一种茶叶废弃物有效部位提取物及其提取方法和用途
阅读说明：本技术 一种茶叶废弃物有效部位提取物及其提取方法和用途 (Effective part extract of tea waste and extraction method and application thereof ) 是由 雍建平 卢灿忠 肖雨晨 谢奕明 于 2021-08-06 设计创作，主要内容包括：本发明公开一种茶叶废弃物有效部位提取物及其提取方法和用途。所述提取方法包括如下步骤：将茶叶废弃物粉碎,用溶剂浸泡或热提取后,过滤,浓缩,得到浸膏；将所述浸膏分散在水中,用第一萃取剂萃取,得到水层；将所述水层用第二萃取剂萃取至少两次,收集、合并得到的乙酸乙酯层,所述乙酸乙酯层经脱色、过滤、浓缩、干燥后,得到所述有效部位提取物。本发明得到的有效部位提取物具有清除自由基的功效,能够作为抗氧化功能性的食品、饮料、化妆品的原料或添加剂。(The invention discloses an extract of effective parts of tea wastes, an extraction method and application thereof. The extraction method comprises the following steps: pulverizing tea waste, soaking in solvent or extracting under heating, filtering, and concentrating to obtain extract; dispersing the extract in water, and extracting with a first extracting agent to obtain a water layer; extracting the water layer with a second extraction agent at least twice, collecting and combining the obtained ethyl acetate layers, and decoloring, filtering, concentrating and drying the ethyl acetate layers to obtain the effective part extract. The effective part extract obtained by the invention has the effect of scavenging free radicals and can be used as a raw material or an additive of foods, beverages and cosmetics with antioxidant function.)
技术领域
本发明属于生物活性技术领域，具体涉及一种茶叶废弃物(茶毫或茶梗)有效部位提取物及其提取方法和用途。
背景技术
茶(红茶、乌龙茶和绿茶)在世界各地被广泛消费，是三大饮料之首，也是我国最普及的一种天然饮料，茶文化在中国已有数千年的历史，中国茶叶品种齐全，资源丰富，是世界上主要的茶叶生产、出口国。茶叶中所含的化学成分主要有茶多酚、蛋白质酶、氨基酸、碳水化合物、油脂、甾醇、维生素和色素等。多项研究证明茶叶提取物具有抗癌、抗衰老、抗辐射、抗氧化、降低血糖血脂等药理功能，其主要功能性成分是茶多酚，约占茶叶干重的18％-36％。
在茶叶的生产加工过程中，大量的茶毫和茶梗作为废料被丢弃，造成了大量资源浪费。
发明内容
为改善上述技术问题，本发明提供了一种从茶叶废弃物(茶毫或茶梗)提取得到有效部位提取物的方法，得到的有效部位提取物具有清除自由基的功效。
本发明提供一种茶叶废弃物有效部位提取物的提取方法，包括如下步骤：
A、将茶叶废弃物粉碎，用溶剂浸泡或热提取后，过滤，浓缩，得到浸膏；
B、将步骤A所述浸膏分散在水中，用第一萃取剂萃取，得到水层；
C、将步骤B所述水层用第二萃取剂萃取至少两次，收集、合并得到的萃取层，所述萃取层经脱色、过滤、浓缩、干燥后，得到所述有效部位提取物。
根据本发明的实施方案，步骤A中所述茶叶废弃物为茶毫和/或茶梗。例如，所述茶毫和/或茶梗可以来源于本领域已知的各种茶，例如乌龙茶、白茶、红茶或绿茶。
根据本发明的实施方案，步骤A中所述将茶叶废弃物粉碎至粒度为70-90目，优选地，粉碎至75-85目，例如为70目、73目、76目、80目、82目、86目或90目。
根据本发明的实施方案，步骤A中所述茶叶废弃物与混合溶液的质量体积比可以为1kg:(1-5)L，优选地，为1kg:(2-4)L，例如为1kg:1L、1kg:2L、1kg:2.5L、1kg:5L；
根据本发明的实施方案，步骤A中所述混合溶液中，乙醇和水的体积比可以为(50-100):30，优选为(60-90):30，例如为50:30、60:30、70:30、80:30、90:30；
根据本发明的实施方案，步骤A中所述浸泡的温度可以为10-30℃，优选为15-25℃，例如为10℃、15℃、25℃、30℃；
根据本发明的实施方案，步骤A中所述浸泡时间可以为20-50天，优选为30-40天，例如为25天、30天、35天、45天；
根据本发明的实施方案，步骤A中所述热提取的温度可以为30-100℃，优选为50-90℃，例如为60℃、70℃、80℃；
根据本发明的实施方案，步骤A中所述热提取的时间可以为6-24h，优选为10-20h，例如为8h、12h、18h、22h；
根据本发明的实例方案，步骤A中所述溶剂为低级醇与水的混合溶剂，优选为乙醇与水的混合溶剂；
根据本发明的实例方案，步骤B中所述第一萃取剂为有机溶剂，优选地，所述第一萃取剂为正己烷、氯仿或二氯甲烷，例如为正己烷。
根据本发明的实施方案，步骤B中萃取的次数可以为1-5次，例如3次；
优选地，所述步骤B还包括将每次萃取得到的水层合并；
根据本发明的实施方案，步骤C中所述第二萃取剂为二氯甲烷、氯仿或乙酸乙酯，优选为乙酸乙酯。
根据本发明的实施方案，步骤C中萃取的次数可以为1-5次，例如3次；
根据本发明的实施方案，步骤C中所述干燥可以为冻干或烘干；
优选地，所述烘干的温度可以为40-60℃，比如所述烘干的温度为45-55℃，例如为45℃、50℃、55℃、60℃。
根据本发明的实施方案，步骤C中所述脱色可以使用活性炭进行脱色。
本发明还提供一种茶叶废弃物有效部位提取物，其具有抗氧化活性，例如能够清除DPPH自由基。
优选地，所述有效部位提取物由所述提取方法提取得到。
优选地，所述有效部位提取物含有黄酮类化合物。
优选地，上述有效部位提取物对DPPH自由基的清除率≥80％；优选地，在浓度为0.345mg/mL的有效部位提取物的DMSO溶液中，所述有效部位提取物对DPPH自由基的清除率达到了85.44％；在浓度为0.316mg/mL的有效部位提取物的DMSO溶液中，上述有效成分对DPPH自由基的清除率达到了84.32％。
根据本发明的实施方案，所述有效部位提取物为深黄绿色固体粉末。
根据本发明的实施方案，所述有效部位提取物具有如图1所示的HPLC图。
本发明还提供上述茶叶废弃物有效部位提取物作为抗氧化功能性的食品、饮料、化妆品的原料或添加剂的应用。
有益效果
本发明以茶叶废弃物料茶毫和/或茶梗作为原料，经醇水混合物浸泡或热提取、正己烷萃取、乙酸乙酯萃取，提取得到茶叶废弃物的乙酸乙酯有效部位提取物，实现了废弃资源的再利用。得到的有效部位提取物具有优异的抗氧化活性，对DPPH自由基清除率≥80％，能够作为抗氧化功能性的食品、饮品、化妆品的原料或添加剂。
附图说明
图1为实施例2制备得到的有效部位提取物的HPLC谱图。
图2为实施例2制备得到的有效部位提取物的照片。
具体实施方式
下文将结合具体实施例对本发明的制备方法和应用做更进一步的详细说明。应当理解，下列实施例仅为示例性地说明和解释本发明，而不应被解释为对本发明保护范围的限制。凡基于本发明上述内容所实现的技术均涵盖在本发明旨在保护的范围内。
除非另有说明，以下实施例中使用的原料和试剂均为市售商品，或者可以通过已知方法制备。
仪器与试剂：
茶毫和茶梗于2020年10月由“八马茶业”茶厂提供，为乌龙茶的茶毫和茶梗，茶毫和茶梗实验前均通过粉碎机粉碎处理。其它化学试剂均为国产化学纯试剂。
检测仪器使用型号为D-2000Elite的高效液相色谱仪。
以下实施例中，粉碎机将茶毫和/或茶梗粉碎至80目。
实施例1
茶毫有效部位提取物的制备
1.将茶毫10公斤用50L V乙醇/V水＝70/30的混合溶液在室温下浸泡30天，过滤即得醇/水提取液，将该提取液减压浓缩，得到浸膏；
2.将该浸膏分散在水中，用正己烷萃取三次，分离出正己烷层，保留水层；
3.将步骤2得到的水层用乙酸乙酯萃取三次，收集乙酸乙酯层，将乙酸乙酯层用活性碳脱色后，过滤、浓缩、干燥后得到所述有效部位提取物(深黄绿色固体粉末)，提取率为3％。
实施例2
茶梗有效部位提取物的制备：将实施例1中的茶毫替换为茶梗，其余与实施例1相同。得到的有效部位提取物为深黄绿色固体粉末，如图2所示。
将DPPH 5mg溶于DMSO，加入HPLC中，以30％的水和70％的甲醇为洗脱液进行洗脱分离，得到如图1所示的液相色谱图，证明有效部位提取物中含有黄酮类化合物。
实施例3
DPPH法检测实施例1得到的茶毫有效部位提取物和实施例2得到的茶梗有效部位提取物抗氧化活性
3.1DPPH储备液的制备
取DPPH 5mg置于25mL的容量瓶中，DMSO定容，充分振摇，配制成DPPH储备液，避光保存。
3.2DPPH应用液的制备
DPPH储备液与DMSO按照体积比为1.8:8.2的比例配制成DPPH应用液(10mL)，充分混匀，配制成DPPH储备液，避光保存。
3.3吸光度测量
a.取DPPH应用液5mL，在519nm处测其吸光度A0，平行测定三次。
b.取DPPH应用液5mL(3份)，分别加入实施例1茶毫有效部位提取物的DMSO溶液，至该提取物的浓度如表1所示，充分混合振摇，在519nm处测其吸光度A，平行测定三次。
c.取DPPH应用液5mL(3份)，分别加入实施例2茶梗有效部位提取物的DMSO溶液，至该提取物的浓度如表1所示，充分混合振摇，在519nm处测其吸光度A，平行测定三次。
测试结果见表1。
3.4清除率的计算
DPPH清除率％＝(A0-A)/A0×100％
表1茶毫和茶梗乙酸乙酯提取有效部位提取物对DPPH的清除率
以上，对本发明的实施方式进行了说明。但是，本发明不限定于上述实施方式。凡在本发明的精神和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
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