在抗原特异性免疫细胞中调节cd160功能的方法及其用途
阅读说明：本技术 在抗原特异性免疫细胞中调节cd160功能的方法及其用途 (Methods of modulating CD160 function in antigen-specific immune cells and uses thereof ) 是由 陈长征 周华 孙天强 罗易灵 董国强 于 2020-02-28 设计创作，主要内容包括：本发明提供了表达外源CD160蛋白质的修饰的抗原特异性免疫细胞。在一些实施方式中,修饰的抗原特异性免疫细胞进一步包括功能性外源受体,比如工程化的TCR或CAR。本发明还提供了调节抗原特异性免疫细胞中CD160活性的方法。本发明还提供了使用本文所述的修饰的抗原特异性免疫细胞和CD160活性的调节剂治疗癌症的方法和药物组合物。(The present invention provides modified antigen-specific immune cells expressing exogenous CD160 protein. In some embodiments, the modified antigen-specific immune cell further comprises a functional exogenous receptor, such as an engineered TCR or CAR. The invention also provides methods of modulating CD160 activity in antigen-specific immune cells. The invention also provides methods and pharmaceutical compositions for treating cancer using the modified antigen-specific immune cells and modulators of CD160 activity described herein.)
相关申请的交叉引用
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技术领域
本发明涉及调节抗原特异性免疫细胞中CD160功能的方法及其用途，抗原特异性免疫细胞包括天然和工程化的抗原特异性αβT细胞以及其他免疫细胞，比如具有或不具有工程化的抗原识别的天然杀伤(NK)细胞、天然杀伤T细胞(NK-T细胞)、iNK-T细胞、NK-T-like细胞、γδT细胞和巨噬细胞。本发明还涉及表达外源CD160蛋白质的抗原特异性免疫细胞，及其用于调节抗原特异性免疫细胞在治疗癌症中的功能的方法。
背景技术
T细胞是天然的药物，其可保护我们的身体免受感染和癌症。值得注意的是，靶向肿瘤的T细胞可以通过检查点阻断和嵌合抗原受体(CAR)T细胞疗法有效地重新接合(re-engage)以治疗癌症患者。这些免疫疗法的成功明确地表明T细胞对癌症治疗非常有效，激发了探索多种方法来激活并且使T细胞对抗癌症的。在过去的半个世纪里，开拓性的研究人员和临床医生已经探索靶向肿瘤的T细胞的过继转移来治疗人实体瘤。包括体外激活的T细胞、肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)、携带识别肿瘤抗原或肿瘤相关抗原的特异性T细胞受体(TCR)的T细胞(TCR-T)和源自装载肿瘤抗原的树突状细胞的T细胞(DC-T)的多种靶向肿瘤的T细胞进行测试并且在临床前模型和人患者中显示出有希望的功效。最近，识别来自突变的癌细胞的新抗原的T细胞被用于肺癌和乳腺癌的过继性T细胞疗法，并且在一些情况下显示出功效。然而，即使借助其他疗法，比如放射、疫苗接种、化学疗法和抗肿瘤细胞因子IL-2的共同输注，也难于以靶向肿瘤的T细胞的过继转移来可重复地实现实体瘤的持续控制和消除。
通过输注的靶向肿瘤的T细胞控制的肿瘤的相对低的应答率和最终损失可归因于T细胞的多种内在和外在屏障。这些屏障起源于内衡免疫耐受机制以及肿瘤诱导的免疫抑制机制。值得注意的是，这些耐受力造成了阻止T细胞有效控制肿瘤的屏障。例如，受涉及正负胸腺选择的中枢耐受机制控制的天然存在的抗肿瘤T细胞通常具有针对未突变的肿瘤抗原或肿瘤相关抗原具有低或中等亲和力的T细胞受体(TCR)。此外，发育的肿瘤可降低I类和II类主要组织相容性复合体(MHC)分子的表达，并且实际上限制了肿瘤抗原在肿瘤细胞上的呈递，并且从而限制了以同源TCR通过T细胞的识别。该领域的许多努力都致力于克服这些屏障，并且具有不同程度的成功。CAR可以有效地使T细胞接合肿瘤细胞，并且有助于克服T细胞对肿瘤识别的不足或损失。惊人地，靶向CD19或BCMA抗原的CAR-T细胞可分别消除B细胞白血病/淋巴瘤或多发性骨髓瘤。其他方法聚焦于经由体外进化通过提高肿瘤特异性TCR的亲和力或通过选择识别新抗原的TCR来克服识别屏障，从而适度提高功效。
虽然这些策略显示出前景，但为了使靶向肿瘤的T细胞能够消除或持续控制已建立的肿瘤，必须克服除抗原识别之外的另外屏障。值得注意的是，冷肿瘤—肿瘤内缺乏激活的T细胞—与预后不良和对免疫疗法的低反应性相关。据推测，除了肿瘤微环境中的许多其他未知因素外，检查点抑制、T细胞特异性化学引诱物的关闭、不利的营养和缺氧导致的T细胞耗竭也可有助于冷肿瘤现象。探索了多种基因工程化策略以增强肿瘤中的T细胞运输(trafficking)和激活。肿瘤特异性T细胞中趋化因子受体或识别VEGFR的CAR的异位表达显示出通过转移的T细胞增加肿瘤控制。此外，肿瘤特异性T细胞中的负向T细胞调节剂，比如PD-1或CBLB或腺苷2A受体的失活导致T细胞的抗肿瘤功能的增强。有趣地，增强线粒体生物发生和氧化磷酸化的信号，比如PGC1α或OPA1或携带CD278信号传导结构域的CAR的异位表达，也可以增加转移的T细胞的抗肿瘤功能。虽然肿瘤控制中的T细胞功能可通过不同的分子和细胞过程加强，但这些策略通常不足以通过T细胞能够进行持续的肿瘤控制或消除已建立的肿瘤，因此寻找可用于改编靶向肿瘤的T细胞的分子，以持续控制和消除实体瘤是重要的。
CD160是27kDa糖蛋白，它最初是用单克隆抗体BY55在人天然杀伤细胞上鉴定的(等，1993，J Exp Med..178(3):1121-6)。后来，CD160的主要形式是糖基-磷脂酰肌醇(GPI)锚定的免疫球蛋白(Ig)样细胞膜受体，其在主要CD16+NK细胞子集、NK-T细胞、γδ-T细胞、CD4 T细胞的一些子集和CD8+溶细胞T细胞上以及激活的内皮细胞中发现(LeBouteiller等，2011，Immunol Lett.,138(2):93-6)。人CD160的cDNA序列编码具有单个Ig样结构域的181个氨基酸的富含半胱氨酸的、糖基磷脂酰肌醇锚定的蛋白质。随后，已鉴定出具有跨膜结构域和/或缺乏细胞外Ig样结构域的其他同种型。CD160在细胞表面表达为紧密地二硫键连接的多聚体。CD160是HVEM的配体，并且CD160与HVEM的结合导致T细胞抑制和无反应性(Cai等，2009，Nat Immunol.，9(2):176–185)。CD160通常与抗PD-1抗体一起被认为是具有抗癌症活性的免疫检查点抑制剂(Stecher等，2017，Front Immunol.，8:572)。已经建议CD160与BTLA(CD272)竞争结合至HVEM(Kojima等，2011，J Mol Biol.，413(4):762-72)。NK细胞和一些人T细胞子集上的鼠和人CD160对MHC Ia类和Ib类具有低的亲和力，并且可在NK和T细胞激活中起作用(Maeda等，2005，J Immunol.，175(7):4426-32；Agrawal等，1999，J Immunol.,162(3):1223-6)。CD160也由内皮细胞表达，并且已被提议作为人类病理性眼部和肿瘤新血管生成的情况下潜在新靶标，所述人类病理性眼部和肿瘤新血管生成对现有的抗血管生成药物没有应答或变得抗性(Chabot等，2011，J Exp Med.，208(5):973-86)。小鼠中CD160功能丧失分析显示出CD160对NK-介导的IFN-γ产生至关重要，但对NK细胞的溶细胞活性是不重要的，并且显然不需要T淋巴细胞发育和功能(Tu等，2015，J ExpMed.，212(3):415-29)。迄今为止，还没有公开的证据显示在控制和消除已建立的肿瘤方面CD160对抗原特异性T细胞的作用。
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