阅读说明：本技术 一种从番荔枝种子中提取泡番荔枝辛的方法 (A method of it is pungent to extract bubble manaca from sugar apple seed ) 是由 余雁 司文会 于 2019-07-22 设计创作，主要内容包括：本发明涉及从番荔枝种子中提取泡番荔枝辛的方法,其以番荔枝种子为原料,包括(1)、用醇水溶液对番荔枝种子进行提取,得粗提物；(2)、对粗提物进行脱脂处理,得半成品；(3)、将半成品用乙醇-水溶液溶解,制成混浊度低于0.5°的上样溶液,采用大孔树脂D101分离柱,湿法上样以后,静置,至树脂达到吸附平衡,以乙醇-水溶液为洗脱液,进行梯度洗脱或等度分段洗脱,收集泡番荔枝辛质量分数大于30%的洗脱液,合并,浓缩,干燥,得粗品；(4)、对粗品重复步骤(3)的提纯,收集泡番荔枝辛质量分数大于等于95%的洗脱液,合并,浓缩,干燥,即得所述泡番荔枝辛。本发明能从番荔枝种子中高效提取泡番荔枝辛,操作简单,成本低廉,适合大规模生产。(The present invention relates to the pungent method of bubble manaca is extracted from sugar apple seed, using sugar apple seed as raw material, including (1), with alcohol solution sugar apple seed is extracted, obtain crude extract；(2), ungrease treatment is carried out to crude extract, obtains semi-finished product；(3), semi-finished product are dissolved with ethanol-water solution, the load solution that turbidity is lower than 0.5 ° is made, using macroreticular resin D101 splitter, after wet process loading, it stands, until resin reaches adsorption equilibrium, using ethanol-water solution as eluent, carry out gradient elution or isocratic stepwise elution, the eluent that the bubble pungent mass fraction of manaca is greater than 30% is collected, is merged, concentration, it is dry, obtain crude product；(4), the purification of step (3) is repeated to crude product, is collected the eluent that the bubble pungent mass fraction of manaca is more than or equal to 95%, is merged, concentration, drying is pungent to get the bubble manaca.The present invention can from sugar apple seed high efficiency extraction bubble manaca it is pungent, it is easy to operate, it is low in cost, be suitble to large-scale production.)

一种从番荔枝种子中提取泡番荔枝辛的方法

技术领域

本发明一种从番荔枝种子中提取泡番荔枝辛的方法。

背景技术

番荔枝种子为番荔枝属番荔枝科植物番荔枝的干燥成熟种子。番荔枝属植物的种子含有丰富的番荔枝内酯，该类化合物具有显著的抗肿瘤活性。研究表明泡番荔枝辛对小鼠淋巴细胞白血病细胞系L1210的抑制率为紫杉醇的 300倍。

已知，番荔枝种子随产地的不同而含有不同含量的泡番荔枝辛。本发明提供从番荔枝种子中高效提取泡番荔枝辛的方法将具有重要的经济和环境效益。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种从番荔枝种子中高效提取泡番荔枝辛的方法。

为解决上述技术问题，本发明采取如下技术方案：

一种从番荔枝种子中提取泡番荔枝辛的方法，其以番荔枝种子为原料，包括依次进行的如下步骤：

（1）、用醇体积含量为 80wt%~95wt% 的醇水溶液对番荔枝种子进行提取，浓缩提取液，干燥，得粗提物；

（2）、用石油醚对步骤（1）所得粗提物进行脱脂处理，之后使用***多次萃取，合并***酯萃取液，真空减压回收溶剂，得到流体状物质，40℃以下真空干燥得半成品；

（3）、将步骤（2）所得半成品用乙醇-水溶液溶解，制成混浊度低于0.5°的上样溶液，采用大孔树脂 D101分离柱，湿法上样以后，静置，至树脂达到吸附平衡，以乙醇-水溶液为洗脱液，进行梯度洗脱或等度分段洗脱，收集泡番荔枝辛质量分数大于30%的洗脱液，合并，浓缩，干燥，得粗品；

（4）、对步骤（3）所得粗品重复步骤（3）的提纯，收集泡番荔枝辛质量分数大于等于 95%的洗脱液，合并，浓缩，干燥，即得所述泡番荔枝辛。

优选地，所述作为原料的番荔枝种子为干燥的番荔枝种子粉末。粉末大小可以为例如30~100目。

优选地，步骤（1）中，醇可以是甲醇、乙醇等常用于植物提取的醇，但优选为乙醇。所述提取可以在常温下进行。

优选地，步骤（2）中，所述真空干燥的温度为25℃~30℃。

根据本发明的一个具体和优选方面，步骤（3）中，进行梯度洗脱。

根据本发明的又一个具体和优选方面，步骤（4）中，进行梯度洗脱，且将收集的泡番荔枝辛质量分数为大于等于 95% 的洗脱液合并，浓缩，干燥。

根据本发明的又一具体和优选方面，步骤（3）和（4）中，进行等度分段洗脱，以 10%的浓度差为一个间隔段，每段的洗脱体积为 2~3 个柱体积，洗脱液流速为 1~2 个柱体积/小时。

步骤（3）中，所述静置在室温下进行，静置的时间为0.5~1h。

根据本发明，步骤（1）中，醇水溶液的用量一般为番荔枝种子的 10~15 倍（V/G）。

由于以上技术方案的实施，本发明与现有技术相比具有如下优点：

（1）制备过程简单，易于操作；

（2）成本低廉，适合大规模生产，具有应用潜力。

具体实施方式

以下结合具体的实施例，对本发明做进一步详细的说明，但本发明不限于以下实施例。

实施例1

一种从番荔枝种子中提取泡番荔枝辛的方法，其包括依次进行的下列步骤：

（1）、番荔枝种子阴凉处晾干（水分含量 10%），称取粉碎过筛（40 目）后的粉末 5kg，70% 乙醇-水溶液室温浸提 3 次（40L×1、25L×2、12hr×3，每 2hr 溶液循环/搅拌10min），合并 3 次乙醇提取液，55℃ 真空减压浓缩至 1L 流体。

（2）、将步骤（1）所得 100L 流体用石油醚脱脂后，***萃取 3次（100L×3），合并三次***萃取液，真空减压回收溶剂，得到流体状物质，30℃下真空干燥，得到固体粉末430g。

（3）、将步骤（2）所得固体粉末 430 g 加 35℃的90%乙醇水溶液，制成澄清或略混浊（混浊度低于0.5°）的上样溶液，采用大孔树脂 D101 为分离介质，湿法上样以后，放置一段时间（约 0.5~1 小时），以使树脂对化学成分达到吸附平衡；以乙醇-水溶液为洗脱液，收集泡番荔枝辛质量分数大于 30% 的洗脱液，合并，浓缩，干燥，得 153g 粉末状的粗品。

（4）、对步骤（3）粗品，重复步骤（3）的提纯，收集泡番荔枝辛质量分数为大于等于95% 的洗脱液，合并，浓缩，真空干燥 72 小时，得泡番荔枝辛晶体 45 克，纯度为为 95%。

实施例2

一种从番荔枝种子中提取泡番荔枝辛的方法，其基本同实施例1，不同的是，步骤（3）和（4）洗脱采用的是等度分段洗脱，以 10% 的浓度差为一个间隔段，每段的洗脱体积为 2 个柱体积，洗脱液流速为 1 个柱体积/小时。最后得到泡番荔枝辛晶体 45 克，经 HPLC 检测，泡番荔枝辛含量为 95%。

以上对本发明做了详尽的描述，其目的在于让熟悉此领域技术的人士能够了解本发明的内容并加以实施，并不能以此限制本发明的保护范围，凡根据本发明的精神实质所作的等效变化或修饰，都应涵盖在本发明的保护范围内。