本发明公开了一种牛瘤胃微生物纤维素酶eg基因在乳酸菌表达中的应用,属于生物工程技术领域。提取牛瘤胃总DNA,以NCBI的eg基因序列为设计引物,以牛瘤胃总DNA为模板,经PCR扩增eg片段,将其克隆至表达载体pMG36e中获得分泌型表达载体pMG36e::eg；将测序正确后的重组质粒电转导入L.lactis NZ9000,得到L.lactis NZ9000/pMG-36e::eg重组菌株。本发明克隆了牛瘤胃的纤维素酶eg基因,通过连接分型表达质粒,成功构建出分泌型表达质粒pMG36e::eg。从牛瘤胃中克隆得到一个基因大小为1500bp的的条带,该酶分子量为50kD,刚果红染色有明显水解圈,DNS法测定酶活力之后,酶活值为1.8195U/mL表明该酶具有一定的活性。

本发明提供一种秸秆酶解组合物及其制备方法和应用。所述秸秆酶解组合物包括层生镰刀菌分泌蛋白和纤维素酶,利用所述秸秆酶解组合物处理秸秆的方法包括：使用芬顿试剂对秸秆进行预处理,再使用所述秸秆酶解组合物对所述秸秆进行酶解。本发明中,将层生镰刀菌的分泌蛋白作为纤维素酶的补充添加剂或其辅助酶使用,能够提高纤维素酶的酶解效果,提高玉米秸秆的转化率以及还原糖的得率,实现农业废弃物资源的高效利用,同时也为层生镰刀菌的资源化利用提供了一条新途径。

本发明涉及具有分解纤维增强活性的分离多肽和编码该多肽的分离多核苷酸。本发明也涉及包括该多核苷酸的核酸构建体、载体、和宿主细胞以及生产和使用该多肽的方法。

本发明公开了一种将木质纤维素水解液回用于发酵生产纤维素酶液的方法,属于发酵生物技术领域。该方法包括以下步骤：利用粗纤维素酶液降解木质纤维素原料所得的木质纤维素水解液为碳源配制培养基进行发酵,生产出纤维素酶,将所述纤维素酶继续回用于木质纤维素原料的降解,形成循环工艺。通过对转录因子编码基因xyr1表达量和序列的遗传改造,里氏木霉菌株能够突破葡萄糖对纤维素酶表达的阻遏效应,使其具有在以纯葡萄糖或木质纤维素水解液为碳源的培养基上生产纤维素酶的能力,有效节省了纤维素酶发酵的碳源成本,有利于提高木质纤维素降解转化企业的整体经济效益。

本发明公开了一种N-糖基化修饰提高黑曲霉木聚糖酶热稳定性的方法,属于基因工程技术领域。通过酶学性质测定,突变体酶T59N的半衰期t-(1/2)～(50℃)提高至340min,突变体酶A55N/D57S/T59N在50℃下孵育500min,酶活没有下降趋势,孵育1260min,酶活只损失25.6％。突变体酶A55N/D57S/T59N的比酶活为290.5U/mg,较xynA提高了70.4％,且在pH2.0-9.0间很稳定,孵育1h仍能保持70％以上的酶活力,具有广阔的应用前景。

本发明公开了一种几丁质酶、其编码基因及应用。本发明以弧菌Vibrio sp.MCCC1A18305的基因组DNA为模板,设计并合成引物,通过PCR扩增几丁质酶基因,将该基因克隆入pET-22b表达载体上,在大肠杆菌E.coli BL21中进行诱导表达,采用Ni-Sepharose亲和层析纯化得到较高纯度的重组几丁质酶蛋白。该酶最适pH为6.5,最适温度为50℃,在40～50℃、pH 5.5～6.5范围内酶活性较好；在40℃和45℃下保温12h后酶活力仍无明显降低；Ca～(2+)和K～(+)对该酶活性具有明显促进作用；该酶对胶体几丁质具有良好的底物特异性,其水解终产物主要是二糖和单糖,是一种外切型几丁质酶,可用于几丁质资源的开发利用和几丁寡糖的制备。

本发明公开了一种将枯饼发酵成液体有机菌肥的生物酶菌剂配方,包括如下组分,其原料按重量份数计：蛋白粉10-30份,微生物菌剂4-8份和酶剂1-2份。本发明属于农业微生物菌剂和酶制剂技术领域,具体是指一种通过酶和菌相结合的方式在水中对枯饼进行分解,增加酶的含量加快分解速度,同时含有丰富的菌群,增加了枯饼有机液体菌肥的功能性的将枯饼发酵成液体有机菌肥的生物酶菌剂配方。

本发明公开了壳寡糖硒在南美白对虾养殖中的应用,具体地,包括：在提高南美白对虾体内硒含量中的应用,在促进南美白对虾生长中的应用,在提高南美白对虾存活率中的应用,在提高南美白对虾体内氨基酸含量中的应用；在制备南美白对虾饲料中的应用。所述壳寡糖硒是壳寡糖与亚硒酸螯合形成的壳寡糖硒配合物。具体应用时,向南美白对虾饲喂壳寡糖硒。本发明还公开了一种南美白对虾饲料,由南美白对虾基础饲料和壳寡糖硒组成,其中,壳寡糖硒的添加量为0.3％～0.8％。本发明通过实验研究发现壳寡糖硒可显著促进南美白对虾的生长(体长,体重),提升其质量品质(含硒量、氨基酸含量),具有良好的推广应用前景。

一种菌酶组合物及其在大豆皮发酵中的应用,菌酶组合物由纤维素酶、木聚糖酶、乳酸杆菌、芽孢杆菌和酵母菌组成。本发明相对于物理法和化学法来说,本发明采用的复合酶和复合益生菌结合发酵大豆皮技术方法简单、易于操作、安全环保并且成本低。与单独酶解法或者单独发酵相比,本发明既能降低大豆皮中的纤维,又能降低大豆皮中的抗原蛋白、脲酶等抗营养因子,极大地改善了大豆皮的适口性和营养价值,可有效促进大豆皮在畜禽饲料中的开发和利用,提高动物对大豆皮的利用效率,极其具有推广价值。

本发明公开了一株草酸青霉菌XZH-2及其应用。本发明提供的草酸青霉菌(Penicillium oxalicum)XZH-2菌株可分泌大量的纤维素酶和裂解性多糖单加氧酶,其中裂解性多糖单加氧酶,酶活力最高可达到17.17U/g底物,滤纸酶活达7.37IU/g底物,该草酸青霉菌XZH-2所产的纤维素酶和LPMO酶组合制剂应用于林木纤维素酶解,酶解效率提高13.35％。该纤维素酶和LPMO酶组合制剂是具有协同降解纤维素作用的氧化水解酶,它能够通过氧化作用来断裂纤维素的糖苷键,并促进纤维素酶与纤维底物结合以提高酶解效率,从而有效地降低酶解过程的加酶量。可进一步降低纤维素乙醇的生产成本,加快其产业化进程。