可得然胶在制备饲料添加剂中的应用
阅读说明：本技术 可得然胶在制备饲料添加剂中的应用 (Application of curdlan in preparation of feed additive ) 是由 何珣 周勇 万欣 卢宗梅 邴狄祥 郭世堂 陈可泉 叶震 佟毅 于 2021-09-10 设计创作，主要内容包括：本发明公开了可得然胶在制备饲料添加剂中的应用。通过可得然胶改性处理的织物乳杆菌,能够提高植物乳杆菌细胞的制备和保存过程的活菌率。换句话说就是：利用本发明的菌剂,能够在环境条件下维持较高活菌率,使得植物乳杆菌在常温条件下也可以延长保存期,在农业生产上有着广泛的用途,对保护环境,减少抗生素的使用量,促进农业生产可持续发展有着重要的技术价值和社会价值,本发明改性工艺简单,原料广泛,降低了生产成本,所得添加剂的稳定性大大提高,性能优异；也便于运输和储存,更适宜产业化推广。(The invention discloses an application of curdlan in preparing a feed additive. The fabric lactobacillus modified by curdlan can improve the viable bacteria rate of lactobacillus plantarum cells in the preparation and preservation processes. In other words, it is: the microbial inoculum can maintain higher viable bacteria rate under environmental conditions, so that the storage life of the lactobacillus plantarum can be prolonged under normal temperature conditions, the lactobacillus plantarum has wide application in agricultural production, has important technical and social values in protecting environment, reducing the use amount of antibiotics and promoting sustainable development of agricultural production, and has the advantages of simple modification process, wide raw materials, reduced production cost, greatly improved stability of the obtained additive and excellent performance; is also convenient for transportation and storage, and is more suitable for industrialized popularization.)
技术领域
本发明涉及动物饲料添加剂制备技术领域，具体涉及可得然胶在制备饲料添加剂中的应用。
背景技术
微生物胞外多糖具有相当低毒性的优势，使其在医疗保健、食品以及化妆品行业中被大量应用。同时，食品和药物管理局（美国）已依法批准可得然胶作为食品添加剂使用。
可得然胶(Curdlan)是一种以葡萄糖、蔗糖等糖类为原料由土壤杆菌(Agrobacterium sp.)等微生物发酵而生产的高分子聚合物。它是一种由葡萄糖结构单元以β-1,3-糖苷键连接而成的直链多糖。由于它具有在加热条件下形成凝胶的独特性质，又被称为热凝胶，在中国台湾地区被称为卡德兰胶。其对人体安全无毒，不溶于水但可溶于碱性溶液而形成粘稠状溶液。可得然胶作为食品添加剂被广泛应用于食品工业，可改善产品的持水性、粘弹性、稳定性，提高产品的口感。此外，在饲料、医药、建材以及石油开发等领域也具有良好的应用前景。
植物乳杆菌是一类革兰氏阳性乳杆菌，在自然界中广泛存在，厌氧或兼性厌氧,菌种为直或弯的杆状，单个、有时成对或成链状，最适pH 6.5 左右，属于同型发酵乳酸菌。但现有的植物乳杆菌常温下存活率低，限制其应用。需要进一步改性处理，提高其存活率，方便应用。
发明内容
针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供可得然胶在制备饲料添加剂中的应用，该饲料添加剂利用可得然胶对植物乳杆菌进行改性处理，提高了织物乳杆菌在常温下的存活能力，所得饲料添加剂用于饲料中可延长保质期，且成本低廉，组分安全，适合产业化应用。
为解决现有技术问题，本发明采取的技术方案为：
可得然胶在制备饲料添加剂中的应用。
上述应用，包括以下步骤：
步骤1，配置MRS琼脂平板培养基和MRS液体培养基，并在121℃下灭菌20分钟，冷却至室温，备用；
步骤2，挑取植物乳杆菌在MRS琼脂培养基平板上37℃下生长24h；
步骤3，再从平板中挑取培养后的菌株至MRS液体培养基中，在37℃氮气摇床中震荡培养至对数生长期中期；
步骤4，按照10%接种量，从摇瓶接种到50 L发酵罐，37℃下发酵培养72小时，发酵后离心收集菌体；
步骤4，计算活菌数后，将可得然胶与植物乳杆菌混合均匀冻干得可得然胶封装后的植物乳杆菌，即饲料添加剂。
作为改进的是，步骤2中所述植物乳杆菌Lactobacillus plantarum CGMCC15013，中国普通微生物菌种保藏管理中心。
作为改进的是，步骤4中可得然胶与植物乳杆菌的质量比为0.2-1.5:100。
作为改进的是，步骤4中还包括脱脂奶粉、蔗糖、糖蜜、淀粉、分离乳清蛋白、或海藻酸盐中一种或多种混合。
上述饲料添加剂在制备动物饲料上的应用。
一种动物饲料，含有上述的饲料添加剂。
有益效果：
与现有技术相比，本发明可得然胶在制备饲料添加剂中的应用，具有如下优势：
1、通过可得然胶改性处理的织物乳杆菌，能够提高植物乳杆菌细胞的制备和保存过程的活菌率。换句话说就是：利用本发明的菌剂，能够在环境条件下维持较高活菌率，使得植物乳杆菌在常温条件下也可以延长保存期，在农业生产上有着广泛的用途，对保护环境，减少抗生素的使用量，促进农业生产可持续发展有着重要的技术价值和社会价值。
2、改性工艺简单，原料广泛，降低了生产成本，所得添加剂的稳定性大大提高，性能优异；也便于运输和储存，更适宜产业化推广。
附图说明
图1为本发明所用的植物乳杆菌冻干的图片。
图2为本发明利用可得然胶封装后的植物乳杆菌在4℃下保存的图片。
图3为本发明利用可得然胶封装后的植物乳杆菌在25℃下保存的图片。
具体实施方式
除非另有说明，否则本文使用的所有技术和科学术语具有本发明所述领域的常规技术人通常理解的相同含义。虽然本发明仅描述了优选的方法和材料，但是在本发明的实施或测试中也可以使用与本文所述相似或等同的任何方法和材料。本说明书中提到的所有文献通过引用并入，用以公开和描述与所述文献相关的方法和/或材料。在与任何并入的文献冲突时，以本说明书的内容为准。
本发明所用的植物乳杆菌为Lactobacillus plantarum CGMCC 15013，中国普通微生物菌种保藏管理中心。
分离乳清蛋白购于北京康比特体育科技股份有限公司；
淀粉为可溶性淀粉，本发明实施例用的是普通的玉米淀粉；
MRS液体培养基配方：蛋白胨10.0 g/L，牛肉浸粉8.0 g/L，酵母浸粉4.0 g/L，葡萄糖20.0 g/L，磷酸氢二钾2.0 g/L，柠檬酸氢二铵2.0 g/L，乙酸钠5.0 g/L，硫酸镁0.2 g/L，硫酸锰0.04 g/L，吐温80 1.0 g/L；
MRS固体培养基配方：蛋白胨10.0 g/L，牛肉浸粉5.0 g/L，酵母浸粉4.0 g/L，葡萄糖20.0 g/L，磷酸氢二钾2.0 g/L，柠檬酸三铵2.0 g/L，乙酸钠5.0 g/L，硫酸镁0.2 g/L，硫酸锰0.05 g/L，吐温80 1mL，琼脂粉 10 g/L。
实施例1
配置MRS琼脂平板培养基和MRS液体培养基，并在121℃条件下灭菌20分钟，冷却至室温后，备用。其中，
挑取植物乳杆菌在MRS琼脂培养基平板上37℃下生长24h；
挑取培养后的菌株至装有MRS液体培养基的摇瓶中，在37℃氮气摇床中震荡培养至对数生长期中期；
按照10%接种量，从摇瓶接种到50L 种子罐中，37℃下发酵培养72小时，结束后，用压力压送发酵液从发酵罐转到转筒式离心机，收集植物乳杆菌的菌体。
将可得然胶和植物乳杆菌按质量比1:100的比例充分混合，记得可得然胶封装后的植物乳杆菌。
在-40℃下速冻，后干燥。
利用系列稀释法涂布平板，计算活菌数。
在4℃条件下，保存六个月后活菌数降低5%、菌体分布均匀性无变化。
利用系列稀释法涂布平板，计算活菌数。具体可参照文献：袁丽红.微生物学实验[M].北京：化学工业出版社，2010：66-67。
在4℃条件下，保存六个月后活菌数降低5%、菌体分布均匀性无变化。
对比例1
除将可得然胶替换为分离乳清蛋白外，其余同实施例1。
在4℃条件下，保存六个月后活菌数降低23%、菌体分布均匀性无变化。
实施例2
除将可得然胶和植物乳杆菌混合替换为可得然胶、淀粉、分离乳清蛋白和植物乳杆菌按质量比1:20:15:100混合外，其余同实施例1。
在25℃条件下，保存六个月后活菌数减少45%、菌体分布均匀性无变化。
对比例2
除将可得然胶和植物乳杆菌混合替换为淀粉、分离乳清蛋白和植物乳杆菌按质量比20:15:100外，其余同实施例1。
在-40℃下速冻，后干燥。
在25℃条件下，保存六个月后活菌数降低68%、菌体分布均匀性无变化。
实施例3
除将可得然胶和植物乳杆菌混合替换为可得然胶、淀粉、分离乳清蛋白和植物乳杆菌按质量比1:10:15:100外，其余同实施例1。
在25℃条件下，保存六个月后活菌数降低54%、菌体分布均匀性无变化。
以上实施例中，需要说明的是，此处提到的活菌数是指原有的植物乳杆菌存活的数量。
活体微生物细胞低温保存，易保证活力，长时间高温容易衰亡。本发明通过对植物乳杆菌剂改性处理后，提高了常温存活能力。从图1、图2和图3可知，可得然胶能封装微生物，同时在室温下包埋结构可以较长时间维持，并因此维持了较低的菌体死亡率，增加了保存期间的活菌数。尤其是图3，很直观的反应出在室温下保存后仍处于封装（包埋）状态，包埋结构未被破坏。
以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，本发明的保护范围不限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明披露的技术范围内，可显而易见地得到的技术方案的简单变化或等效替换均落入本发明的保护范围内。