、非取代或取代的烃基、非取代或取代的环状烃基、取代或非取代的单环或多环芳基、芳香性的杂环或各种取代的芳香性的杂环，其中一个或多个亚甲基可以被羰基、酰胺基、硫代酰胺基、磺酰胺基、氧、硫所替换；R₃和R₄可以相互连接成为环状结构；R₆和R₇可以相互连接为环状结构；A为连接结构，可以选自非取代或取代的烃基、非取代或取代的环状烃基、取代或非取代的单环或多环芳基、芳香性的杂环或各种取代的芳香性的杂环，其中一个或多个亚甲基可以被羰基、酰胺基、硫代酰胺基、磺酰胺基、氧、硫或NR所替换，NR中N为氮原子，R为氢原子、非取代或取代的烷基、非取代或取代的环烷基、取代或非取代的单环或多环芳基、芳香性的杂环或各种取代的芳香性的杂环，其中一个或多个亚甲基可以被羰基、酰胺基、硫代酰胺基、磺酰胺基、氧、硫所替换。以上描述中的取代基选自卤素原子、硝基、亚硝基、腈基、非取代或取代的烃基、非取代或取代的环状烃基、取代或非取代的单环或多环芳基、芳香性的杂环或各种取代的芳香性的杂环，其中一个或多个亚甲基可以被羰基、酰胺基、硫代酰胺基、磺酰胺基、氧、硫或NR₁R₂所替换，NR₁R₂中N为氮原子，R₁和R₂为氢原子、非取代或取代的烃基、非取代或取代的环状烃基、取代或非取代的单环或多环芳基、芳香性的杂环或各种取代的芳香性的杂环，其中一个或多个亚甲基可以被羰基、酰胺基、硫代酰胺基、磺酰胺基、氧、硫所替换。

本发明中的化合物进一步优选式II的结构：

其中Ar为取代或非取代的单环或多环芳基或芳杂环；X和Y分别为1-3个取代或非取代的亚甲基，其中一个或多个亚甲基可以被氧、硫或NR所替换，NR中N为氮原子，R为氢原子、非取代或取代的烃基、非取代或取代的环状烃基、取代或非取代的单环或多环芳基、芳香性的杂环或各种取代的芳香性的杂环，其中一个或多个亚甲基可以被羰基、酰胺基、硫代酰胺基、磺酰胺基、氧、硫所替换；R_1-R₇为1-20碳的非取代或取代的烃基、非取代或取代的环状烃基、取代或非取代的单环或多环芳基、芳香性的杂环或各种取代的芳香性的杂环，其中一个或多个亚甲基可以被羰基、酰胺基、硫代酰胺基、磺酰胺基、氧、硫或NR所替换，NR中N为氮原子，R为氢原子、非取代或取代的烃基、非取代或取代的环状烃基、取代或非取代的单环或多环芳基、芳香性的杂环或各种取代的芳香性的杂环，其中一个或多个亚甲基可以被羰基、酰胺基、硫代酰胺基、磺酰胺基、氧、硫所替换；R₃和R₄可以相互连接成为环状结构；R₆和R₇可以相互连接为环状结构；以上描述中的取代基选自卤素原子、硝基、亚硝基、腈基、非取代或取代的烃基、非取代或取代的环状烃基、取代或非取代的单环或多环芳基、芳香性的杂环或各种取代的芳香性的杂环，其中一个或多个亚甲基可以被羰基、酰胺基、硫代酰胺基、磺酰胺基、氧、硫或NR₁R₂所替换，NR₁R₂中N为氮原子，R₁和R₂为氢原子、非取代或取代的烃基、非取代或取代的环状烃基、取代或非取代的单环或多环芳基、芳香性的杂环或各种取代的芳香性的杂环，其中一个或多个亚甲基可以被羰基、酰胺基、硫代酰胺基、磺酰胺基、氧、硫所替换。

本发明提供了如式I所示拟肽类化合物的制备方法，如下反应式：

具体包括以下步骤：

(1)氨基酸苄酯1与Boc保护的氨基酸缩合制得化合物2；

(2)化合物2酸性条件下脱Boc保护后与酸缩合，然后氢化脱苄酯制得化合物3；

(3)化合物4与Boc保护氨基酸缩合，然后酸性条件下脱Boc保护制得化合物5；

(4)化合物5与Boc保护氨基酸缩合，然后酸性条件下脱Boc保护制得化合物6；

(5)化合物6与化合物3缩合制得化合物I。

本发明的优选式II代表的化合物选自包含下列各化合物的结构类型：

在研究手性胺合成的过程中，本发明按照下述路线制备式(11)的化合物：

具体包括以下步骤：

(1)化合物7与(R)-叔丁基亚磺酰胺8缩合制得亚磺酰亚胺9；

(2)化合物9与格氏试剂反应制得化合物10；

(3)化合物10在盐酸甲醇条件下脱除亚磺酰基制得手性胺的盐酸盐11。

在研究苯并咪唑衍生物的合成过程中，本发明按照下述路线制备式(14)的化合物：

具体包括以下步骤：

(1)取代邻苯二胺12与Boc保护的氨基酸缩合制得化合物13；

(2)化合物13在乙酸中70℃反应制得苯并咪唑化合物14。

在研究咪唑衍生物的合成过程中，本发明按照下述路线制备式(19)的化合物：

具体包括以下步骤：

(1)氨基酸咪唑衍生物15通过NBS溴代制得化合物16；

(2)化合物16与溴苄反应制得化合物17；

(3)化合物17与取代硼酸偶联制得化合物18；

(4)化合物18氢化脱苄基保护后与溴代烷烃或碘代烷烃反应制得化合物19。

具体实施方式

下面通过实施例具体说明本发明的内容。在本发明中，以下所述的实施例是为了更好的阐述本发明，并不是用来限制本发明的范围。

实施例1手性胺式(11)的合成

以(S)-1-(1-萘基)乙胺盐酸盐的制备为例：

将1-萘醛(1.56g，10mmol)溶于无水THF中，依次加入R-叔丁基亚磺酰胺(1.33g，11mmol)，钛酸四乙酯(4.56g，20mmol)，室温反应过夜。TLC监测反应完全后，用EA稀释反应液，滴加水至不再有固体产生。硅藻土抽滤，滤饼用EA洗涤三次，滤液用饱和NaCl水溶液洗涤，无水硫酸钠干燥。旋干溶剂得到亚磺酰亚胺，粗产品未经纯化可直接用于下一步，产率约90％。

将上一步得到的亚磺酰亚胺(2.33g，9mmol)溶于无水DCM中，氮气保护下，-40℃缓慢滴加甲基溴化镁(4.5ml，3M in THF，13.5mmol)，滴加完毕后，将反应液缓慢升至室温反应过夜。TLC监测反应完全后，加入饱和氯化铵水溶液淬灭反应。反应液用DCM稀释，依次用水、饱和NaCl水溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，硅胶柱层析分离得(S)-N-((S)-1-(1-萘基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺，产率约65％。¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ8.26(d，J＝8.4Hz，1H)，7.90(d，J＝8.2Hz，1H)，7.83(d，J＝8.2Hz，1H)，7.67-7.45(m，4H)，5.40(m，1H)，3.66(brs，1H)，1.72(d，J＝6.6Hz，3H)，1.26(s，9H).

将上述中间体溶于盐酸甲醇溶液中，室温反应1h。TLC监测反应完全后，减压浓缩得到(S)-1-(1-萘基)乙胺盐酸盐，可不经纯化直接用于下一步反应，产率近100％。

实施例2氨基酸苯并咪唑衍生物式(14)的合成

将Boc保护的氨基酸(1.1eq)、HOBT(1.5eq)、EDC(1.1eq)溶于适量DCM中，加入DIPEA(3eq)室温搅拌30min，0℃下加入二氨基联苯室温搅拌过夜。TLC监测反应完全后，反应液用DCM稀释，然后用稀盐酸、饱和碳酸氢钠溶液，饱和NaCl溶液分别洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，硅胶柱层析分离(PE∶EA＝3∶1)得淡黄色油状物的苯胺中间体，收率65％-95％。将上述苯胺中间体溶于适量醋酸，70℃反应3-4h。TLC监测反应完全后，减压浓缩，残余物用EA稀释，饱和碳酸氢钠溶液、饱和NaCl溶液洗涤三次，无水硫酸钠干燥，浓缩，硅胶柱层析分离(PE∶EA＝2∶1)得白色固体氨基酸苯并咪唑衍生物，收率55％-75％。

(S)-2-(4-苯基-1H-苯并[d]咪唑)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯：¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.60-7.40(m，4H)，7.39(m，1H)，6.85-6.70(m，3H)，5.15(m，1H)，3.49-3.40(m，2H)，2.32-1.92(m，4H)，1.52(s，9H)；ESI-MS m/zcalc’d for C₂₂H₂₅N₃O₂ [M+Na]⁺ 386.2，found386.4.

(S)-(1-(4-苯基-1H-苯并[d]咪唑)乙基)氨基甲酸叔丁酯：¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.73-7.63(m，3H)，7.50-7.43(m，2H)，7.41-7.30(m，3H)，5.38(m，1H)，5.03(m，1H)，1.72(d，J＝7.0Hz，3H)，1.46(s，9H)；ESI-MS m/zcalc’d for C₂₀H₂₃N₃O₂ [M+Na]⁺ 360.2，found360.3.

(S)-(2-甲基-1-(4-苯基-1H-苯并[d]咪唑)丙基)氨基甲酸叔丁酯：¹H-NMR(300MHz，DMSO)δ8.00(m，1H)，7.65-7.33(m，4H)，7.26(m，1H)，7.20-7.08(m，2H)，6.38(m，1H)，4.51(m，1H)，2.13(m，1H)，1.30(s，9H)，0.89-0.65(m，6H)；ESI-MS m/z calc’d forC₂₂H₂₇N₃O₂ [M+Na]⁺ 388.2，found 388.4.

(1S，2S)-(2-甲基-1-(4-苯基-1H-苯并[d]咪唑)丁基)氨基甲酸叔丁酯：¹H-NMR(300MHz，DMSO)δ7.76(m，1H)，7.71-7.65(m，2H)，7.59(m，1H)，7.50-7.42(m，2H)，7.32(m，1H)，7.18(m，1H)，6.50(brd，J＝8.0Hz，1H)，4.72(m，1H)，2.12-1.92(m，2H)，1.56(m，1H)，1.39(s，9H)，0.93-0.74(m，6H)；ESI-MS m/z calc’d for C₂₃H₂₉N₃O₂ [M+Na]⁺ 392.2，found392.5.

(S)-(3-甲基-1-(4-苯基-1H-苯并[d]咪唑)丁基)氨基甲酸叔丁酯：¹H-NMR(300MHz，DMSO)δ7.97(m，1H)，7.40-7.18(m，7H)，6.40(brd，J＝7.0Hz，1H)，4.79(m，1H)，1.69-1.49(m，2H)，1.39(m，1H)，1.30(s，9H)，0.83(s，6H)；ESI-MS m/z calc’d forC₂₃H₂₉N₃O₂ [M+Na]⁺ 392.2，found 392.5.

(S)-(3-甲基-1-(4-苯基-1H-苯并[d]咪唑)-2-苯乙基)氨基甲酸叔丁酯：¹H-NMR(300MHz，DMSO)δ7.62-7.33(m，4H)，7.29-7.22(m，6H)，7.17(m，1H)，7.14-7.04(m，2H)，6.24(brs，1H)，5.02(m，1H)，3.35-3.01(m，2H)，1.28(s，9H)；ESI-MS m/z calc’d for C₂₆H₂₇N₃O₂[M+Na]⁺ 426.2，found 426.2.

(13)(S)-(1-(1H-苯并[d]咪唑)乙基)氨基甲酸叔丁酯：¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.70-7.50(m，2H)，7.31-7.21(m，2H)，5.45(m，1H)，5.04(m，1H)，1.82(d，J＝6.8Hz，3H)，1.45(s，9H)；ESI-MS m/z calc’d for C₁₄H₁₉N₃O₂ [M+Na]⁺ 284.2，found 284.3.

(14)(S)-(1-(1H-苯并[d]咪唑)乙基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯：¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.69-7.48(m，2H)，7.27-7.19(m，2H)，5.15(m，1H)，3.44(m，2H)，2.32-1.92(m，4H)，1.53(s，9H)；ESI-MS m/z calc’d for C₁₆H₂₁N₃O₂ [M+Na]⁺ 300.2，found 300.3.

实施例3氨基酸咪唑衍生物式(19)的合成

(S)-2-(4-溴-1H-咪唑)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯的制备：

将脯氨酸咪唑(1.26g，5.31mmol，1.0eq)溶于THF(50mL)中，0℃下缓慢加入N-溴代琥珀酰亚胺(0.99g，5.58mmol，1.05eq)，室温搅拌2-3h。TLC监测反应完全后，浓缩反应液，硅胶柱层析分离(PE∶EA＝1∶1)得(S)-2-(4-溴-1H-咪唑)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(1.35g，收率80.4％)。¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ11.03(brs，1H)，6.91(s，1H)，4.89(m，1H)，3.45-3.33(m，2H)，2.70(m，1H)，2.19-2.00(m，2H)，1.93(m，1H)，1.47(s，9H)；ESI-MS m/z calc’d forC₁₂H₁₈BrN₃O₂ [M+H]⁺ 317.2，found 317.3.

(S)-2-(1-苄基-4-苯基-1H-咪唑)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯的制备：

将(S)-2-(4-溴-1H-咪唑)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(1.35g，4.27mmol，1.0eq)溶于DMF(30mL)中，0℃下加入NaH(0.20g，5.12mmol，1.2eq)搅拌30min，再缓慢滴加溴化苄(0.88g，5.12mmol，1.2eq)，室温反应5h。TLC监测反应完全后，加入饱和氯化铵水溶液淬灭反应，反应液用水稀释，EA萃取三次。合并有机相，有机相用饱和NaCl水溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，硅胶柱层析分离(PE∶EA＝2∶1)得白色固体1.51g，收率87.3％。

将上述固体(1.51g，3.72mmol，1.0eq)溶于1，4-二氧六环(12mL)和水(3mL)的混合溶液中，再加入四(三苯基膦)钯(86mg，74.32μmol，0.02eq)，苯硼酸(0.45g，3.72mmol，1.0eq)，碳酸铯(3.42g，7.43mmol，2.0eq)，氮气保护条件下，100℃反应8h。TLC监测反应完全后冷却至室温，反应液用水稀释，EA萃取三次。合并有机相，有机相用饱和NaCl水溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，硅胶柱层析分离(PE∶EA＝4∶1)得(S)-2-(1-苄基-4-苯基-1H-咪唑)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯约1.29g，收率86.0％。¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.82-7.75(m，2H)，7.42-7.27(m，5H)，7.26-7.06(m，4H)，5.19(s，2H)，4.88(m，1H)，3.79-3.73(m，2H)，2.26-2.02(m，2H)，2.06-1.80(m，2H)，1.44(s，9H)；ESI-MS m/z calc’d for C₂₅H₂₉N₃O₂ [M+Na]⁺426.2，found 426.2.

(S)-2-(1-甲基-4-苯基-1H-咪唑)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯的制备：

将(S)-2-(1-苄基-4-苯基-1H-咪唑)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(0.50g，1.24mmol，1.0eq)溶于甲醇中，加入10％钯碳(10mg)，通入氢气室温反应1h。TLC监测反应完全后，硅藻土过滤，滤液浓缩得白色固体(收率约100％)。将白色固体、碳酸钾(0.34g，2.48mmol，2.0eq)溶于DMF(20mL)中，0℃下缓慢滴加碘甲烷(0.19g，1.36mmol，1.1eq)，室温反应2h。TLC监测反应完全后，加入饱和氯化铵水溶液淬灭反应，反应液用水稀释，EA萃取三次。合并有机相，有机相用饱和NaCl水溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，硅胶柱层析分离(PE∶EA＝2∶1)得白色固体0.36g，收率88.9％。¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.80-7.67(m，2H)，7.39-7.26(m，2H)，7.19(m，1H)，7.02(m，1H)，4.92(m，1H)，3.86-3.55(m，5H)，2.62-1.84(m，4H)，1.32(s，9H)；ESI-MS m/z calc’d for C₁₉H₂₅N₃O₂ [M+Na]⁺ 350.4，found 350.2.

(S)-2-(1-乙基-4-苯基-1H-咪唑)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯：¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.68-7.57(m，2H)，7.27-6.93(m，4H)，5.03(m，1H)，4.30-3.19(m，4H)，2.30-1.54(m，4H)，1.43-0.97(m，12H)；ESI-MS m/z calc’d for C₂₀H₂₇N₃O₂ [M+Na]⁺ 364.2，found 364.2.

(S)-2-(1-异丙基-4-苯基-1H-咪唑)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯：¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.80-7.61(m，2H)，7.34-6.95(m，4H)，5.04-4.24(m，2H)，3.70-3.29(m，2H)，2.31-1.77(m，4H)，1.49-1.01(m，15H)；ESI-MS m/z calc’d for C₂₁H₂₉N₃O₂ [M+Na]⁺ 378.2，found 378.3.

(S)-2-(1-环己甲基-4-苯基-1H-咪唑)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯：¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.89-7.51(m，2H)，7.35-6.88(m，4H)，4.80(m，1H)，3.85-3.31(m，4H)，2.30-1.76(m，4H)，1.72-1.50(m，6H)，1.37-1.05(m，14H)；ESI-MS m/z calc’d for C₂₅H₃₅N₃O₂ [M+Na]⁺ 432.2，found 432.3.

(S)-(1-(1-(环己基甲基)-4-苯基-1H-咪唑)乙基)氨基甲酸叔丁酯：¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.78-7.72(m，2H)，7.41-7.34(m，2H)，7.23(m，1H)，7.08(s，1H)，5.52(brd，J＝8.8Hz，1H)，4.94(m，1H)，3.87(m，1H)，3.71(m，1H)，1.78-1.63(m，8H)，1.60(d，J＝6.8Hz，3H)，1.46(s，9H)，1.24-1.17(m，3H)；ESI-MS m/z calc’d for C₂₃H₃₃N₃O₂ [M+Na]⁺406.3，found 406.5.。

实施例4关键中间体式的合成

L-N-乙酰亮氨酰-脯氨酰-缬氨酸苄酯的制备：

将L-脯氨酸苄酯(1.0g，4.87mmol，1.0eq)、L-N-Boc-亮氨酸(1.13g，4.87mmol，1.0eq)，EDC(1.03g，5.26mmol，1.1eq)和HOBT(0.99g，7.31mmol，1.5eq)溶于DCM(50mL)中，室温搅拌30min，0℃下缓慢滴加DIPEA(1.26g，9.74mmol，2.0eq)，室温反应过夜。TLC监测反应完全后，反应液用DCM稀释，有机相依次用1N HCl水溶液，饱和碳酸氢钠水溶液和饱和NaCl水溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，硅胶柱层析分离(PE∶EA＝4∶1)得L-N-Boc-亮氨酰-脯氨酸苄酯(1.63g，收率80.0％)。将L-N-Boc-亮氨酰-脯氨酸苄酯溶于盐酸乙酸乙酯中，采用通用的Boc脱保护方法脱Boc保护。将脱除Boc保护的胺溶于DCM(50mL)中，加入吡啶(0.92g，11.68mmol，3.0eq)，0℃下缓慢滴加乙酸酐(0.60g，5.84mmol，1.5eq)，室温反应3h。TLC监测反应完全后，反应液用DCM稀释，有机相依次用1N HCl水溶液，水和饱和NaCl水溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，硅胶柱层析分离(PE∶EA＝1∶1)得中间体L-N-乙酰亮氨酰-脯氨酸苄酯(0.91g，收率65.0％)。¹H-NMR(300MHz，DMSO)δ7.38-7.26(m，5H)，6.75(brd，J＝8.5Hz，1H)，5.25-5.02(m，2H)，4.50(m，1H)，3.84(m，1H)，3.75-3.52(m，2H)，2.21(m，1H)，2.05-1.99(m，2H)，1.98-1.93(m，3H)，1.67(m，1H)，1.52-1.40(m，3H)，1.39-1.37(m，3H)，0.94-0.89(m，3H)；ESI-MS m/z calc’d for C₂₀H₂₈N₂O₄ [M+Na]⁺ 383.2，found 383.

将L-N-乙酰亮氨酰-脯氨酸苄酯(0.91g，2.52mmol，1.0eq)溶于甲醇中，加入10％钯碳(90mg)，通入氢气室温反应1h。TLC监测反应完全后，硅藻土过滤，滤液浓缩得无色油状物L-N-乙酰-亮氨酰-脯氨酸(收率约100％)。将上述无色油状物和L-缬氨酸苄酯(0.52g，2.52mmol，1.0eq)，EDC(0.53g，2.78mmol，1.1eq)和HOBT(0.51g，3.79mmol，1.5eq)溶于DCM(50mL)中，室温搅拌30min，0℃下缓慢滴加DIPEA(0.65g，5.05mmol，2.0eq)，室温反应过夜。TLC监测反应完全后，反应液用DCM稀释，有机相依次用1N HCl水溶液，饱和碳酸氢钠水溶液和饱和NaCl水溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，硅胶柱层析分离(PE∶EA＝2∶1)得L-N-乙酰亮氨酰-脯氨酰-缬氨酸苄酯(0.98g，收率84.5％)。¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.42-7.29(m，6H)，6.32(brs，1H)，5.27-5.09(m，2H)，4.85(m，1H)，4.63(m，1H)，4.53(m，1H)，3.81(m，1H)，3.58(m，1H)，2.35(m，1H)，2.26-2.02(m，2H)，2.00(s，3H)，1.96-1.82(m，2H)，1.75-1.60(m，1H)，1.58-1.39(m，2H)，1.01-0.82(m，12H)；ESI-MS m/z calc’d for C₂₅H₃₇N₃O₅ [M+Na]⁺482.3，found 482.5.

L-N-4-甲基戊酰基-脯氨酰-缬氨酸苄酯的制备：

将L-脯氨酰-缬氨酸苄酯(0.5g，1.64mmol，1.0eq)，4-甲基戊酸(0.19g，1.64mmol，1.0eq)，EDC(0.35g，1.81mmol，1.1eq)和HOBT(0.33g，2.46mmol，1.5eq)溶于DCM(20mL)中，室温搅拌30min，0℃下缓慢滴加DIPEA(0.42g，3.29mmol，2.0eq)，室温反应过夜。TLC监测反应完全后，反应液用DCM稀释，有机相依次用1N HCl水溶液，饱和碳酸氢钠水溶液和饱和NaCl水溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，硅胶柱层析分离(PE∶EA＝4∶1)得L-N-4-甲基戊酰基-脯氨酰-缬氨酸苄酯(0.58g，收率87.9％)。¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.60(brd，J＝8.4Hz，1H)，7.39-7.35(m，5H)，5.25-5.11(m，2H)，4.66(m，1H)，4.48(m，1H)，3.64-3.41(m，2H)，2.42(m，1H)，2.37-2.29(m，2H)，2.26-2.15(m，2H)，2.01(m，1H)，1.90-1.78(m，2H)，1.60-1.54(m，2H)，0.94-0.87(m，12H)；ESI-MS m/z calc’d for C₂₃H₃₄N₂O₄ [M+Na]⁺ 425.3，found 425.5.

L-N-苯酰基-脯氨酰-缬氨酸苄酯的制备：

将L-脯氨酰-缬氨酸苄酯(0.5g，1.64mmol，1.0eq)、苯甲酸(0.20g，1.64mmol，1.0eq)，EDC(0.35g，1.81mmol，1.1eq)和HOBT(0.33g，2.46mmol，1.5eq)溶于DCM(20mL)中，室温搅拌30min，0℃下缓慢滴加DIPEA(0.42g，3.29mmol，2.0eq)，室温反应过夜。TLC监测反应完全后，反应液用DCM稀释，有机相依次用1N HCl水溶液，饱和碳酸氢钠水溶液和饱和NaCl水溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，硅胶柱层析分离(PE∶EA＝2∶1)得L-N-苯酰基-脯氨酰-缬氨酸苄酯(0.56g，收率83.6％)。¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.56-7.28(m，11H)，5.27-5.11(m，2H)，4.84(m，1H)，4.58(m，1H)，3.65-3.40(m，2H)，2.45(m，1H)，2.25-1.98(m，4H)，1.00-0.78(m，6H)；ESI-MS m/z calc’d for C₂₄H₂₈N₂O₄ [M+Na]⁺ 431.2，found 431.5.

((S)-3-环戊基-1-氧代-1-((S)-2-(4-苯基-1H-苯并[d]咪唑基)吡咯烷)丙烷基)氨基甲酸叔丁酯的制备：

将(S)-2-(4-苯基-1H-苯并[d]咪唑)吡咯烷甲酸叔丁酯(0.50g，1.38mmol，1.0eq)溶于盐酸甲醇中，室温反应1h。TLC监测反应完全后减压浓缩，得到以氨基盐酸盐形式存在的产物，可不经纯化直接用于下一步反应，产率近100％。。将脱除Boc保护的胺和L-N-Boc-环戊基丙氨酸(0.35g，1.38mmol，1.0eq)，EDC(0.29g，1.51mmol，1.1eq)和HOBT(0.28g，2.06mmol，1.5eq)溶于DCM(20mL)中，室温搅拌30min，0℃下缓慢滴加DIPEA(0.36g，2.75mmol，2.0eq)，室温反应过夜。TLC监测反应完全后，反应液用DCM稀释，有机相依次用1NHCl水溶液饱和碳酸氢钠水溶液和饱和NaCl水溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，硅胶柱层析分离(PE∶EA＝2∶1)得((S)-3-环戊基-1-氧代-1-((S)-2-(4-苯基-1H-苯并[d]咪唑基)吡咯烷)丙烷基)氨基甲酸叔丁酯(0.66g，两步收率95.7％)。ESI-MS m/z calc’d forC₃₀H₃₈N₄O₃ [M+Na]⁺ 525.3，found 525.4.

((S)-3-(((S)-3-环戊基-1-氧代-1-((S)-2-(4-苯基-1H-苯并[d]咪唑基)吡咯烷基)丙基))氨基)-3-氧代丙烷-1，2-二基)二氨基甲酸苄酯叔丁酯的制备：

将((S)-3-环戊基-1-氧代-1-((S)-2-(4-苯基-1H-苯并[d]咪唑基)吡咯烷)丙烷基)氨基甲酸叔丁酯(0.66g，1.38mmol，1.0eq)溶于盐酸甲醇中，室温反应1h。TLC监测反应完全后减压浓缩，得到以氨基盐酸盐形式存在的产物，可不经纯化直接用于下一步反应，产率近100％。将脱除Boc保护的胺和L-N-Boc-N’-Cbz-2，3-二氨基丙酸(0.44g，1.31mmol，1.0eq)，EDC(0.28g，1.44mmol，1.1eq)和HOBT(0.27g，1.97mmol，1.5eq)溶于DCM(20mL)中，室温搅拌30min，0℃下缓慢滴加DIPEA(0.34g，2.63mmol，2.0eq)，室温反应过夜。TLC监测反应完全后，反应液用DCM稀释，有机相依次用1N HCl水溶液，饱和碳酸氢钠水溶液和饱和NaCl水溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，硅胶柱层析分离(PE∶EA＝1∶1)得((S)-3-(((S)-3-环戊基-1-氧代-1-((S)-2-(4-苯基-1H-苯并[d]咪唑基)吡咯烷基)丙基))氨基)-3-氧代丙烷-1，2-二基)二氨基甲酸苄酯叔丁酯(0.88g，两步收率92.4％)。¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ11.12(brs，1H)，8.14-7.56(m，3H)，7.56-7.41(m，3H)，7.39-7.28(m，8H)，5.92(brd，J＝8.1Hz，1H)，5.78(brs，1H)，5.37(m，1H)，5.18-5.01(m，2H)，4.79(m，1H)，4.65(m，1H)，3.85(m，1H)，3.74(m，1H)，3.57-3.46(m，2H)，2.63(m，1H)，2.41(m，1H)，2.21(m，1H)，2.06(m，1H)，1.62-1.44(m，5H)，1.40(s，9H)，1.30-1.18(m，3H)，1.03-0.79(m，3H)；ESI-MS m/zcalc’d for C₄₁H₅₀N₆O₆ [M+Na]⁺ 745.4，found 745.5.

((S)-3-(((S)-3-环戊基-1-氧代-1-((S)-2-(5-苯基-1H-苯并[d]咪唑基)吡咯烷基)丙基))氨基)-3-氧代丙烷-1，2-二基)二氨基甲酸苄酯叔丁酯：¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ8.14(brd，J＝7.8Hz，1H)，7.74(m，1H)，7.67-7.51(m，3H)，7.49-7.39(m，3H)，7.39-7.26(m，7H)，5.92(m，1H)，5.29(m，1H)，5.14-4.99(m，2H)，4.77(m，1H)，4.62(m，1H)，4.04(m，1H)，3.88(m，1H)，3.78(m，1H)，3.63-3.42(m，2H)，2.56(m，1H)，2.43(m，1H)，2.25(m，1H)，2.05(m，1H)，1.76-1.58(m，2H)，1.51(s，9H)，1.44-1.27(m，7H)，0.99-0.90(m，2H).ESI-MS m/zcalc’d for C₄₁H₅₀N₆O₆ [M+Na]⁺ 745.4，found 745.5.

(S)-3-(((S)-3-环戊基-1-氧代-1-((S)-2-(1H-苯并[d]咪唑基)吡咯烷基)丙基))氨基)-3-氧代丙烷-1，2-二基)二氨基甲酸苄酯叔丁酯：¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.96(brs，1H)，7.59-7.45(m，2H)，7.38-7.31(m，6H)，7.25-7.15(m，2H)，5.89-5.70(m，2H)，5.30(m，1H)，5.13-5.07(m，2H)，4.74(m，1H)，3.88-3.42(m，5H)，2.50-2.13(m，2H)，2.08(m，1H)，1.84-1.53(m，3H)，1.48(s，9H)，1.54-1.34(m，7H)，0.94-0.83(m，2H)；ESI-MS m/z calc’dfor C₃₅H₄₆N₆O₆ [M+Na]⁺ 669.4，found 669.8.

((S)-3-(((S)-3-环戊基-1-氧代-1-(((S)-1-(4-苯基-1H-苯并[d]咪唑基)乙基)氨基)丙基)氨基)-3-氧代丙烷-1，2-二基)二氨基甲酸苄酯叔丁酯：¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.76-7.71(m，2H)，7.63(m，1H)，7.56(m，1H)，7.48-7.43(m，2H)，7.39-7.25(m，9H)，7.06(brd，J＝5.9Hz，1H)，6.04(brd，J＝2.7Hz，1H)，5.85(brs，1H)，5.37(m，1H)，5.09-4.97(m，2H)，4.30(m，1H)，4.11(m，1H)，3.45-3.34(m，2H)，1.81-1.62(m，8H)，1.58-1.49(m，2H)，1.46-1.36(m，11H)，1.11-0.96(m，2H)；ESI-MS m/z calc’d for C₃₉H₄₈N₆O₆ [M+Na]⁺719.4，found 719.6.

((S)-3-(((S)-3-环戊基-1-氧代-1-(((S)-1-(5-苯基-1H-苯并[d]咪唑基)乙基)氨基)丙基)氨基)-3-氧代丙烷-1，2-二基)二氨基甲酸苄酯叔丁酯：¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ8.33(brs，1H)，7.98(brs，1H)，7.72(brs，1H)，7.58-7.50(m，3H)，7.45-7.33(m，4H)，7.32-7.22(m，6H)，6.33-6.17(m，2H)，5.42(m，1H)，5.01(s，2H)，4.61-4.51(m，2H)，3.68-3.43(m，2H)，1.72(d，J＝7.0Hz，3H)，1.68-1.50(m，6H)，1.43(s，9H)，1.39-1.29(m，3H)，0.89-0.83(m，2H)；ESI-MS m/z calc’d for C₃₉H₄₈N₆O₆ [M+Na]⁺ 719.4，found 719.4.

((S)-3-(((S)-3-环戊基-1-(((S)-2-甲基-1-(4-苯基-1H-苯并[d]咪唑基)丙基)氨基)-1-氧代丙烷)氨基)-3-氧代丙烷-1，2-二基)二氨基甲酸苄酯叔丁酯：¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.72-7.75(m，3H)，7.47-7.40(m，3H)，7.37-7.24(m，10H)，5.11-4.99(m，3H)，4.37(m，1H)，3.34(m，1H)，2.49-2.12(m，4H)，1.75-1.54(m，6H)，1.49-1.43(m，3H)，1.40(s，9H)，1.30-.26(m，3H)，0.99(d，J＝6.8Hz，3H)，0.86(d，J＝6.8Hz，3H)；ESI-MS m/zcalc’d for C₄₁H₅₂N₆O₆ [M+Na]⁺ 747.4，found 747.4.

((S)-3-(((S)-3-环戊基-1-氧代-1-(((S)-1-(5-苯基-1H-苯并[d]咪唑基)乙基(氨基)-1-氧代丙烷)氨基)-3-氧代丙烷-1，2-二基)二氨基甲酸苄酯叔丁酯：¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ8.73(brs，1H)，8.52(brs，1H)，7.89(brs，1H)，7.55-7.48(m，2H)，7.49-7.28(m，6H)，7.25-7.21(m，5H)，6.35-6.10(m，2H)，5.09(m，1H)，5.03-4.96(m，2H)，4.85(m，1H)，4.74(m，1H)，3.65(m，1H)，3.50(m，1H)，2.50(m，1H)，1.67-1.55(m，5H)，1.46(s，9H)，1.25-1.17(m，4H)，1.13(d，J＝6.5Hz，3H)，0.91(d，J＝6.5Hz，3H)，0.78-0.59(m，2H)；ESI-MS m/z calc’d for C₄₁H₅₂N₆O₆ [M+Na]⁺ 747.4，found 747.5.

(((S)-3-(((S)-3-环戊基-1-(((1S，2S)-2-甲基-1-(4-苯基-1H-苯并[d]咪唑基)丁基)氨基)-1-氧代丙烷基)氨基)-3-氧代丙烷-1，2-二基)二氨基甲酸苄酯叔丁酯：¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.84(brs，1H)，7.66-7.52(m，2H)，7.46-7.39(m，3H)，7.36-7.25(m，10H)，6.09(brs，1H)，5.16-5.02(m，4H)，4.57-4.28(m，2H)，3.45-3.31(m，2H)，2.45-2.20(m，4H)，1.71-1.50(m，6H)，1.39(s，9H)，1.28-1.19(m，2H)，0.89-0.79(m，8H)；ESI-MS m/z calc’dfor C₄₂H₅₄N₆O₆ [M+Na]⁺ 761.4，found 761.4.

(((S)-3-(((S)-3-环戊基-1-(((1S，2S)-2-甲基-1-(5-苯基-1H-苯并[d]咪唑基)丁基)氨基)-1-氧代丙烷基)氨基)-3-氧代丙烷-1，2-二基)二氨基甲酸苄酯叔丁酯：¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ8.65(brs，1H)，8.42(brs，1H)，7.80(m，1H)，7.55-7.46(m，2H)，7.47-7.32(m，5H)，7.30-7.24(m，6H)，6.24-6.04(m，2H)，5.17(m，1H)，5.02(s，2H)，4.82(m，1H)，4.72(m，1H)，3.59-2.46(m，2H)，2.30(m，1H)，1.87-1.71(m，2H)，1.47(s，9H)，1.30-1.26(m，4H)，1.25-1.09(m，5H)，0.92-0.84(m，6H)，0.72-0.53(m，2H)；ESI-MS m/z calc’d forC₄₂H₅₄N₆O₆ [M+Na]⁺ 761.4，found 761.4.

(((S)-3-(((S)-3-环戊基-1-(((1S，2S)-3-甲基-1-(4-苯基-1H-苯并[d]咪唑基)丁基)氨基)-1-氧代丙烷基)氨基)-3-氧代丙烷-1，2-二基)二氨基甲酸苄酯叔丁酯：¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.68-7.53(m，3H)，7.47-7.40(m，3H)，7.37-7.28(m，10H)，6.01(brs，1H)，5.87(brs，1H)，5.37(m，1H)，5.02(s，2H)，4.30(m，2H)，3.40-3.25(m，2H)，2.36-2.24(m，2H)，2.07-1.87(m，2H)，1.74-1.59(m，8H)，1.42(s，9H)，0.95-0.89(m，8H)；ESI-MS m/zcalc’d for C₄₂H₅₄N₆O₆ [M+Na]⁺ 761.4，found 761.6.

(((S)-3-(((S)-3-环戊基-1-(((1S，2S)-3-甲基-1-(5-苯基-1H-苯并[d]咪唑基)丁基)氨基)-1-氧代丙烷基)氨基)-3-氧代丙烷-1，2-二基)二氨基甲酸苄酯叔丁酯：¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ8.21(brs，1H)，7.97(brs，1H)，7.71(brs，1H)，7.58-7.51(m，3H)，7.47-7.36(m，3H)，7.34-7.22(m，7H)，6.31-6.09(m，2H)，5.43(m，1H)，5.05(s，2H)，4.66-4.55(m，2H)，3.61-3.50(m，2H)，2.14(m，1H)，1.99(m，1H)，1.71-1.49(m，5H)，1.46(s，9H)，1.39-1.25(m，5H)，0.99-0.87(m，6H)，0.84-0.63(m，2H).ESI-MS m/z calc’d for C₄₂H₅₄N₆O₆ [M+Na]⁺ 761.4，found 761.5.

((S)-3-(((S)-3-环戊基-1-氧代-1-(((S)-2-苯基-1-(4-苯基-1H-苯并[d]咪唑基)乙基)氨基)丙基)氨基)-3-氧代丙烷-1，2-二基)二氨基甲酸苄酯叔丁酯：¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.75-7.55(m，3H)，7.49-7.42(m，3H)，7.39-7.29(m，8H)，7.27-7.17(m，7H)，6.85(brs，1H)，5.82(brs，1H)，5.60(m，1H)，5.064.92(m，2H)，4.17(m，1H)，4.03(m，1H)，3.61(m，1H)，3.38-3.25(m，3H)，1.87-1.75(m，4H)，1.61-1.52(m，5H)，1.45(s，9H)，1.04-0.92(m，2H).ESI-MS m/z calc’d for C₄₅H₅₂N₆O₆ [M+Na]⁺ 795.4，found 795.4.

((S)-3-(((S)-3-环戊基-1-氧代-1-(((S)-2-苯基-1-(5-苯基-1H-苯并[d]咪唑基)乙基)氨基)丙基)氨基)-3-氧代丙烷-1，2-二基)二氨基甲酸苄酯叔丁酯：¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ8.37(brs，1H)，7.92(brs，1H)，7.62-7.51(m，3H)，7.45-7.36(m，4H)，7.35-7.20(m，7H)，7.19-7.09(m，5H)，6.32-6.14(m，2H)，5.63(m，1H)，5.00(s，2H)，4.63-4.51(m，2H)，3.63-3.32(m，4H)，1.56-1.42(m，4H)，1.43(s，9H)，1.36-1.28(m，4H)，1.00-0.85(m，1H)，0.82-0.61(m，2H).ESI-MS m/z calc’d for C₄₅H₅₂N₆O₆ [M+Na]⁺ 795.4，found795.5.

((S)-3-(((S)-3-环戊基-1-氧代-1-(((S)-1-(1H-苯并[d]咪唑基)乙基)氨基)丙基)氨基)-3-氧代丙烷-1，2-二基)二氨基甲酸苄酯叔丁酯：¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.95(brs，1H)，7.52(brs，1H)，7.43-7.23(m，7H)，7.25-7.13(m，2H)，6.86(brs，1H)，6.30(brs，1H)，5.82(m，1H)，5.44-5.31(m，2H)，5.07(m，1H)，4.89(m，1H)，4.11(m，1H)，3.50-3.39(m，2H)，2.50-2.13(m，3H)，1.84-1.53(m，3H)，1.48(s，9H)，1.44(m，6H)，0.94-0.83(m，2H)；ESI-MS m/z calc’d for C₃₃H₄₄N₆O₆ [M+Na]⁺ 643.3，found 643.8.

(((S)-3-(((S)-1-(((S)-1-(1H-苯并[d]咪唑基)乙基)氨基)-3-环戊基-1-氧代丙-1-醇吡啶-2-基)氨基)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-氧代丙基)甲基氨基甲酸苄酯叔丁酯的制备：

将((S)-3-环戊基-1-氧代-1-(((S)-1-(4-苯基-1H-苯并[d]咪唑基)乙基)氨基)丙烷基)氨基甲酸叔丁酯(0.5g，1.05mmol，1.0eq)溶于盐酸甲醇中，室温反应1h。TLC监测反应完全后减压浓缩，得到以氨基盐酸盐形式存在的产物，可不经纯化直接用于下一步反应，产率近100％。将脱除Boc保护的胺和L-N-Boc-N’-Cbz-N’-甲基-2，3-二氨基丙酸(0.35g，1.05mmol，1.0eq)，EDC(0.22g，1.15mmol，1.1eq)和HOBT(0.21g，1.57mmol，1.5eq)溶于DCM(20mL)中，室温搅拌30min，0℃下缓慢滴加DIPEA(0.27g，2.10mmol，2.0eq)，室温反应过夜。TLC监测反应完全后，反应液用DCM稀释，有机相依次用1N HCl水溶液，饱和碳酸氢钠水溶液和饱和NaCl水溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，硅胶柱层析分离(PE∶EA＝1∶1)得(((S)-3-(((S)-1-(((S)-1-(1H-苯并[d]咪唑基)乙基)氨基)-3-环戊基-1-氧代丙-1-醇吡啶-2-基)氨基)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-氧代丙基)甲基氨基甲酸苄酯叔丁酯(0.67g，两步收率89.8％)。¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.82-7.66(m，3H)，7.65-7.53(m，2H)，7.51-7.44(m，2H)，7.41-7.30(m，8H)，6.85(brs，1H)，6.38(brs，1H)，5.41(m，1H)，5.10(s，2H)，4.33(m，1H)，4.10(m，1H)，3.73-3.40(m，2H)，2.93(s，3H)，1.85-1.60(m，9H)，1.44(s，9H)，1.31-1.28(m，3H)，1.17-1.03(m，2H)；ESI-MS m/z calc’d for C₄₀H₅₀N₆O₆ [M+Na]⁺ 733.4，found 733.8.

(((S)-3-(((S)-1-(((S)-1-(4-苯基-1H-苯并[d]咪唑基)乙基)氨基)-3-环戊基-1-氧代丙-1-醇吡啶-2-基)氨基)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-氧代丙基)甲基氨基甲酸苄酯叔丁酯：¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.95(brs，1H)，7.52(brs，1H)，7.40-7.27(m，7H)，7.24-7.14(m，3H)，5.82(brs，1H)，5.38(m，1H)，5.12-5.02(m，2H)，4.85(m，1H)，4.11(m，1H)，3.50-3.39(m，2H)，2.92(s，3H)，2.50-2.13(m，2H)，2.16-2.00(m，3H)，1.84-1.53(m，3H)，1.48(s，9H)，1.46-1.40(m，4H)，0.94-0.83(m，2H)；ESI-MS m/z calc’d for C₃₄H₄₆N₆O₆ [M+Na]⁺ 657.4，found 657.8.：

((S)-3-环戊基-1-((S)-2-(1-甲基-4-苯基-1H-咪唑基)吡咯烷基)-1-氧代丙烷基)氨基甲酸叔丁酯的制备：

将(S)-2-(1-甲基-4-苯基-1H-咪唑)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(0.50g，1.53mmol，1.0eq)溶于盐酸甲醇中，室温反应1h。TLC监测反应完全后减压浓缩，得到以氨基盐酸盐形式存在的产物，可不经纯化直接用于下一步反应，产率近100％。将脱除Boc保护的胺和L-N-Boc-环戊基丙氨酸(0.39g，1.53mmol，1.0eq)，EDC(0.32g，1.68mmol，1.1eq)和HOBT(0.31g，2.29mmol，1.5eq)溶于DCM(20mL)中，室温搅拌30min，0℃下缓慢滴加DIPEA(0.40g，3.05mmol，2.0eq)，室温反应过夜。TLC监测反应完全后，反应液用DCM稀释，有机相依次用1NHCl水溶液，饱和碳酸氢钠水溶液和饱和NaCl水溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，硅胶柱层析分离(PE∶EA＝5∶1)得((S)-3-环戊基-1-((S)-2-(1-甲基-4-苯基-1H-咪唑基)吡咯烷基)-1-氧代丙烷基)氨基甲酸叔丁酯(0.59g，两步收率83.3％)。ESI-MS m/z calc’d forC₂₇H₃₈N₄O₃ [M+Na]⁺ 489.3，found 489.6.

((S)-3-(((S)-3-环戊基-1-((S)-2-(1-甲基-4-苯基-1H-咪唑基)吡咯烷基)-1-氧代丙烷基)氨基)-3-氧代丙烷-1，2-二基)二氨基甲酸苄基叔丁酯的制备：

将((S)-3-环戊基-1-((S)-2-(1-甲基-4-苯基-1H-咪唑基)吡咯烷基)-1-氧代丙烷基)氨基甲酸叔丁酯(0.70g，1.50mmol，1.0eq)溶于盐酸甲醇中，室温反应1h。TLC监测反应完全后减压浓缩，得到以氨基盐酸盐形式存在的产物，可不经纯化直接用于下一步反应，产率近100％。将脱除Boc保护的胺和L-N-Boc-N’-Cbz-2，3-二氨基丙酸(0.51g，1.50mmol，1.0eq)，EDC(0.32g，1.65mmol，1.1eq)和HOBT(0.30g，2.25mmol，1.5eq)溶于DCM(20mL)中，室温搅拌30min，0℃下缓慢滴加DIPEA(0.39g，3.00mmol，2.0eq)，室温反应过夜。TLC监测反应完全后，反应液用DCM稀释，有机相依次用1N HCl水溶液，饱和碳酸氢钠水溶液和饱和NaCl水溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，硅胶柱层析分离(PE∶EA＝1∶1)得((S)-3-(((S)-3-环戊基-1-((S)-2-(1-甲基-4-苯基-1H-咪唑基)吡咯烷基)-1-氧代丙烷基)氨基)-3-氧代丙烷-1，2-二基)二氨基甲酸苄基叔丁酯(0.79g，两步收率76.9％)。¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.70-7.65(m，2H)，7.36-7.29(m，7H)，7.21-7.09(m，2H)，6.95(s，1H)，5.91(m，1H)，5.76(brd，J＝7.5Hz，1H)，5.15-5.02(m，3H)，4.69(m，1H)，4.31(m，1H)，3.90-3.82(m，2H)，3.68(s，3H)，3.59-3.50(m，2H)，2.78(m，1H)，2.52(m，1H)，2.27-2.13(m，2H)，2.04(m，1H)，1.84-1.62(m，4H)，1.62-1.46(m，4H)，1.44(s，9H)，1.11-0.94(m，2H)；ESI-MS m/z calc’dfor C₃₈H₅₀N₆O₆ [M+Na]⁺ 709.4，found 709.4.

((S)-3-(((S)-3-环戊基-1-((S)-2-(1-乙基-4-苯基-1H-咪唑基)吡咯烷基)-1-氧代丙烷基)氨基)-3-氧代丙烷-1，2-二基)二氨基甲酸苄基叔丁酯：¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.72-7.66(m，2H)，7.37-7.29(m，7H)，7.18(m，1H)，7.10(m，1H)，7.04(s，1H)，5.88(m，1H)，5.75(brd，J＝7.5Hz，1H)，5.17-5.03(m，3H)，4.66(m，1H)，4.28(m，1H)，4.16(m，1H)，3.99(m，1H)，3.93-3.80(m，2H)，3.60-3.48(m，2H)，2.53(m，1H)，2.28-1.97(m，3H)，1.87-1.64(m，5H)，1.61-1.49(m，3H)，1.44(s，9H)，1.42-1.35(m，4H)，1.14-0.97(m，2H)；ESI-MS m/zcalc’d for C₃₉H₅₂N₆O₆ [M+Na]⁺ 723.4，found 723.5.

((S)-3-(((S)-3-环戊基-1-((S)-2-(1-异丙基-4-苯基-1H-咪唑基)吡咯烷基)-1-氧代丙烷基)氨基)-3-氧代丙烷-1，2-二基)二氨基甲酸苄基叔丁酯：¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.73-7.68(m，2H)，7.36-7.29(m，7H)，7.19(m，1H)，7.13(s，1H)，7.03(m，1H)，5.84(m，1H)，5.69(brd，J＝7.5Hz，1H)，5.21(m，1H)，5.11(s，2H)，4.76-4.59(m，2H)，4.29(m，1H)，3.97-3.78(m，3H)，3.59-3.49(m，2H)，2.63-2.30(m，2H)，2.29-1.96(m，3H)，1.88-1.67(m，4H)，1.63-1.52(m，3H)，1.50(d，J＝6.5Hz，3H)，1.45(s，9H)，1.42(d，J＝6.5Hz，3H)，1.15-1.01(m，2H)；ESI-MS m/z calc’d for C₄₀H₅₄N₆O₆ [M+Na]⁺ 737.4，found 737.4.

((S)-3-(((S)-3-环戊基-1-((S)-2-(1-环己基甲基-4-苯基-1H-咪唑基)吡咯烷基)-1-氧代丙烷基)氨基)-3-氧代丙烷-1，2-二基)二氨基甲酸苄基叔丁酯：¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.74-7.67(m，2H)，7.37-7.30(m，7H)，7.20(m，1H)，6.99(s，1H)，6.93(m，1H)，5.64(m，2H)，5.18-5.05(m，3H)，4.70(m，1H)，4.19(m，2H)，3.94-3.80(m，2H)，3.69(m，1H)，3.62-3.50(m，2H)，2.59(m，1H)，2.26-2.18(m，2H)，2.14-1.98(m，2H)，1.72(m，11H)，1.61-1.49(m，3H)，1.46(s，9H)，1.26-1.14(m，3H)，1.09-0.92(m，4H)；ESI-MS m/z calc’dfor C₄₄H₆₀N₆O₆ [M+Na]⁺ 791.5，found 791.8.

(S)-3-(((S)-3-环戊基-1-((S)-2-(1-环己基甲基-4-苯基-1H-咪唑基)吡咯烷基)-1-氧代丙烷基)氨基)-3-氧代丙烷-1，2-二基)二氨基甲基甲酸苄基叔丁酯：¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.74-7.67(m，2H)，7.40-7.29(m，8H)，7.23-7.16(m，1H)，7.01(s，1H)，5.84(brs，1H)，5.17-5.13(m，2H)，5.08(m，1H)，4.75(m，1H)，4.34(m，1H)，4.20(m，1H)，3.93-3.84(m，2H)，3.82-3.65(m，2H)，3.54(m，1H)，2.97(s，3H)，2.59(m，1H)，2.29-2.19(m，2H)，2.14-1.98(m，2H)，1.84-1.61(m，11H)，1.57-1.47(m，3H)，1.45(s，9H)，1.27-1.13(m，3H)，1.10-0.95(m，4H)；ESI-MS m/z calc’d for C₄₅H₆₂N₆O₆ [M+Na]⁺ 805.5，found805.5.：

((S)-3-(((S)-1-(((S)-1-(1-环己基甲基-4-苯基-1H-咪唑基)乙基)氨基)-3-环戊基-1-氧代丙烷基)氨基)-3-氧代丙烷-1，2-二基)二氨基-甲酸苄基叔丁酯：¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.73-7.67(m，2H)，7.39-7.30(m，7H)，7.26-7.13(m，2H)，7.04(s，1H)，6.86(m，1H)，6.43(m，1H)，5.54(m，1H)，5.28-5.05(m，3H)，4.37-4.27(m，2H)，3.90(m，1H)，3.68(m，1H)，3.49(m，1H)，3.31(m，1H)，1.81-1.61(m，11H)，1.54(d，J＝6.8Hz，3H)，1.44(s，9H)，1.28-1.19(m，5H)，1.15-1.04(m，3H)，1.03-0.85(m，3H)；ESI-MS m/z calc’d forC₄₂H₅₈N₆O₆ [M+Na]⁺ 765.4，found 765.8.

((S)-3-环戊基-1-(((S)-1-萘基乙基)氨基)-1-氧代丙烷基)氨基甲酸叔丁酯的制备：

将(S)-1-(1-萘基)乙胺盐酸盐(0.42g，1.53mmol，1.0eq)溶于盐酸甲醇中，室温反应1h。TLC监测反应完全后减压浓缩，得到以氨基盐酸盐形式存在的产物，可不经纯化直接用于下一步反应，产率近100％。将脱除Boc保护的胺和L-N-Boc-环戊基丙氨酸(0.39g，1.53mmol，1.0eq)，EDC(0.32g，1.68mmol，1.1eq)和HOBT(0.31g，2.29mmol，1.5eq)溶于DCM(20mL)中，室温搅拌30min，0℃下缓慢滴加DIPEA(0.40g，3.05mmol，2.0eq)，室温反应过夜。TLC监测反应完全后，反应液用DCM稀释，有机相依次用1N HCl水溶液，饱和碳酸氢钠水溶液和饱和NaCl水溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，硅胶柱层析分离(PE∶EA＝5∶1)得((S)-3-环戊基-1-(((S)-1-萘基乙基)氨基)-1-氧代丙烷基)氨基甲酸叔丁酯(0.56g，两步收率88.9％)。ESI-MS m/z calc’d for C₂₅H₃₄N₂O₃ [M+Na]⁺ 433.3，found 433.6.

((S)-3-(((S)-3-环戊基-1-(((S)-1-(萘基)乙基)氨基)-1-氧代丙烷基)氨基)-3-氧代丙烷-1-甲酸叔丁酯-1，2-二基)二氨基甲酸苄基叔丁酯的制备：

将((S)-3-环戊基-1-(((S)-1-萘基乙基)氨基)-1-氧代丙烷基)氨基甲酸叔丁酯(0.62g，1.50mmol，1.0eq)溶于盐酸甲醇中，室温反应1h。TLC监测反应完全后减压浓缩，得到以氨基盐酸盐形式存在的产物，可不经纯化直接用于下一步反应，产率近100％。将脱除Boc保护的胺和L-N-Boc-N’-Cbz-2，3-二氨基丙酸(0.51g，1.50mmol，1.0eq)，EDC(0.32g，1.65mmol，1.1eq)和HOBT(0.30g，2.25mmol，1.5eq)溶于DCM(20mL)中，室温搅拌30min，0℃下缓慢滴加DIPEA(0.39g，3.00mmol，2.0eq)，室温反应过夜。TLC监测反应完全后，反应液用DCM稀释，有机相依次用1N HCl水溶液，饱和碳酸氢钠水溶液和饱和NaCl水溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，硅胶柱层析分离(PE∶EA＝1∶1)得((S)-3-(((S)-3-环戊基-1-(((S)-1-(萘基)乙基)氨基)-1-氧代丙烷基)氨基)-3-氧代丙烷-1-甲酸叔丁酯-1，2-二基)二氨基甲酸苄基叔丁酯(0.83g，两步收率88.8％)。¹H-NMR(300MHz，CD₃OD)δ8.09(m，1H)，7.88(m，1H)，7.78(m，1H)，7.55(m，1H)，7.53-7.46(m，2H)，7.43(m，1H)，7.37-7.33(m，5H)，5.82(m，1H)，5.12-5.04(m，3H)，4.38(m，1H)，4.21(m，1H)，3.43(m，1H)，1.79-1.65(m，5H)，1.62(d，J＝6.9Hz，3H)，1.58-1.50(m，2H)，1.46(s，9H)，1.35-1.22(m，2H)，1.12-1.01(m，2H)；ESI-MSm/z calc’d for C₃₆H₄₆N₄O₆ [M+Na]⁺ 653.3，found 653.8.

((S)-3-(((S)-3-环戊基-1-(((S)-2-(萘基)乙基)氨基)-1-氧代丙烷基)氨基)-3-氧代丙烷-1-甲酸叔丁酯-1，2-二基)二氨基甲酸苄基叔丁酯：¹H-NMR(300MHz，CD₃OD)δ7.86-7.76(m，4H)，7.50-7.43(m，3H)，7.38-7.28(m，5H)，5.18(m，1H)，5.03(m，1H)，4.49(m，1H)，4.42(m，1H)，4.22(m，1H)，3.51-3.42(m，2H)，1.83-1.69(m，5H)，1.58(d，J＝7.0Hz，3H)，1.46(s，9H)，1.34-1.31(m，4H)，1.17-1.09(m，2H)；ESI-MS m/z calc’d for C₃₆H₄₆N₄O₆[M+Na]⁺ 653.3，found 653.8.

((S)-3-(((S)-3-环戊基-1-(((S)-1-(4-乙基苯基)乙基)氨基)-1-氧代丙烷基)氨基)氧代丙烷-1，2-二基)二氨基甲酸苄酯叔丁酯：¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.37-7.35(m，5H)，7.25-7.20(m，2H)，7.18-7.13(m，2H)，6.82(brd，J＝8.2Hz，1H)，6.63(brs，1H)，5.90(brs，1H)，5.42(m，1H)，5.16-5.04(m，3H)，4.36(m，1H)，4.21(m，1H)，3.62-3.52(m，2H)，2.63(q，J＝7.6Hz，2H)，1.86(m，1H)，1.80-1.65(m，4H)，1.64-1.54(m，2H)，1.48(s，9H)，1.46-1.44(m，3H)，1.25(t，J＝7.6Hz，3H)，1.19-1.06(m，4H)；ESI-MS m/z calc’d forC₃₄H₄₈N₄O₆ [M+Na]⁺ 631.4，found 631.8.

((S)-3-(((S)-3-环戊基-1-(((S)-1-(4-异丙基苯基)乙基)氨基)-1-氧代丙烷基)氨基)氧代丙烷-1，2-二基)二氨基甲酸苄酯叔丁酯：¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.38-7.32(m，5H)，7.25-7.15(m，4H)，6.96(brd，J＝8.2Hz，1H)，6.75(brs，1H)，5.93(brs，1H)，5.56(brs，1H)，5.17-5.01(m，3H)，4.38(m，1H)，4.24(m，1H)，3.60-3.54(m，2H)，2.89(m，1H)，1.87(m，1H)，1.78-1.62(m，4H)，1.62-1.49(m，3H)，1.47(s，9H)，1.45-1.44(m，3H)，1.24(d，J＝7.0Hz，6H)，1.20-1.01(m，3H)；ESI-MS m/z calc’d for C₃₅H₅₀N₄O₆ [M+Na]⁺ 645.4，found 645.8.

(((S)-3-(((S)-3-环戊基-1-(((S)-4-甲基戊烷基)氨基)-1-氧代丙基)氨基)3-氧代丙烷-1，2-二基)氨基甲酸苄酯叔丁酯：¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.38-7.33(m，5H)，6.82(brd，J＝8.3Hz，1H)，6.25(brs，1H)，6.00(brs，1H)，5.54(brs，1H)，5.20-5.04(m，2H)，4.35(m，1H)，4.19(m，1H)，4.02(m，1H)，3.61-3.55(m，2H)，1.93-1.70(m，5H)，1.69-1.55(m，4H)，1.47(s，9H)，1.39(m，1H)，1.30-1.12(m，4H)，1.09(d，J＝6.5Hz，3H)，0.90(d，J＝6.6Hz，6H)；ESI-MS m/z calc’d for C₃₀H₄₈N₄O₆ [M+Na]⁺ 583.4，found 583.7.

((S)-3(((S)-1(((S)-1-环己基乙基)氨基)-3-环戊基-1-氧代丙烷基)氨基)-3-氧代丙烷-1，2-二基)二氨基甲酸苄酯叔丁酯：¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.39-7.34(m，5H)，6.77(brd，J＝8.1Hz，1H)，6.16(brs，1H)，5.92(brs，1H)，5.41(brs，1H)，5.21-5.07(m，2H)，4.34(m，1H)，4.19(m，1H)，3.82(m，1H)，3.63-3.57(m，2H)，1.88(m，1H)，1.84-1.70(m，7H)，1.69-1.61(m，5H)，1.48(s，9H)，1.37-1.29(m，2H)，1.26-1.10(m，5H)，1.07(d，J＝6.8Hz，3H)，1.03-0.87(m，2H)；ESI-MS m/z calc’d for C₃₂H₅₀N₄O₆ [M+Na]⁺ 609.4，found 609.8.

((S)-3-(((S)-3-环戊基-1-((((S)-1-(3-吡啶基)乙基)氨基)-1-氧代丙烷基)氨基)氧代丙烷-1，2-二基)二氨基甲酸苄酯叔丁酯的制备：¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ8.59(d，J＝2.4Hz，1H)，8.47(dd，J＝4.8，1.6Hz，1H)，7.63(m，1H)，7.39-7.32(m，5H)，7.23(m，1H)，7.17(brs，1H)，6.85(brd，J＝8.1Hz，1H)，6.16(brs，1H)，5.63(m，1H)，5.20-5.02(m，3H)，4.38(m，1H)，4.18(m，1H)，3.62-3.56(m，2H)，1.87(m，1H)，1.78-1.66(m，4H)，1.65-1.52(m，3H)，1.49(d，J＝7.1Hz，3H)，1.47(s，9H)，1.19-1.02(m，3H)；ESI-MS m/z calc’d forC₃₁H₄₃N₅O₆ [M+Na]⁺ 604.3，found 604.7.

((S)-3-(((S)-1-(苄基氨基)-3-环戊基-1-氧代丙烷基)氨基)-3-氧代丙烷-1，2-二基)二氨基甲酸苄酯叔丁酯的制备：

将(S)-(1-(苄基氨基)-3-环戊基-1-氧代丙烷基)氨基甲酸叔丁酯(0.54g，1.50mmol，1.0eq)溶于盐酸甲醇中，室温反应1h。TLC监测反应完全后减压浓缩，得到以氨基盐酸盐形式存在的产物，可不经纯化直接用于下一步反应，产率近100％。将脱除Boc保护的胺和L-N-Boc-N’-Cbz-2，3-二氨基丙酸(0.51g，1.50mmol，1.0eq)，EDC(0.32g，1.65mmol，1.1eq)和HOBT(0.30g，2.25mmol，1.5eq)溶于DCM(20mL)中，室温搅拌30min，0℃下缓慢滴加DIPEA(0.39g，3.00mmol，2.0eq)，室温反应过夜。TLC监测反应完全后，反应液用DCM稀释，有机相依次用1N HCl水溶液，饱和碳酸氢钠水溶液和饱和NaCl水溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，硅胶柱层析分离(PE∶EA＝1∶1)得((S)-3-(((S)-1-(苄基氨基)-3-环戊基-1-氧代丙烷基)氨基)-3-氧代丙烷-1，2-二基)二氨基甲酸苄酯叔丁酯(0.77g，两步收率90.6％)。ESI-MS m/z calc’d for C₃₁H₄₂N₄O₆ [M+Na]⁺ 589.3，found 589.7.

实施例5终产物的合成

L-N-乙酰亮氨酰-脯氨酰-缬氨酰-3-氨基丙氨酰-环戊基丙氨酰-(S)-2-(4-苯基-1H-苯并[d]咪唑基)吡咯烷的制备：

将((S)-3-(((S)-3-环戊基-1-氧代-1-((S)-2-(4-苯基-1H-苯并[d]咪唑基)吡咯烷基)丙基))氨基)-3-氧代丙烷-1，2-二基)氨基甲酸苄酯(100mg，138μmol，1.0eq)，L-N-乙酰亮氨酰-脯氨酰-缬氨酸(63mg，138μmol，1.0eq)和HATU(63mg，166μmol，1.2eq)溶于DMF(10mL)中，室温搅拌30min，0℃下缓慢滴加DIPEA(54mg，415μmol，3.0eq)，室温反应3h。TLC监测反应完全后，反应液用水稀释，EA萃取三次，有机相用饱和NaCl水溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，硅胶柱层析分离(DCM∶MeOH＝10∶1)得Cbz保护的脯氨酸苯并咪唑终产物。钯碳催化氢化脱Cbz保护(86.2mg，收率74.2％)，经由半制备型高效液相分离纯化(洗脱梯度从70％A液和30％的B液到40％A液和60％的B液)，冷冻干燥得L-N-乙酰亮氨酰-脯氨酰-缬氨酰-3-氨基丙氨酰-环戊基丙氨酰-(S)-2-(4-苯基-1H-苯并[d]咪唑基)吡咯烷(纯度高于95％)。¹H-NMR(400MHz，CD₃OD)δ7.75(m，1H)，7.70-7.66(m，2H)，7.65-7.51(m，5H)，5.37(m，1H)，4.74(m，1H)，4.68(m，1H)，4.60(m，1H)，4.51(m，1H)，4.05(d，J＝6.9Hz，1H)，4.03-3.84(m，3H)，3.60(m，1H)，3.37(m，1H)，3.20(m，1H)，2.57(m，1H)，2.35-1.99(m，7H)，1.98(s，3H)，1.95-1.64(m，9H)，1.64-1.50(m，4H)，1.27-1.16(m，2H)，1.02-0.95(m，12H)；ESI-MSm/z calc’d for C₄₆H₆₅N₉O₆ [M+H]⁺ 841.1，found 841.1.

L-N-乙酰亮氨酰-脯氨酰-缬氨酰-3-氨基丙氨酰-环戊基丙氨酰-(S)-2-(4-苯基-1H-苯并[d]咪唑基)乙酰胺的制备：¹H-NMR(400MHz，CD₃OD)δ7.76(m，1H)，7.70-7.63(m，3H)，7.63-7.57(m，3H)，7.55(m，1H)，5.31(m，1H)，4.72(m，1H)，4.58(m，1H)，4.49(m，1H)，4.41(m，1H)，3.98(d，J＝7.0Hz，1H)，3.89(m，1H)，3.62(m，1H)，3.37(m，1H)，3.23(m，1H)，2.21(m，1H)，2.16-2.01(m，3H)，2.00(s，3H)，1.97(m，1H)，1.86(m，1H)，1.82-1.79(m，2H)，1.78-1.75(m，5H)，1.69-1.46(m，7H)，1.24-1.09(m，2H)，1.04-0.94(m，12H)；ESI-MS m/z calc’dfor C₄₄H₆₃N₉O₆ [M+H]⁺ 815.1，found 815.1.

L-N-乙酰亮氨酰-脯氨酰-缬氨酰-3-氨基丙氨酰-环戊基丙氨酰-(S)-2-(4-苯基-1H-苯并[d]咪唑基)-2-甲基丙酰胺的制备：¹H-NMR(400MHz，CD₃OD)δ7.81(m，1H)，7.70-7.65(m，3H)，7.63-7.59(m，3H)，7.55(m，1H)，5.03(m，1H)，4.73(m，1H)，4.59(m，1H)，4.50(m，1H)，4.43(m，1H)，4.00(d，J＝7.0Hz，1H)，3.88(m，1H)，3.63(m，1H)，3.38(m，1H)，3.24(m，1H)，2.44(m，1H)，2.21(m，1H)，2.15-2.01(m，3H)，2.00(s，3H)，1.87-1.67(m，7H)，1.66-1.53(m，4H)，1.51-1.43(m，2H)，1.19(d，J＝6.5Hz，3H)，1.16-1.05(m，2H)，1.04-0.92(m，15H)；ESI-MS m/z calc’d for C₄₆H₆₇N₉O₆ [M+H]⁺ 843.1，found 843.2.

L-N-乙酰-亮氨酰-脯氨酰-缬氨酰-3-氨基丙氨酰-环戊基丙氨酰-(S)-2-(4-苯基-1H-苯并[d]咪唑基)-2-甲基丁酰胺的制备：¹H-NMR(400MHz，CD₃OD)δ7.81(m，1H)，7.71-7.64(m，3H)，7.63-7.58(m，3H)，7.56(m，1H)，5.11(d，J＝9.5Hz，1H)，4.73(m，1H)，4.60(m，1H)，4.50(m，1H)，4.42(m，1H)，4.00(d，J＝7.1Hz，1H)，3.89(m，1H)，3.63(m，1H)，3.39(m，1H)，3.24(m，1H)，2.30-2.18(m，2H)，2.17-2.01(m，3H)，2.00(s，3H)，1.86-1.66(m，7H)，1.63-1.54(m，4H)，1.47-1.43(m，2H)，1.42-1.31(m，2H)，1.20-1.06(m，2H)，1.04-0.94(m，15H)，0.88(d，J＝6.8Hz，3H)；ESI-MS m/z calc’d for C₄₇H₆₉N₉O₆ [M+H]⁺ 857.1，found857.2.

L-N-乙酰-亮氨酰-脯氨酰-缬氨酰-3-氨基丙氨酰-环戊基丙氨酰-(S)-2-(4-苯基-1H-苯并[d]咪唑基)-3-甲基丁酰胺的制备：¹H-NMR(400MHz，CD₃OD)δ7.77(m，1H)，7.70-7.63(m，3H)，7.63-7.51(m，4H)，5.38(m，1H)，4.72(m，1H)，4.59(m，1H)，4.50(m，1H)，4.40(m，1H)，3.99(d，J＝7.0Hz，1H)，3.89(m，1H)，3.63(m，1H)，3.37(m，1H)，3.24(m，1H)，2.21(m，1H)，2.15-2.03(m，4H)，2.00(s，3H)，1.92-1.68(m，9H)，1.66-1.54(m，4H)，1.53-1.44(m，2H)，1.21-1.10(m，2H)，1.05-0.95(m，18H)；ESI-MS m/z calc’d for C₄₇H₆₉N₉O₆ [M+H]⁺857.1，found 857.2.

L-N-乙酰-亮氨酰-脯氨酰-缬氨酰-3-氨基丙氨酰-环戊基丙氨酰-(S)-2-(4-苯基-1H-苯并[d]咪唑基)-2-苯基乙酰胺的制备：¹H-NMR(300MHz，CD₃OD)δ7.74(m，1H)，7.62(m，1H)，7.57-7.49(m，6H)，7.31-7.24(m，3H)，7.21-7.16(m，2H)，5.49(m，1H)，4.73(m，1H)，4.59(m，1H)，4.50(m，1H)，4.38(m，1H)，4.01(d，J＝7.0Hz，1H)，3.89(m，1H)，3.63(m，1H)，3.52(m，1H)，3.41(m，1H)，3.22(m，1H)，2.22(m，1H)，2.15-2.02(m，3H)，2.00(s，3H)，1.95(m，1H)，1.85-1.68(m，7H)，1.65-1.41(m，6H)，1.19-1.04(m，2H)，1.05-0.93(m，12H)；ESI-MS m/z calc’d for C₅₀H₆₇N₉O₆ [M+H]⁺ 891.1，found 891.2.

L-N-乙酰亮氨酰-脯氨酰-缬氨酰-3-氨基丙氨酰-环戊基丙氨酰-(S)-2-(5-苯基-1H-苯并[d]咪唑基)吡咯烷的制备：¹H-NMR(400MHz，CD₃OD)δ7.93(m，1H)，7.86-7.80(m，2H)，7.72-7.68(m，2H)，7.54-7.49(m，2H)，7.43(m，1H)，5.37(m，1H)，4.74(m，1H)，4.69(m，1H)，4.60(m，1H)，4.51(m，1H)，4.05-4.01(m，2H)，3.98-3.84(m，3H)，3.60(m，1H)，3.23(m，1H)，2.61(m，1H)，2.37-2.18(m，4H)，2.17-2.00(m，4H)，1.98(s，3H)，1.89-1.69(m，7H)，1.65-1.51(m，5H)，1.26-1.21(m，2H)，1.06-0.92(m，12H)；ESI-MS m/z calc’d for C₄₆H₆₅N₉O₆ [M+H]⁺ 841.1，found 841.2.

L-N-乙酰亮氨酰-脯氨酰-缬氨酰-3-氨基丙氨酰-环戊基丙氨酰-(S)-2-(5-苯基-1H-苯并[d]咪唑基)乙酰胺的制备：¹H-NMR(300MHz，CD₃OD)δ7.96(m，1H)，7.86-7.84(m，2H)，7.72-7.67(m，2H)，7.53-7.39(m，3H)，5.39(m，1H)，4.76(m，1H)，4.60(m，1H)，4.50(m，1H)，4.45(m，1H)，4.02(d，J＝6.7Hz，1H)，3.88(m，1H)，3.64(m，1H)，3.42(m，1H)，3.26(m，1H)，2.19(m，1H)，2.15-2.01(m，3H)，1.99(s，3H)，1.81(s，9H)，1.70-1.46(m，7H)，1.22-1.11(m，2H)，1.02-0.95(m，12H)；ESI-MS m/z calc’d for C₄₄H₆₃N₉O₆ [M+H]⁺ 815.0，found 815.1.

L-N-乙酰亮氨酰-脯氨酰-缬氨酰-3-氨基丙氨酰-环戊基丙氨酰-(S)-2-(5-苯基-1H-苯并[d]咪唑基)-2-甲基丙酰胺的制备：¹H-NMR(300MHz，CD₃OD)δ8.00(m，1H)，7.88-7.84(m，2H)，7.73-7.67(m，2H)，7.53-7.39(m，3H)，5.06(m，1H)，4.77(m，1H)，4.60(m，1H)，4.53-4.43(m，2H)，4.03(d，J＝6.6Hz，1H)，3.89(m，1H)，3.64(m，1H)，3.40(m，1H)，3.25(m，1H)，2.48(m，1H)，2.22(m，1H)，2.16-2.00(m，3H)，1.99(s，3H)，1.86-1.72(m，6H)，1.67-1.56(m，4H)，1.52-1.27(m，3H)，1.22-1.18(m，3H)，1.13-1.06(m，2H)，1.04-0.92(m，15H)；ESI-MSm/z calc’d for C₄₆H₆₇N₉O₆ [M+H]⁺ 843.1，found 843.2.

L-N-乙酰亮氨酰-脯氨酰-缬氨酰-3-氨基丙氨酰-环戊基丙氨酰-(S)-2-(5-苯基-1H-苯并[d]咪唑基)-2-甲基丁酰胺的制备：¹H-NMR(300MHz，CD₃OD)δ7.99(m，1H)，7.86-7.83(m，2H)，7.72-7.67(m，2H)，7.52-7.38(m，3H)，5.12(m，1H)，4.78(m，1H)，4.61(m，1H)，4.51(m，1H)，4.46(m，1H)，4.03(d，J＝6.7Hz，1H)，3.89(m，1H)，3.63(m，1H)，3.41(m，1H)，3.25(m，1H)，2.31-2.17(m，2H)，2.16-2.01(m，3H)，1.99(s，3H)，1.90-1.65(m，8H)，1.62-1.54(m，4H)，1.50-1.35(m，3H)，1.24-1.07(m，2H)，1.03-0.92(m，18H)；ESI-MS m/z calc’d forC₄₇H₆₉N₉O₆ [M+H]⁺ 857.1，found 857.2.

L-N-乙酰亮氨酰-脯氨酰-缬氨酰-3-氨基丙氨酰-环戊基丙氨酰-(S)-2-(5-苯基-1H-苯并[d]咪唑基)-3-甲基丁酰胺的制备：¹H-NMR(300MHz，CD₃OD)δ7.95(m，1H)，7.85-7.81(m，2H)，7.72-7.67(m，2H)，7.53-7.39(m，3H)，5.38(m，1H)，4.75(m，1H)，4.59(m，1H)，4.50(m，1H)，4.42(m，1H)，4.01(m，1H)，3.88(m，1H)，3.62(m，1H)，3.41(m，1H)，3.25(m，1H)，2.26-2.01(m，5H)，2.00(s，3H)，1.90(m，1H)，1.86-1.70(m，7H)，1.69-1.43(m，7H)，1.24-1.10(m，2H)，1.07-0.95(m，18H).ESI-MS m/z calc’d for C₄₇H₆₉N₉O₆ [M+H]⁺ 857.1，found857.2.

L-N-乙酰亮氨酰-脯氨酰-缬氨酰-3-氨基丙氨酰-环戊基丙氨酰-(S)-2-(5-苯基-1H-苯并[d]咪唑基)-2-苯基乙酰胺的制备：¹H-NMR(300MHz，CD₃OD)δ7.77-7.65(m，4H)，7.63-7.49(m，7H)，7.48-7.44(m，2H)，5.40-5.21(m，2H)，4.75(m，1H)，4.52(m，1H)，4.46-4.27(m，3H)，3.94(m，1H)，3.75(m，1H)，3.42(m，1H)，3.18(m，1H)，2.58(m，1H)，2.30-1.86(m，6H)，1.85-1.69(m，10H)，1.70-1.41(m，6H)，1.40-1.06(m，4H)，1.06-0.96(m，2H)，0.93-0.69(m，6H)；ESI-MS m/z calc’d for C₅₉H₆₇N₉O₆ [M+H]⁺ 891.1，found 891.2.

L-N-乙酰亮氨酰-脯氨酰-缬氨酰-3-氨基丙氨酰-环戊基丙氨酰-(S)-2-(1H-苯并[d]咪唑基)吡咯烷的制备：¹H-NMR(300MHz，CD₃OD)δ7.81-7.76(m，2H)，7.61-7.57(m，2H)，5.37(m，1H)，4.75(m，1H)，4.71-4.56(m，2H)，4.51(m，1H)，4.12-3.95(m，3H)，3.87(m，1H)，3.60(m，1H)，3.38(m，1H)，3.19(m，1H)，2.61(m，1H)，2.36-2.16(m，4H)，2.15-2.00(m，3H)，1.98(s，3H)，1.96-1.64(m，9H)，1.62-1.50(m，4H)，1.27-1.14(m，2H)，1.04-0.94(m，12H).ESI-MS m/z calc’d for C₄₀H₆₁N₉O₆ [M+H]⁺764.5，found 764.6.

L-N-4-甲基戊酰脯氨酰-缬氨酰-3-氨基丙氨酰-环戊基丙氨酰-(S)-2-(4-苯基-1H-苯并[d]咪唑基)乙酰胺的制备：¹H-NMR(400MHz，CD₃OD)δ7.76(m，1H)，7.71-7.57(m，6H)，7.54(m，1H)，5.34(m，1H)，4.63(m，1H)，4.39-4.34(m，2H)，3.86(d，J＝8.3Hz，1H)，3.72(m，1H)，3.61(m，1H)，3.40(m，1H)，3.28(m，1H)，2.42-2.36(m，2H)，2.25(m，1H)，2.15-1.96(m，5H)，1.94-1.81(m，3H)，1.78(d，J＝7.2Hz，3H)，1.69-1.59(m，3H)，1.57-1.45(m，5H)，1.22-1.09(m，2H)，1.01(d，J＝6.7Hz，3H)，0.97-0.92(m，9H)；ESI-MS m/z calc’d for C₄₂H₆₀N₈O₄[M+Na]⁺ 779.5，found 779.9.

L-N-苯甲酰脯氨酰-缬氨酰-3-氨基丙氨酰-环戊基丙氨酰-(S)-2-(4-苯基-1H-苯并[d]咪唑基)乙酰胺的制备：¹H-NMR(400MHz，CD₃OD)δ7.77(m，1H)，7.70-7.65(m，3H)，7.63-7.59(m，5H)，7.57-7.37(m，4H)，5.33(m，1H)，4.69(m，1H)，4.60(m，1H)，4.40(m，1H)，4.00(d，J＝7.7Hz，1H)，3.75-3.56(m，2H)，3.37(m，1H)，3.22(m，1H)，2.37(m，1H)，2.17-1.87(m，5H)，1.84-1.73(m，7H)，1.68-1.60(m，2H)，1.57-1.45(m，2H)，1.24-1.09(m，2H)，1.06-0.99(m，6H)；ESI-MS m/z calc’d for C₄₃H₅₄N₈O₄ [M+Na]⁺ 785.4，found 785.9.

L-N-4-甲基戊酰-脯氨酰-缬氨酰-3-甲基氨基丙氨酰-环戊基丙氨酰-(S)-2-(4-苯基-1H-苯并[d]咪唑基)乙酰胺的制备：¹H-NMR(400MHz，CD₃OD)δ7.79(m，1H)，7.70-7.66(m，3H)，7.63-7.51(m，4H)，5.35(m，1H)，4.68(m，1H)，4.40-4.30(m，2H)，3.84(d，J＝8.6Hz，1H)，3.73(m，1H)，3.61(m，1H)，3.55-3.35(m，2H)，2.76(s，3H)，2.42-2.35(m，2H)，2.26(m，1H)，2.15-1.96(m，4H)，1.96-1.81(m，4H)，1.79(d，J＝7.3Hz，3H)，1.69-1.58(m，3H)，1.57-1.44(m，5H)，1.21-1.09(m，2H)，1.03-0.89(m，12H)；ESI-MS m/z calc’d for C₄₃H₆₂N₈O₄ [M+Na]⁺ 793.4，found 793.9.

L-N-苯甲酰脯氨酰-缬氨酰-3-甲基氨基-丙氨酰-环戊基丙氨酰-(S)-2-(4-苯基-1H-苯并[d]咪唑基)乙酰胺的制备：¹H-NMR(400MHz，CD₃OD)δ7.76(m，1H)，7.70-7.65(m，3H)，7.62-7.37(m，9H)，5.31(m，1H)，4.77(m，1H)，4.60(m，1H)，4.40(m，1H)，3.99(d，J＝7.8Hz，1H)，3.72-3.55(m，2H)，3.41(m，1H)，3.28(m，1H)，2.65(s，3H)，2.43-2.32(m，1H)，2.19-1.86(m，6H)，1.83-1.80(m，2H)，1.77(d，J＝7.1Hz，3H)，1.73(m，1H)，1.69-1.60(m，2H)，1.56-1.46(m，2H)，1.23-1.11(m，2H)，1.08-0.98(m，6H)；ESI-MS m/z calc’d forC₄₄H₅₆N₈O₄ [M+Na]⁺ 799.4，found 799.9.

L-N-乙酰亮氨酰-脯氨酰-缬氨酰-3-氨基丙氨酰-环戊基丙氨酰-(S)-2-(1-甲基-4-苯基-1H-咪唑)吡咯烷的制备：

将((S)-3-(((S)-3-环戊基-1-((S)-2-(1-甲基-4-苯基-1H-咪唑基)吡咯烷基)-1-氧代丙烷基)氨基)-3-氧代丙烷-1，2-二基)氨基甲酸苄酯(100mg，146μmol，1.0eq)，L-N-乙酰亮氨酰-脯氨酰-缬氨酸(67mg，146μmol，1.0eq)和HATU(66mg，175μmol，1.2eq)溶于DMF(10mL)中，室温搅拌30min，0℃下缓慢滴加DIPEA(56mg，437μmol，3.0eq)，室温反应3h。TLC监测反应完全后，反应液用水稀释，EA萃取三次，有机相用饱和NaCl水溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，硅胶柱层析分离(DCM∶MeOH＝10∶1)得Cbz保护的N-甲基脯氨酸咪唑终产物。钯碳催化氢化脱Cbz保护(88.3mg，收率75.4％)，经由半制备型高效液相分离纯化(洗脱梯度从70％A液和30％的B液到40％A液和60％的B液)，冷冻干燥得L-N-乙酰亮氨酰-脯氨酰-缬氨酰-3-氨基丙氨酰-环戊基丙氨酰-(S)-2-(1-甲基-4-苯基-1H-咪唑)吡咯烷(纯度高于95％)。¹H-NMR(400MHz，CD₃OD)δ7.81(s，1H)，7.72-7.68(m，2H)，7.55-7.47(m，3H)，5.26(m，1H)，4.75(m，1H)，4.66-4.60(m，2H)，4.51(m，1H)，4.10-4.04(m，2H)，4.02(s，3H)，3.91-3.83(m，2H)，3.61(m，1H)，3.38(m，1H)，3.22(m，1H)，2.61(m，1H)，2.38-2.00(m，7H)，1.98(s，3H)，1.90-1.45(m，13H)，1.21-1.09(m，2H)，1.04-0.94(m，12H)；ESI-MS m/z calc’dfor C₄₃H₆₅N₉O₆ [M+Na]⁺ 826.5，found 826.6.

L-N-乙酰-亮氨酰-脯氨酰-缬氨酰-3-氨基丙氨酰-环戊基丙氨酰-(S)-2-(1-乙基-4-苯基-1H-咪唑)吡咯烷的制备：¹H-NMR(400MHz，CD₃OD)δ7.91(s，1H)，7.73-7.70(m，2H)，7.55-7.47(m，3H)，5.32(m，1H)，4.76(m，1H)，4.65-4.61(m，2H)，4.51(m，1H)，4.43-4.36(m，2H)，4.08-4.02(m，2H)，3.98-3.84(m，2H)，3.61(m，1H)，3.38(m，1H)，3.22(m，1H)，2.59(m，1H)，2.32(m，1H)，2.27-2.18(m，3H)，2.15-2.00(m，3H)，1.98(s，3H)，1.93-1.82(m，3H)，1.80-1.70(m，4H)，1.68-1.58(m，6H)，1.55-1.45(m，3H)，1.23-1.10(m，2H)，1.03-0.95(m，12H)；ESI-MS m/z calc’d for C₄₄H₆₇N₉O₆ [M+Na]⁺ 840.5，found 840.5.

L-N-乙酰亮氨酰-脯氨酰-缬氨酰-3-氨基丙氨酰-环戊基丙氨酰-(S)-2-(1-异丙基-4-苯基-1H-咪唑)吡咯烷的制备：¹H-NMR(400MHz，CD₃OD)δ8.07(s，1H)，7.73-7.70(m，2H)，7.56-7.49(m，3H)，5.38(m，1H)，4.98(m，1H)，4.76(m，1H)，4.67(m，1H)，4.61(m，1H)，4.51(m，1H)，4.10-4.00(m，2H)，3.95-3.85(m，2H)，3.61(m，1H)，3.42(m，1H)，3.23(m，1H)，2.59(m，1H)，2.34(m，1H)，2.26-2.16(m，3H)，2.14-1.99(m，4H)，1.98(s，3H)，1.93-1.81(m，3H)，1.81-1.73(m，3H)，1.70(d，J＝6.6Hz，3H)，1.68-1.63(m，2H)，1.61(d，J＝6.6Hz，3H)，1.59-1.49(m，4H)，1.20-1.11(m，2H)，1.04-0.95(m，12H)；ESI-MS m/z calc’d forC₄₅H₆₉N₉O₆ [M+Na]⁺ 854.5，found 854.6.

L-N-乙酰亮氨酰-脯氨酰-缬氨酰-3-氨基丙氨酰-环戊基丙氨酰-(S)-2-(1-环己甲基-4-苯基-1H-咪唑)吡咯烷的制备：¹H-NMR(400MHz，CD₃OD)δ7.87(s，1H)，7.72-7.69(m，2H)，7.56-7.49(m，3H)，5.31(m，1H)，4.75(m，1H)，4.69-4.57(m，2H)，4.51(m，1H)，4.30(m，1H)，4.10(mz，1H)，4.05(d，J＝6.9Hz，1H)，3.96-3.84(m，2H)，3.61(m，1H)，3.37-3.36(m，2H)，3.21(m，1H)，2.57(m，1H)，2.34(m，1H)，2.29-2.15(m，3H)，2.15-1.99(m，4H)，1.98(s，3H)，1.88-1.78(m，5H)，1.76-1.71(m，6H)，1.68-1.46(m，7H)，1.41-1.27(m，4H)，1.19-1.13(m，3H)，1.04-0.95(m，12H)；ESI-MS m/z calc’d for C₄₉H₇₅N₉O₆ [M+Na]⁺ 908.6，found908.6.

L-N-乙酰亮氨酰-脯氨酰-缬氨酰-3-氨基丙氨酰-环戊基丙氨酰-(S)-2-(1-环己甲基-4-苯基-1H-咪唑)乙酰胺的制备：¹H-NMR(400MHz，CD₃OD)δ7.90(m，1H)，7.79-7.74(m，2H)，7.56-7.49(m，3H)，5.35(m，1H)，4.70(m，1H)，4.56(m，1H)，4.48(m，1H)，4.34(m，1H)，4.23(m，1H)，4.12(m，1H)，3.97(d，J＝7.2Hz，1H)，3.89(m，1H)，3.65(m，1H)，3.42(m，1H)，3.28(m，1H)，2.25(m，1H)，2.15-2.04(m，3H)，2.02(s，3H)，2.01-1.96(m，2H)，1.86-1.79(m，3H)，1.78-1.71(m，10H)，1.68-1.56(m，4H)，1.54-1.46(m，2H)，1.41-1.25(m，4H)，1.20-1.09(m，4H)，1.05-0.96(m，12H)；ESI-MS m/z calc’d for C₄₇H₇₃N₉O₆ [M+Na]⁺ 882.6，found 882.6.

L-N-4-甲基戊酰脯氨酰-缬氨酰-3-氨基丙氨酰-环戊基丙氨酰-(S)-2-(1-环己甲基-4-苯基-1H-咪唑)吡咯烷的制备：¹H-NMR(400MHz，CD₃OD)δ7.87(s，1H)，7.71-7.68(m，2H)，7.56-7.49(m，3H)，5.30(m，1H)，4.68(m，1H)，4.66(m，1H)，4.45(m，1H)，4.30(m，1H)，4.13-3.99(m，3H)，3.89(m，1H)，3.70-3.57(m，2H)，3.38(m，1H)，3.20(m，1H)，2.59(m，1H)，2.42-2.36(m，2H)，2.28-1.96(m，8H)，1.88-1.71(m，10H)，1.68-1.58(m，3H)，1.55-1.45(m，4H)，1.43-1.27(m，4H)，1.25-1.07(m，4H)，1.06-0.98(m，6H)，1.00-0.90(m，6H)；ESI-MS m/z calc’d for C₄₇H₇₂N₈O₄ [M+Na]⁺ 851.6，found 851.9.

L-N-苯甲酰脯氨酰-缬氨酰-3-氨基丙氨酰-环戊基丙氨酰-(S)-2-(1-环己甲基-4-苯基-1H-咪唑)吡咯烷的制备：¹H-NMR(400MHz，CD₃OD)δ7.87(s，1H)，7.73-7.69(m，2H)，7.61-7.57(m，2H)，7.53-7.45(m，6H)，5.30(m，1H)，4.77(m，1H)，4.67-4.62(m，2H)，4.29(m，1H)，4.09-4.05(m，2H)，3.92(m，1H)，3.77-3.53(m，3H)，3.37(m，1H)，3.20(m，1H)，2.56(m，1H)，2.37-2.21(m，4H)，2.06-1.79(m，9H)，1.78-1.70(m，4H)，1.69-1.57(m，2H)，1.59-1.49(m，2H)，1.38-1.25(m，4H)，1.21-1.10(m，5H)，1.08-1.02(m，6H)；ESI-MS m/z calc’d forC₄₈H₆₆N₈O₄ [M+Na]⁺ 857.5，found 857.9.

L-N-4-甲基戊酰脯氨酰-缬氨酰-3-甲基氨基丙氨酰-环戊基丙氨酰-(S)-2-(1-环己甲基-4-苯基-1H-咪唑)吡咯烷制备：¹H-NMR(400MHz，CD₃OD)δ7.87(m，1H)，7.73-7.69(m，2H)，7.56-7.48(m，3H)，5.30(m，1H)，4.74-4.57(m，2H)，4.47-4.25(m，2H)，4.18-3.86(m，4H)，3.68-3.42(m，3H)，3.29(m，1H)，2.77(s，3H)，2.56(m，1H)，2.42-2.14(m，7H)，2.07-1.92(m，4H)，1.86-1.70(m，10H)，1.68-1.44(m，7H)，1.39-1.27(m，3H)，1.22-1.10(m，4H)，1.04-0.99(m，6H)，0.97-0.90(m，6H)；ESI-MS m/z calc’d for C₄₈H₇₄N₈O₄ [M+Na]⁺ 865.6，found 865.9.

L-N-乙酰亮氨酰-脯氨酰-缬氨酰-3-氨基丙氨酰-环戊基丙氨酰-(S)-2-(1-萘基)乙酰胺的制备：

将((S)-3-(((S)-3-环戊基-1-(((S)-1-(萘基)乙基)氨基)-1-氧代丙烷基)氨基)-3-氧代丙烷-1-甲酸叔丁酯-1，2-二基)氨基甲酸苄酯(95mg，150μmol，1.0eq)，L-N-乙酰亮氨酰-脯氨酰-缬氨酸(69mg，150μmol，1.0eq)和HATU(68mg，180μmol，1.2eq)溶于DMF(10mL)中，室温搅拌30min，0℃下缓慢滴加DIPEA(58mg，450μmol，3.0eq)，室温反应3h。TLC监测反应完全后，反应液用水稀释，EA萃取三次，有机相用饱和NaCl水溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，硅胶柱层析分离(DCM∶MeOH＝10∶1)得Cbz保护的1-萘基胺终产物。钯碳催化氢化脱Cbz保护(81.9mg，收率73.0％)，经由半制备型高效液相分离纯化(洗脱梯度从70％A液和30％的B液到40％A液和60％的B液)，冷冻干燥得L-N-乙酰亮氨酰-脯氨酰-缬氨酰-3-氨基丙氨酰-环戊基丙氨酰-(S)-2-(1-萘基)乙酰胺(纯度高于95％)。¹H-NMR(300MHz，CD₃OD)δ8.09(m，1H)，7.90(m，1H)，7.81(m，1H)，7.59-7.43(m，4H)，5.84(m，1H)，4.76(m，1H)，4.62(m，1H)，4.52(m，1H)，4.36(m，1H)，4.06(d，J＝6.9Hz，1H)，3.89(m，1H)，3.61(m，1H)，3.38(m，1H)，3.23(m，1H)，2.19(m，1H)，2.15-2.00(m，3H)，1.99(s，3H)，1.82-1.66(m，6H)，1.64(d，J＝6.9Hz，3H)，1.62-1.49(m，4H)，1.46-1.33(m，3H)，1.16-1.04(m，2H)，1.04-0.95(m，12H)；ESI-MS m/z calc’d for C₄₁H₆₁N₇O₆ [M+Na]⁺ 770.5，found 770.8.

L-N-乙酰亮氨酰-脯氨酰-缬氨酰-3-氨基丙氨酰-环戊基丙氨酰-(S)-2-(2-萘基)乙酰胺的制备：¹H-NMR(300MHz，CD₃OD)δ7.87-7.76(m，4H)，7.52-7.42(m，3H)，5.18(m，1H)，4.77(m，1H)，4.62(m，1H)，4.53(m，1H)，4.40(m，1H)，4.06(d，J＝6.9Hz，1H)，3.88(m，1H)，3.61(m，1H)，3.40(m，1H)，3.24(m，1H)，2.19(m，1H)，2.16-2.01(m，3H)，1.99(s，3H)，1.86-1.65(m，6H)，1.64-1.52(m，7H)，1.52-1.39(m，2H)，1.23-1.05(m，3H)，1.05-0.94(m，12H)；ESI-MS m/z calc’d for C₄₁H₆₁N₇O₆ [M+Na]⁺ 770.5，found 770.7.

L-N-乙酰亮氨酰-脯氨酰-缬氨酰-3-氨基丙氨酰-环戊基丙氨酰-(S)-2-(4-乙基苯基)乙酰胺的制备：¹H-NMR(300MHz，CD₃OD)δ7.26-7.14(m，4H)，4.97(m，1H)，4.75(m，1H)，4.62(m，1H)，4.53(m，1H)，4.36(m，1H)，4.05(d，J＝6.9Hz，1H)，3.89(m，1H)，3.61(m，1H)，3.37(m，1H)，3.22(m，1H)，2.63(q，J＝7.5Hz，2H)，2.25-2.17(m，1H)，2.17-2.00(m，3H)，1.99(s，3H)，1.84-1.72(m，3H)，1.72-1.48(m，9H)，1.46(d，J＝7.0Hz，3H)，1.37-1.27(m，2H)，1.22(t，J＝7.6Hz，3H)，1.18-1.06(m，2H)，1.05-0.95(m，12H)；ESI-MS m/z calc’dfor C₃₉H₆₃N₇O₆ [M+Na]⁺ 748.5，found 748.8.

L-N-乙酰亮氨酰-脯氨酰-缬氨酰-3-氨基丙氨酰-环戊基丙氨酰-(S)-2-(4-异丙基苯基)乙酰胺的制备：¹H-NMR(300MHz，CD₃OD)δ7.26-7.17(m，4H)，4.97(m，1H)，4.75(m，1H)，4.62(m，1H)，4.53(m，1H)，4.36(m，1H)，4.05(d，J＝6.9Hz，1H)，3.90(m，1H)，3.61(m，1H)，3.38(m，1H)，3.22(m，1H)，2.88(m，1H)，2.25-2.00(m，4H)，1.99(s，3H)，1.80-1.48(m，11H)，1.46(d，J＝7.1Hz，3H)，1.38-1.28(m，2H)，1.24(d，J＝7.0Hz，6H)，1.19-1.06(m，2H)，1.05-0.96(m，12H)；ESI-MS m/z calc’d for C₄₀H₆₅N₇O₆ [M+Na]⁺ 762.5，found 762.9.

L-N-乙酰亮氨酰-脯氨酰-缬氨酰-3-氨基丙氨酰-环戊基丙氨酰-(S)-2-4-甲基戊酰胺的制备：¹H-NMR(300MHz，CD₃OD)δ4.76(m，1H)，4.62(m，1H)，4.53(m，1H)，4.29(m，1H)，4.06(d，J＝6.9Hz，1H)，3.98(m，1H)，3.90(m，1H)，3.62(m，1H)，3.38(m，1H)，3.23(m，1H)，2.26-2.01(m，4H)，1.99(s，3H)，1.92-1.77(m，4H)，1.77-1.64(m，5H)，1.64-1.40(m，6H)，1.29-1.16(m，3H)，1.12(d，J＝6.6Hz，3H)，1.06-0.89(m，18H)；ESI-MS m/z calc’d forC₃₅H₆₃N₇O₆ [M+Na]⁺ 700.5，found 700.9.

L-N-乙酰亮氨酰-脯氨酰-缬氨酰-3-氨基丙氨酰-环戊基丙氨酰-(S)-2-(环己基)乙酰胺的制备：¹H-NMR(300MHz，CD₃OD)δ4.75(m，1H)，4.62(m，1H)，4.53(m，1H)，4.33(m，1H)，4.06(d，J＝6.9Hz，1H)，3.89(m，1H)，3.73-3.58(m，2H)，3.37(m，1H)，3.22(m，1H)，2.20(m，1H)，2.15-2.02(m，3H)，1.99(s，3H)，1.93-1.82(m，3H)，1.82-1.64(m，12H)，1.62-1.52(m，4H)，1.36-1.28(m，3H)，1.27-1.17(m，4H)，1.11(d，J＝6.8Hz，3H)，1.04-0.97(m，12H)；ESI-MS m/z calc’d for C₃₇H₆₅N₇O₆ [M+Na]⁺ 726.5，found 726.8.

L-N-乙酰亮氨酰-脯氨酰-缬氨酰-3-氨基丙氨酰-环戊基丙氨酰-(S)-2-(邻甲基苯基)乙酰胺的制备：¹H-NMR(300MHz，CD₃OD)δ7.31(m，1H)，7.21-7.11(m，3H)，5.22(m，1H)，4.75(m，1H)，4.63(m，1H)，4.52(m，1H)，4.38(m，1H)，4.08(m，1H)，3.89(m，1H)，3.62(m，1H)，3.40(m，1H)，3.25(m，1H)，2.38(s，3H)，2.22-2.00(m，4H)，1.99(s，3H)，1.84-1.73(m，3H)，1.73-1.66(m，3H)，1.66-1.47(m，6H)，1.44(d，J＝7.0Hz，3H)，1.23-1.04(m，3H)，1.04-0.95(m，12H)；ESI-MS m/z calc’d for C₃₈H₆₁N₇O₆ [M+Na]⁺ 734.5，found 734.9.

L-N-乙酰亮氨酰-脯氨酰-缬氨酰-3-氨基丙氨酰-环戊基丙氨酰-(S)-2-(间甲基苯基)乙酰胺的制备：¹H-NMR(300MHz，CD₃OD)δ7.24(m，1H)，7.14-7.06(m，3H)，4.75(m，1H)，4.63(m，1H)，4.53(m，1H)，4.37(m，1H)，4.06(m，1H)，3.88(m，2H)，3.64(m，1H)，3.39(m，1H)，3.22(m，1H)，2.71(m，1H)，2.25-2.02(m，5H)，1.99(s，3H)，1.85-1.49(m，13H)，1.46(d，J＝7.1Hz，3H)，1.21-1.06(m，3H)，1.05-0.96(m，12H)；ESI-MS m/z calc’d for C₃₈H₆₁N₇O₆ [M+Na]⁺ 734.5，found 734.9.

L-N-乙酰亮氨酰-脯氨酰-缬氨酰-3-氨基丙氨酰-环戊基丙氨酰-(S)-2-(对甲基苯基)乙酰胺的制备：¹H-NMR(300MHz，CD₃OD)δ7.24-7.11(m，4H)，4.98(m，1H)，4.74(m，1H)，4.63(m，1H)，4.53(m，1H)，4.36(m，1H)，4.07(d，J＝6.9Hz，1H)，3.99(m，1H)，3.62(m，1H)，3.40(m，1H)，3.24(m，1H)，2.31(s，3H)，2.20(m，1H)，2.15-2.01(m，3H)，1.99(s，3H)，1.82-1.74(m，3H)，1.73-1.66(m，3H)，1.66-1.48(m，6H)，1.46(d，J＝7.0Hz，3H)，1.23-1.05(m，3H)，1.05-0.96(m，12H)；ESI-MS m/z calc’d for C₃₈H₆₁N₇O₆ [M+Na]⁺ 734.5，found734.9.

L-N-乙酰亮氨酰-脯氨酰-缬氨酰-3-氨基丙氨酰-环戊基丙氨酰-(S)-2-(3-吡啶)乙酰胺的制备：¹H-NMR(300MHz，CD₃OD)δ8.95(s，1H)，8.85(m，1H)，8.34(m，1H)，7.89(m，1H)，5.12(m，1H)，4.74(m，1H)，4.60(m，1H)，4.50(m，1H)，4.35(m，1H)，4.04(m，1H)，3.89(m，1H)，3.63(m，1H)，3.42(m，1H)，3.27(m，1H)，2.27-2.02(m，4H)，2.00(s，3H)，1.88-1.69(m，6H)，1.68-1.61(m，3H)，1.59(d，J＝7.1Hz，3H)，1.57-1.48(m，3H)，1.23-1.05(m，3H)，1.06-0.94(m，12H)；ESI-MS m/z calc’d for C₃₆H₅₈N₈O₆ [M+Na]⁺ 721.4，found 721.9.

L-N-乙酰亮氨酰-脯氨酰-缬氨酰-3-氨基丙氨酰-环戊基丙氨酰-2-苄胺的制备：¹H-NMR(300MHz，CD₃OD)δ7.36-7.21(m，5H)，4.75(m，1H)，4.63(m，1H)，4.52(m，1H)，4.43-4.34(m，3H)，4.07(m，1H)，3.89(m，1H)，3.61(m，1H)，3.40(m，1H)，3.24(m，1H)，2.24-2.01(m，4H)，1.99(s，3H)，1.95-1.73(m，6H)，1.71-1.49(m，6H)，1.26-1.05(m，3H)，1.04-0.96(m，12H).ESI-MS m/z calc’d for C₃₆H₅₇N₇O₆ [M+Na]⁺ 706.4，found 706.9。