本发明公开了一种促进丛枝菌根真菌非共生产孢的方法及其应用。是在丛枝菌根真菌的培养基中添加豆蔻酸钾、独脚金内酯、茉莉酸甲酯和蛋白胨。本发明经过创造性的探索实验,通过在丛枝菌根真菌的孢子中添加豆蔻酸钾、独脚金内酯、茉莉酸甲酯和蛋白胨,显著提高丛枝菌根真菌孢子生产量,添加处理中丛枝菌根真菌单个母孢子产生的孢子量是不添加处理的9倍。添加豆蔻酸钾、独脚金内酯、茉莉酸甲酯和蛋白胨能够显著提高非共生条件下的丛枝菌根真菌孢子生产量。