具体实施方式

根据本发明，将药物溶液称为“即可灌注(ready to infuse)”溶液或“即可被灌注(ready-to-be-infused)”溶液，即，溶液不需要在给药前的任何在先的稀释或重建或混合。本发明的这一属性使得该药物溶液对使用者非常友好。据设想，可以使用本发明的产品直接静脉内灌注其中所含的溶液，而不需要任何重建或稀释或混合的干预步骤。

如本申请的内容中所用的，术语“稳定的”意思是保持在适用于给药于病人的状态或状况下。特别地，“稳定的溶液”用来表示储存在2℃至8℃或室温下时，持续一段时间物理稳定的溶液，例如，其没有显示出可见颗粒的出现，并且在化学上也是稳定的。如本文中使用的术语“化学上稳定的”表示将剂型储存在室温或2℃至8℃下时，溶液中的杂质，如由溶液中的化学反应形成的那些，在长期储存中保持在可接受的限制内。预期溶液稳定的时间段为12个月或24个月。在一个优选的实施方案中，已经发现根据本发明的溶液在室温或冷藏条件下维持至少24个月时是稳定的。发现了溶液在冷藏条件或室温下通常稳定24至36个月。本发明的大体积灌注剂型由作为唯一的活性成分的吉西他滨或其药物学上可接受的盐组成。

如本申请的内容中所用的，术语“无菌的”意思是已经使剂型处于无菌状态，并且随后没有暴露于微生物污染，即，容纳该无菌组合物的容器的无菌性没有损坏。通常通过由依照美国食品药品监督管理局的现行良好生产规范(“cGMP”)的药物制造商来制备无菌组合物。

术语“大体积”是指至少100ml的体积，例如，在100ml至500ml的范围内，优选110ml至250ml。

根据本发明，装在灌注容器中的溶液的体积可以定制，使得按照处方提供单剂量的盐酸吉西他滨。在一个实施方案中，将10mg/ml浓度的盐酸吉西他滨(以游离碱表示)溶液以对应于每个灌注容器1000mg至3000mg剂量的可变体积分配至灌注瓶中。在另一个实施方案中，盐酸吉西他滨的浓度为15mg/ml。可能注意到，根据盐酸吉西他滨的浓度，可以将可变体积的溶液装入灌注容器中，以获得每个容器所需剂量的盐酸吉西他滨，所述剂量将对应于单个剂量。例如，盐酸吉西他滨的浓度可以为5mg/ml至20mg/ml，优选，8mg/ml至16mg/ml。根据本发明，存在具有5mg/ml至20mg/ml浓度的大体积的盐酸吉西他滨溶液，优选8mg至18mg/ml。相应地，每个容器的溶液体积可以为约100ml至约500ml。

例如，可以在不同体积中提供10mg/ml的盐酸吉西他滨溶液(以游离碱表示)，如100ml、160ml、200ml、260ml或300ml，以分别提供1000mg、1600mg、2000mg、2600mg或3000mg。

本发明的大体积灌注溶液可以包括惰性赋形剂，如张力调节剂、缓冲剂。所述溶液不包括糖成分的存在，如D-山梨糖醇、甘露糖醇、蔗糖。因此，此外，所述溶液不需要助溶剂，如醇，如乙醇或甘醇，例如，丙二醇、聚乙二醇、丙撑二醇和丁二醇。

本发明溶液的pH范围为约6.0至约8.0。合适的生理学上可接受的缓冲剂，如磷酸盐、可以包括在所述溶液中，以维持pH。缓冲剂可以以取决于盐酸吉西他滨浓度的浓度存在于所述溶液中。使用时与pH要求相适应的合适的张力剂包括但不限于，氯化钠、氯化钙和氯化钾中的一种或多种。优选氯化钠。本发明的所述溶液可以含有1至100mg/mL张力剂；优选4至60mg/mL氯化钠，更优选4至10mg/mL氯化钠。

可以通过特定浓度的，但在不同体积中的本发明的盐酸吉西他滨即可灌注溶液，来提供不同剂量的盐酸吉西他滨溶液。优化每个容器的浓度和体积，使得在可接受的60分钟时间限制内，以约8ml/分钟或更低的非常安全的灌注速率，将即可灌注溶液给药于病人。所述产品是无菌的、稳定的和即可灌注的。这种即可灌注溶液的形式避免了在灌注前将浓缩的小体积盐酸吉西他滨非肠道制剂稀释成灌注稀释液的不便利，以及消除了无菌操作过程中微生物污染的风险和任何可能的计算或稀释错误。

根据本发明的即可灌注溶液剂型可以被容纳在任何合适的大体积单区隔容器中。合适的聚合单区隔容器包括，例如，具有100ml至500ml范围大小的玻璃制品或聚合小瓶、安瓿、注射器、灌注袋或灌注瓶。大体积非肠道制剂可以被包含在灌注袋或灌注瓶中。聚合单区隔容器优选是柔性的并且可以含有或无聚氯乙烯(PVC)。在一个实施方案中，即可灌注的溶液剂型含有160ml和170ml的含水载体中的稳定大体积盐酸吉西他滨溶液。在这个实施方案中，灌注容器的构造材料是多层M312，具有一个聚烯烃/EVA管：6.2/8.2±0.15MMsippex。在另一个实施方案中，灌注容器的构造材料是多层M312，具有一个聚烯烃/EVA管：

6.2/8.2±0.15MM sippex。灌注容器包括由M95A插接式连接器(spike port)构成的多个塞子，具有氯丁基(无Latex)6321GS接头sippex 323。

本发明还提供了包括大体积灌注剂型的药盒，所述大体积灌注剂型包括含水载体中的吉西他滨或其药物学上可接受的盐的稳定的大体积溶液，所述含水载体被装在用第二包装系统覆盖的大体积灌注聚合物容器中，其中所述溶液是即可灌注的。给聚合物容器提供了防潮层，作为第二包装系统来防止储存过程中水的流失并且进一步确保溶液的稳定性。第二包装不仅提供了防潮层，而且还提供了另外的保护，这是重要的，因为吉西他滨是细胞毒性剂。该附加的包装还保护了灌注容器免受损坏或错用，并且可以帮助提供产品的独有识别。在一个实施方案中，第二包装是铝袋(aluminum over-pouch)。其可以保护溶液免受光解。此外，所用的容器能够耐受灌装状态和未灌装状态下的热灭菌，优选湿热灭菌。在一个实施方案中，所述药盒包括大体积灌注剂型，其中灌注容器装满含水载体中的10mg/ml吉西他滨或其药物学上可接受的盐的160ml的稳定大体积溶液并且提供了每个容器1600mg盐酸吉西他滨的剂量。在另一个实施方案中，所述药盒包括大体积灌注剂型，其中灌注容器包括含水载体中的10mg/ml盐酸吉西他滨的170ml的稳定大体积溶液，其提供了每个容器1700mg盐酸吉西他滨的剂量。在再另一个实施方案中，所述药盒包括大体积灌注剂型，其中所述灌注容器包括含水载体中的10mg.ml盐酸吉西他滨的180ml的稳定大体积溶液，其提供了每个容器1800mg盐酸吉西他滨的剂量。在另一个相似实施方案中，所述药盒包括大体积灌注剂型，其中所述灌注容器包括含水载体中的盐酸吉西他滨的190ml的稳定大体积溶液，并且提供了每个容器1900mg盐酸吉西他滨的剂量。

在一个实施方案中，包括大体积灌注剂型的吉西他滨水溶液的产品存在于柔性塑料袋容器中。本发明的这种大体积灌注剂型通过USP 29章87测试测定，是安全的。USP 29章87，设计了测试来测定哺乳动物细胞培养物接触与病人直接或间接接触的弹性塑料和其他聚合材料后的生物反应性。存在三个用于体外生物反应性的测试，并且它们是：i)琼脂扩散测试，ii)直接接触测试和iii)稀释测试。在本发明的内容中，进行了琼脂测试用于体外生物反应性。该测试是为了各种形状的弹性封闭物设计的。这里所述的封闭物是铂固化的硅胶管。琼脂层作为衬垫，保护细胞免受机械损伤，同时允许可浸出化学物质从聚合物样本中扩散出来。将材料的提取物施加于一片滤纸上，并且将其放置在制备的琼脂薄单层细胞培养物上，并且在37±1℃下孵育不超过24小时，优选在含有5±1％二氧化碳的潮湿培养箱中进行。描述生物反应性，并且以0至4的等级来评级。如果对样品制备物的应答不高于等级2(中度反应)，则样品满足要求，并且所进行的测试满足要求，即，等级不超过2。

在另一个方面中，本发明提供了一种治疗癌症的方法，该方法包括给药即可灌注的盐酸吉西他滨的无菌溶液剂型，其中通过静脉内灌注，将吉西他滨溶液给药于癌症病人，其中灌注所述溶液，而没有任何重建或稀释的干预步骤。特别地，本发明提供了一种治疗癌症的方法，该方法包括给药无菌的、稳定的大体积即可灌注的溶液，所述溶液包括5mg/ml至20mg/ml的盐酸吉西他滨(以游离碱表示)，其中通过静脉内灌注，以1000mg/m²至3000mg/m²，将盐酸吉西他滨给药于癌症病人，持续约30分钟至约1小时的时间段，其中灌注所述溶液，而没有任何重建或稀释的干预步骤。特别地，本发明提供了适用于非肠道给药并且具有pH为6至8的在溶液中包括5mg至20mg盐酸吉西他滨(以游离碱表示)每ml溶液的盐酸吉西他滨的含水、稳定、无菌药物溶液。该溶液是储存稳定的(冷藏和室温)，能够无菌灌装和热灭菌。灌注容器含有其浓度和体积使得不需要在给药前稀释的盐酸吉西他滨溶液，即，可以从大体积灌注容器直接灌注溶液。

在一个实施方案中，本发明的大体积灌注剂型提供了1250mg/m²吉西他滨的推荐剂量，用于乳癌病人。为了提供这一剂量，定制灌注剂型，以在大体积灌注容器中含有125mL即可灌注的10mg/mL浓度的盐酸吉西他滨溶液。相似地，本发明的剂型提供了1000mg/m²的吉西他滨，其是用于卵巢、非小细胞肺癌和胰腺癌的批准剂量。

可以通过以下方法制备本发明的大体积灌注剂型，所述方法包括在注射用水中溶解盐酸吉西他滨的步骤，以在1毫升溶液中获得5mg至20mg吉西他滨碱的浓度。可以添加碱和/或酸，将pH调节至6或更高，然后将所述溶液灌装至灌注容器中，并且随后将灌装的灌注容器最终灭菌。可以通过γ-照射、电子束(e-Beam)、自然光、微波热灭菌，如湿热灭菌，来实现最终灭菌。最终灭菌可以是蒸汽灭菌，或可以是热灭菌，或其组合。在一个实施方案中，本发明提供了最终蒸汽灭菌的即可灌注的无菌溶液剂型。特别地，本发明提供了使用最终热灭菌来破坏最终密封的容器内的所有活的微生物。有利地，热灭菌是最终热灭菌。高压灭菌器可以用于完成最终包装中的药品的最终热灭菌。制药工业中实现终产品的最终灭菌的典型高压灭菌循环是121℃温度下15分钟。本发明的盐酸吉西他滨组合物可以在110℃至150℃(优选115℃至130℃，并且更优选120至125℃)范围的温度下高压灭菌，持续5至40分钟范围的时间段(优选10至30分钟，并且更优选10至20分钟)。特别地，优选在119℃至122℃的温度范围中进行高压灭菌10至36分钟范围的时间段。此外，将盐酸吉西他滨注射的即可灌注溶液接受应力研究，以预测产品在含水介质中的货架期。将121℃下高压灭菌15分钟后的盐酸吉西他滨溶液储存在25℃和40℃的不同稳定性条件下，持续六个月的时间段。获自这个研究的数据表明所述溶液在化学上以及在物理上是稳定的，并且在40℃下研究的时间段中的总降解产物(degradant)变化低于1％。

在一个实施方案中，通过高压灭菌装满含水载体中的大体积的吉西他滨或其药物学上可接受的盐的溶液的灌注容器来进行最终灭菌。高压灭菌在110℃至150℃范围的温度下进行至少5分钟的时间段，优选持续5至40分钟的时间段。具体地，该过程涉及在119℃至122℃范围的温度下进行高压灭菌10至36分钟范围的时间段。

通常，通过以下步骤制备本发明的大体积灌注剂型：将吉西他滨或其药物学上可接受的盐溶解于含水载体中，形成溶液；调节溶液的pH至6.0至8.0；将所述溶液装入灌注容器中；并将灌注容器中的溶液接受最终灭菌。发现了通过这样的方法获得的大体积剂型是稳定的，并且在冷藏条件或室温下没有显示出任何结晶的信号。所述溶液在化学上是稳定的，具有在可接受药典和ICH限制内的杂质水平。该大体积灌注剂型

通过将吉西他滨或其药物学上可接受的盐接受最终灭菌可获得本发明的药品；其中所述溶液i)具有大体积，ii)在含水载体中包括吉西他滨或其药物学上可接受的盐，和iii)被包含在大体积灌注容器中。通常，从包括以下步骤的方法获得药品：将吉西他滨或其药物学上可接受的盐溶解于含水载体中，形成溶液；调节溶液的pH至6至8；将溶液装入灌注容器中；并且将灌装的灌注容器接受最终灭菌。

令人惊讶地，发明人发现了使用无菌制备技术制备无菌药物溶液时，在室温或冷藏条件下存储时，所述溶液没有提供物理和化学稳定性。不希望受到任何理论的束缚，发明人认为由于盐酸吉西他滨中的晶种影响，抑制了最终灭菌过程中的压力和温度的作用。这种令人惊讶的作用从比较例中给出的结果看是明显的。将本发明的即可灌注溶液过滤并无菌灌装在灌注袋或瓶(玻璃瓶)中时，没有经历最终灭菌，在2℃至8℃或室温下储存时，所述溶液显示出晶体的存在。

以下实施例是对本发明范围的示例，对本发明的范围没有任何限制。

实施例1-3

如下制备了根据本发明的即可灌注的溶液。

表1：本发明的即可灌注溶液的组成

将特定含量的注射用水维持在制造罐中的20℃至25℃温度下。用氮气吹洗大约15-30分钟。在加入赋形剂和盐酸吉西他滨之前，停止氮气吹洗。逐渐加入特定含量的氯化钠，并且将溶液充分搅拌大约10分钟。视觉检查氯化钠的完全溶解和溶液的清澈度。检查盐水的pH。

然后，边连续强烈搅拌，边将总量的盐酸吉西他滨缓慢加入大量溶液中。用足量的注射用水冲洗盐酸吉西他滨溶液分配容器，并加入大体积溶液中。重复冲洗的步骤，直至转移所有内含物。使用足量的10％w/v氢氧化钠或10％w/v盐酸将pH调节至7.70±0.2。用注射用水调节体积。将溶液搅拌10分钟。将pH维持在6.00至8.00之间。将溶液通过Ultipor N66Cartridge滤器过滤(0.2微米-10英寸长)。

将按照表1和上述程序制备的溶液灌装至一定体积，以获得将分别提供1600mg、1700mg、1800mg和2000mg每袋的盐酸吉西他滨的灌注容器，如以下表2中所述。

表2：10mg/ml浓度的吉西他滨溶液的大体积灌注剂型(实施例1)

对于160ml灌装，标准灌装体积为175.51ml(限制在172.00ml至179.02ml)。对于170ml灌装，标准灌装体积为185.71ml(限制在182.00ml至189.42ml)。

对于180ml灌装，标准灌装体积为195.92ml(限制在192.00ml至199.84ml)，对于200ml灌装，标准灌装体积为216.33ml(限制在212.00ml至220.66ml)。

通过使用瓶塞供给机器，用高压灭菌过的塞子将装满的灌注袋塞紧。按照最终灭菌循环，将塞紧的灌注袋在过热水喷雾灭菌机中进行最终灭菌(使用121℃的灭菌温度和15分钟的灭菌保持时间)。

将具有实施例1的溶液的灌注袋储存在2-8℃(冷藏条件)和室温下。观察溶液的任何物理变化，如脱色、澄清度和晶体的存在或不存在。在6个月的时间段内定期观察所述溶液。以下表3中给出了结果。

表3：实施例1的即可灌注溶液的物理稳定性研究

按照以上所述的程序制备了实施例1的即可灌注溶液，但pH不同，如，pH6.00、7.00和8.00。使用10％w/v氢氧化钠溶液或10％w/v盐酸溶液调节pH。关于测定、相关物质(％)、pH、420nm下的吸光度、650nm下的％透射率和摩尔渗透压浓度，分析了即可灌注溶液的初始样品和在40℃/75％RH下储存2个月的样品。以下表4中给出了结果。

表4：具有不同pH的实施例2的即可灌注溶液的化学稳定性研究

表5：10mg/ml，160ml，盐酸吉西他滨注射的稳定性结果

#＝2'-脱氧-2',2'二氟尿苷

##＝单个最大杂质

###＝总杂质(不包括2'-脱氧-2',2'二氟尿苷)

以上数据证明了具有约pH6至8的吉西他滨的大体积剂型在室温下是稳定的。估计产品的货架期为约两年。在12℃下延长的高压灭菌循环后，确定了实施例1中的制剂经受最终灭菌的能力。研究的高压灭菌循环时间范围为20分钟至长达150分钟。

比较例1

根据以上实施例1的程序制备了实施例1、2和实施例3的即可灌注溶液，其中通过过滤将灌注溶液灭菌(没有最终灭菌)。将过滤过的溶液灌装在玻璃小瓶或无菌PVC袋中。将装满的容器储存在2-8℃和20-25℃。评价所述溶液的稳定性，即，晶体或颗粒物质的存在。以下表6中给出了物理稳定性的结果。

表6：比较例1的即可灌注溶液的物理稳定性研究

以上数据表明了令人惊讶的发现：只有最终灭菌的吉西他滨溶液是稳定的，而无菌灌装至容器中并且储存在非肠道产品通常所需的条件下的溶液显示出不稳定的迹象，如晶体或颗粒物质的存在。