本发明公开了一种基于群体感应的自诱导调控系统,包括luxI、luxR和egfp,其中,控制luxI和luxR表达的启动子选自P-(luxI)、P-(BB)或P-(J23100)；控制egfp表达的启动子选自P-(luxI)、P-(luxI)(T-38C)或P-(luxI)(C-77T)。所述的基于群体感应的自诱导调控系统在大肠杆菌工程菌的目的基因表达、自动调控中的应用,在制备褐藻胶裂解酶、酯酶中的应用。本发明还公开了包含该基于群体感应的自诱导调控系统的重组表达载体、重组工程菌。本发明对群体感应系统中的启动子进行改造筛选,构建了适合褐藻胶裂解酶和酯酶的自诱导调控系统,可实现褐藻胶裂解酶的高密度、高酶活发酵。

本发明属于植物基因工程技术领域,具体公开了一种胡椒PNPAL3基因,核苷酸序列为SEQ ID NO:1。本发明还公开了上述胡椒PNPAL3基因在胡椒抗瘟病中的应用。本发明公开的胡椒PNPAL3基因能够提高热引1号抗瘟病能力；对PnPAL3基因进行烟草转化,得到木质素总含量升高、G型木质素含量升高、抗病性明显提高的转基因烟草植株。

本发明公开了细菌生物被膜核心胞外多糖裂解酶PelAN及其制备方法和应用,属于微生物工程技术领域。PelAN的制备方法包括设计编码细菌生物被膜核心胞外多糖裂解酶PelAN的基因序列,将其克隆到pET28b表达载体中后导入到DE3感受态细胞中,得到DE3工程菌株后扩大培养,诱导表达,离心收集菌体并重悬于细胞破碎液中,冰浴超声破碎,高速离心,收集上清液,纯化并收集PelAN蛋白得到。本发明通过原核表达系统构建重组表达PelAN蛋白,步骤简单且操作方便,适用于大量提取高纯度、高活性的PelAN蛋白,弥补其工业化制备的技术空白,为PelAN靶向清除革兰氏阴性细菌生物被膜奠定基础。

本发明公开了一种松材线虫效应子BxSCD1互作蛋白及其编码基因和应用,属于分子生物学技术领域。松材线虫效应子BxSCD1互作蛋白,其氨基酸序列如SEQ ID No.1所示,表达该蛋白的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。本申请从松材线虫分泌的效应子及寄主靶标出发,研究寄主松树和松材线虫之间的相互作用,发现BxSCD1沉默能够延缓黑松发病,BxSCD1抑制了黑松病程相关基因的表达；通过BxSCD1与松树乙烯合成酶基因ACO1互作,证明BxSCD1可以通过影响黑松的乙烯合成酶ACO1的表达量,影响松树的免疫反应,对于揭示松材线虫的致病机理及早期检测松材线虫病的发生等方面具有重要的科学意义。

本发明公开了一种代谢工程大肠杆菌发酵制备广藿香醇的方法,属于生物工程领域。本发明改造广藿香醇合酶及宿主菌株,获得能够高效发酵生产广藿香醇的重组菌及其发酵方法。该重组菌株能够以廉价的葡萄糖为底物,发酵生成高附加值的广藿香醇,摇瓶发酵96h广藿香醇产量达到338.6mg/L,得率为48.6mg/g干2细胞重量,体积生产强度为84.6mg/L/d。在5L发酵罐中,广藿香醇产量可达到970.1mg/L,体积生产强度为199mg/L/d。

本发明涉及一种用于在微生物宿主细胞中产生目标重组多肽的方法,其包括(a)向微生物宿主细胞中引入编码所述目标多肽的多核苷酸,所述微生物宿主细胞已经被修饰,使得所述微生物宿主细胞中的选自酮醇酸还原异构酶(NADP(+))活性(EC 1.1.1.86)、乙酰羟酸合酶活性(EC 2.2.1.6)、天冬氨酸激酶活性(EC 2.7.2.4)、高丝氨酸脱氢酶活性(EC 1.1.1.3)和L-苏氨酸脱水酶活性(EC 4.3.1.19)的酶活性与未经修饰的微生物宿主细胞中的所述酶活性相比被调节；以及(b)在所述微生物宿主细胞中表达所述目标多肽。此外,本发明涉及一种用于减少至少一种非经典支链氨基酸向微生物宿主细胞中表达的目标重组多肽中的错掺的方法。

本发明公开了一种具有广谱裂解活性的抗菌肽P104、裂解酶LysP53及其应用。所述抗菌肽P104的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,所述抗菌肽P104的基因序列如SEQ ID NO.3所示；所述裂解酶LysP53的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示,所述裂解酶LysP53的基因序列如SEQ ID NO.4所示；所述抗菌肽P104和所述裂解酶LysP53在体外对鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌和大肠杆菌具有较好的裂解效果,能广谱裂解革兰氏阴性菌；同时所述裂解酶LysP53能在大肠杆菌中进行可溶性表达,酶的活性高,因此,所述抗菌肽P104和所述裂解酶LysP53在抗感染类药物的研发中具有较好的应用前景。

本发明公开了碳酸酐酶SaCA及其编码基因和应用。本发明提供的蛋白质,来源于盐螺旋菌(Salinispirillum sp.),是一种碳酸酐酶,命名为SaCA蛋白,是由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质。本发明还保护SaCA蛋白作为碳酸酐酶的应用。本发明对于相关环境保护、医药领域等,具有重大的应用前景。

本发明公开了一种果胶裂解酶突变体ΔPelG403及其编码基因、制备方法和应用,该果胶裂解酶突变体ΔPelG403为将野生型果胶裂解酶PelG403柔性区第129位的氨基酸由小分子量丙氨酸突变为大分子量缬氨酸；其氨基酸序列和核苷酸序列分别为SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2。本发明提供的突变体酶在碱性条件下,酶活力和耐热性能有明显的提高,解决了野生型果胶裂解酶在碱性条件下催化活性低和热稳定性不足的问题,为利用该酶在棉麻加工、制浆造纸、工业废水处理等行业中的应用创造了良好条件。

提供了包含鞣花单宁组合物和酶组合物的组合,所述酶组合物包含一种或多种鞣花单宁酶,其中所述一种或多种鞣花单宁酶包含单宁酰基水解酶、没食子酸脱羧酶或其组合。还提供了制备和使用本文所公开的组合的方法。