利用银杏外种皮制备高纯度银杏酚酸提取物的工艺方法
阅读说明：本技术 利用银杏外种皮制备高纯度银杏酚酸提取物的工艺方法 (Process for preparing high-purity ginkgolic acid extract by using ginkgo episperms ) 是由 杨宪勇 张爱丽 花丽 于 2021-08-15 设计创作，主要内容包括：本发明具体公开了一种利用银杏外种皮制备高纯度银杏酚酸提取物的工艺方法,该方法是将银杏外种皮经浸泡、磨成颗粒度在6.5～13μm的浆液；将浆液分别用乙醇和石油醚浸提,经回收溶剂后将浸提物合并,再将合并后的浸提物加入去离子水经充分搅拌加入聚酰胺进行吸附二次,再将吸附后的聚酰胺用乙醇洗脱三次,回收乙醇得稠膏状醇提物,将醇提物真空干燥、粉碎得浅棕黄色粉末,得到的最终产物银杏酚酸的含量＞90重量%。本发明高纯度的银杏酚酸提取物可作为药物制剂、化妆品制品、生物农药和生物杀虫剂制剂的用途。(The invention particularly discloses a process method for preparing a high-purity ginkgolic acid extract by utilizing ginkgo biloba sarcotesta, which comprises the steps of soaking the ginkgo biloba sarcotesta and grinding into slurry with the granularity of 6.5-13 mu m; respectively extracting the serous fluid with ethanol and petroleum ether, merging the extracts after recovering the solvent, adding deionized water into the merged extracts, fully stirring and adding polyamide for adsorption twice, eluting the adsorbed polyamide with ethanol for three times, recovering the ethanol to obtain thick paste-shaped ethanol extract, drying the ethanol extract in vacuum, and crushing to obtain light brown yellow powder, wherein the content of the ginkgolic acid of the final product is more than 90 percent by weight. The high-purity ginkgolic acid extract can be used as a pharmaceutical preparation, a cosmetic product, a biological pesticide and a biological insecticide preparation.)
技术领域
本发明属于医药和生物农药加工领域，涉及医药及生物农药中所含银杏酚酸提取物的制备，具体涉及利用银杏外种皮制备高纯度银杏酚酸提取物的工艺方法。
背景技术
银杏酚酸主要来自银杏的叶、果、外种皮及根茎中，其中银杏外种皮中含量最高，约占银杏外种皮的3～5%。银杏酚酸对真菌有较强的杀灭或抑制作用，对某些病虫害也具有很好的杀灭作用，因此，在医药领域被开发制备成药剂广泛地应用于皮肤科、妇科等相关疾病的预防和治疗，尚有在化妆品中的应用，在农业病原菌、病虫害方面有较好的防治效果，因而被制作成生物农药应用；银杏酚酸在农业病害和虫害领域的应用，已为本领域技术人员公知的技术，并且在研究人员的不断努力下，其防治效果不断提升，并取得了可喜的应用效果。银杏酚酸虽已能够化学合成，使其有效成分含量稳定，但其生产成本较高，价格较贵，增加了生产成本，乃至生产生物农药的价格较贵，增加了农民的负担，导致产品得不到普及应用。同时，我国是银杏种植业的大国，是世界的主产区，江苏邳州、泰兴，山东郯城又是国内银杏产业的主产区，而银杏酚酸广泛存在于银杏的叶、果、根茎、外种皮等部位，利用银杏叶、果、根茎、外种皮等部位的提取物中可获得银杏酚酸，或对银杏叶、果、根茎、外种皮提取加工产物在提取加工过程中剩余的废料中重新回收。特别是每年在银杏收获季节，大量的银杏外种皮作为废料被扔掉，这也给提取银杏酚酸提供了廉价的资源，从而能够大大地降低生产成本，并且能够成为源源不断地银杏酚酸原料来源。
国内普遍利用乙醇、甲醇、石油醚等有机溶液作为提取或精制的溶媒提取银杏酚酸，也有利用离子交换树脂吸附再洗脱等工艺进行银杏酚酸的提取，有机溶液提取普遍存在提取率低、杂质含量高，银杏酚酸的含量和纯度较低，离子交换法制得银杏酚酸含量和纯度相对较高，但其工艺相对复杂，生产成本较高，而且树脂再生需要大量的酸碱处理，不仅操作麻烦，而且还会有大量的酸液和碱液成为废弃液流出，造成环境污染。寻求一种能够制备高纯度银杏酚酸，且工艺简单、易行的方法，是目前需要深入研究开发的方向。
发明内容
发明人多年来不断针对以银杏外种皮为原料从中提取银杏酚酸进行研究，以寻求一种工艺简单易行且提取率高、银杏酚酚含量高的有效方法，以获得更好的银杏酚酸在制备外用药物、生物农药方面的应用。
为了实现上述目的，本发明提供了一种利用银杏外种皮制备高纯度银杏酚酸提取物的工艺方法。就本发明的目的，是通过以下方法实现的：
利用银杏外种皮制备高纯度银杏酚酸提取物的工艺方法，其特征在于步骤如下：
步骤（一）将挑拣干净并经干燥后的银杏外种皮按质量比为1：10的比例加入去离子水浸泡18～24h，浸泡水温在40～43℃，浸泡结束后，滤去浸泡水；
步骤（二）将浸泡后的银杏外种皮按干银杏外种皮的重量加入1倍量的去离子水，用磨浆机磨成粗浆，然后将粗浆再用胶体磨进行细磨，得细磨浆液，所得细磨浆液的颗粒度在6.5～13μm；
步骤（三）将步骤（二）所得细磨浆液先用含量浓度为98%V/V的乙醇提取一次，具体的提取条件是乙醇的用量为细磨浆液重量的10倍，浸提温度为42～45℃，浸提时间为8～12h，滤取乙醇浸提液，滤渣再用石油醚提取一次，具体的提取条件是石油醚的用量为细磨浆液重量的10倍，浸提温度为30～36℃，浸提时间为18h，滤取石油醚浸提液，然后将乙醇浸提液和石油醚浸提液分别回收乙醇和石油醚，分别得膏状乙醇浸提物和膏状石油醚浸提物，将浸提物合并，得混合膏状浸提物；
步骤（四）将步骤（三）所得混合膏状浸提物加入重量30倍的去离子水，充分搅拌使均匀，在不停地搅拌下加入混合膏状浸提物重量5倍的聚酰胺，搅拌6h，搅拌结束后，静止沉降3h，滤取聚酰胺；滤液再加入混合膏状浸提物重量5倍的聚酰胺，搅拌6h，搅拌结束后，静止沉降3h，滤取聚酰胺；将两次滤取的聚酰胺合并于滤器中，自滤器上不断添加去离子水，至滤过的去离子水基本无色时为止，然后将聚酰胺控尽水分；
步骤（五）将步骤（四）中控尽水分的聚酰胺按聚酰胺重量10倍、8倍、5倍，浓度为98%V/V的乙醇洗脱三次，洗脱的条件为每次加入乙醇后，在温度38～42℃条件下，设转速为30r/min搅拌3～5h，合并三次洗脱液，回收乙醇，得稠膏状醇提物；
步骤（六）将步骤（五）所得稠膏状醇提物，置入真空干燥机内，在不大于50℃的条件下真空干燥，粉碎，得浅棕黄色银杏酚酸提取物粉末；获得的银杏酚酸提取物，经检验，该提取物中银杏酚酸含量＞90重量%。
本发明的有益效果是：
1、本发明利用银杏外种皮提取银杏酚酸提取物的提取工艺简单，溶剂均得到回收再利用，损耗少，耗能少，且工艺简单、易行，提取和洗脱分离效果好，提取物中的银杏酚酸含量高，本发明方法获得的银杏酚酸提取物中的银杏酚酸含量＞90重量%。
2、本发明采用乙醇和石油醚分别进行的浸提，能够最大化地将银杏酚酸得到提取，且溶媒进行完全回收，无环境污染；进一步利用银杏酚酸的水不溶性的性质，在大量的去离子水中且在不断地搅拌下形成悬浮的混浊液体，利用聚酰胺对银杏酚酸的吸附作用，在搅拌和时间的涤荡过程中，使之被聚酰胺吸附，然后对吸附后的聚酰胺用去离子水洗涤，使其水溶性杂质得到充分的溶出，然后再将吸附后的聚酰胺用乙醇洗脱三次，其过程利于提取高纯度的银杏酚酸；洗脱后的聚酰胺再用水漂洗，然后用乙醇浸泡10小时以上，滤出，经干燥后仍可反复使用或作它用，不造成浪费，节约生产成本。
3、本发明利用银杏酚酸溶于醇、醚等有机溶液而不溶于水的性质，首先采用乙醇和石油醚进行二次提取，然后再将醇和醚提取物用大量的水稀释，采用聚酰胺吸附，而后再经水反复淋洗，使水溶性杂质进一步去除，然后再用乙醇将聚酰胺吸附的银杏酚酸进行洗脱，本研究所提出的提取方法和过程，简单实用，而且溶媒、辅助材料均可得到回收利用，无或很少损耗，操作条件可根据实际选择使用常规的容器和设备，不采用大孔交换树脂也就避免了树脂在酸、碱处理再生的过程产生的废弃酸碱废液造成的水源和环境污染；本发明方法解决了对银杏酚酸提取含量高，耗能低，操作简单易行，无污染的相关问题。
4、本发明方法制备高含量的银杏酚酸提取物也为医药外用药物制剂、化妆品制品、生物农药制剂、生物杀虫剂提供更为有益的原料保障，能够保障上述制剂的杂质含量低，有效成分含量高的较好效果，为银杏外种皮的高效利用提供了一种实用方便、高效的方法。
本发明方法制得的银杏酚酸提取物，可作为医药外用药物制剂的用途，作为化妆品制品的用途；还可作为生物农药、生物杀虫剂制剂的用途。
本发明中采用的设备为常规设备。
本发明中对银杏酚酸含量的检验，采用公知公用的高效液相色谱法（HPLC）检测；还可委托具有资质的专业检验机构帮助检测。
具体实施方式
实施例1
步骤（一）将挑拣干净并经干燥后的银杏外种皮，称取1kg，加入10kg的去离子水，在温度41℃条件下浸泡24h，浸泡结束后，滤去浸泡水；
步骤（二）将步骤（一）经浸泡后的银杏外种皮加入1kg的去离子水，用磨浆机先磨成粗浆，然后将粗浆再用胶体磨进行细磨，得细磨浆液，所得浆液的颗粒度在6.5～13μm；
步骤（三）将步骤（二）所得的细磨浆液加入含量浓度为98%V/V的乙醇20kg，在温度为43℃条件下，浸提12h，滤取乙醇浸提液；滤渣再加入石油醚20kg，在温度为30℃条件下，浸提18h，滤取石油醚浸提液，然后分别将乙醇浸提液和石油醚浸提液回收乙醇和石油醚，分别得膏状乙醇浸提物和膏状石油醚浸提物，将浸提物合并，得混合膏状浸提物298g；
步骤（四）将步骤（三）所得混合膏状浸提物加入8.94kg的去离子水，在转速为30r/min下充分搅拌均匀后，在不断搅拌下加入1.49kg的聚酰胺，继续搅拌6h，搅拌结束后，静止沉降3h，滤取聚酰胺，将滤液再加入1.49kg的聚酰胺，在转速为30r/min下搅拌6h，搅拌结束后，静止沉降3h，滤取聚酰胺，将两次滤取的聚酰胺合并于滤器中，自滤器上不断添加去离子水， 至滤过的去离子水基本无色时为止，然后将聚酰胺控尽水分；
步骤（五）将步骤（四）中控尽水分的聚酰胺加入29.8kg含量浓度为98%V/V的乙醇，在温度为38℃，转速为30r/min的条件下搅拌洗脱5h，滤取乙醇洗脱液，然后将聚酰胺再加入23.84kg含量浓度为98%V/V的乙醇，在温度为40℃，转速为30r/min的条件下搅拌洗脱4h，滤取乙醇洗脱液，再将滤出的聚酰胺加入14.9kg含量浓度为98%V/V的乙醇，在温度为42℃，转速为30r/min的条件下搅拌洗脱3h，滤取乙醇洗脱液，将三次洗脱液合并，回收乙醇，得稠膏状醇提物；
步骤（六）将步骤（五）所得稠膏状醇提物，置入真空干燥机内，在不大于50℃的条件下真空干燥，粉碎，得浅棕黄色银杏酚酸提取物粉末49.6g。
经HPLC检测，该提取物粉末中银杏酚酸的含量为92.74重量%。
实施例2
步骤（一）将挑拣干净并经干燥后的银杏外种皮，称取1kg，加入10kg的去离子水，在温度42℃条件下浸泡20h，浸泡结束后，滤去浸泡水；
步骤（二）将步骤（一）经浸泡后的银杏外种皮加入1kg的去离子水，用磨浆机先磨成粗浆，然后将粗浆再用胶体磨进行细磨，得细磨浆液，所得浆液的颗粒度在6.5～13μm；
步骤（三）将步骤（二）所得的细磨浆液加入含量浓度为98%V/V的乙醇20kg，在温度为44℃条件下，浸提10h，滤取乙醇浸提液；滤渣再加入石油醚20kg，在温度为36℃条件下，浸提18h，滤取石油醚浸提液，然后分别将乙醇浸提液和石油醚浸提液回收乙醇和石油醚，分别得膏状乙醇浸提物和膏状石油醚浸提物，将浸提物合并，得混合膏状浸提物306g；
步骤（四）将步骤（三）所得混合膏状浸提物加入9.18kg的去离子水，在转速为30r/min下充分搅拌均匀后，在不断搅拌下加入1.53kg的聚酰胺，继续搅拌6h，搅拌结束后，静止沉降3h，滤取聚酰胺，将滤液再加入1.53kg的聚酰胺，在转速为30r/min下搅拌6h，搅拌结束后，静止沉降3h，滤取聚酰胺，将两次滤取的聚酰胺合并于滤器中，自滤器上不断添加去离子水， 至滤过的去离子水基本无色时为止，然后将聚酰胺控尽水分；
步骤（五）将步骤（四）中控尽水分的聚酰胺加入30.6kg含量浓度为98%V/V的乙醇，在温度为39℃，转速为30r/min的条件下搅拌洗脱5h，滤取乙醇洗脱液，然后将聚酰胺再加入24.48kg含量浓度为98%V/V的乙醇，在温度为40℃，转速为30r/min的条件下搅拌洗脱4h，滤取乙醇洗脱液，再将滤出的聚酰胺加入15.3kg含量浓度为98%V/V的乙醇，在温度为41℃，转速为30r/min的条件下搅拌洗脱3h，滤取乙醇洗脱液，将三次洗脱液合并，回收乙醇，得稠膏状醇提物；
步骤（六）将步骤（五）所得稠膏状醇提物，置入真空干燥机内，在不大于50℃的条件下真空干燥，粉碎，得浅棕黄色银杏酚酸提取物粉末50.3g。
经HPLC检测，该提取物粉末中银杏酚酸的含量为91.45重量%。
实施例3
步骤（一）将挑拣干净并经干燥后的银杏外种皮，称取1kg，加入10kg的去离子水，在温度43℃条件下浸泡18h，浸泡结束后，滤去浸泡水；
步骤（二）将步骤（一）经浸泡后的银杏外种皮加入1kg的去离子水，用磨浆机先磨成粗浆，然后将粗浆再用胶体磨进行细磨，得细磨浆液，所得浆液的颗粒度在6.5～13μm；
步骤（三）将步骤（二）所得的细磨浆液加入含量浓度为98%V/V的乙醇20kg，在温度为45℃条件下，浸提8h，滤取乙醇浸提液；滤渣再加入石油醚20kg，在温度为33℃条件下，浸提18h，滤取石油醚浸提液，然后分别将乙醇浸提液和石油醚浸提液回收乙醇和石油醚，分别得膏状乙醇浸提物和膏状石油醚浸提物，将浸提物合并，得混合膏状浸提物310.3g；
步骤（四）将步骤（三）所得混合膏状浸提物加入9.31kg的去离子水，在转速为30r/min下充分搅拌均匀后，在不断搅拌下加入1.55kg的聚酰胺，继续搅拌6h，搅拌结束后，静止沉降3h，滤取聚酰胺，将滤液再加入1.55kg的聚酰胺，在转速为30r/min下搅拌6h，搅拌结束后，静止沉降3h，滤取聚酰胺，将两次滤取的聚酰胺合并于滤器中，自滤器上不断添加去离子水， 至滤过的去离子水基本无色时为止，然后将聚酰胺控尽水分；
步骤（五）将步骤（四）中控尽水分的聚酰胺加入31kg含量浓度为98%V/V的乙醇，在温度为39℃，转速为30r/min的条件下搅拌洗脱5h，滤取乙醇洗脱液，然后将聚酰胺再加入24.8kg含量浓度为98%V/V的乙醇，在温度为40℃，转速为30r/min的条件下搅拌洗脱4h，滤取乙醇洗脱液，再将滤出的聚酰胺加入15.5kg含量浓度为98%V/V的乙醇，在温度为42℃，转速为30r/min的条件下搅拌洗脱3h，滤取乙醇洗脱液，将三次洗脱液合并，回收乙醇，得稠膏状醇提物；
步骤（六）将步骤（五）所得稠膏状醇提物，置入真空干燥机内，在不大于50℃的条件下真空干燥，粉碎，得浅棕黄色银杏酚酸提取物粉末51g。
经HPLC检测，该提取物粉末中银杏酚酸的含量为90.67重量%。