具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合具体实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

现有的药剂抗性大，不利于长期灭杀鳞翅目、双翅目和鞘翅目昆虫，易使得杀鳞翅目、双翅目和鞘翅目昆虫反复出现，本发明中通过绿僵菌和苏云金芽孢杆菌的联合使用显著的提高了对鳞翅目、双翅目和鞘翅目昆虫的防治效果。

实施例1

一种防虫害的复合微生物菌剂的制备方法，具体包括以下步骤：

(1)将60g的运载体进行粉碎，所述运载体为硅藻土，过150目筛，然后将运载体粉末配制成质量百分比为70％的浆液；液体发酵培养多粘芽孢杆菌、绿僵菌、苏云金芽孢杆菌和链霉菌，液体发酵的培养基中的主要成分为牛肉膏3g、蛋白胨10g、NaCl5g,蒸馏水1000mL,pH＝7.4，分别获得多粘芽孢杆菌菌液、绿僵菌菌液、苏云金芽孢杆菌菌液和链霉菌菌液，然后将获得的多粘芽孢杆菌菌液、绿僵菌菌液、苏云金芽孢杆菌菌液和链霉菌菌液分别进行旋转培养，使得转速为300r/min，旋转15分钟，然后取出各菌液，使用台盼蓝分离个菌种中的活菌和死菌，取出活菌；

(2)称取多粘芽孢杆菌菌液30g、绿僵菌菌液20g、苏云金芽孢杆菌菌液20g、链霉菌菌液10g，分别将各菌液进行喷雾干燥，制备成粉状菌粉，然后将各菌粉放置在一起进行混合，将混合后的菌粉放入步骤(1)中所制得的运载体浆液中，进行搅拌混合，搅拌均匀后加入20g的防护剂，所述防护剂为水解胶原蛋白、几丁质、环状糊精和明胶之间的组合物，所述水解胶原蛋白、几丁质、环状糊精和明胶之间的质量比为1.5：1：1.6：1；搅拌均匀后加入80g膨润土，搅拌均匀，即可得到产品，产品中有效活菌数量在2-3亿/克。

实施例2

一种防虫害的复合微生物菌剂的制备方法，具体包括以下步骤：

(1)将80g的运载体进行粉碎，所述运载体为硅藻土，过150目筛，然后将运载体粉末配制成质量百分比为80％的浆液；液体发酵培养多粘芽孢杆菌、绿僵菌、苏云金芽孢杆菌和链霉菌，分别获得多粘芽孢杆菌菌液、绿僵菌菌液、苏云金芽孢杆菌菌液和链霉菌菌液，然后将获得的多粘芽孢杆菌菌液、绿僵菌菌液、苏云金芽孢杆菌菌液和链霉菌菌液分别进行旋转培养，使得转速为400r/min，旋转20分钟，然后取出各菌液，使用台盼蓝分离个菌种中的活菌和死菌，取出活菌；

(2)称取多粘芽孢杆菌菌液50g、绿僵菌菌液40g、苏云金芽孢杆菌菌液40g、链霉菌菌液30g，分别将各菌液进行喷雾干燥，制备成粉状菌粉，然后将各菌粉放置在一起进行混合，将混合后的菌粉放入步骤(1)中所制得的运载体浆液中，进行搅拌混合，搅拌均匀后加入40g的防护剂，所述防护剂为水解胶原蛋白、几丁质、环状糊精和明胶之间的组合物，所述水解胶原蛋白、几丁质、环状糊精和明胶之间的质量比为1.7：1.2：1.8：1；搅拌均匀后加入100g膨润土，搅拌均匀，即可得到产品，产品中有效活菌数量在2-3亿/克。

实施例3

一种防虫害的复合微生物菌剂的制备方法，具体包括以下步骤：

(1)将65g的运载体进行粉碎，所述运载体为硅藻土，过150目筛，然后将运载体粉末配制成质量百分比为75％的浆液；液体发酵培养多粘芽孢杆菌、绿僵菌、苏云金芽孢杆菌和链霉菌，分别获得多粘芽孢杆菌菌液、绿僵菌菌液、苏云金芽孢杆菌菌液和链霉菌菌液，然后将获得的多粘芽孢杆菌菌液、绿僵菌菌液、苏云金芽孢杆菌菌液和链霉菌菌液分别进行旋转培养，使得转速为350r/min，旋转18分钟，然后取出各菌液，使用台盼蓝分离个菌种中的活菌和死菌，取出活菌；

(2)称取多粘芽孢杆菌菌液35g、绿僵菌菌液25g、苏云金芽孢杆菌菌液25g、链霉菌菌液15g，分别将各菌液进行喷雾干燥，制备成粉状菌粉，然后将各菌粉放置在一起进行混合，将混合后的菌粉放入步骤(1)中所制得的运载体浆液中，进行搅拌混合，搅拌均匀后加入25g的防护剂，所述防护剂为水解胶原蛋白、几丁质、环状糊精和明胶之间的组合物，所述水解胶原蛋白、几丁质、环状糊精和明胶之间的质量比为1.5：1：1.6：1；搅拌均匀后加入85g膨润土，搅拌均匀，即可得到产品，产品中有效活菌数量在2-3亿/克。

实施例4

一种防虫害的复合微生物菌剂的制备方法，具体包括以下步骤：

(1)将70g的运载体进行粉碎，所述运载体为硅藻土，过150目筛，然后将运载体粉末配制成质量百分比为75％的浆液；液体发酵培养多粘芽孢杆菌、绿僵菌、苏云金芽孢杆菌和链霉菌，分别获得多粘芽孢杆菌菌液、绿僵菌菌液、苏云金芽孢杆菌菌液和链霉菌菌液，然后将获得的多粘芽孢杆菌菌液、绿僵菌菌液、苏云金芽孢杆菌菌液和链霉菌菌液分别进行旋转培养，使得转速为350r/min，旋转18分钟，然后取出各菌液，使用台盼蓝分离个菌种中的活菌和死菌，取出活菌；

(2)称取多粘芽孢杆菌菌液40g、绿僵菌菌液30g、苏云金芽孢杆菌菌液30g、链霉菌菌液20g，分别将各菌液进行喷雾干燥，制备成粉状菌粉，然后将各菌粉放置在一起进行混合，将混合后的菌粉放入步骤(1)中所制得的运载体浆液中，进行搅拌混合，搅拌均匀后加入30g的防护剂，所述防护剂为水解胶原蛋白、几丁质、环状糊精和明胶之间的组合物，所述水解胶原蛋白、几丁质、环状糊精和明胶之间的质量比为1.5：1：1.6：1；搅拌均匀后加入95g膨润土，搅拌均匀，即可得到产品，产品中有效活菌数量在2-3亿/克。

实施例5

一种防虫害的复合微生物菌剂的制备方法，具体包括以下步骤：

(1)将75g的运载体进行粉碎，所述运载体为硅藻土，过150目筛，然后将运载体粉末配制成质量百分比为75％的浆液；液体发酵培养多粘芽孢杆菌、绿僵菌、苏云金芽孢杆菌和链霉菌，分别获得多粘芽孢杆菌菌液、绿僵菌菌液、苏云金芽孢杆菌菌液和链霉菌菌液，然后将获得的多粘芽孢杆菌菌液、绿僵菌菌液、苏云金芽孢杆菌菌液和链霉菌菌液分别进行旋转培养，使得转速为350r/min，旋转18分钟，然后取出各菌液，使用台盼蓝分离个菌种中的活菌和死菌，取出活菌；

(2)称取多粘芽孢杆菌菌液45g、绿僵菌菌液35g、苏云金芽孢杆菌菌液35g、链霉菌菌液25g，分别将各菌液进行喷雾干燥，制备成粉状菌粉，然后将各菌粉放置在一起进行混合，将混合后的菌粉放入步骤(1)中所制得的运载体浆液中，进行搅拌混合，搅拌均匀后加入35g的防护剂，所述防护剂为水解胶原蛋白、几丁质、环状糊精和明胶之间的组合物，所述水解胶原蛋白、几丁质、环状糊精和明胶之间的质量比为1.5：1：1.6：1；搅拌均匀后加入90g膨润土，搅拌均匀，即可得到产品，产品中有效活菌数量在2-3亿/克。

实施例6

一种防虫害的复合微生物菌剂的制备方法，具体包括以下步骤：

(1)将70g的运载体进行粉碎，所述运载体为硅藻土，过150目筛，然后将运载体粉末配制成质量百分比为75％的浆液；液体发酵培养多粘芽孢杆菌、绿僵菌、苏云金芽孢杆菌和链霉菌，分别获得多粘芽孢杆菌菌液、绿僵菌菌液、苏云金芽孢杆菌菌液和链霉菌菌液，然后将获得的多粘芽孢杆菌菌液、绿僵菌菌液、苏云金芽孢杆菌菌液和链霉菌菌液分别进行旋转培养，使得转速为350r/min，旋转18分钟，然后取出各菌液，使用台盼蓝分离个菌种中的活菌和死菌，取出活菌；

(2)称取多粘芽孢杆菌菌液40g、绿僵菌菌液30g、苏云金芽孢杆菌菌液30g、链霉菌菌液20g，分别将各菌液进行喷雾干燥，制备成粉状菌粉，然后将各菌粉放置在一起进行混合，将混合后的菌粉放入步骤(1)中所制得的运载体浆液中，进行搅拌混合，搅拌均匀后加入30g的防护剂，所述防护剂为水解胶原蛋白、几丁质、环状糊精和明胶之间的组合物，所述水解胶原蛋白、几丁质、环状糊精和明胶之间的质量比为1.6：1：1.6：1；搅拌均匀后加入90g膨润土，搅拌均匀，即可得到产品，产品中有效活菌数量在2-3亿/克。

实施例7

本实施例和实施例6的制备方法相同，且部分数据相同，其不同之处在于，本实施例中所述防护剂中的水解胶原蛋白、几丁质、环状糊精和明胶之间的质量比为1.6：1：1.65：1。

实施例8

本实施例和实施例6的制备方法相同，且部分数据相同，其不同之处在于，本实施例中所述防护剂中的水解胶原蛋白、几丁质、环状糊精和明胶之间的质量比为1.6：1：1.7：1。

实施例9

本实施例和实施例6的制备方法相同，且部分数据相同，其不同之处在于，本实施例中所述防护剂中的水解胶原蛋白、几丁质、环状糊精和明胶之间的质量比为1.6：1：1.75：1。

实施例10

本实施例和实施例6的制备方法相同，且部分数据相同，其不同之处在于，本实施例中所述防护剂中的水解胶原蛋白、几丁质、环状糊精和明胶之间的质量比为1.6：1：1.8：1。

实施例11

一种防虫害的复合微生物菌剂的制备方法，具体包括以下步骤：

(1)将70g的运载体进行粉碎，所述运载体为硅藻土，过150目筛，然后将运载体粉末配制成质量百分比为75％的浆液；液体发酵培养多粘芽孢杆菌、绿僵菌、苏云金芽孢杆菌和链霉菌，分别获得多粘芽孢杆菌菌液、绿僵菌菌液、苏云金芽孢杆菌菌液和链霉菌菌液，然后将获得的多粘芽孢杆菌菌液、绿僵菌菌液、苏云金芽孢杆菌菌液和链霉菌菌液分别进行旋转培养，使得转速为350r/min，旋转20分钟，然后取出各菌液，使用台盼蓝分离个菌种中的活菌和死菌，取出活菌；

(2)称取多粘芽孢杆菌菌液40g、绿僵菌菌液30g、苏云金芽孢杆菌菌液30g、链霉菌菌液20g，分别将各菌液进行喷雾干燥，制备成粉状菌粉，然后将各菌粉放置在一起进行混合，将混合后的菌粉放入步骤(1)中所制得的运载体浆液中，进行搅拌混合，搅拌均匀后加入30g的防护剂，所述防护剂为水解胶原蛋白、几丁质、环状糊精和明胶之间的组合物，所述水解胶原蛋白、几丁质、环状糊精和明胶之间的质量比为1.6：1：1.7：1；搅拌均匀后加入90g膨润土，搅拌均匀，即可得到产品，产品中有效活菌数量在2-3亿/克。

实施例12

一种防虫害的复合微生物菌剂的制备方法，具体包括以下步骤：

(1)将70g的运载体进行粉碎，所述运载体为硅藻土，过150目筛，然后将运载体粉末配制成质量百分比为75％的浆液；液体发酵培养多粘芽孢杆菌、绿僵菌、苏云金芽孢杆菌和链霉菌，分别获得多粘芽孢杆菌菌液、绿僵菌菌液、苏云金芽孢杆菌菌液和链霉菌菌液，然后将获得的多粘芽孢杆菌菌液、绿僵菌菌液、苏云金芽孢杆菌菌液和链霉菌菌液分别进行旋转培养，使得转速为400r/min，旋转20分钟，然后取出各菌液，使用台盼蓝分离个菌种中的活菌和死菌，取出活菌；

(2)称取多粘芽孢杆菌菌液40g、绿僵菌菌液30g、苏云金芽孢杆菌菌液30g、链霉菌菌液20g，分别将各菌液进行喷雾干燥，制备成粉状菌粉，然后将各菌粉放置在一起进行混合，将混合后的菌粉放入步骤(1)中所制得的运载体浆液中，进行搅拌混合，搅拌均匀后加入30g的防护剂，所述防护剂为水解胶原蛋白、几丁质、环状糊精和明胶之间的组合物，所述水解胶原蛋白、几丁质、环状糊精和明胶之间的质量比为1.6：1：1.7：1；搅拌均匀后加入90g膨润土，搅拌均匀，即可得到产品，产品中有效活菌数量在2-3亿/克。

对比例1

一种防虫害的复合微生物菌剂的制备方法，具体包括以下步骤：

(1)将70g的运载体进行粉碎，所述运载体为硅藻土，过150目筛，然后将运载体粉末配制成质量百分比为75％的浆液；液体发酵培养多粘芽孢杆菌、绿僵菌和链霉菌，分别获得多粘芽孢杆菌菌液、绿僵菌菌液和链霉菌菌液，然后将获得的多粘芽孢杆菌菌液、绿僵菌菌液和链霉菌菌液分别进行旋转培养，使得转速为350r/min，旋转18分钟，然后取出各菌液，使用台盼蓝分离个菌种中的活菌和死菌，取出活菌；

(2)称取多粘芽孢杆菌菌液40g、绿僵菌菌液30g和链霉菌菌液20g，分别将各菌液进行喷雾干燥，制备成粉状菌粉，然后将各菌粉放置在一起进行混合，将混合后的菌粉放入步骤(1)中所制得的运载体浆液中，进行搅拌混合，搅拌均匀后加入30g的防护剂，所述防护剂为水解胶原蛋白、几丁质、环状糊精和明胶之间的组合物，所述水解胶原蛋白、几丁质、环状糊精和明胶之间的质量比为1.6：1：1.7：1；搅拌均匀后加入90g膨润土，搅拌均匀，即可得到产品，产品中有效活菌数量在2-3亿/克。

对比例2

一种防虫害的复合微生物菌剂的制备方法，具体包括以下步骤：

(1)将70g的运载体进行粉碎，所述运载体为硅藻土，过150目筛，然后将运载体粉末配制成质量百分比为75％的浆液；液体发酵培养多粘芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌和链霉菌，分别获得多粘芽孢杆菌菌液、苏云金芽孢杆菌菌液和链霉菌菌液，然后将获得的多粘芽孢杆菌菌液、苏云金芽孢杆菌菌液和链霉菌菌液分别进行旋转培养，使得转速为350r/min，旋转18分钟，然后取出各菌液，使用台盼蓝分离个菌种中的活菌和死菌，取出活菌；

(2)称取多粘芽孢杆菌菌液40g、苏云金芽孢杆菌菌液30g、链霉菌菌液20g，分别将各菌液进行喷雾干燥，制备成粉状菌粉，然后将各菌粉放置在一起进行混合，将混合后的菌粉放入步骤(1)中所制得的运载体浆液中，进行搅拌混合，搅拌均匀后加入30g的防护剂，所述防护剂为水解胶原蛋白、几丁质、环状糊精和明胶之间的组合物，所述水解胶原蛋白、几丁质、环状糊精和明胶之间的质量比为1.6：1：1.7：1；搅拌均匀后加入90g膨润土，搅拌均匀，即可得到产品，产品中有效活菌数量在2-3亿/克。

对比例3

一种防虫害的复合微生物菌剂的制备方法，具体包括以下步骤：

(1)将70g的运载体进行粉碎，所述运载体为硅藻土，过150目筛，然后将运载体粉末配制成质量百分比为75％的浆液；液体发酵培养多粘芽孢杆菌和链霉菌，分别获得多粘芽孢杆菌菌液和链霉菌菌液，然后将获得的多粘芽孢杆菌菌液和链霉菌菌液分别进行旋转培养，使得转速为350r/min，旋转18分钟，然后取出各菌液，使用台盼蓝分离个菌种中的活菌和死菌，取出活菌；

(2)称取多粘芽孢杆菌菌液40g和链霉菌菌液20g，分别将各菌液进行喷雾干燥，制备成粉状菌粉，然后将各菌粉放置在一起进行混合，将混合后的菌粉放入步骤(1)中所制得的运载体浆液中，进行搅拌混合，搅拌均匀后加入30g的防护剂，所述防护剂为水解胶原蛋白、几丁质、环状糊精和明胶之间的组合物，所述水解胶原蛋白、几丁质、环状糊精和明胶之间的质量比为1.6：1：1.7：1；搅拌均匀后加入90g膨润土，搅拌均匀，即可得到产品，产品中有效活菌数量在2-3亿/克。

选取15组有出现地老虎的实验地，在玉米种植时，挖穴，将实施例1-12和对比例1-3所制得的复合微生物菌剂分别按用量3kg/亩放入对应组的穴中，挑选健康的玉米苗放入穴中，浇定植水，生长中后期每亩用量4kg，观察对地老虎的防治效果。

表1

综上所述：由表1可知本发明实施例对地老虎具有有效的灭杀效果，可防止地老虎的反复出现，利于植物生长，本发明提供了一种防虫害的复合微生物菌剂及其应用，本发明中的复合微生物菌剂由多粘芽孢杆菌、绿僵菌、苏云金芽孢杆菌、链霉菌、防护剂和运载体组成，本发明中的复合微生物菌剂对鳞翅目、双翅目和鞘翅目昆虫具有良好的防治和灭杀效果，本发明中通过绿僵菌和苏云金芽孢杆菌的联合使用显著的提高了对鳞翅目、双翅目和鞘翅目昆虫的防治效果，可长期有效的对鳞翅目、双翅目和鞘翅目昆虫具有良好的防治作用，且同时能够利于植物的生长。

对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。

此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。