一种高含量葛根总黄酮及其制备方法
阅读说明：本技术 一种高含量葛根总黄酮及其制备方法 (High-content pueraria flavonid and preparation method thereof ) 是由 于华忠 宋科 郭婕 吴海顺 李伟业 于 2020-12-15 设计创作，主要内容包括：本申请提供一种高含量葛根总黄酮及其制备方法,依次通过超声波逆流提取、树脂纯化、结晶、干燥工艺组合应用,提取得到黄酮含量高的葛根提取物,与常见的葛根提取物提取工艺相比,本申请制得的葛根总黄酮含量达到95％以上,且工艺简单、生产周期短,产品颜色浅,生产成本低,易实现大规模生产,适用于工业化大生产的高含量的葛根总黄酮,可广泛用于保健食品(用于解酒、丰胸、延缓女性更年期、糖尿病引起的并发症等)等领域。(The application provides a high-content pueraria flavonid and a preparation method thereof, the pueraria flavonid extract with high flavone content is obtained by extracting and combining ultrasonic countercurrent extraction, resin purification, crystallization and drying processes in sequence, and compared with the common pueraria flavonid extraction process, the prepared pueraria flavonid has the advantages of high content of more than 95 percent, simple process, short production period, light product color, low production cost and easy realization of large-scale production, is suitable for industrial mass production, is high-content pueraria flavonid, and can be widely used in the fields of health-care food (for relieving alcoholism, enlarging breast, delaying female climacteric, complications caused by diabetes and the like) and the like.)
技术领域
本发明属葛根总黄酮技术领域，具体涉及一种高含量葛根总黄酮及其制备方法。
背景技术
葛根为豆科植物野葛的干燥根，具有解肌退热、生津止渴、升阳止泻、通经活络等功效。研究表明，葛根中含有丰富的黄酮类物质、淀粉、蛋白质以及多种微量元素和氨基酸、胆碱类衍生物等营养成分，其中葛根总黄酮的成分十分复杂，它包括葛根素，大豆甙、大豆甙元、芒柄花素、4，7-二葡糖糖大豆甙、3-甲基-葛根素、7-木糖-葛根素等异黄酮类化合物，具有很高的营养价值和药用价值。
黄酮类物质为葛根的主要功效成分，具有抗菌、活血化瘀、扩张冠状动脉血管和脑血管、降低心肌耗氧量、改善心肌收缩功能、促进血液循环、增强机体免疫力等多种药理与保健作用。葛根总黄酮目前主要用于治疗心脑血管类疾病，如高血压，高血脂、偏头痛、冠心病、心肌梗塞、心绞痛、视网膜动脉阻塞、视网膜静脉阻塞、突发性耳聋等症，替代中成药中的中药葛根。同时广泛用于保健食品(用于解酒、丰胸、延缓女性更年期、糖尿病引起的并发症等)等领域。
为了用药的方便，高纯度的葛根总黄酮的产品受到了国际市场上的关注。葛根中黄酮含量不高仅为3-5％，要得到纯度较高的葛根总黄酮，需要对其进行提取分离。通常采用溶剂常规提取、溶剂萃取、大孔吸附树脂法、聚酞胺柱层析吸附法等方法对葛根总黄酮进行分离和纯化。不同方法各有优缺点，有的葛根总黄酮的纯度和产率不高，有的生产工艺生产周期太长。因此，如何使用简单可行、效率高的提取分离工艺，对实现含量95％以上葛根总黄酮的工业化生产有重要意义。
发明内容
本发明为了解决现有技术从葛根中制备葛根总黄酮的含量不高、工艺复杂、周期长的技术问题，提供一种高含量葛根总黄酮的制备方法，通过超声波逆流提取、树脂纯化、结晶、干燥工艺组合应用，提取，制得黄酮含量高达95％以上的葛根提取物，工艺简洁、生产周期短、适用于工业化大生产的高含量的葛根总黄酮。
本申请的另一目的是提供一种高含量葛根总黄酮。
一种高含量葛根总黄酮的制备方法，包括以下步骤：
S101、超声波连续逆流提取：取葛根药材破碎后，加入3～5倍量体积分数为30～60％乙醇溶液，50℃～80℃下，超声波连续逆流提取，从进料到出料1～2小时；
S102、浓缩：将上述提取液浓缩至药液无醇味，加入1～3倍体积量的60～80℃热水；
S103、树脂分离：将上述浓缩液上大孔树脂，水洗1～3倍柱体积除去杂质后，用30～50℃、体积分数为10～45％乙醇洗脱，通过紫外在线监测，收集含有黄酮的洗脱液；
S104、结晶：将含有黄酮的洗脱液浓缩至药液比重1.1～1.2，冷却至2～5℃静置析晶；
S105、干燥：将结晶晶体干燥后，即得。
本申请提供一种高含量葛根总黄酮的制备方法，依次通过超声波逆流提取、树脂纯化、结晶、干燥工艺组合应用，提取得到黄酮含量高的葛根提取物，与常见的葛根提取物提取工艺相比，本申请制得的葛根总黄酮含量达到95％以上，且工艺简单、生产周期短，产品颜色浅，生产成本低，易实现大规模生产，适用于工业化大生产的高含量的葛根总黄酮。
优选的，步骤S101中，所述葛根为野葛根，破碎至1～2mm。本申请使用的野葛根中含有丰富的葛根总黄酮，采用河南省荥阳宏乐机械厂的JWFC-16万能粉碎机，将葛根破碎至1到2mm，粉碎处理制成的葛根粉粉质细腻，葛根粉内含有的葛根总黄酮含量高，有利于高含量葛根总黄酮的提取，缩短了生产周期。
优选的，步骤S101中，所述逆流提取为浸提两次，超声频率为20KHz～40KHz。本申请采用超声逆流提取效率高，全程封闭条件下运行，有利于减少提取过程中葛根总黄酮的损失，可以最大限度的保留住了葛根粉内葛根总黄酮的活性，提高了葛根总黄酮的含量。优选采用江苏丹阳制药机械厂的动态连续逆流提取机。
优选的，步骤S102和步骤S104中，浓缩采用减压浓缩，减压浓缩条件为60～80℃、0.07～0.08Mpa。优点是溶液沸点降低，能防止有效物质的分解，且提高了蒸发效率，缩短了生产周期。
优选的，步骤S102中，所述浓缩至药液无醇味具体为浓缩至乙醇浓度在5％以下。
优选的，步骤S103中，所述紫外在线监测采用波长为200nm～400nm的氘灯紫外检测器。灵敏度高、线性范围宽、有较好的选择性，用于提取目标黄酮，提高黄酮的含量，优选为220nm波长。
优选的，步骤S103中，大孔树脂选自LSA-21大孔树脂、D101大孔树脂、HPD-300大孔树脂、DM-301大孔树脂中的任一种。用于吸附除杂。
优选的，步骤S105中，晶体干燥采用喷雾干燥，喷雾干燥条件为：进风温度110～120℃，出风温度60～85℃，进料温度为60℃，进料速度为10mL/min。干燥过程迅速，有利于获得高含量的葛根总黄酮。
一种高含量葛根总黄酮，采用上述的一种高含量葛根总黄酮的制备方法制备而成。
优选的，葛根总黄酮含量大于95％。本申请制得的葛根总黄酮，采用紫外可见分光光度法测得葛根总黄酮的含量在95％以上，高含量的葛根总黄酮可广泛用于保健食品(用于解酒、丰胸、延缓女性更年期、糖尿病引起的并发症等)等领域。
本发明相对于现有技术，有以下优点：
本申请提供一种高含量葛根总黄酮的制备方法，依次通过超声波逆流提取、树脂纯化、结晶、干燥工艺组合应用，提取得到黄酮含量高的葛根提取物，与常见的葛根提取物提取工艺相比，本申请制得的葛根总黄酮含量达到95％以上，且工艺简单、生产周期短，产品颜色浅，生产成本低，易实现大规模生产，适用于工业化大生产的高含量的葛根总黄酮。
本申请提供一种高含量葛根总黄酮，经紫外可见分光光度法检测葛根总黄酮含量高达95％以上，与常见的葛根提取物提取工艺相比，本发明仅利用超声波连续逆流提取、柱层析、结晶工序有机结合，得到葛根总黄酮含量高，颜色浅。生产成本低，工艺简单，易实现大规模生产，可广泛用于保健食品(用于解酒、丰胸、延缓女性更年期、糖尿病引起的并发症等)等领域。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，下面结合具体实施例对本发明做进一步说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1：
一种高含量葛根总黄酮的制备方法，包括以下步骤：
S101、超声波连续逆流提取：取葛根药材100kg,破碎至2mm，加入3倍量体积分数为60％乙醇溶液，70℃下，超声波连续逆流提取，调节速度从进料到出料1小时；
S102、浓缩：将上述提取液浓缩至药液无醇味，加入浓缩液2倍体积量的70℃热水；
S103、树脂分离：将上述浓缩液上大孔树脂DM-301，水洗2倍柱体积除去杂质后，用40℃、体积分数为35％乙醇洗脱，通过紫外在线监测，收集含有黄酮的洗脱液；
S104、结晶：将含有黄酮的洗脱液浓缩至药液比重1.15，冷却至3℃静置析晶；
S105、干燥：将结晶晶体干燥后，即得6.2kg葛根总黄酮提取物。
实施例2：
一种高含量葛根总黄酮的制备方法，包括以下步骤：
S101、超声波连续逆流提取：取葛根药材100kg,破碎至1.5mm，加入3倍量体积分数为60％乙醇溶液，80℃下，超声波连续逆流提取，调节速度从进料到出料1.5小时；
S102、浓缩：将上述提取液浓缩至药液无醇味，加入浓缩液2倍体积量的70℃热水；
S103、树脂分离：将上述浓缩液上大孔树脂LSA-21，水洗1倍柱体积除去杂质后，用30℃、体积分数为40％乙醇洗脱，通过紫外在线监测，收集含有黄酮的洗脱液；
S104、结晶：将含有黄酮的洗脱液浓缩至药液比重1.18，冷却至4℃静置析晶；
S105、干燥：将结晶晶体干燥后，即得6.5kg葛根总黄酮提取物。
实施例3：
一种高含量葛根总黄酮的制备方法，包括以下步骤：
S101、超声波连续逆流提取：取葛根药材100kg,破碎至2mm，加入5倍量体积分数为30％乙醇溶液，60℃下，超声波连续逆流提取，调节速度从进料到出料1小时；
S102、浓缩：将上述提取液浓缩至药液无醇味，加入浓缩液1倍体积量的80℃热水；
S103、树脂分离：将上述浓缩液上大孔树脂HPD-300，水洗1倍柱体积除去杂质后，用50℃、体积分数为45％乙醇洗脱，通过紫外在线监测，收集含有黄酮的洗脱液；
S104、结晶：将含有黄酮的洗脱液浓缩至药液比重1.1，冷却至2℃静置析晶；
S105、干燥：将结晶晶体干燥后，即得6.1kg葛根总黄酮提取物。
实施例4：
一种高含量葛根总黄酮的制备方法，包括以下步骤：
S101、超声波连续逆流提取：取葛根药材100kg,破碎至1mm，加入4倍量体积分数为40％乙醇溶液，50℃下，超声波连续逆流提取，调节速度从进料到出料2小时；
S102、浓缩：将上述提取液浓缩至药液无醇味，加入浓缩液3倍体积量的60℃热水；
S103、树脂分离：将上述浓缩液上大孔树脂DM-301，水洗1倍柱体积除去杂质后，用30℃、体积分数为10％乙醇洗脱，通过紫外在线监测，收集含有黄酮的洗脱液；
S104、结晶：将含有黄酮的洗脱液浓缩至药液比重1.2，冷却至5℃静置析晶；
S105、干燥：将结晶晶体干燥后，即得6.0kg葛根总黄酮提取物。
将实施1-4制得的产品进行葛根总黄酮含量测定，测定方法采用紫外可见分光光度法，测定步骤如下：
1、准确称取10mg干燥至质量恒定的葛根素标准品，加入适量的体积分数50％乙醇充分溶解，然后转移至50m L容量瓶中，加体积分数50％乙醇定容，充分摇匀即得一定浓度的葛根素标准溶液。依次对上述标准溶液取等间隔体积的5份标准溶液2、4、6、8、10m L分别置于5个同样的10m L容量瓶中，加体积分数50％乙醇稀释定容。同时将体积分数50％乙醇1.0m L用蒸馏水稀释至10m L作为空白对照，用紫外可见分光光度计在250nm下测定其吸光度值。以葛根素浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
2、称取50mg葛根产品样品于10m L小烧杯，用50％乙醇溶液溶解，过滤、滤液转入50ml容量瓶中采用50％乙醇定容至50ml，用紫外可见分光光度计在250nm下测定其吸光度值，根据标准曲线计算葛根总黄酮含量。
测试结果如表1所示：
表1葛根总黄酮含量测试结果
实施例
实施例1
实施例2
实施例3
实施例4
葛根总黄酮含量
96.3％
95.8％
96.1％
95.9％
由测试结果可知，本申请制备方法制得的产品，葛根总黄酮含量在95％以上，得到高含量的葛根总黄酮，本申请提供一种简单可行、效率高的提取分离工艺，对实现含量95％葛根总黄酮的工业化生产有重要意义，依次通过超声波逆流提取、树脂纯化、结晶、干燥工艺组合应用，提取得到黄酮含量高的葛根提取物，与常见的葛根提取物提取工艺相比，本申请制得的葛根总黄酮含量达到95％以上，且工艺简单、生产周期短，产品颜色浅，生产成本低，易实现大规模生产，适用于工业化大生产的高含量的葛根总黄酮。
以上所述仅为本申请的较佳实施例而已，并不用以限制本申请，凡在本申请的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本申请的保护范围之内。