具体实施方式

本发明的眼科组合物含有选自由以下的(A-1)成分、(A-2)成分、(A-3)成分和(A-4)成分组成的组中的至少一种：(A-1)解充血成分；(A-2)抗组胺成分；(A-3)选自由樟脑、薄荷酮、异薄荷醇、桉树脑、薄荷呋喃、蒎烯、柠檬烯、新薄荷醇和乙酸甲酯组成的组中的至少一种；以及(A-4)局部麻醉成分。优选含有选自由(A-1)成分、(A-2)成分、(A-3)成分和(A-4)成分组成的组中的至少一种作为有效成分。

需要说明的是，本说明书中，只要没有特别记载，则含量的单位“％”是指“w/v％”，与“g/100mL”含义相同。

[(A-1)解充血成分]

作为解充血成分，优选使用例如选自由四氢唑啉、萘甲唑啉、羟甲唑啉、或它们的盐酸盐、硝酸盐等咪唑啉类解充血成分、肾上腺素、麻黄碱、甲基麻黄碱、苯肾上腺素和它们的药学上可接受的盐组成的组中的至少一种，但不限定于这些。

这些解充血成分中，优选为例如咪唑啉类解充血成分，更优选为四氢唑啉、萘甲唑啉和其药学上可接受的盐，进一步优选为四氢唑啉和其药学上可接受的盐，特别优选为四氢唑啉盐酸盐(盐酸四氢唑啉)。

在本发明的眼科组合物含有(A-1)成分的情况下，(A-1)成分的含量没有特别限定，根据(A-1)成分的种类、其他配合成分的种类和含量、眼科组合物的用途和制剂形态等适当设定。作为(A-1)的含量，从更显著地发挥本发明效果的观点考虑，相对于眼科组合物的总量，例如，(A-1)成分的总含量的下限优选为0.0001w/v％以上、0.0003w/v％以上、0.0005w/v％以上。另外，进一步优选为0.01w/v％以上。另外，在本发明的眼科组合物含有(A-1)成分的情况下，关于(A-1)成分的含量，从更显著地发挥本发明效果的观点考虑，相对于眼科组合物的总量，例如，上限优选为0.5w/v％以下、0.3w/v％以下、0.1w/v％以下、0.05w/v％以下。

另外，上述的下限和上限可以任意地组合。

在本发明的眼科组合物含有(A-1)成分的情况下，(A-1)成分相对于(B)成分的含有比率没有特别限定，根据(A-1)成分的种类、其他配合成分的种类和含量、眼科组合物的用途和制剂形态等适当设定。作为(A-1)成分相对于(B)成分的含有比率，从更显著地发挥本发明效果的观点考虑，例如，关于本申请发明的眼科组合物中含有的(A-1)成分的总含量，相对于(B)成分的总含量1重量份，例如，下限通常为0.001重量份以上，优选为0.01重量份以上，更优选为0.1重量份以上，进一步优选为0.2重量份以上，特别优选为0.5重量份以上。另外，关于(A-1)成分的总含量，相对于(B)成分的总含量1重量份，例如，上限通常为1000重量份以下，优选为800重量份以下，更优选为50重量份以下，进一步优选为10重量份以下。

另外，上述的下限和上限可以任意地组合。

[(A-2)抗组胺成分]

作为抗组胺成分，优选使用例如选自由氯苯那敏、苯海拉明、酮替芬、异丙海汀、左卡巴斯汀、奥洛他定和它们的药学上可接受的盐组成的组中的至少一种，但不限定于这些。

这些抗组胺成分中，优选可以列举酮替芬富马酸盐、异丙海汀、苯海拉明盐酸盐、氯苯那敏马来酸盐(马来酸氯苯那敏)、左卡巴斯汀盐酸盐、奥洛他定盐酸盐等，更优选可以列举酮替芬富马酸盐、苯海拉明盐酸盐、氯苯那敏马来酸盐、左卡巴斯汀盐酸盐、奥洛他定盐酸盐等，进一步优选可以列举苯海拉明盐酸盐、氯苯那敏马来酸盐，更进一步优选可以列举氯苯那敏马来酸盐。

在本发明的眼科组合物含有(A-2)成分的情况下，(A-2)成分的含量没有特别限定，根据(A-2)成分的种类、其他配合成分的种类和含量、眼科组合物的用途和制剂形态等适当设定。作为(A-2)的含量，从更显著地发挥本发明效果的观点考虑，相对于眼科组合物的总量，例如，(A-2)成分的总含量的下限优选为0.001w/v％以上、0.003w/v％以上、0.005w/v％以上、0.01w/v％以上。另外，在本发明的眼科组合物含有(A-2)成分的情况下，关于(A-2)成分的含量，从更显著地发挥本发明效果的观点考虑，相对于眼科组合物的总量，例如，(A-2)成分的总含量的上限优选为0.5w/v％以下、0.3w/v％以下、0.05w/v％以下、0.03w/v％以下。

另外，上述的下限和上限可以任意地组合。

在本发明的眼科组合物含有(A-2)成分的情况下，(A-2)成分相对于(B)成分的含有比率没有特别限定，根据(A-2)成分的种类、其他配合成分的种类和含量、眼科组合物的用途和制剂形态等适当设定。作为(A-2)成分相对于(B)成分的含有比率，从更显著地发挥本发明效果的观点考虑，例如，关于本申请发明的眼科组合物中含有的(A-2)成分的总含量，相对于(B)成分的总含量1重量份，例如，下限优选为0.002重量份以上，更优选为0.004重量份以上，进一步优选为0.01重量份以上，更进一步优选为0.05重量份以上，特别优选为0.1重量份以上。另外，关于(A-2)成分的比例，相对于(B)成分1重量份，例如上限优选为50000重量份以下，更优选为5000重量份以下，进一步优选为1000重量份以下，更进一步优选为800重量份以下，进一步优选为500重量份以下，更进一步优选为100重量份以下，特别优选为10重量份以下。

另外，上述的下限和上限可以任意地组合。

[(A-3)成分]

本发明的眼科组合物含有选自由樟脑、薄荷酮、异薄荷醇、桉树脑、薄荷呋喃、蒎烯、柠檬烯、新薄荷醇、乙酸甲酯组成的组中的至少一种作为(A-3)成分。它们可以为d体、l体或dl体中的任意一种。

另外，本发明的(A-3)成分可以以含有(A-3)成分的精油形式使用。作为含有(A-3)成分的精油，可以列举例如薄荷油、野薄荷油(クールミント油)、留兰香油、椒样薄荷油、茴香油、桂皮油、香柠檬油、桉叶油、肉桂油、玫瑰油等中的一种以上，其中特别优选薄荷油或野薄荷油。

在本发明的眼科组合物含有(A-3)成分的情况下，关于(A-3)成分的比例，以(A-3)成分的总量计，相对于眼科组合物的总量，例如，下限可以为0.00001w/v％以上、0.00005w/v％以上、0.0001w/v％以上、0.0003w/v％以上、0.0005w/v％以上、0.0007w/v％以上、0.0008w/v％以上、0.0009w/v％以上、0.001w/v％以上。

另外，在本发明的眼科组合物含有(A-3)成分的情况下，关于(A-3)成分的比例，相对于眼科组合物的总量，例如，上限可以为5w/v％以下、3w/v％以下、2w/v％以下、1.5w/v％以下、1.2w/v％以下、1w/v％以下、0.9w/v％以下、0.8w/v％以下、0.7w/v％以下、0.6w/v％以下、0.5w/v％以下、0.3w/v％以下、0.1w/v％以下。

另外，上述的下限和上限可以任意地组合。

特别是，此外，(A-3)成分的比例相对于眼科组合物的总量，例如，可以合计为0.00001w/v％～2w/v％(例如，合计为0.00005～1w/v％)、优选合计为0.0001～0.1w/v％(例如，0.0003～0.05w/v％)、进一步优选合计为0.0005～0.02w/v％(例如，合计为0.001～0.01w/v％)左右。此外，(A-3)成分的比例相对于眼科组合物的总量，例如，下限可以为0.00000005％以上、0.0000005％以上、0.000001％以上。

(A-3)成分的来源没有特别限定，也包含精油来源。

在本发明的眼科组合物含有(A-3)成分的情况下，(A-3)成分相对于(B)成分的含有比率没有特别限定，根据(A-3)成分的种类、其他配合成分的种类和含量、眼科组合物的用途和制剂形态等适当设定。作为(A-3)成分相对于(B)成分的含有比率，从更显著地发挥本发明效果的观点考虑，相对于(B)成分的总含量1重量份，例如，下限可以为0.000001重量份以上、0.00001重量份以上、0.0001重量份以上、0.001重量份以上、0.005重量份以上、0.01重量份以上、0.1重量份以上、1重量份以上。另外，对于(A-3)成分的比例而言，相对于(B)成分1重量份，例如，上限可以为500000重量份以下、300000重量份以下、15000重量份以下、800重量份以下、500重量份以下、100重量份以下、10重量份以下。

另外，上述的下限和上限可以任意地组合。

[(A-4)成分]

作为局部麻醉成分，优选氯丁醇。另外，本发明中，除了氯丁醇以外，还可以使用盐酸普鲁卡因或盐酸利多卡因等本领域中公知的局部麻醉成分来代替氯丁醇、或者将氯丁醇与其他公知的局部麻醉成分组合使用。

特别是，在本发明的眼科组合物含有(A-4)成分的情况下，关于其比例，相对于眼科组合物的总量例如优选为0.001～2.5w/v％，更优选为0.01～1w/v％，进一步优选为0.05～0.5w/v％，特别优选为0.1～0.25％。

在本发明的眼科组合物含有(A-4)成分的情况下，(A-4)成分相对于(B)成分的含有比率没有特别限定，根据(A-4)成分的种类、其他配合成分的种类和含量、眼科组合物的用途和制剂形态等适当设定。作为(A-4)成分相对于(B)成分的含有比率，从更显著地发挥本发明效果的观点考虑，相对于(B)成分的总含量1重量份，例如，下限可以为0.01重量份以上、0.1重量份以上、1重量份以上。另外，关于(A-3)成分的比例，相对于(B)成分1重量份，例如，上限可以为5000重量份以下、3500重量份以下、1000重量份以下、500重量份以下、100重量份以下、50重量份以下、10重量份以下。

另外，上述的下限和上限可以任意地组合。

[(A)成分]

本说明书中，也有时将(A-1)成分、(A-2)成分、(A-3)成分和(A-4)成分一起总称为(A)成分。另外，(A)成分优选组合使用两种以上成分，更优选组合使用选自由(A-1)～(A-4)组成的组中的两组以上，进一步优选组合使用三组以上。

[(B)成分：TRPA1激动剂]

本发明的眼科组合物优选含有TRPA1激动剂。TRPA1激动剂对眼赋予刺激感。作为TRPA1激动剂，优选薄荷醇。

薄荷醇只要是医药上、药理学或生理学上可接受的薄荷醇，则没有特别限制，可以为d体、l体、dl体中的任意一种，优选l-薄荷醇。

另外，作为薄荷醇，可以使用含有薄荷醇的精油。

本发明的眼科组合物中的薄荷醇的含量相对于眼科组合物的总量优选为0.00001～0.5w/v％，更优选为0.0001～0.25w/v％，进一步优选为0.0005～0.1w/v％，更进一步优选为0.001～0.08w/v％。需要说明的是，在使用含有薄荷醇的精油的情况下，以使包括精油中含有的薄荷醇量在内的薄荷醇量的总和满足上述比例的方式进行设定。

本发明的眼科组合物可以通过含有选自由(A-1)成分、(A-2)成分、(A-3)成分和(A-4)成分组成的组中的至少一种而使刺激感得到抑制。进而，在本发明的眼科组合物含有(B)TRPA1激动剂的情况下，能够抑制眼科组合物中含有的TRPA1激动剂所带来的刺激感，因此特别优选。还优选被给药眼科组合物的人等动物显示出由干眼、变态反应等引起的疼痛症状、或者该动物的刺激受体TRPA1被活化。

本发明的眼科组合物中，除了上述成分以外，还可以进一步含有非离子表面活性剂。非离子表面活性剂只要是医药上、药理学或生理学上可接受的非离子表面活性剂，则没有特别限制。作为非离子表面活性剂的具体例，可以列举例如聚氧乙烯山梨糖醇酐脂肪酸酯、聚氧乙烯氢化蓖麻油、聚氧乙烯蓖麻油、聚氧乙烯-聚氧丙烯嵌段聚合物、聚氧乙烯-聚氧丙烯嵌段聚合物加成物、聚氧乙烯-聚氧丙烯烷基醚、聚氧乙烯烷基苯基醚。

作为非离子表面活性剂的更具体的例子，可以列举例如：聚氧乙烯(以下也称为POE)-聚氧丙烯(以下也称为POP)二醇(例如，泊洛沙姆407、泊洛沙姆235、泊洛沙姆188等泊洛沙姆类)；Poloxamine等乙二胺的POE-POP嵌段聚合物加成物；单月桂酸POE(20)山梨糖醇酐(聚山梨醇酯20)、单油酸POE(20)山梨糖醇酐(聚山梨醇酯80)、POE山梨糖醇酐单硬脂酸酯(聚山梨醇酯60)、POE山梨糖醇酐三硬脂酸酯(聚山梨醇酯65)等POE山梨糖醇酐脂肪酸酯类；POE(5)氢化蓖麻油、POE(10)氢化蓖麻油、POE(20)氢化蓖麻油、POE(40)氢化蓖麻油、POE(50)氢化蓖麻油、POE(60)氢化蓖麻油、POE(100)氢化蓖麻油等POE氢化蓖麻油；POE(3)蓖麻油、POE(10)蓖麻油、POE(35)蓖麻油等POE蓖麻油；POE(9)月桂基醚等POE烷基醚类；POE(20)POP(4)鲸蜡基醚等POE·POP烷基醚类；POE(10)壬基苯基醚等POE烷基苯基醚类；聚氧乙烯(40)单硬脂酸酯(ステアリン酸ポリオキシル40)等聚乙二醇单硬脂酸酯类等。需要说明的是，括号内的数字表示POP或POE的平均加成摩尔数。

这些非离子表面活性剂中，从显著发挥本发明效果的观点考虑，优选POE-POP二醇、POE山梨糖醇酐脂肪酸酯类、POE氢化蓖麻油、POE蓖麻油和聚乙二醇单硬脂酸酯类，更优选泊洛沙姆407、单油酸POE(20)山梨糖醇酐(聚山梨醇酯80)、POE(60)氢化蓖麻油(聚氧乙烯氢化蓖麻油60)、POE(40)氢化蓖麻油(聚氧乙烯氢化蓖麻油40)、POE(3)蓖麻油(聚氧乙烯蓖麻油3)、POE(10)蓖麻油(聚氧乙烯蓖麻油10)、POE(35)蓖麻油(聚氧乙烯蓖麻油35)、聚氧乙烯(40)单硬脂酸酯，特别优选单油酸POE(20)山梨糖醇酐、POE(60)氢化蓖麻油。

这些非离子表面活性剂可以通过公知的方法合成来使用，也可以获取市售品来使用。非离子表面活性剂可以单独使用一种，也可以任意地组合使用两种以上。

非离子表面活性剂的含量可以根据非离子表面活性剂的种类、其他成分的种类和量、眼科组合物的用途等适当设定。

另外，本发明的眼科组合物可以含有非离子表面活性剂以外的表面活性剂。这样的表面活性剂只要是医药上、药理学或生理学上可接受的表面活性剂，则没有特别限制，作为具体例，可以列举例如聚氧乙烯烷基醚磷酸盐、聚氧乙烯烷基醚硫酸盐、烷基苯磺酸盐、烷基硫酸盐、N-酰基牛磺酸盐等阴离子表面活性剂等、或者例如月桂基二甲基氨基乙酸甜菜碱等两性表面活性剂等。

作为一例，相对于眼科组合物的总量的表面活性剂的总含量没有特别限定，例如，关于下限，优选为0.0001w/v％以上，更优选为0.0005w/v％以上，进一步优选为0.001w/v％以上，特别优选为0.005w/v％以上，最优选为0.01w/v％以上。另外，关于上限，没有特别限定，优选为10w/v％以下，更优选为5w/v％以下，进一步优选为1w/v％以下，特别优选为0.5w/v％以下。另外，上述的下限和上限可以任意地组合。

本发明中，眼科组合物中，除了上述成分以外，可以进一步含有增稠剂。作为增稠剂，具体而言，可以列举甲基纤维素、乙基纤维素、羟乙基纤维素、羟甲基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素(Hypromellose)、羧甲基纤维素和其盐、羧乙基纤维素和其盐等纤维素系高分子化合物、硫酸软骨素和其盐以及透明质酸和其盐等糖胺聚糖、聚乙烯醇(完全或部分皂化物)、聚乙烯吡咯烷酮(K17、K25、K30、K90等)、羧基乙烯基聚合物和其盐等乙烯基系高分子、葡聚糖、聚乙二醇(macrogol)6000、聚乙二醇(macrogol)4000、聚乙二醇(macrogol)400等聚乙二醇(macrogol)(聚乙二醇)、结冷胶、海藻酸和其盐。在此，其盐没有特别限定，优选钠盐。

从显著发挥本发明效果的观点考虑，优选糖胺聚糖、纤维素系高分子或乙烯基系高分子，更优选糖胺聚糖，更优选硫酸软骨素、透明质酸和它们的盐，进一步优选硫酸软骨素钠(硫酸软骨素酯钠)和透明质酸钠。这些增稠剂可以通过公知的方法合成来使用，也可以获取市售品来使用。这些增稠剂可以单独使用一种，或者可以组合使用两种以上。

增稠剂的总含量可以根据使用的增稠剂的种类、其他配合成分的种类和配合量、眼科组合物的用途等适当设定。相对于眼科组合物的总量，增稠剂的总含量没有特别限定，优选为0.0001w/v％以上，更优选为0.0005w/v％以上，进一步优选为0.001w/v％以上，进一步优选为0.005w/v％以上，进一步更优选为0.01w/v％以上，最优选为0.05w/v％以上。另外，相对于眼科组合物的总量，增稠剂的总含量没有特别限定，优选为5w/v％以下，更优选为3w/v％以下，进一步优选为1w/v％以下，进一步更优选为0.5w/v％以下，最优选为0.3w/v％以下。相对于眼科组合物的总量，增稠剂的总含量没有特别限定，优选为0.0001～5w/v％，更优选为0.0005～3w/v％，进一步优选为0.001～1w/v％，进一步更优选为0.005～0.5w/v％，特别优选为0.01～0.5w/v％，最优选为0.05～0.3w/v％。

本发明中，眼科组合物中，除了上述成分以外，可以进一步含有缓冲剂。作为缓冲剂，只要是医药上、药理学或生理学上可接受的缓冲剂，则没有特别限制。作为这样的缓冲剂的一例，可以列举硼酸缓冲剂、磷酸缓冲剂、碳酸缓冲剂、柠檬酸缓冲剂、乙酸缓冲剂、Tris缓冲剂、天冬氨酸、天冬氨酸盐、ε-氨基己酸等。作为缓冲剂，优选硼酸缓冲剂、磷酸缓冲剂、碳酸缓冲剂、柠檬酸缓冲剂。

作为更具体的例子，没有特别限定，作为硼酸缓冲剂，可以例示硼酸或其盐(硼酸钠、四硼酸钾、偏硼酸钾、硼酸铵、硼砂等)；作为磷酸缓冲剂，可以例示磷酸或其盐(磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、磷酸二氢钾、磷酸三钠、磷酸二钾、磷酸一氢钙、磷酸二氢钙等)；作为碳酸缓冲剂，可以例示碳酸或其盐(碳酸氢钠、碳酸钠、碳酸铵、碳酸钾、碳酸钙、碳酸氢钾、碳酸镁等)；作为柠檬酸缓冲剂，可以例示柠檬酸或其盐(柠檬酸钠、柠檬酸钾、柠檬酸钙、柠檬酸二氢钠、柠檬酸二钠等)；作为乙酸缓冲剂，可以例示乙酸或其盐(乙酸铵、乙酸钾、乙酸钙、乙酸钠等)；天冬氨酸或其盐(天冬氨酸钠、天冬氨酸镁、天冬氨酸钾、天冬氨酸镁·钾混合物等)。另外，作为缓冲剂的制造的原料，可以使用各盐的水合物。

这些缓冲剂可以通过公知的方法合成来使用，也可以获取市售品来使用。这些缓冲剂可以单独使用一种，也可以任意地组合使用两种以上。

本发明的眼科组合物中的缓冲剂的含量可以根据使用的缓冲剂的种类、其他配合成分的种类和配合量、眼科组合物的用途等适当设定。作为一例，相对于眼科组合物的总量的缓冲剂的总含量没有特别限定，优选为0.01w/v％以上，更优选为0.05w/v％以上，进一步优选为0.1w/v％以上，特别优选为0.3w/v％以上。相对于眼科组合物的总量的缓冲剂的总含量没有特别限定，优选为10w/v％以下，更优选为5w/v％以下，进一步优选为3w/v％以下，特别优选为2w/v％以下。相对于眼科组合物的总量的缓冲剂的总含量没有特别限定，优选为0.01～10w/v％，更优选为0.05～5w/v％，进一步优选为0.1～3w/v％，特别优选为0.3～2w/v％。

本发明中，眼科组合物中，除了上述成分以外，可以进一步含有等渗剂。作为等渗剂，只要是医药上、药理学或生理学上可接受的等渗剂，则没有特别限制。

作为等渗剂，具体而言，可以列举亚硫酸氢钠、亚硫酸钠、氯化钾、氯化钙、氯化钠、氯化镁、硫代硫酸钠、硫酸镁、甘油、丙二醇等。这些等渗剂中，从显著发挥本发明效果的观点考虑，优选可以列举氯化钠、氯化钾、氯化钙、氯化镁、甘油和丙二醇。这些等渗剂可以单独使用一种，另外也可以组合使用两种以上。

关于本发明的眼科组合物中的等渗剂的含量，可以根据使用的等渗剂的种类、其他配合成分的种类和配合量、眼科组合物的用途等适当设定。作为一例，相对于眼科组合物的总量的缓冲剂的总含量没有特别限定，优选为0.01～10w/v％，优选为0.05～5w/v％，更优选为0.1～3w/v％。

本发明的眼科组合物在不损害本发明的效果的范围内，可以根据其用途和制剂形态，按照常规方法适当选择各种添加物，含有适当量的一种或组合使用一种以上。作为这样的添加物，可以例示例如医药品添加物事典2016(日本医药品添加剂协会编纂)或一般用医药品制造销售批准基准2012年版(一般社团法人法规科学学会)中记载的有效成分(药理活性成分、生理活性成分等)等所记载的各种添加物。作为代表性成分，可以列举下述添加物。

载体：例如，水、含水乙醇等水性溶剂。

螯合剂：例如，乙二胺二乙酸(EDDA)、乙二胺三乙酸、乙二胺四乙酸(EDTA)、N-(2-羟乙基)乙二胺三乙酸(HEDTA)、二亚乙基三胺五乙酸(DTPA)等。

基质：例如，辛基十二烷醇、氧化钛、溴化钾、Plastibase(液体石蜡和聚乙烯的复合软膏基质)等。

pH调节剂：例如，盐酸、乙酸、氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钙、氢氧化镁、三乙醇胺、二异丙醇胺等。

稳定剂：例如，甲醛次硫酸钠(吊白块)、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、单硬脂酸铝、单硬脂酸甘油酯、环糊精、单乙醇胺等。

防腐剂、杀菌剂或抗菌剂：例如，氯化锌、盐酸烷基二氨基乙基甘氨酸、苯甲酸钠、乙醇、苯扎氯铵、苄索氯铵、葡萄糖酸氯己定、山梨酸、山梨酸钾、脱氢乙酸钠、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯、硫酸羟基喹啉、苯乙醇、苯甲醇、双胍化合物(具体为盐酸聚六亚甲基双胍等)、グローキル(罗地亚公司制商品名)等。

糖类：例如，葡萄糖、环糊精、α-环糊精等。

糖醇类：例如，木糖醇、山梨糖醇、甘露糖醇、甘油等。它们可以为d体、l体或dl体中的任意一种。

另外，本实施方式的刺激感得到了抑制的眼科用组合物中，只要不妨碍本发明的效果，则可以除了上述成分以外组合含有适当量的各种药理活性成分、生理活性成分。成分没有特别限制，可以例示例如一般用医药品制造销售批准基准2012年版(一般社团法人法规科学学会主编)中记载的各种医药中的有效成分。例如，作为眼科用药中使用的成分，具体可以列举下述成分。

眼肌调节药剂：例如，新斯的明甲基硫酸盐、托吡卡胺、土木香素硫酸阿托品等胆碱酯酶抑制剂等。

维生素类：例如，黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD)、黄素腺嘌呤二核苷酸钠、吡哆醇盐酸盐、氰钴胺素、视黄醇乙酸酯、视黄醇棕榈酸酯、泛醇、抗坏血酸、乙酸生育酚、乙酸d-α-生育酚、琥珀酸生育酚、烟酸生育酚、亚麻酸生育酚等。

氨基酸类：例如，L-谷氨酸、L-天冬氨酸钾、L-天冬氨酸镁·钾、氨基乙磺酸(牛磺酸)等。

消炎剂：例如，甘草酸、甘草酸二钾、甘草甜素、水杨酸甲酯、水杨酸二醇、薁磺酸、薁磺酸钠、尿囊素、氨甲环酸、小檗碱、溶菌酶、氯化溶菌酶、氯化小檗碱、小檗碱硫酸盐、小檗碱硫酸盐水合物、ε-氨基己酸、吲哚美辛、普拉洛芬、布洛芬、皮考布洛芬、酮洛芬、双氯芬酸钠、溴芬酸钠、联苯乙酸、苄达酸、吡罗昔康、丁苯羟酸、氟芬那酸丁酯、硫酸锌水合物等。

收敛剂：例如，氧化锌、乳酸锌、硫酸锌等。它们可以为水合物。

转用(switch)成分：例如，色甘酸钠、普拉洛芬等。

其他：例如，磺胺甲唑、磺胺甲唑钠、磺胺异唑、磺胺二甲异嘧啶钠、紫草根、欧洲七叶树和它们的盐、肌酐、泰洛沙泊、芝麻油、蓖麻油、二丁基羟基甲苯、苯基乙基醇等。

在本发明的眼科组合物含有水的情况下，作为水的含量，从更显著地发挥本发明效果的观点考虑，例如，以眼科组合物的总量作为基准，水的含量优选为80w/v％以上且小于100w/v％，更优选为85w/v％以上且99.5w/v％以下，进一步优选为90w/v％以上且99.2w/v％以下。

本发明的眼科组合物中使用的水只要是医药上、药理学或生理学上可接受的水即可。作为这样的水，可以列举例如蒸馏水、常水、纯化水、灭菌纯化水、注射用水和注射用蒸馏水等。它们的定义基于第十七次修订日本药局方。

本发明的眼科组合物可以通过将期望量的选自由(A-1)成分、(A-2)成分、(A-3)成分和(A-4)成分组成的组中的一种以上、和任选的(B)TRPA激动剂、以及根据需要的其他成分以达到期望的浓度的方式进行添加和混合来制备。例如，可以通过利用纯化水使这些成分溶解或分散、调整至规定的pH和渗透压并利用过滤灭菌等进行灭菌处理来制备。

需要说明的是，本发明的眼科组合物中，优选不含苯扎氯铵或其盐、咖啡因或其盐、50000单位以上的视黄醇棕榈酸酯，但也可以含有这些。

本发明的眼科组合物的pH只要在医药上、药理学或生理学上可接受的范围内，则没有特别限定。例如，眼科组合物的pH可以根据眼科组合物的用途、制剂形态、使用方法等适当设定，例如可以为4.0～9.5，优选为4.0～9.0，更优选为4.5～9.0，更优选为4.5～8.5，进一步优选为5.0～8.5。

本发明的眼科组合物可以根据需要调节至生物体可接受的范围内的渗透压比。适当的渗透压比可以根据眼科组合物的用途、制剂形态、使用方法等适当设定，例如，可以设定为0.4～5.0，优选设定为0.6～3.0，更优选设定为0.8～2.2，进一步优选设定为0.8～2.0。渗透压比基于第十七次修订日本药局方，设定为试样的渗透压相对于286mOsm(0.9w/v％氯化钠水溶液的渗透压)的比，渗透压参考日本药局方记载的渗透压测定法(凝固点降低法)来测定。需要说明的是，渗透压比测定用标准液(0.9w/v％氯化钠水溶液)通过将氯化钠(日本药局方标准试剂)在500～650℃下干燥40～50分钟后在干燥器(硅胶)中放冷、准确称量其0.900g并溶于纯化水中使其准确为100mL来制备、或者可以使用市售的渗透压比测定用标准液(0.9w/v％氯化钠水溶液)。

本发明的眼科组合物的粘度只要在医药上、药理学或生理学上可接受的范围内，则没有特别限定。例如，利用旋转粘度计(RE550型粘度计、东机产业公司制造，转子；1°34‘×R24)测定的20℃下的粘度优选为0.1～10000mPa·s，更优选为0.1～8000mPa·s，更优选为0.1～1000mPa·s，进一步优选为0.1～100mPa·s，特别优选为1～20mPa·s。

本发明的眼科组合物可以根据目的采用各种制剂形态。作为这样的制剂形态，可以列举例如液剂、凝胶剂、半固体剂(软膏等)等。

本发明的眼科组合物可以作为例如滴眼剂(也称为滴眼液或滴眼药。另外，滴眼剂包含可在角膜接触镜佩戴时滴眼的滴眼剂。)、人工泪液、洗眼剂(也称为洗眼液或洗眼药。另外，洗眼剂包含可在角膜接触镜佩戴时洗眼的洗眼剂。)、角膜接触镜用组合物[角膜接触镜佩戴液、角膜接触镜护理用组合物(角膜接触镜消毒剂、角膜接触镜用保存剂、角膜接触镜用清洗剂、角膜接触镜用清洗保存剂)、角膜接触镜用包装液等]等来使用。

需要说明的是，“角膜接触镜”包括硬角膜接触镜、软角膜接触镜(包含离子性和非离子性这两者，包含硅水凝胶角膜接触镜和非硅水凝胶角膜接触镜这两者)。

从能够更显著地发挥本发明效果的观点考虑，本发明的眼科组合物优选为滴眼剂(包含可在角膜接触镜佩戴中滴眼的滴眼剂。)。在本实施方式的眼科组合物为滴眼剂的情况下，作为其用法和用量，只要是发挥效果、副作用少的用法和用量则没有特别限定，例如，在成人(15岁以上)和7岁以上的儿童的情况下，优选为1次1～7滴，更优选为1次1～3滴、1～2滴或2～3滴。关于滴眼次数，在1次1～3滴、1～2滴或2～3滴的情况下，可以例示1天滴眼5～6次来使用的方法。另外，也可以将1次4～6滴进行1天滴眼3～6次。

本发明的眼科组合物收容于任意的容器中来提供。关于收容本实施方式的眼科组合物的容器，没有特别限制，例如，可以为玻璃制，另外也可以为塑料制。优选为塑料制。作为塑料，可以列举例如聚对苯二甲酸乙二醇酯、聚丙烯酸酯、聚萘二甲酸乙二醇酯、聚碳酸酯、聚乙烯、聚丙烯、聚酰亚胺和构成它们的单体的共聚物、以及它们中的两种以上的混合物。优选为聚对苯二甲酸乙二醇酯。另外，收容本实施方式的眼科组合物的容器可以为能够目视确认容器内部的透明容器，也可以为难以目视确认容器内部的不透明容器。优选为透明容器。在此，“透明容器”包括无色透明容器和有色透明容器这两者。

收容本发明的眼科组合物的容器可以带有喷嘴。关于喷嘴的材质，没有特别限制，例如，可以为玻璃制，另外也可以为塑料制。优选为塑料制。作为塑料，可以列举例如聚对苯二甲酸丁二醇酯、聚乙烯、聚丙烯、聚对苯二甲酸乙二醇酯、聚萘二甲酸乙二醇酯和构成它们的单体的共聚物、以及它们中的两种以上的混合物。

收容本发明的眼科组合物的容器可以为收容多次的使用量的多剂量型，也可以为收容单次的使用量的单剂量型。

[用于抑制由干眼、变态反应等引起的疼痛的眼科组合物或疼痛抑制剂]

另外，本发明的眼科组合物通过含有上述的选自由(A-1)成分、(A-2)成分、(A-3)成分和(A-4)成分组成的组中的至少一种，也可以减轻由于刺激受体TRPA1被活化而引起的、由干眼、变态反应等引起的疼痛。

因此，作为本发明的一个实施方式，提供含有(A)成分的、用于抑制由干眼、变态反应等引起的疼痛的眼科组合物和由干眼、变态反应等引起的疼痛的抑制剂。

这是基于TRPA1与干眼所引起的疼痛有关的报道(例如，参考Neuroscience.2015Apr 2；290:204-13)。

另外，疼痛除了由干眼引起以外，还可以由变态反应引起。需要说明的是，干眼除了基于干眼诊断基准的干眼以外还包括眼睛干燥等。

[眼科组合物用刺激抑制剂]

另外，本发明还提供眼科组合物用刺激抑制剂。作为该刺激抑制剂中的(A)成分、(B)成分的配合和形态，如上文中针对眼科组合物说明的那样。

作为本发明的一个实施方式，提供含有(A)成分作为有效成分的、含有(B)成分的眼科组合物的刺激抑制剂。在TRPA1激动剂为薄荷醇的情况下，能够在保持清凉感的同时抑制眼科组合物的刺激。

[抑制眼科组合物的刺激的方法]

另外，本发明还提供抑制眼科组合物的刺激的方法，其包括：使眼科组合物含有(A)成分和(B)成分。具体为抑制由(B)TRPA1激动剂引起的眼科组合物的刺激的方法，其特征在于，使含有(B)TRPA1激动剂的眼科组合物进一步含有选自由下述成分组成的组中的至少一种：(A-1)解充血成分；(A-2)抗组胺成分；(A-3)选自由樟脑、薄荷酮、异薄荷醇、桉树脑、薄荷呋喃、蒎烯、柠檬烯、新薄荷醇和乙酸甲酯组成的组中的至少一种；以及(A-4)局部麻醉成分。

[眼刺激的评价方法]

另外，本发明还提供眼刺激的评价方法。例如，一种受试样品的眼刺激的评价方法，其特征在于，使受试样品与TRPA1表达细胞接触，测定由上述受试样品通过TRPA1介导而引起的细胞内钙离子浓度的变化量。

作为本发明的评价方法中使用的受试样品，可以使用例如(B)TRPA1激动剂与眼科组合物的领域中通常使用的成分的组合。例如，作为这样的成分，可以为上述的(A-1)成分、(A-2)成分、(A-3)成分或(A-4)成分，也可以为表面活性剂、增稠剂、缓冲剂、等渗剂、载体、螯合剂、基质、pH调节剂、稳定剂、防腐剂、杀菌剂或抗菌剂、糖类、糖醇类、眼肌调节药剂、维生素类、氨基酸类、消炎剂、收敛剂等。

另外，(B)TRPA1激动剂可以作为受试样品的对照(对照试样)来使用。

TRPA1表达细胞只要是能够稳定保持hTRPA1基因的细胞则没有特别限定，例如，优选T-REx-293细胞、HEK293T细胞等。

关于上述方法中的细胞内钙离子浓度的变化，例如，可以使用公知的Ca²⁺浓度指示剂、Fluo-4、Fluo-8或Fluo-2等，利用市售的酶标仪、荧光显微镜等进行测定、观察。

本发明中，通过测定细胞内钙离子浓度的变化量，能够得到眼刺激的有无、眼刺激的强度等信息。另外，通过对使受试样品、对照试样与TRPA1表达细胞接触的时间进行调整等，能够经时观察细胞内钙离子浓度，还得到与受试样品对TRPA1表达细胞的亲和性有关的信息(例如，与受试样品的LogP值(分配系数)等的相关性)等。

另外，作为使受试样品与TRPA1表达细胞接触的方法，可以列举例如：将受试样品或其稀释液、或者含有受试样品的人工泪液等添加到培养的TRPA1表达细胞中、对人等动物进行滴眼的方法等。

以下示出实施例对本发明更具体地进行说明，但本发明不受实施例的任何限定。

实施例

＜使用细胞＞

保持hTRPA1基因的T-REx-293细胞株的制备

从人WI38细胞中提取出hTRPA1的mRNA。稳定地表达hTRPA1的HEK细胞使用Invitrogen公司的四环素调控T-REx表达系统来制作。以hTRPA1 mRNA作为模板，利用RT-PCR进行扩增，将扩增后的hTRPA1的cDNA整合到作为哺乳类细胞用基因表达载体的pcDNA4/TO(invitrogen公司制造)中，使用invitrogen公司的基因导入试剂Lipofectamin 2000试剂，导入到T-REx-293细胞中。pcDNA4/TO中整合有吉欧霉素(Zeocin)，在T-REx-293细胞中保持有用于维持T-Rex系统的质粒(杀稻瘟菌素抗性基因)。使用作为抗生素的吉欧霉素500μg/mL和杀稻瘟菌素10μg/mL，建立稳定保持hTRPA1基因的T-REx-293细胞株。

＜细胞培养＞

关于保持hTRPA1的T-REx-293细胞，使用含有10％FBS、100单位/mL青霉素、100mg/mL链霉素、250ng/mL两性霉素B的DMEM培养基，在5％二氧化碳存在下进行培养。传代时，加入200μg/mL吉欧霉素、5μg/mL杀稻瘟菌素，使最大传代数为50以下来进行。

具体而言，作为前培养，以达到半汇合的方式在60mm培养皿上培养T-REx-293细胞，然后用PBS(-)进行清洗。通过1×胰蛋白酶/EDTA处理从培养皿剥离细胞，加入DMEM培养基。然后，移至15mL试管中，以800rpm在室温下离心分离4分钟。仅将DMEM培养基抽吸除去，通过吹打使细胞散开后，加入新的DMEM培养基，以达到约40×10⁴～50×10⁴个细胞/mL的方式调整细胞数，制作细胞悬浮液。此时，为了进行受体表达，加入1μg/mL四环素。将制作的细胞悬浮液以各100μL分注到96孔板中，在37℃、5％CO₂培养箱中温育一晩，用于试验。

[试验例1]l-薄荷醇所带来的刺激感抑制确认试验

已知薄荷醇使刺激受体TRPA1活化而带来刺激。因此，将l-薄荷醇和受试样品(实施例)给药于上述细胞，对于l-薄荷醇所引起的TRPA1活性是否被受试样品抑制进行了确认。

使用Ca²⁺浓度指示剂(Fluo-4或Fluo-8(AAT Bioquest,Inc.公司制造)，观察TRP活性是否发生变化。使Ca²⁺浓度指示剂摄入预先保持了hTRPA1的T-REx-293细胞内，利用酶标仪测定荧光量。

具体而言，按照以下的规程来实施。将前一天进行了准备(上述的细胞培养)的96孔板从培养箱取出，通过倾析将DMEM培养基除去。用100μL/孔的缓冲液(pH 7.4、5.37mMKCl、0.44mM KH₂PO₄、137mM NaCl、0.34mM Na₂HPO₄、5.56mM D-葡萄糖、20mM HEPES、1mMCaCl₂、0.1％牛血清白蛋白、2.5mM丙磺舒、余量纯化水)温和地清洗，将以1.5μM Fluo-8溶解后的同上的缓冲液以各50μL添加到孔中，然后，在37℃、5％CO₂培养箱中处理1小时。培养箱处理后，将加入了Fluo-8的同上的缓冲液通过倾析除去，用100μL/孔的同上的缓冲液温和地清洗。然后，添加180μL/孔的同上的缓冲液，利用Flexstation II(注册商标)或Flexstation III(注册商标)酶标仪(Molecular Devices、Sunnyvale、CA、USA)开始测定。在酶标仪测定开始30秒后，添加20μL/孔受试样品，对添加后5秒～120秒间的荧光量的最大值进行测定，将该值作为荧光量。

需要说明的是，TRP活性(％)基于下式来计算。

TRP活性(％)＝(受试样品给药时的荧光量/l-薄荷醇单独给药时的荧光量)×100

比较例2(l-薄荷醇单独给药时)为100％。

将下述表1中记载的受试样品的TRP活性的计算结果示于图1中。需要说明的是，比较例1是对照(未添加l-薄荷醇的缓冲液(pH 7.4、5.37mM KCl、0.44mM KH₂PO₄、137mM NaCl、0.34mM Na₂HPO₄、5.56mM D-葡萄糖、20mM HEPES、1mM CaCl₂、0.1％牛血清白蛋白、2.5mM丙磺舒、余量纯化水))，比较例2是使l-薄荷醇(TRPA1激动剂)以66.7μM的浓度溶解于与比较例1同样的缓冲液中而得到的。另外，实施例是使l-薄荷醇(66.7μM)和表1记载的成分以表2记载的浓度溶解于与比较例1同样的缓冲液中而得到的。

[表1]

[表2]

根据图1的结果，本发明的含有作为(A-1)解充血成分的四氢唑啉盐酸盐、萘甲唑啉盐酸盐、作为(A-2)抗组胺成分的氯苯那敏马来酸盐、苯海拉明盐酸盐、作为(A-3)成分的d-樟脑、dl-樟脑、(-)-薄荷酮、(+)-异薄荷醇、1,8-桉树脑、薄荷呋喃、α-蒎烯、β-蒎烯、(R)-(+)-柠檬烯、(S)-(-)-柠檬烯、新薄荷醇、乙酸甲酯、以及作为(A-4)成分的氯丁醇的眼科组合物能够抑制TRPA1激动剂所带来的刺激感。另外，对于包含作为含有(A-3)成分的精油的椒样薄荷油和桉叶油的眼科组合物而言，也同样能够抑制TRPA1激动剂所带来的刺激感。

[试验例2]l-薄荷醇的TRPA1活化的可见化、经时观察和结合能力评价

基于与上述试验例1同样的原理，使用荧光量随着Ca²⁺浓度增加的Ca²⁺浓度指示剂Fluo-8，测定TRP的活化度。使Ca²⁺浓度指示剂摄入预先保持了hTRPA1基因的T-REx-293细胞内，利用荧光显微镜系统(Leica,LAS AF6000)使荧光量可见化。

在盖玻片上以每1张载玻片为20μL滴加约60×10⁴个细胞/mL的保持了hTRPA1基因的T-REx-293细胞DMEM悬浮液，在37℃、5％CO₂培养箱中温育一晩。将温育后的盖玻片从培养箱取出，通过倾析将培养基除去。将盖玻片用缓冲液(pH 7.4、5.37mM KCl、0.44mMKH₂PO₄、137mM NaCl、0.34mM Na₂HPO₄、5.56mM D-葡萄糖、20mM HEPES、1mM CaCl₂、余量纯化水)温和地清洗后，添加荧光指示剂Fluo-8/缓冲液，在37℃、5％CO₂培养箱中进行1小时处理。在培养箱处理后，将盖玻片设置在腔室上，利用荧光显微镜系统(Leica,LAS AF6000)使荧光量可见化并经时观察。

本试验的流程如下所述。

(1)确认在缓冲液中荧光试剂的发光量稳定后，将缓冲液替换为含有l-薄荷醇(66.7μM)的缓冲液，使TRPA1活化。

(2)可以确认到TRPA1的活化后，将含有l-薄荷醇(66.7μM)的缓冲液进一步替换为含有相同浓度的l-薄荷醇与各受试样品(四氢唑啉盐酸盐0.003125w/v％、椒样薄荷油0.015w/v％)的组合，确认TRPA1活性是否得到抑制。

(3)可以确认到TRPA1活性的抑制效果后，将含有l-薄荷醇和各受试样品的缓冲液恢复为(1)中使用的含有l-薄荷醇的缓冲液，确认TRPA1是否再次被活化。

将利用荧光显微镜使l-薄荷醇所引起的TRPA1活化可见化的结果示于图2中。使用冰片作为受试样品的例子中，显示出TRPA1活性抑制效果后，使试验液恢复为l-薄荷醇时，再次显示出TRPA1活性(参考图2的参考例)。另一方面，使用作为(A-1)解充血成分的四氢唑啉盐酸盐和作为含有(A-3)成分的精油的椒样薄荷油作为受试样品的例子中，显示出TRPA1活性抑制效果后，使试验液恢复为仅薄荷醇时，未观察到抑制效果、或者再活化弱(参考图2的实施例)。

即认为，本发明的(A-1)成分和(A-3)成分分别能够暂时持续显示对TRPA1受体的抑制效果。

[试验例3]人的四氢唑啉盐酸盐所带来的刺激感抑制确认试验

将使l-薄荷醇(0.01w/v％)和聚氧乙烯氢化蓖麻油(0.1w/v％)溶解于人工泪液(乐敦制药株式会社制造的“ロートソフトワン滴眼”，含有氯化钾0.1w/v％、氯化钠0.4w/v％、硼酸、pH调节剂)中而得到的液体(比较例)、使l-薄荷醇(0.01w/v％)、聚氧乙烯氢化蓖麻油(0.1w/v％)和四氢唑啉盐酸盐(0.05w/v％)溶解于同上的人工泪液中而得到的液体(实施例)分别滴加到相同受试者的左右眼中，对清凉感和刺激感进行评价，将结果示于图3中。需要说明的是，受试者是裸眼或戴眼镜的8名成人男性，评价通过使用VAS标尺(最大刻度：20)进行数值化来进行。

结果表明，通过将l-薄荷醇与作为(A-1)解充血成分的四氢唑啉盐酸盐组合，能够在维持l-薄荷醇的清凉感的同时抑制l-薄荷醇的刺激感。即，在人中也确认到，利用本发明的(A-1)解充血成分能够抑制TRPA1激动剂所带来的刺激感。

[制剂例]

制备下述表4和表5中记载的处方例。纯化水以使各液剂的总量达到100mL的方式进行添加。

[表4]

[表5]

产业上的可利用性

本发明涉及刺激感得到了抑制的眼科组合物、眼科组合物用刺激抑制剂、抑制眼科组合物的刺激的方法和眼刺激的评价方法。本发明的剂在医药品的领域中是有用的。