一种从车前子中提取制备京尼平苷酸的方法
阅读说明：本技术 一种从车前子中提取制备京尼平苷酸的方法 (Method for extracting and preparing geniposide from plantago seeds ) 是由 舒朋华 黄继红 魏夏兰 孙军涛 李念慈 何林烨 万佳辉 方艺颖 于 2021-08-13 设计创作，主要内容包括：本发明公开了一种从车前子中提取制备京尼平苷酸的方法,属于京尼平苷酸提取技术领域,包括如下步骤：(1)珠磨处理；(2)电晕处理；(3)电子束辅助浸泡处理；(4)索氏回流提取。本申请提供了一种从车前子中提取制备京尼平苷酸的方法,在对车前子进行珠磨粉碎、电晕处理、电子束辐照辅助浸泡处理的基础上进行索氏回流提取,增加车前子原材料的活性表面积,改善其微孔结构,提高了细胞的通透性,促进提取剂的渗透扩散,从而提高京尼平苷酸的溶出率,提高其产量。(The invention discloses a method for extracting and preparing geniposidic acid from plantain seeds, which belongs to the technical field of geniposidic acid extraction and comprises the following steps: (1) performing bead grinding treatment; (2) carrying out corona treatment; (3) carrying out electron beam assisted soaking treatment; (4) soxhlet reflux extraction. The application provides a method for extracting and preparing geniposide from semen plantaginis, which is characterized in that Soxhlet reflux extraction is carried out on the basis of carrying out bead grinding, corona treatment and electron beam irradiation assisted soaking treatment on the semen plantaginis, so that the active surface area of the semen plantaginis raw material is increased, the microporous structure of the semen plantaginis raw material is improved, the permeability of cells is improved, and the osmotic diffusion of an extracting agent is promoted, thereby improving the dissolution rate of the geniposide and improving the yield of the geniposide.)
技术领域
本发明属于京尼平苷酸提取
技术领域
，具体涉及一种从车前子中提取制备京尼平苷酸的方法。背景技术
车前子为车前科植物车前(Plantago asiaticaL.)或平车前(Plantago depressaWilld.)的干燥成熟种子，性寒，味甘，归肝、肾、肺、小肠经，具有清热利尿通淋、渗湿止泻、明目、祛痰的功能，用于热淋涩痛，水肿胀满，暑湿泄泻，目赤肿痛，痰热咳嗽。车前子为常用中药，主要化学成分为多糖、苯乙醇苷类、环烯醚萜类、黄酮类及生物碱类等化合物。《中国药典》(2020年版)将京尼平苷酸和毛蕊花糖苷作为车前子药材含量测定的指标。京尼平苷酸(Geniposidic acid，GPA)是车前子中的环烯醚萜苷类成分，具有保肝利胆、降血压、抗炎、抗癌、修复软组织、治疗骨质疏松等作用。因此，提高车前子的京尼平苷酸的提取率对于提高车前子的推广应用，具有很好的意义。
《中国药典》2020年版一部制备供试品方法：供试品溶液的制备取本品粉末(过二号筛)约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入60％甲醇50ml，称定重量，加热回流2小时，放冷，再称定重量，用60％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。该方法回流时间长，对技术人员的专业水平要求较高。另外提取的京尼平苷酸的含量低，既费时费力，又没有将车前子进行充分的利用。
发明内容
本发明的目的是针对现有的问题，提供了一种从车前子中提取制备京尼平苷酸的方法。
本发明是通过以下技术方案实现的：
一种从车前子中提取制备京尼平苷酸的方法，包括如下步骤：
(1)珠磨处理：
将车前子置于珠磨粉碎机内进行珠磨处理，完成后取出车前子粉体备用；
(2)电晕处理：
将步骤(1)中所得车前子粉体置于电晕放电仪内进行电晕处理，完成后取出备用；
(3)电子束辅助浸泡处理：
将步骤(2)中电晕处理后的车前子粉体浸入甲醇溶液中进行浸泡处理，在浸泡处理的同时进行电子束辐照处理，完成后过滤，收集滤液和滤渣备用；
(4)索氏回流提取：
将步骤(3)中收集的滤渣用吸水纸包好置于索氏提取装置中，以步骤(3)中收集的滤液作为提取剂，然后置于水浴锅内进行索氏回流提取，得浸提膏，再进行萃取纯化即可。
进一步地，步骤(1)中所述的珠磨处理时控制珠磨机的转速为600～1000rpm，珠磨至粉体能通过20～30目筛，不能通过40～60目筛为准。
通过采用上述技术方案，利用机械研磨，产生动能，动能被有效的吸收，进而裂解车前子原料纤维的次价键和共价键，使得结晶度和聚合度下降，故而引起形态和微细结构的改变，提高车前子活性比表面积。
进一步地，步骤(2)中所述的电晕处理时控制电压为10～14kV，电晕处理的时间为1～2min。
通过采用上述技术方案，通过放电，在车前子粉体的表面形成低温等离子区，增大表面张力，同时还能在粉体的表面形成微凹的密集孔穴，能够有效的提高车前子的细胞通透性，促进活性成分的溶出。
进一步地，步骤(3)中所述的车前子粉体与甲醇溶液的重量体积比为1kg:10～12L。
进一步地，步骤(3)中所述的浸泡处理时控制甲醇溶液内的温度为40～46℃，浸泡处理的时间为3～4h。
进一步地，步骤(3)中所述的电子束辐照处理时控制能量为2～3MeV，束流为2～3mA，传送速率为3～4m/min，辐照剂量为2.3～2.7kGy。
进一步地，步骤(4)中所述的索氏回流提取反复回流的次数为18～24次。
通过采用上述技术方案，在浸提之前进行电子束辅助浸泡处理，控制甲醇的浸泡温度，入射的电子束作用于车前子粉体后，入射的电子束辐射能量损失，释放给所撞击的分子中的原子，原子被激发，在分子链骨架上形成一定量的活性自由基，由于这些基团的位阻大，车前子粉体中的额纤维素主链进一步发生断裂裂解，促进甲醇的渗透扩散，采用此时的滤渣作为浸提原料，滤液作为浸提剂，能显著提高提高京尼平苷酸的溶出率，提高其产量。
本发明相比现有技术具有以下优点：
本申请提供了一种从车前子中提取制备京尼平苷酸的方法，在对车前子进行珠磨粉碎、电晕处理、电子束辐照辅助浸泡处理的基础上进行索氏回流提取，增加车前子原材料的活性表面积，改善其微孔结构，提高了细胞的通透性，促进提取剂的渗透扩散，从而提高京尼平苷酸的溶出率，提高其产量。
附图说明
图1为各实施例方法制备京尼平苷酸含量的对比数据图。
具体实施方式
一种从车前子中提取制备京尼平苷酸的方法，包括如下步骤：
(1)珠磨处理：
将车前子置于珠磨粉碎机内进行珠磨处理，控制珠磨机的转速为600～1000rpm，珠磨至粉体能通过20～30目筛，不能通过40～60目筛为准，完成后取出车前子粉体备用；
(2)电晕处理：
将步骤(1)中所得车前子粉体置于电晕放电仪内进行电晕处理，控制电压为10～14kV，电晕处理的时间为1～2min，完成后取出备用；
(3)电子束辅助浸泡处理：
将步骤(2)中电晕处理后的车前子粉体浸入甲醇溶液中进行浸泡处理，车前子粉体与甲醇溶液的重量体积比为1kg:10～12L，浸泡处理时控制甲醇溶液内的温度为40～46℃，浸泡处理的时间为3～4h，在浸泡处理的同时进行电子束辐照处理，控制能量为2～3MeV，束流为2～3mA，传送速率为3～4m/min，辐照剂量为2.3～2.7kGy，完成后过滤，收集滤液和滤渣备用；
(4)索氏回流提取：
将步骤(3)中收集的滤渣用吸水纸包好置于索氏提取装置中，以步骤(3)中收集的滤液作为提取剂，然后置于水浴锅内进行索氏回流提取，回流18～24次后得浸提膏，再进行萃取纯化即可。
为了对本发明做更进一步的解释，下面结合下述具体实施例进行阐述。
实施例1
一种从车前子中提取制备京尼平苷酸的方法，包括如下步骤：
(1)珠磨处理：
将车前子置于珠磨粉碎机内进行珠磨处理，控制珠磨机的转速为600rpm，珠磨至粉体能通过20目筛，不能通过40目筛为准，完成后取出车前子粉体备用；
(2)电晕处理：
将步骤(1)中所得车前子粉体置于电晕放电仪内进行电晕处理，控制电压为10kV，电晕处理的时间为1min，完成后取出备用；
(3)电子束辅助浸泡处理：
将步骤(2)中电晕处理后的车前子粉体浸入甲醇溶液中进行浸泡处理，车前子粉体与甲醇溶液的重量体积比为1kg:10L，浸泡处理时控制甲醇溶液内的温度为40℃，浸泡处理的时间为3h，在浸泡处理的同时进行电子束辐照处理，控制能量为2MeV，束流为2mA，传送速率为3m/min，辐照剂量为2.3kGy，完成后过滤，收集滤液和滤渣备用；
(4)索氏回流提取：
将步骤(3)中收集的滤渣用吸水纸包好置于索氏提取装置中，以步骤(3)中收集的滤液作为提取剂，然后置于水浴锅内进行索氏回流提取，回流18次后得浸提膏，再进行萃取纯化即可。
实施例2
一种从车前子中提取制备京尼平苷酸的方法，包括如下步骤：
(1)珠磨处理：
将车前子置于珠磨粉碎机内进行珠磨处理，控制珠磨机的转速为800rpm，珠磨至粉体能通过25目筛，不能通过50目筛为准，完成后取出车前子粉体备用；
(2)电晕处理：
将步骤(1)中所得车前子粉体置于电晕放电仪内进行电晕处理，控制电压为12kV，电晕处理的时间为1.5min，完成后取出备用；
(3)电子束辅助浸泡处理：
将步骤(2)中电晕处理后的车前子粉体浸入甲醇溶液中进行浸泡处理，车前子粉体与甲醇溶液的重量体积比为1kg:11L，浸泡处理时控制甲醇溶液内的温度为43℃，浸泡处理的时间为3.5h，在浸泡处理的同时进行电子束辐照处理，控制能量为2.5MeV，束流为2.5mA，传送速率为3.5m/min，辐照剂量为2.5kGy，完成后过滤，收集滤液和滤渣备用；
(4)索氏回流提取：
将步骤(3)中收集的滤渣用吸水纸包好置于索氏提取装置中，以步骤(3)中收集的滤液作为提取剂，然后置于水浴锅内进行索氏回流提取，回流21次后得浸提膏，再进行萃取纯化即可。
实施例3
一种从车前子中提取制备京尼平苷酸的方法，包括如下步骤：
(1)珠磨处理：
将车前子置于珠磨粉碎机内进行珠磨处理，控制珠磨机的转速为1000rpm，珠磨至粉体能通过30目筛，不能通过60目筛为准，完成后取出车前子粉体备用；
(2)电晕处理：
将步骤(1)中所得车前子粉体置于电晕放电仪内进行电晕处理，控制电压为14kV，电晕处理的时间为2min，完成后取出备用；
(3)电子束辅助浸泡处理：
将步骤(2)中电晕处理后的车前子粉体浸入甲醇溶液中进行浸泡处理，车前子粉体与甲醇溶液的重量体积比为1kg:12L，浸泡处理时控制甲醇溶液内的温度为46℃，浸泡处理的时间为4h，在浸泡处理的同时进行电子束辐照处理，控制能量为3MeV，束流为3mA，传送速率为4m/min，辐照剂量为2.7kGy，完成后过滤，收集滤液和滤渣备用；
(4)索氏回流提取：
将步骤(3)中收集的滤渣用吸水纸包好置于索氏提取装置中，以步骤(3)中收集的滤液作为提取剂，然后置于水浴锅内进行索氏回流提取，回流24次后得浸提膏，再进行萃取纯化即可。
实施例4
一种从车前子中提取制备京尼平苷酸的方法，包括如下步骤：
(1)电晕处理：
将车前子置于电晕放电仪内进行电晕处理，控制电压为12kV，电晕处理的时间为1.5min，完成后取出备用；
(2)电子束辅助浸泡处理：
将步骤(1)中电晕处理后的车前子浸入甲醇溶液中进行浸泡处理，车前子粉体与甲醇溶液的重量体积比为1kg:11L，浸泡处理时控制甲醇溶液内的温度为43℃，浸泡处理的时间为3.5h，在浸泡处理的同时进行电子束辐照处理，控制能量为2.5MeV，束流为2.5mA，传送速率为3.5m/min，辐照剂量为2.5kGy，完成后过滤，收集滤液和滤渣备用；
(3)索氏回流提取：
将步骤(2)中收集的滤渣用吸水纸包好置于索氏提取装置中，以步骤(3)中收集的滤液作为提取剂，然后置于水浴锅内进行索氏回流提取，回流21次后得浸提膏，再进行萃取纯化即可。
实施例5
一种从车前子中提取制备京尼平苷酸的方法，包括如下步骤：
(1)珠磨处理：
将车前子置于珠磨粉碎机内进行珠磨处理，控制珠磨机的转速为800rpm，珠磨至粉体能通过25目筛，不能通过50目筛为准，完成后取出车前子粉体备用；
(2电子束辅助浸泡处理：
将步骤(1)中所得的车前子粉体浸入甲醇溶液中进行浸泡处理，车前子粉体与甲醇溶液的重量体积比为1kg:11L，浸泡处理时控制甲醇溶液内的温度为43℃，浸泡处理的时间为3.5h，在浸泡处理的同时进行电子束辐照处理，控制能量为2.5MeV，束流为2.5mA，传送速率为3.5m/min，辐照剂量为2.5kGy，完成后过滤，收集滤液和滤渣备用；
(3)索氏回流提取：
将步骤(2)中收集的滤渣用吸水纸包好置于索氏提取装置中，以步骤(3)中收集的滤液作为提取剂，然后置于水浴锅内进行索氏回流提取，回流21次后得浸提膏，再进行萃取纯化即可。
实施例6
一种从车前子中提取制备京尼平苷酸的方法，包括如下步骤：
(1)珠磨处理：
将车前子置于珠磨粉碎机内进行珠磨处理，控制珠磨机的转速为800rpm，珠磨至粉体能通过25目筛，不能通过50目筛为准，完成后取出车前子粉体备用；
(2)电晕处理：
将步骤(1)中所得车前子粉体置于电晕放电仪内进行电晕处理，控制电压为12kV，电晕处理的时间为1.5min，完成后取出备用；
(3)浸泡处理：
将步骤(2)中电晕处理后的车前子粉体浸入甲醇溶液中进行浸泡处理，车前子粉体与甲醇溶液的重量体积比为1kg:11L，浸泡处理时控制甲醇溶液内的温度为43℃，浸泡处理的时间为3.5h，完成后过滤，收集滤液和滤渣备用；
(4)索氏回流提取：
将步骤(3)中收集的滤渣用吸水纸包好置于索氏提取装置中，以步骤(3)中收集的滤液作为提取剂，然后置于水浴锅内进行索氏回流提取，回流21次后得浸提膏，再进行萃取纯化即可。
实施例7
一种从车前子中提取制备京尼平苷酸的方法，包括如下步骤：
(1)珠磨处理：
将车前子置于珠磨粉碎机内进行珠磨处理，控制珠磨机的转速为800rpm，珠磨至粉体能通过25目筛，不能通过50目筛为准，完成后取出车前子粉体备用；
(2)电晕处理：
将步骤(1)中所得车前子粉体置于电晕放电仪内进行电晕处理，控制电压为12kV，电晕处理的时间为1.5min，完成后取出备用；
(3)电子束辅助浸泡处理：
将步骤(2)中电晕处理后的车前子粉体浸入甲醇溶液中进行浸泡处理，车前子粉体与甲醇溶液的重量体积比为1kg:11L，浸泡处理时控制甲醇溶液内的温度为43℃，浸泡处理的时间为3.5h，在浸泡处理的同时进行电子束辐照处理，控制能量为2.5MeV，束流为2.5mA，传送速率为3.5m/min，辐照剂量为2.5kGy，完成后过滤，收集滤液和滤渣备用；
(4)索氏回流提取：
将步骤(3)中收集的滤渣用吸水纸包好置于索氏提取装置中，以甲醇为提取剂，然后置于水浴锅内进行索氏回流提取，回流21次后得浸提膏，再进行萃取纯化即可。
实施例8
一种从车前子中提取制备京尼平苷酸的方法，包括如下步骤：
(1)珠磨处理：
将车前子置于珠磨粉碎机内进行珠磨处理，控制珠磨机的转速为800rpm，珠磨至粉体能通过25目筛，不能通过50目筛为准，完成后取出车前子粉体备用；
(2)电晕处理：
将步骤(1)中所得车前子粉体置于电晕放电仪内进行电晕处理，控制电压为12kV，电晕处理的时间为1.5min，完成后取出备用；
(3)索氏回流提取：
将步骤(2)中电晕处理后的车前子粉体用吸水纸包好置于索氏提取装置中，以甲醇作为提取剂，然后置于水浴锅内进行索氏回流提取，回流21次后得浸提膏，再进行萃取纯化即可。
对照组
申请号为：CN201110172511.8公开的一种车前子提取物及其应用。
为了对比本申请技术效果，分别用上述实施例2、实施例4～8以及对照组的方法进行京尼平苷酸的制取，然后利用液相色谱进行京尼平苷酸的含量测定，色谱条件为：色谱柱Dikma Diamonsil C18(250mm×4.6mm，5μm)；流动相A为甲醇，B为0.05‰甲酸-水；梯度洗脱程序为0～30min，5％～90％A；体积流量1.0mL·min-1；紫外检测波长205nm；进样量20μL；柱温25℃。测试计算得出各租样品中京尼平苷酸的含量。
具体试验对比数据如附图1所示，其中实施例2对应的含量数值为15.62；实施例4对应的含量数值为9.25；实施例5对应的含量数值为11.28；实施例6对应的含量数值为13.05；实施例7对应的含量数值为7.25；实施例8对应的含量数值为6.26；对照组对应的含量数值为3.65。
由图1可以看出，本申请提供了一种从车前子中提取制备京尼平苷酸的方法，在对车前子进行珠磨粉碎、电晕处理、电子束辐照辅助浸泡处理的基础上进行索氏回流提取，增加车前子原材料的活性表面积，改善其微孔结构，提高了细胞的通透性，促进提取剂的渗透扩散，从而提高京尼平苷酸的溶出率，提高其产量。
以上所述仅为本发明的较佳实施例，但本发明不以所示限定实施范围，凡是依照本发明的构想所作的改变，或修改为等同变化的等效实施例，仍未超出说明书所涵盖的精神时，均应在本发明的保护范围内。
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