一种病毒检测传感器、一种检测病毒浓度的装置和方法

文档序号:1719076 发布日期:2019-12-17 浏览:16次 >En<

阅读说明:本技术 一种病毒检测传感器、一种检测病毒浓度的装置和方法 (virus detection sensor, device and method for detecting virus concentration ) 是由 洪少力 秦莉 张泽芬 张琴韵 汤曼 张南刚 刘侃 于 2019-08-27 设计创作,主要内容包括:本发明公开了一种病毒检测传感器、一种检测病毒浓度的装置和方法,所述传感器包括支架、检测探头和毛细玻璃管,毛细玻璃管内壁上修饰有与待测病毒进行特异性结合的抗体,检测探头包括检测体和光电转化电路,光电转化电路包括光敏元件和光源,检测体固定于支架上,检测体中央设有圆形的检测通道,毛细玻璃管穿过检测通道,毛细玻璃管固定于支架上,检测通道侧壁上对称第一凹槽和第二凹槽,光源固定于第一凹槽中,光敏元件固定于第二凹槽中。该传感器结构简单,设计巧妙,将磁球的遮光性与光电转换巧妙地结合,检测方便快捷。该装置结构简单,能实现病毒地自动化检测,提高了检测的效率和精度。该方法简单,利用标准曲线法进行检测,方便快捷。(the invention discloses a virus detection sensor, a device and a method for detecting virus concentration, wherein the sensor comprises a bracket, a detection probe and a capillary glass tube, an antibody which is specifically combined with a virus to be detected is modified on the inner wall of the capillary glass tube, the detection probe comprises a detection body and a photoelectric conversion circuit, the photoelectric conversion circuit comprises a photosensitive element and a light source, the detection body is fixed on the bracket, a circular detection channel is arranged in the center of the detection body, the capillary glass tube passes through the detection channel, the capillary glass tube is fixed on the bracket, a first groove and a second groove are symmetrically arranged on the side wall of the detection channel, the light source is fixed in the first groove, and the photosensitive element is fixed in the second groove. The sensor has the advantages of simple structure, ingenious design, skillful combination of the light shielding property of the magnetic ball and the photoelectric conversion, and convenient and quick detection. The device simple structure can realize the automated inspection of virus ground, has improved the efficiency and the precision of detection. The method is simple, and convenient and rapid to detect by using a standard curve method.)

一种病毒检测传感器、一种检测病毒浓度的装置和方法

技术领域

本发明涉及生物检测技术领域,具体涉及一种病毒检测传感器、一种检测病毒浓度的装置和方法。

背景技术

目前,由病毒引起的人类疾病种类繁多,不同的病毒有着不同的致病机制,在细胞水平上,病毒主要的破坏作用是导致细胞裂解,从而引起细胞死亡。在多细胞生物中,一旦机体内有足够多的细胞死亡,就会对机体的健康产生影响。一些病毒能够引起慢性感染,可以在机体内不断复制而不受宿主防御系统的影响。受到慢性感染的人群即是病毒携带者,因为他们相当于储存了保持感染性的病毒,当人群中有较高比例的携带者时,这一疾病就可发展为流行疾病。因此,病毒检测技术在生物医学领域具有重要的意义,是人类健康保证的重要一环。

当前临床常用的检测方法多为核酸检测和蛋白检测,检测过程有很高的技术和设备要求。目前常用的病毒技术包括:病毒检测的方法及装置(专利CN201510144530),一种病毒检测装置及其使用方法(CN201711486707),一种病毒性状检测装置(CN201820145057)等。但以上装置实现过程过于繁琐,技术要求高,效率不高,成本大,增加了检查费用,不利于普及。

发明内容

为了解决上述现有技术存在的问题,本发明提供了一种病毒检测传感器、一种检测病毒浓度的装置和方法,该传感器结构简单,设计巧妙,将磁球的遮光性与光电转换巧妙地结合,检测方便快捷,成本低。

该装置结构简单,能实现病毒地自动化检测,提高了检测的效率和检测的精度。

该方法简单,利用标准曲线法进行检测,方便快捷。

实现本发明上述目的所采取的技术方案为:

一种病毒检测传感器,包括支架、检测探头和毛细玻璃管,毛细玻璃管内壁上修饰有与待测病毒进行特异性结合的抗体,检测探头包括检测体和光电转化电路,光电转化电路包括光敏元件和光源,检测体固定于支架上,检测体中央设有圆形的检测通道,毛细玻璃管穿过检测通道,毛细玻璃管与检测通道间隙配合,毛细玻璃管固定于支架上,检测通道侧壁上对称第一凹槽和第二凹槽,光源固定于第一凹槽中,光敏元件固定于第二凹槽中,光源正对光敏元件。

所述的支架包括支撑板和夹具,夹具有两个,夹具包括支撑体和具有弹性的C型卡箍,支撑体上设有半圆形的第三凹槽,第三凹槽的直径与毛细玻璃管的外径相等,支撑体对称固定于支撑板上,检测***于两支撑体之间,毛细玻璃管的两侧分别置于两第三凹槽中,且毛细玻璃管的两侧分别通过C型卡箍固定于两支撑体上。

包括权利要求1所述的病毒检测传感器、动力机构、阀门控制机构、试剂供给机构、磁分离机构和检测机构;

动力机构包括抽气泵、第一抽气支管和第一阀门,第一抽气支管的一端与抽气泵出口连通,第一阀门安装于第一抽气支管上;

试剂供给机构包括N个试剂瓶,第一抽气支管的另一端分别与N个试剂瓶气路连通;

磁分离机构包括微流控芯片、样品排出管和排废管,各试剂瓶通过阀门控制机构控制是否与微流控芯片入口液路连通,微流控芯片包括缓冲液移动通道和样品移动通道,缓冲液移动通道过样品排出管与毛细玻璃管入口连通,样品移动通道与排废管连通。

所述的阀门控制机构包括多路气动电磁阀、控制器和阀控芯片,控制器与多路气动电磁阀连接,多路气动电磁阀具有一个进气口和N个出气口;

阀控芯片包括夹具和玻璃芯片,玻璃芯片包括盖片、有机硅薄膜和基片,玻璃芯片为三明治夹心结构,有机硅薄膜位于盖片和基片之间,且盖片和基片通过夹具固定连接;

盖片上分别设有N个第一进液孔、两个第一排液孔和N个气体通槽,N个气体通槽均通过夹具密封,有机硅薄膜上分别设有N个第二进液孔和两个第二排液孔;

基片上分别设有第一液体通道和第二液体通道,第一液体通道由第一主沟道、第一出液沟道和Q个第一进液分沟道,各第一进液分沟道的一端分别与第一主沟道连通,且其中一个第一进液分沟道与第一主沟道的一端连通,第一出液沟道的一端与第一主沟道的另一端连通,第二液体通道由第二主沟道、第二出液沟道和P个第二进液分沟道,各第二进液分沟道的一端分别与第二主沟道连通,且其中一个第二进液分沟道与第二主沟道的一端连通,第二出液沟道的一端与第二主沟道的另一端连通,Q+P=N;

N个试剂瓶分别与N个第一进液孔连通,N个第一进液孔分别与N个第二进液孔连通,其中Q个第二进液孔分别与Q个第一进液分沟道的另一端连通,剩余的P个第二进液孔分别与P个第二进液分沟道的另一端连通;

N个出气口分别与N个气体通槽连通,且各气体通槽在基片上的投影分隔对应的第一进液分沟道或第二进液分沟道;

动力机构包括还包括第二抽气支管和第二阀门,第二抽气支管的一端与抽气泵出口连通,第二阀门安装于第二抽气支管上,第二抽气支管的另一端与进气口连通;

微流控芯片还包括第一注入口、第二注入口、第一排出口和第二排出口,第一注入口和第一排出口分别与缓冲液移动通道的两端连通,第二注入口和第二排出口分别与样品移动通道的两端连通,第一出液沟道和第二出液沟道的另一端分别与两第二排液孔连通,两第二排液孔分别与两第一排液孔连通,其中一个第一排液孔与第一注入口连通,第一排出口与样品排出管的一端连通,样品排出管的另一端与毛细玻璃管连通,另一个第一排液孔与第二注入口连通,第二排出口与排废管连通。

所述的夹具包括第一夹板和第二夹板,玻璃芯片位于第一夹板和第二夹板之间,第一夹板与盖片密封贴合,第二夹板与基片密封贴合,第一夹板和第二夹板通过螺栓固定连接,第一夹板上连接有N个进液管、两个排液管和N个进气管,N个试剂瓶分别与N个进液管的一端连接,N个进液管的另一端分别N个第一进液孔连接,两个排液管的一端分别与两第一排液孔连通,两排液管的另一端分别与第一注入口和第二注入口连通,N个进气管的一端分别与N个出气口连通,N个进气管的另一端分别与N个气体通槽连通。

所述的试剂供给机构还包括N个注液管和N-1个连通管,N个注液管的一端分别与N个试剂瓶连通,N个注液管的另一端分别与N个进液管的一端连通,第一抽气支管的另一端与第一试剂瓶瓶口连通,相邻两试剂瓶的瓶口通过连通管连通。

还包括迪文屏,病毒检测传感器与控制器连接,控制器与迪文屏连接。

一种检测病毒浓度的方法,包括如下步骤:

1、将磁性微球悬浮液中的磁性微球修饰能与待测病毒进行特异性结合的抗体,得到抗体修饰磁球悬浮液;

2、向含待测病毒的病毒原液中加入抗体修饰磁球悬浮液进行反应,使待测病毒完全与抗体进行特异性结合,同时将病毒原液稀释至病毒浓度为C1、C2……Cm的病毒标准液,C1、C2……Cm依次增大,C1≤5ng/ml,Cm≥155ng/ml;

3、向其中一对试剂瓶中加入封闭试剂,向其中一对试剂瓶中加入去离子水和PBS缓冲液,向其中一个试剂瓶中加入体积为V、浓度为C1的病毒标准液,将盛有浓度为C1的病毒标准液的试剂瓶标记为样品瓶;

4、控制阀门控制机构使盛有封闭试剂的两试剂瓶与微流控芯片入口连通,使盛有封闭试剂的两试剂瓶分别与缓冲液移动通道和样品移动通道连通,开启抽气泵,将封闭试剂分别通入缓冲液移动通道和样品移动通道连通中,减少非特异性吸附,封闭完成后,控制阀门控制机构使盛有封闭试剂的两试剂瓶与微流控芯片入口隔断;

5、控制阀门控制机构使盛有去离子水和PBS缓冲液的两试剂瓶与微流控芯片入口连通,使盛有PBS缓冲液的试剂瓶与缓冲液移动通道道连通、盛有去离子水的试剂瓶与样品移动通道连通,将PBS缓冲液通入缓冲液移动通道中,将离子水样品通入移动通道连通中,清洗缓冲液移动通道和样品移动通道连通,清洗干净后,控制阀门控制机构使盛有去离子水和PBS缓冲液的两试剂瓶与微流控芯片入口隔断;

6、控制阀门控制机构使盛有病毒标准液和PBS缓冲液的两试剂瓶与微流控芯片入口连通,使盛有病毒标准液的试剂瓶与样品移动通道连通,使盛有PBS缓冲液的试剂瓶与缓冲液移动通道连通,将PBS缓冲液通入缓冲液移动通道中,将病毒标准液通入样品移动通道中,病毒标准液中的磁性微球在缓冲液移动通道中富集,并流向毛细玻璃管中,磁性微球在毛细玻璃管处被捕获,当病毒标准液全部通入后,控制阀门控制机构使盛有病毒标准液的试剂瓶与微流控芯片入口隔断,当光敏元件两端的电压的不再变化,控制阀门控制机构使盛有PBS缓冲液的试剂瓶与微流控芯片入口隔断,同时记录光敏元件两端的电压V1

7、将样品瓶中清洗干净后,向样品瓶中加入体积为V、浓度为C2的病毒标准液;或直接向其中一个试剂瓶加入体积为V、浓度为C2的病毒标准液;

8、重复步骤8.4-8.6,此步骤测得光敏元件两端的电压为V2

9、重复步骤8.7-8.8,直至将所有的病毒标准液检测完毕,分别测得光敏元件两端的电压为V3……Vm

10、以病毒标准液的浓度为横坐标,以光敏元件两端的电阻为纵坐标,根据检测的数据进行绘图,拟合后得到标准曲线,根据标准曲线得到标准曲线的函数关系式y=k1x+b1

11、将待测病毒液体用步骤8.3-8.6的方法进行检测,测量光敏元件两端的电压为V’,将V’代入函数关系式,得到待测病毒液体中病毒的浓度。

与现有技术相比,本发明的有益效果和优点在于:

1、本发明实现了病毒检测自动化,可精确注射试剂,减少人工操作中对试剂的浪费,也可以大大减少人工操作失误引起的误差或者错误诊断。

2、本发明利用磁性微米球的磁性实现了对病毒蛋白的分离,并利用磁球黑色的性质,结合光敏电阻的伏安特性,实现了对溶液中病毒浓度的判断,将病毒蛋白的富集和含量检测集成在同一设备上,简化了传统检测过程中繁琐的操作过程。

3、本发明实现简单,成本低,效率高,不需要高端的技术要求,有效简化传统病毒检测复杂的工艺流程。

4、本发明可以运用在前期初步诊断,可减少精密仪器检查的费用,可减少不必要的浪费,节约了检测的成本。

附图说明

图1为病毒检测传感器的结构示意图。

图2为检测体的结构示意图。

图3为光电转化电路的电路图。

图4为检测病毒浓度的装置的结构示意图。

图5为阀控芯片的结构示意图。

图6为阀控芯片的结构***图。

图7为微流控芯片的结构示意图。

图8为病毒标准液中病毒浓度与光敏电阻两端电压的关系点图。

图9为标准曲线图。

其中,1-毛细玻璃管、2-检测体、3-C型卡箍、4-支撑体、5-支撑板、6-第一凹槽、7-第二凹槽、8-发光二极管、9-光敏电阻、10-第三凹槽、11-抽气泵、12-第一抽气支管、13-第一阀门、14-第一试剂瓶、15-第二试剂瓶、16-第三试剂瓶、17-第四试剂瓶、18-第五试剂瓶、19-微流控芯片、20-多路气动电磁阀、21-控制器、22-阀控芯片、23-迪文屏、24-样品排出管、25-排废管、26-第二抽气支管、27-第二阀门、28-注液管、29-连通管、30-缓冲液移动通道、31-样品移动通道、32-第一注入口、33-第二注入口、34-第一排出口、35-第二排出口、36-第一夹板、37-第二夹板、38-进液管、39-排液管、40-进气管、41-盖片、42-有机硅薄膜、43-基片、44-第一进液孔、45-第一排液孔、46-气体通槽、47-第二进液孔、48-第二排液孔、49-第一主沟道、50-第一进液分沟道、51-第一出液沟道、52-第二主沟道、53-第二出液沟道、54-第二进液分沟道、55-第一废液瓶、56-第二废液瓶。

具体实施方式

下面结合附图和具体实施例对本发明进行详细说明。

实施例1

本实施例提供的病毒检测传感器的结构如图1所示,包括支架、检测探头和毛细玻璃管1。

支架包括支撑板和夹具,夹具有两个。夹具包括支撑体4和具有弹性的C型卡箍3,支撑体4和支撑板5均呈方形,支撑体4对称固定于支撑板5的一表面上,两支撑体4的一侧面分别于支撑板紧贴,两支撑体4上与支撑板5平行且不接触的另一侧面上对称有半圆形的第三凹槽10。

检测探头包括检测体2和光电转换电路。光电转化电路包括光敏电阻9和发光二极管8。检测体2呈方形,检测体2不透光,检测体2中央设有圆形的检测通道。如图2所示,检测通道侧壁上对称第一凹槽6和第二凹槽7,发光二极管8固定于第一凹槽6中国,光敏电阻9固定于第二凹槽7中,发光二级管与光敏电阻正相对,光敏电阻能接收发光二极管接收的光。

毛细玻璃管1是透明的,细玻璃管1内壁上修饰有与待测病毒样品进行特异性结合的抗体。毛细玻璃管1穿过检测通道,毛细玻璃管1与检测通道间隙配合。毛细玻璃管1的两侧分别置于两第三凹槽10中,且毛细玻璃管1的两侧分别通过C型卡箍3固定于两支撑体4上。

细玻璃管内壁上修饰抗体的方法为:

1、毛细玻璃管的亲水处理:

1)取5mL试剂管,加入1ml双氧水,再取3ml浓硫酸缓慢沿杯壁加入双氧水中;

2)将毛细玻璃管浸泡在溶液中1小时;

3)用无水乙醇清洗毛细玻璃管;

2、毛细玻璃管的改性:

1)取1mL无水乙醇至离心管中,取25μLAPTES注入至无水乙醇中,混合均匀(注意:取完APTES之后,要迅速封住APTES的试剂瓶,APTES易水解),得到混合溶液;

2)用注射剂取配置好的混合溶液注入毛细玻璃管,采用注射泵注射,速度为2μL/min,时间为5小时左右,注意观察通入过程中是否有气泡,有气泡时需要手动调整;

3)用无水乙醇清洗毛细玻璃管,除去未反应完的APTES;

3、抗体的修饰

1)将EP管放置在梅特勒AT20微量天平中置零,分别用EP管称取10μg/ml的EDC4mg和2μL的抗体;

2)取98μLPBS缓冲液(PH=7.2)于EP管中,加入EDC和抗体,混合均匀,得到抗体备用液;

3)用注射泵将抗体备用液注射至毛细玻璃管中,速度为0.5μL/min,保持半小时,细玻璃管内壁上的抗体修饰完成。

光电转化电路的电路图如图3所示,当光敏电阻接收的光线发生变化,光敏电阻的阻值发生变化,根据分压原理,可知输出电压也会随之发生变化。如果初值过大,超过满电压,可通过用跳线帽串联R1、R2和R3来改变电阻分压值,从而改变初值,改变电阻值之后,将PIC12F683的引脚CALI与地GND短暂连接后电路会自动校准电压值,使得初始电压值在二分之一VCC左右,如此,才可以保证变化电压在有限范围内,具有参考价值。

实施例2

本实施例提供的检测病毒浓度的装置的结构如图4所示,包括实施例1的病毒检测传感器、动力机构、阀门控制机构、试剂供给机构、磁分离机构、检测机构、第一废液瓶55和第二废液瓶56。

动力机构包括抽气泵11、第一抽气支管12、第一阀门13、第二抽气支管26和第二阀门27,第一阀门13和第二阀门27均为电气比例阀。第一抽气支管12和第二抽气支管26的一端均与抽气泵11出口连接,第一阀门13安装于第一抽气支管12上,第二阀门27安装于第二抽气支管26上。

试剂供给机构包括第一试剂瓶14、第二试剂瓶15、第三试剂瓶16、第四试剂瓶17、第五试剂瓶18、注液管28和连通管29,第一抽气支管12的另一端与第一试剂瓶瓶14口连通,第一试剂瓶瓶14口与第二试剂瓶15瓶口通过连通管连通,第二试剂瓶瓶15口与第三试剂瓶16瓶口通过连通管连通,第三试剂瓶16瓶口与第四试剂瓶17瓶口通过连通管连通,第四试剂瓶17瓶口与第五试剂瓶18瓶口通过连通管连通。

阀门控制机构包括多路气动电磁阀20、阀控芯片22和控制器。多路气动电磁阀20多路气动电磁阀20采用ITV-1030电-气比例阀,多路气动电磁阀20具有一个进气口和五个出气口。

阀控芯片包括夹具和玻璃芯片,玻璃芯片包括盖片41、有机硅薄膜42和基片43,有机硅薄膜采用PDMS膜,玻璃芯片为三明治夹心结构,有机硅薄膜42位于盖片41和基片43之间。夹具包括第一夹板36和第二夹板37,玻璃芯片位于第一夹板36和第二夹板37之间,第一夹板36与盖片41密封贴合,第二夹板37与基片43密封贴合,第一夹板36和第二夹板37通过螺栓固定连接,且盖片41和基片43通过第一夹板36和第二夹板37之间的夹合力固定连接。

第一夹板36上连接有五个进液管38、两个排液管39和五个进气管40,盖片上分别设有五个第一进液孔44、两个第一排液孔45和五个气体通槽46,气体通槽46呈L型,有机硅薄膜42上分别设有五个第二进液孔47和两个第二排液孔48。

基片上分别设有第一液体通道和第二液体通道。第一液体通道由第一主沟道49、第一出液沟道51和两个第一进液分沟道50,各第一进液分沟道50的一端分别与第一主沟道49连通,且其中一个第一进液分沟道50与第一主沟道49的一端连通,第一出液沟道50的一端与第一主沟道49的另一端连通。第二液体通道由第二主沟道52、第二出液沟道53和三个第二进液分沟道54,各第二进液分沟道54的一端分别与第二主沟道52连通,且其中一个第二进液分沟道54与第一主沟道52的一端连通,第二出液沟道53的一端与第二主沟道52的另一端连通。

五个出气口分别与五个进气管40的一端连通,五个进气管40的另一端分别与五个气体通槽46连通,且各气体通槽46的其中一平直部分在基片43上的投影与对应的第一进液分沟道50或第二进液分沟道54垂直相交。

五个注液管28的一端分别与第一试剂瓶14、第二试剂瓶15、第三试剂瓶16、第四试剂瓶17和第五试剂瓶18连通,五个注液管28的另一端分别与五个进液管38的一端连通,五个进液管38的另一端分别与五个第一进液孔44连接,五个第一进液孔44分别与其中的五个第二进液孔47连通,其中两个第二进液孔47分别与两个第一进液分沟道50的另一端连通,剩余的三个第二进液孔47分别与三个第二进液分沟道54的另一端连通。两个排液管39的一端分别与两第一排液孔45连通,两第二排液孔48分别与两第一排液孔45连通,第一出液沟道51和第二出液沟道53的另一端分别与两第二排液孔48连通。

磁分离机构包括微流控芯片19、样品排出管24和排废管25。微流控芯片采用中国发明专利《一种用于三维磁泳分离的微流控芯片》(专利申请号201910081980.5)公开的微流控芯片,该微流控芯片包括第一注入口32、第二注入口33、第一排出口34、第二排出口35、缓冲液移动通道30和样品移动通道31。两排液管39的另一端分别与第一注入口32和第二注入口33连通,第一注入口32和第一排出口34分别与缓冲液移动通道30的两端连通,第二注入口33和第二排出口35分别与样品移动通道31的两端连通。第一排出口34与样品排出管24的一端连通,样品排出管24的另一端与毛细玻璃管1连通,第二排出口35与排废管25连通。第一废液瓶55位于毛细玻璃管1出口正下方,第二废液瓶56位于排废管25出口的正下方。

控制器采用STM32f107芯片,光电转化电路和多路气动电磁阀20分别与控制器21连接,控制器21与迪文屏23连接。迪文瓶中设置有多路气动电磁阀工作的程序,在使用时,只需在迪文屏的操作界面上点击开启检测的按钮即可。

实施例3

1、抗体修饰磁球悬浮液的制备:

1)将EP管放置在梅特勒AT20微量天平中置零,分别用EP管称取4mg10μg/ml的EDC和2mg 5μg/ml的NHS;

2)取20μL磁性纳米球于EP管中,然后用移液枪注入PBS缓冲液(PH=6.8),在磁力架上旋转清洗后,用移液枪吸出PBS溶液,依照该方法清洗磁性纳米球三遍,清洗完成之后,向EP管中加入400μL的PBS溶液;

3)将EDC、NHS加入EP管中,EDC较难溶,所以要先加入,再将EP管放在恒温振荡器中振荡30min;

4)振荡后用PBS缓冲液(PH=7.2)在磁力架上清洗三遍,清洗掉多余的EDC和NHS粉末;

5)向EP管中加入H7N9抗体,在恒温振荡器中振荡4小时,得到抗体修饰磁球悬浮液;

2、取五份H7N9病毒原液,向五份病毒原液中分别加入抗体修饰磁球悬浮液,进行特异性反应,使待测病毒完全与抗体进行特异性结合,同时通过抗体修饰磁球悬浮液将五份病毒原液分别稀释至病毒浓度为5ng/ml、12.5ng/ml、16.7ng/ml、25ng/ml、50ng/ml和125ng/ml的病毒标准液;

3、向第一试剂瓶14和第三试剂瓶16中分别加入BSA溶液,向第二试剂瓶15中加入PBS缓冲液,向第四试剂瓶17中加入去离子水,向第五试剂瓶18中加入100μL病毒浓度为5ng/ml的病毒标准液;

4、打开抽气泵11和第二阀门27,在迪文屏23中点击开始检测的按钮,通过迪文屏23自动控制多路气动电磁阀20工作,多路气动电磁阀20自动打开相应的出气口,向相应的气体通槽46中通入气体,气体将有机硅薄膜42上对应的位置压在与第二试剂瓶15连接的第一进液分沟道50以及与第四试剂瓶17和第五试剂瓶18连接的第二进液分沟道54上,使第二试剂瓶15与第一主沟道49隔断以及四试剂瓶17和第五试剂瓶18与第二主沟道52隔断,而第一试剂瓶14与第一主沟道49连通、第三试剂瓶16与第二主沟道52连通,打开第一阀门13,将BSA溶液分别通入缓冲液移动通道30和样品移动通道31连通中,封闭缓冲液移动通道30和样品移动通道31连通,减少缓冲液移动通道和样品移动通道的非特异性吸附,封闭完成后,多路气动电磁阀20自动打开相应的出气口,使第一试剂瓶与第一主沟道隔断、第三试剂瓶与第二主沟道隔断;

5、多路气动电磁阀20自动关闭相应的出气口,使第二试剂瓶15与第一主沟道49连通、第四试剂瓶17与第二主沟道52连通,从而将PBS缓冲液通入缓冲液移动通道30中,将离子水样品通入移动通道连通31中,清洗干净后,多路气动电磁阀自动打开相应的出口,使第二试剂瓶15与第一主沟道49隔断、第四试剂瓶17与第二主沟道52隔断;

6、多路气动电磁阀20自动关闭相应的出气口,使第二试剂瓶15与第一主沟道49连通、第五试剂瓶18与第二主沟道52连通,从而将PBS缓冲液通入缓冲液移动通道30中,将病毒标准液通入移动通道连通31中,病毒标准液中的磁性纳米球在缓冲液移动通道中富集,并流向毛细玻璃管1中,磁性纳米球在毛细玻璃管1处被捕获,磁性纳米球会挡住发光二极管发出的光线,从而引起光敏电阻9电阻值的变化,进而影响光敏电阻9两端的电压值,当病毒标准液全部通入后,多路气动电磁阀20自动打开相应的出气口,使第四试剂瓶与第二主沟道隔断,当迪文屏上显示光敏元件两端的电压不再变化,多路气动电磁阀20自动打开相应的出气口,使第二试剂瓶15与第一主沟道隔断,并记录光敏元件两端的电压,关闭迪文屏上的开始检测的按钮;

7、将第五试剂瓶清洗干净后,向第五试剂瓶中100μL病毒浓度为12.5ng/ml的病毒标准液;

8、重复步骤4-6;

9、重复步骤7-8,将直至将所有的病毒标准液检测完毕,检测结果如下表所示:

病毒浓度(ng/ml) 5 12.5 16.7 25 50 125
电压值(V) 2.4 2.3 2.13 1.45 0.86 0.53

10、以病毒标准液的浓度为横坐标,以光敏元件两端的电阻为纵坐标,根据检测的数据进行绘图,如图8所示,拟合后得到标准曲线,如图9所示,根据标准曲线得到标准曲线的函数关系式y=-0.037x+2.68;

11、将待测病毒液体用步骤3-8的方法进行检测,测量光敏元件两端的电压为V’,将V’代入函数关系式,得到待测病毒液体中病毒的浓度。

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