一种磷酸酶突变体及在催化麦芽糊精制备甘露糖中的应用

本发明公开了一种磷酸酶突变体及在催化麦芽糊精制备甘露糖中的应用,所述突变体是将SEQ ID NO.1所示氨基酸的第175位、179位或195位进行单点突变获得的。本发明以含磷酸酶突变体编码基因的工程菌发酵培养获得的湿菌体经超声破碎提取的酶液为催化剂,以麦芽糊精为底物,联合葡聚糖磷酸化酶、葡萄糖磷酸变位酶、葡萄糖磷酸异构酶、甘露糖6-磷酸异构酶,添加MgCl-(2)和磷酸盐,以pH为7.5～8.5的缓冲液为反应介质构成反应体系,制备甘露糖。本发明磷酸酶突变体F179M通过体外一锅法以麦芽糊精为底物生产甘露糖,转化率达到60-70％,产物甘露糖与副产物果糖、葡萄糖比例为11:1:1。

2021-11-02

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一种提高CE酶结构异构催化活性的方法及其突变体

本发明公开了本发明涉及一种提高CE酶结构异构催化活性的方法及其突变体,属于酶工程领域。本发明以来源于Caldicellulosiruptorsaccharolyticus的纤维二糖差向异构酶(CsCE)为研究对象,基于序列比对及晶体结构分析的半理性策略,对底物结合相关的位点进行点饱和突变,获得了多个结构异构催化活性显著提高的突变体,其结构异构活性较野生型CE酶提高了约36～232％。发明为CE酶改良提供了可行性方案,对于促进乳果糖的酶法工业化合成具有重要意义。

2021-10-29

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mPGES-2作为预防和/或治疗肾脏疾病的药物靶点的应用

本发明公开了mPGES-2作为预防和/或治疗肾脏疾病的药物靶点的应用。本发明首次提出mPGES-2是顺铂诱导的急性肾损伤的药物靶点。实验表明,mPGES-2敲除可以显著降低由顺铂诱导的急性肾损伤小鼠血清中尿素氮和肌酐的水平,明显减轻由顺铂诱导的急性肾损伤小鼠肾组织形态损伤,同时显著改善了急性肾损伤小鼠肾脏中线粒体功能并减少了细胞凋亡。这些结果说明敲除mPGES-2可改善顺铂诱导的急性肾损伤,表明mPGES-2可以作为预防和/或治疗顺铂诱导的急性肾损伤的靶点,对今后此类疾病的药物开发及预防和/或治疗有非常重要的意义。

2021-10-26

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新阿洛酮糖-6-磷酸去磷酸化酶,包含其制备阿洛酮糖的组合物,和用其制备阿洛酮糖的方法

本发明涉及一种阿洛酮糖-6-磷酸磷酸酶,包含所述酶的微生物,以及使用所述酶制备阿洛酮糖的方法。

2021-10-22

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甘露糖的酶法生产

本文公开了生产甘露糖的改进方法,包括由M6PP催化将M6P转化为甘露糖的步骤,所使用的酶与先前生产甘露糖的方法中使用的M6PP酶类相比具有更高的活性。

2021-10-22

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一种从头合成黄烷酮的三功能酶及其合成方法和应用

本发明提出了一种从头合成黄烷酮的高活性三功能酶,将4-香豆酰辅酶A连接酶基因和查尔酮异构酶基因、查尔酮合酶基因克隆至原核表达载体构建重组质粒,再转化大肠杆菌,以诱导表达重组酶,并利用纯化的重组酶建立无细胞合成体系,实现黄烷酮的体外酶促合成。本发明克服了黄烷酮的体外多酶合成体系中产量和底物转化率较低的问题,同时建立一种成分简单的体外酶促合成体系,不存在工程菌细胞内复杂的调控作用,反应过程易于精确控制、副产物少、产品分离相对简单、生产周期明显缩短、生产成本显著降低。

2021-10-22

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一种热稳定性提高的甘露糖异构酶突变体

本发明公开了一种热稳定性提高的甘露糖异构酶突变体,属于酶的基因工程技术领域。本发明公开了来源于微生物Deltaproteobacteria bacterium的甘露糖异构酶作为亲本,利用基因突变技术,第37位的精氨酸替换成赖氨酸和第164位的甘氨酸替换成亮氨酸,得到双突变体R37K/G164L。在温度为60℃时,测得野生酶的半衰期为46.27min,突变体酶R37K/G164L的半衰期为185.83min,两点突变体R37K/G164L在60℃的半衰期为野生酶半衰期的4倍,突变体酶相对于野生酶热稳定性明显的提高。这一发现对于研究更多热稳定性甘露糖异构酶具有重要的研究价值。

2021-10-19

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酶组合物及其在柚皮素生物合成中的应用

本发明涉及生物技术领域,尤其涉及酶组合物及其在柚皮素生物合成中的应用。本发明通过研究查尔酮合成酶CHSs与查尔酮异构酶样蛋白CHILs之间相互作用的关系,获得能够有效促进柚皮素的酶组合物。该组合物以对香豆酸为底物,合成柚皮素水平可达187.10mg/L,较无CHIL情况下,柚皮素产量提高了25.95％。同时,脱轨产物CTAL的含量降低了69.80％。该组合对于推动柚皮素产物的工业化生产具有重要意义,也为CHS催化的其他黄酮产物的高效合成奠定了基础。

2021-10-15

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一种强化表达内质网大小调节因子的酿酒酵母菌株的构建和应用

本发明公开了一种强化表达内质网大小调节因子的酿酒酵母菌株的构建和应用,属于代谢工程技术领域。本发明以酿酒酵母BY4741为出发菌株,强化MVA代谢途径中的关键基因tHMG1(3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶)、IDI(异戊烯基焦磷酸异构酶)以及ERG20(法尼基焦磷酸合酶)以提高角鲨烯前体代谢物产量,敲除ROX1基因以促进菌体生长,发酵生产角鲨烯产量为1.44g/L。进一步强化内质网大小调节因子相关基因INO2、SCS22、TCB2和IST2以扩大内质网表面积增强细胞蛋白质合成能力,发酵产量达到2.06g/L,提高了43.1％。

2021-10-15

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一种蔗糖异构酶突变体及其应用

本发明属于酶工程技术领域,涉及一种蔗糖异构酶突变体及其应用。所述的突变体在SEQ ID NO.1所示氨基酸序列的野生型蔗糖异构酶中突变R434P与E273N。突变体较野生型蔗糖异构酶热稳定性和发酵活力均显著提高。利用突变体制备的固定化酶活力更高,稳定性显著增加,蔗糖转化率和异麦芽酮糖生成率有所提高,杂质含量更低,更适用于工业应用。

2021-10-08

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