阅读说明：本技术 一种不饱和酮类化合物、其制备方法和用途 (Unsaturated ketone compound, preparation method and application thereof ) 是由 胡有洪 谢欣 鲁伯埙 张玉芳 郭世猛 王聪聪 王志龙 于 2019-04-09 设计创作，主要内容包括：本发明涉及一种新型的GPR52拮抗剂。具体而言,涉及一种不饱和酮类化合物、其药学上可接受的盐、立体异构体或前药分子；其药物组合物的制备方法；以及作为孤儿G蛋白偶联受体GPR52拮抗剂的用途,进而涉及GPR52拮抗剂在亨廷顿病预防及治疗药物制备中的用途。(The present invention relates to a novel GPR52 antagonist. In particular to an unsaturated ketone compound, and pharmaceutically acceptable salt, stereoisomer or prodrug molecules thereof; a process for the preparation of pharmaceutical compositions thereof; and the application of the antagonist as a GPR52 antagonist of an orphan G protein-coupled receptor, and further relates to the application of the GPR52 antagonist in the preparation of medicaments for preventing and treating Huntington diseases.)

一种不饱和酮类化合物、其制备方法和用途

技术领域

本发明涉及一种新型的GPR52拮抗剂。具体而言，涉及一种不饱和酮类化合物、其药学上可接受的盐、立体异构体或前药分子；其药物组合物的制备方法；以及作为孤儿G蛋白偶联受体GPR52拮抗剂的用途，进而涉及GPR52拮抗剂在亨廷顿病预防及治疗药物制备中的用途。

背景技术

亨廷顿疾病(HD)是由一种常染色体控制的迟发性神经退行性遗传病，主要是由突变的亨廷顿基因(HTT gene)导致，其全球发病率为万分之一，发病后生存率仅为10-20年。HD常常在成年时期开始显现，其特征为进展性的运动、认知和神经精神损伤。该病无法治愈，然而仍有一些对症治疗的手段。

HTT基因编码亨廷顿蛋白，健康HTT基因外显子1区的CAG三核苷酸重复次数为10-26次，而HD病人的CAG重复数目增多(大于35)，导致合成的变异蛋白(mHTT)的谷氨酰胺重复区域(polyQ)扩增。变异蛋白会被剪断、聚集、产生毒性，集中在纹状体中导致神经元死亡，并引起以舞蹈症为特征的一系列神经功能、心理、以及代谢相关症状，最终导致提早死亡。

虽然mHTT蛋白导致神经元死亡的机制尚不清楚，但直接降低变异HTT蛋白水平被发现在各种动物及细胞模型中可以对疾病相关的表型起到显著的治疗效果。国际HD领域的研究主要集中在RNA干扰、基因治疗、反义RNA抑制、CRISPR/Cas9等RNA靶向手段，然而这些RNA靶向方法需要大生物分子给药或依赖病毒给药，从技术和经济角度都面临很多困难。复旦大学鲁伯埙课题组研究发现一个G蛋白偶联受体GPR52与HD的发生发展存在密切联系，小鼠在体敲除GPR52基因可以显著拯救HD的相关表型，提示GPR52可能是潜在的HD治疗新靶点。中科院上海药物所谢欣课题组采用高通量筛选方法，获得了特异性阻断GPR52的小分子化合物E7，该化合物在细胞、果蝇及小鼠模型上均可以有效降低mHTT水平，并有效拯救了HD相关表型，有力证明了靶向GPR52的小分子药物对HD的潜在治疗作用，因此发现和改造GPR52拮抗剂，对于科学研究和临床应用都有非常重要的价值。基于GPR52小分子药物在亨廷顿疾病治疗的需求，本发明提供一种结构新颖的酮类小分子GPR52拮抗剂。

发明内容

本发明提供一种新型酮类GPR52拮抗剂，及其制备方法和用途。

本发明是通过以下技术方案来实施的：

一种式(I)所示的不饱和酮类化合物、其药学上可接受的盐、立体异构体或前药，

其中：

Ar¹和Ar²各自独立选自5～10元芳基或5～10元杂芳基；

R¹为Ar¹上的一个或多个取代基，各自独立地选自H、卤素、氰基、羟基、硝基、羧基、无取代或取代的C1～C6烷基、C1～C6烷氧基、无取代或取代的氨基、5～10元芳基、5～10元杂芳基、无取代或被叔丁氧羰基取代的3～10元杂环基；所述取代的C1～C6烷基是指被选自如下的一种或多种取代基所取代：卤素、氨基、羟基；所述取代的氨基是指被选自如下的一种或多种取代基所取代：C1～C6烷基、叔丁氧羰基(Boc基)。

R²为Ar²上的一个或多个取代基，各自独立地选自H、卤素、氰基、羟基、硝基、羧基、无取代或取代的C1～C6烷基、C1～C6烷氧基、无取代或取代的氨基、5～10元芳基、5～10元杂芳基、无取代或被叔丁氧羰基取代的3～10元杂环基；所述取代的C1～C6烷基是指被选自如下的一种或多种取代基所取代：卤素、氨基、羟基；所述取代的氨基是指被选自如下的一种或多种取代基所取代：C1～C6烷基、叔丁氧羰基(Boc基)。

m选自0至5的整数；

L为-O-CH₂-、-S-CH₂-、-NR³-CH₂-、-(CHR⁴)_i-CH₂-或L不存在；

R³选自H、C1～C6烷基、叔丁氧羰基、5～10元芳基或5～10元杂芳基；

R⁴选自H、氨基或被叔丁氧羰基取代的氨基、卤素、氰基、羟基、硝基、羧基、C1～C6烷基、5～10元芳基、5～10元杂芳基；

i选自0至5的整数；

所述5～10元芳基为5～10元单环或稠合双环，如苯基、萘基；

所述5～10元杂芳基为含有1～3个选自N、O和S中的杂原子的5-10元杂芳环或稠和双环，如吡啶基、呋喃基、噻吩基、吲哚基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、苯并吡啶基；

所述卤素包括氟、氯、溴和碘；

所述C1～C6烷基为具有1～6个碳原子的饱和脂肪族直链或支链的烷基；

所述C1～C6烷氧基为具有1～6个碳原子的直链或支链烷氧基；

所述3～10元杂环基为环上含有选自N、O、S中一个或一个以上杂原子的饱和或不饱和的3～10元单环或多环脂杂环，本发明中优选为4～7元杂环基，如哌嗪基、哌啶基、吗啉基；

优选地，所述医药上可接受的盐为：盐酸盐、硫酸盐、磷酸盐、甲磺酸盐、马来酸盐等；

所述前药为：式(I)所示的不饱和酮类化合物的酯化合物、酰胺化合物、碳酰胺化合物等。

所述的式(I)所示的不饱和酮类化合物中，

优选地，Ar¹选自苯基、萘基、吡啶基、噻吩基、呋喃基、吡唑基、苯并噻吩基、吲哚基；更优选地，Ar¹选自苯基、噻吩基；

优选地，Ar²选自苯基、萘基、吡啶基、噻吩基、呋喃基、吡唑基；更优选地，Ar²选自苯基、噻吩基、呋喃、吡啶基；

优选地，R¹选自H、卤素、氰基、无取代或取代的C1～C6烷基、C1～C6烷氧基、5～10元芳基、5～10元杂芳基、无取代或取代的氨基、无取代或被叔丁氧羰基取代的3～10元杂环基；所述取代的C1～C6烷基是指被选自如下的一种或多种取代基所取代：卤素、氨基、羟基；所述取代的氨基是指被选自如下的一种或多种取代基所取代：C1～C6烷基、叔丁氧羰基；更优选地，R¹选自H、卤素、CF₃、甲基、甲氧基；

优选地，R²选自H、卤素、氰基、无取代或取代的C1～C6烷基、C1～C6烷氧基、5～10元芳基、5～10元杂芳基、无取代或取代的氨基、无取代或被叔丁氧羰基取代的3～10元杂环基；所述取代的C1～C6烷基是指被选自如下的一种或多种取代基所取代：卤素、氨基、羟基；所述取代的氨基是指被选自如下的一种或多种取代基所取代：C1～C6烷基、叔丁氧羰基；更优选地，R²选自H、卤素、CF₃、甲基、甲氧基；

优选地，m选自0、1、2；更优选地，m为0；

优选地，L选自-O-CH₂-、-(CHR⁴)_i-CH₂-或L不存在；R⁴选自H、卤素、氨基、羟基；i选自0、1、2、3、4。

优选地，所述的式(I)所示的不饱和酮类化合物选自如下化合物：

本发明另一方面提供式(I)所示的不饱和酮类化合物的制备方法，其选自如下合成路线I和合成路线II：

合成路线I包括如下步骤：

(1)化合物I-1在甲醇和浓硫酸的存在下回流，发生酯化反应，得到化合物I-2；

(2)化合物I-2与化合物I-3(甲基磷酸二甲酯)在THF(四氢呋喃)和n-BuLi(正丁基锂)存在下发生加成、消除反应，得到化合物I-4；

(3)化合物I-4与化合物I-5在THF和碳酸钾存在下发生HWE

(Horner-Wadsworth-Emmons)反应，得到化合物I-6；

其中，Ar¹、Ar²、R¹、R²、L及m的定义如前所述；

合成路线II包括如下步骤：

化合物II-1与化合物II-2在乙醇、KOH溶液存在下，发生羟醛缩合反应得到产物II-3；

其中，Ar¹、Ar²、R¹、R²的定义如前所述。

优选地，合成路线I包括如下步骤：

(1)将化合物I-1溶于甲醇中，加入催化量的浓硫酸，回流反应，TLC监测反应完全后，停止反应并冷却至室温，分离纯化得到化合物I-2；

(2)N₂保护下，将甲基磷酸二甲酯I-3溶于干燥的THF，冷却至-78℃，滴加n-BuLi溶液，于-78℃下搅拌30min后，加入化合物I-2的四氢呋喃溶液，于-78℃下反应。TLC监测反应完全后，升温至0℃，加入饱和的NH₄Cl溶液淬灭，分离纯化得化合物I-4；

(3)将化合物I-4溶于THF后，加入碳酸钾，N₂置换3次后室温反应40min。加入化合物I-5的THF溶液，移至40℃下反应12h，TLC监测反应完全后将反应体系冷却至室温，分离纯化得产物I-6。

优选地，合成路线II包括如下步骤：

将化合物II-1、化合物II-2溶于乙醇后，加入50％的KOH溶液，室温反应，TLC监测反应完全后，停止反应，加入冰水淬灭，6M盐酸溶液中和至中性，有大量固体析出，过滤得到固体，EtOH重结晶得到产物II-3。

本发明的又一方面提供一种药物组合物，包含所述式(I)所示的不饱和酮类化合物、其药学上可接受的盐、立体异构体、前药中的至少一种，以及药学上可接受的载体。

本发明的又一方面提供所述式(I)所示的不饱和酮类化合物、其药学上可接受的盐、立体异构体或前药或所述药物组合物在制备GPR52拮抗剂中的应用。

所述的化合物具有降低mHTT的作用，因此，本发明还提供了所述式(I)所示的不饱和酮类化合物、其药学上可接受的盐、立体异构体或前药或所述药物组合物在制备预防和/或治疗亨廷顿病的药物中的用途。

附图说明

图1为化合物E7的结构；

图2为代表性化合物23和43对GPR52及β2AR和GCGR的抑制活性曲线图；

图3为代表性化合物23和43的蛋白印记实验电泳图及TR-FRET实验结果柱状图。

具体实施方式

以下对本发明的具体实施方式进行详细说明。但所描述的具体实施方式仅用于示例性地对本发明进行说明，并不用于限制本发明。

(一)化合物制备实施例

实施例1化合物1的制备

实施例1的合成路线如下所示：

步骤a：

将3-苯基丙酸1-1(3.0g,20mmol)溶于甲醇(30mL)中，加入催化量的浓硫酸(1.5mL)，回流反应2h，TLC监测反应完全后，停止反应并冷却至室温。减压旋蒸除去甲醇，加入乙酸乙酯萃取，有机层依次水洗、饱和碳酸氢钠溶液洗、饱和食盐水洗涤；无水硫酸钠干燥后减压浓缩得到无色油状液体1-2(3.2g,收率96％)。

步骤b：

N₂保护下，将甲基磷酸二甲酯(1.3mL,12.2mmol)溶于干燥的THF(15mL)后，冷却至-78℃，滴加n-BuLi溶液(2.4M in THF,5.6mL)，于-78℃下搅拌30min后，加入3-苯基丙酸甲酯I-2(1.0g,6.1mmol)的四氢呋喃溶液(5mL)于-78℃下搅拌1h后，TLC监测反应完全。升温至0℃下加入饱和的NH₄Cl溶液淬灭。向反应体系中加入乙酸乙酯(50mL)和水(50mL)，有机层依次用水(50mL)和饱和食盐水(50mL)洗涤。有机层用无水硫酸钠干燥后浓缩得粗产物，该粗产物用柱层析(DCM:MeOH＝100:0～95:5)分离纯化得无色油状液体1-4(1.5g,收率98％)。

步骤c：

将1-4(190mg,0.75mmol)溶于THF(5mL)，加入碳酸钾(110mg,0.83mmol)，N₂置换3次后室温反应40min。加入3-苯基丙醛(100mg,0.75mmol)的THF溶液(2mL)，移至40℃下反应12h，TLC监测反应完全后将反应体系冷却至室温。减压旋蒸除去溶剂后，将残余物用乙酸乙酯萃取(10mL)溶解，有机层依次用水(10mL)和饱和食盐水(10mL)洗涤后用无水硫酸钠干燥、浓缩得粗产物，该粗产物用柱层析(PE:EA＝50:1～20:1)分离纯化得产物1(无色油状液体，182mg，收率92％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.44–7.15(m,10H),6.91(dt,J＝15.7,6.8Hz,1H),6.19(d,J＝15.9Hz,1H),3.01(t,J＝7.1Hz,2H),2.95–2.88(m,2H),2.84(t,J＝7.7Hz,2H),2.59(dd,J＝14.6,7.5Hz,2H).

实施例2化合物2的制备

除了使用3-(4-甲氧基苯基)丙醛代替3-苯基丙醛之外，合成方法同实施例1相同的方法制备化合物2。(无色油状液体，收率82％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.49–6.96(m,7H),6.90–6.73(m,3H),6.09(d,J＝15.8Hz,1H),3.76(s,3H),2.90(m,2H),2.83(m,2H),2.75–2.63(m,2H),2.47(m,2H).

实施例3化合物3的制备

除了使用3-(4-三氟甲基苯基)丙醛代替3-苯基丙醛之外，以与实施例1相同的方法制备化合物3。(无色油状液体，收率86％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.53(d,J＝8.0Hz,2H),7.30–7.22(m,4H),7.19–7.16(m,3H),6.80(dt,J＝15.9,6.8Hz,1H),6.10(d,J＝15.9,1H),2.96–2.88(m,2H),2.87–2.76(m,4H),2.56–2.47(m,2H).

实施例4化合物4的制备

除了使用3-(4-溴苯基)丙醛代替3-苯基丙醛之外，以与实施例1相同的方法制备化合物4。(无色油状液体，收率84％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.38(d,J＝8.4Hz,2H),7.29–7.23(m,2H),7.20–7.14(m,3H),7.01(d,J＝8.4Hz,2H),6.78(dt,J＝15.9,6.8Hz,1H),6.07(dt,J＝15.9,1.5Hz,1H),2.94–2.87(m,2H),2.82(ddd,J＝8.5,5.7,1.8Hz,2H),2.69(t,J＝7.6Hz,2H),2.51–2.42(m,2H).

实施例5化合物5的制备

除了使用3-(4-甲氧基苯基)丙酸甲酯代替3-苯基丙酸甲酯之外，以与实施例1相同的方法制备化合物5。(无色油状液体，收率70％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.27(t,J＝7.3Hz,2H),7.21–7.11(m,3H),7.11–7.03(m,2H),6.85–6.73(m,3H),6.08(dt,J＝15.9,1.4Hz,1H),3.74(s,3H),2.88–2.81(m,2H),2.81–2.69(m,4H),2.53–2.43(m,2H).

实施例6化合物6的制备

除了使用3-(4-三氟甲基苯基)丙酸甲酯代替3-苯基丙酸甲酯之外，以与实施例1相同的方法制备化合物6。(无色油状液体，收率62％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.50(d,J＝8.1Hz,2H),7.30–7.22(m,4H),7.20–7.14(m,3H),6.83(dt,J＝15.9,6.8Hz,1H),6.10(d,J＝15.9Hz,1H),2.96(t,J＝7.4Hz,2H),2.83(t,J＝7.3Hz,2H),2.75(t,J＝7.7Hz,2H),2.51(q,J＝7.1Hz,2H).

实施例7化合物7的制备

除了使用3-(4-氟苯基)丙酸甲酯代替3-苯基丙酸甲酯之外，以与实施例1相同的方法制备化合物7。(无色油状液体，收率86％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.27(t,J＝7.3Hz,2H),7.21–7.11(m,3H),7.11–7.03(m,2H),6.85–6.73(m,3H),6.08(dt,J＝15.9,1.4Hz,1H),3.74(s,3H),2.88–2.81(m,2H),2.81–2.69(m,4H),2.53–2.43(m,2H).

实施例8化合物8的制备

除了使用苯乙酸甲酯代替3-苯基丙酸甲酯之外，以与实施例1相同的方法制备化合物8。(无色油状液体，收率41％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.35–7.22(m,5H),7.20–7.16(m,3H),7.11(d,J＝7.3Hz,2H),6.91(dt,J＝15.6,6.8Hz,1H),6.13(d,J＝15.8Hz,1H),3.78(s,2H),2.73(t,J＝7.6Hz,2H),2.49(q,J＝7.2Hz,2H).

实施例9化合物9的制备

除了使用苯甲酸甲酯代替3-苯基丙酸甲酯之外，以与实施例1相同的方法制备化合物9。(无色油状液体，收率77％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.94(d,J＝7.4Hz,2H),7.58(t,J＝7.3Hz,1H),7.48(t,J＝7.7Hz,2H),7.39–7.32(m,2H),7.28–7.25(m,3H),7.18–7.09(m,1H),6.92(d,J＝15.4Hz,1H),2.88(t,J＝7.6Hz,2H),2.67(dd,J＝14.8,7.2Hz,2H).

实施例10化合物10的制备

除了使用苯乙醛代替3-苯基丙醛，苯甲酸甲酯代替3-苯基丙酸甲酯之外，以与实施例1相同的方法制备化合物10。(白色固体，收率76％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.01(d,J＝7.3Hz,2H),7.58(t,J＝7.4Hz,1H),7.49(t,J＝6.3Hz,2H),7.39(d,J＝7.4Hz,2H),7.35–7.25(m,3H),6.86(d,J＝15.3Hz,1H),6.59–6.50(m,1H),3.92(d,J＝6.2Hz,2H).

实施例11化合物11的制备

除了使用4-苯基丁醛代替3-苯基丙醛，苯甲酸甲酯代替3-苯基丙酸甲酯之外，以与实施例1相同的方法制备化合物11。(无色油状液体，收率86％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.92(d,J＝7.0Hz,2H),7.55(t,J＝7.4Hz,1H),7.46(t,J＝7.5Hz,2H),7.29(t,J＝7.7Hz,2H),7.19(d,J＝8.0Hz,3H),7.08(dt,J＝15.4,6.9Hz,1H),6.89(d,J＝15.4Hz,1H),2.71–2.66(m,2H),2.35(td,J＝8.2,1.4Hz,2H),1.92–1.82(m,2H).

实施例12化合物12的制备

除了使用5-苯基戊醛代替3-苯基丙醛，苯甲酸甲酯代替3-苯基丙酸甲酯之外，以与实施例1相同的方法制备化合物12。(无色油状液体，收率88％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.91(d,J＝7.1Hz,2H),7.54(t,J＝7.4Hz,1H),7.45(t,J＝7.5Hz,2H),7.31–7.25(m,2H),7.20–7.16(m,3H),7.05(dt,J＝15.3,6.9Hz,1H),6.86(d,J＝15.4Hz,1H),2.64(t,J＝7.5Hz,2H),2.39–2.30(m,2H),1.71–1.65(m,2H),1.61–1.52(m,2H).

实施例13化合物13的制备

除了使用2-甲基苯甲酸甲酯代替3-苯基丙酸甲酯之外，以与实施例1相同的方法制备化合物13。(无色油状液体，收率82％)

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ7.36–7.23(m,4H),7.21–7.13(m,5H),6.72(dt,J＝15.7,6.7Hz,1H),6.45(d,J＝15.8Hz,1H),2.77(t,J＝7.6Hz,2H),2.56(dd,J＝14.9,7.0Hz,2H),2.35(s,3H).

实施例14化合物14的制备

除了使用2,6-二甲基苯甲酸甲酯代替3-苯基丙酸甲酯之外，以与实施例1相同的方法制备化合物14。(无色油状液体，收率80％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.26(t,J＝7.4Hz,2H),7.21–7.08(m,4H),7.00(d,J＝7.5Hz,2H),6.49(dt,J＝15.9,6.8Hz,1H),6.28(dt,J＝15.9,1.3Hz,1H),2.75(t,J＝7.6Hz,2H),2.59–2.51(m,2H),2.12(s,6H).

实施例15化合物15的制备

除了使用3-甲基苯甲酸甲酯代替3-苯基丙酸甲酯之外，以与实施例1相同的方法制备化合物15。(无色油状液体，收率92％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.72–7.69(m,2H),7.41–7.31(m,4H),7.27–7.24(m,3H),7.10(dt,J＝15.4,6.8Hz,1H),6.89(dt,J＝15.4,1.4Hz,1H),2.88(t,J＝7.7Hz,2H),2.71–2.64(m,2H),2.44(s,3H).

实施例16化合物16的制备

除了使用4-甲基苯甲酸甲酯代替3-苯基丙酸甲酯之外，以与实施例1相同的方法制备化合物16。(无色油状液体，收率90％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.85(d,J＝8.2Hz,2H),7.33–7.37(m,2H),7.29–7.23(m,5H),7.11(dt,J＝15.3,6.8Hz,1H),6.91(dt,J＝15.4,1.3Hz,1H),2.88(t,J＝7.7Hz,2H),2.71–2.64(m,2H),2.45(s,3H).

实施例17化合物17的制备

除了使用2-甲氧基苯甲酸甲酯代替3-苯基丙酸甲酯之外，以与实施例1相同的方法制备化合物17。(无色油状液体，收率92％)

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ7.52–7.40(m,2H),7.35–7.16(m,5H),7.05–6.84(m,3H),6.75–6.65(m,1H),3.83(s,3H),2.81(t,J＝7.7Hz,2H),2.59(dd,J＝14.6,7.4Hz,2H).

实施例18化合物18的制备

除了使用3-甲氧基苯甲酸甲酯代替3-苯基丙酸甲酯之外，以与实施例1相同的方法制备化合物18。(无色油状液体，收率94％)

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ7.45–7.27(m,5H),7.25–7.20(m,3H),7.07(dd,J＝14.9,7.3Hz,2H),6.85(d,J＝15.3Hz,1H),3.86(s,3H),2.85(t,J＝7.7Hz,2H),2.65(dd,J＝14.6,7.6Hz,2H).

实施例19化合物19的制备

除了使用4-甲氧基苯甲酸甲酯代替3-苯基丙酸甲酯之外，以与实施例1相同的方法制备化合物19。(无色油状液体，收率88％)

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ7.89(d,J＝8.9Hz,2H),7.34–7.13(m,5H),7.12–6.81(m,4H),3.83(s,3H),2.83(t,J＝7.6Hz,2H),2.67–2.56(m,2H).

实施例20化合物20的制备

除了使用2-氟苯甲酸甲酯代替3-苯基丙酸甲酯之外，以与实施例1相同的方法制备化合物20。(无色油状液体，收率85％)

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ7.68(t,J＝7.5Hz,1H),7.48(dd,J＝12.9,6.0Hz,1H),7.36–6.94(m,8H),6.74(d,J＝15.5Hz,1H),2.88–2.79(m,2H),2.62(dd,J＝14.6,7.6Hz,2H).

实施例21化合物21的制备

除了使用3-氟苯甲酸甲酯代替3-苯基丙酸甲酯之外，以与实施1相同的方法制备化合物21。(无色油状液体，收率89％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.64(d,J＝7.7Hz,1H),7.55(ddd,J＝9.5,2.5,1.6Hz,1H),7.42(td,J＝8.0,5.5Hz,1H),7.31(t,J＝7.4Hz,2H),7.26–7.18(m,4H),7.09(dt,J＝15.4,6.9Hz,1H),6.80(dt,J＝15.4,1.4Hz,1H),2.85(t,J＝7.6Hz,2H),2.68–2.60(m,2H).

实施例22化合物22的制备

除了使用4-氰基苯甲酸甲酯代替3-苯基丙酸甲酯之外，以与实施例1相同的方法制备化合物22。(无色油状液体，收率60％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.91(d,J＝8.4Hz,2H),7.74(d,J＝8.4Hz,2H),7.34–7.28(m,2H),7.25–7.18(m,3H),7.10(dt,J＝15.4,6.9Hz,1H),6.83–6.75(m,1H),2.86(t,J＝7.6Hz,2H),2.71–2.63(m,2H).

实施例23化合物23的制备

除了使用2-噻吩甲酸甲酯代替3-苯基丙酸甲酯之外，以与实施例1相同的方法制备化合物23。(无色油状液体，收率80％)

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ7.68(dd,J＝3.8,1.1Hz,1H),7.60(dd,J＝4.9,1.1Hz,1H),7.34–7.04(m,7H),6.77(dd,J＝15.3,1.4Hz,1H),2.82(t,J＝7.6Hz,2H),2.67–2.54(m,2H).

实施例24化合物24的制备

除了使用3-噻吩甲酸甲酯代替3-苯基丙酸甲酯之外，以与实施例1相同的方法制备化合物24。(白色固体，收率82％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.99(dd,J＝2.8,1.1Hz,1H),7.57(dd,J＝5.1,1.1Hz,1H),7.35–7.27(m,3H),7.23–7.20(m,3H),7.10(dt,J＝15.2,6.9Hz,1H),6.75(d,J＝15.4Hz,1H),2.84(t,J＝7.7Hz,2H),2.67–2.59(m,2H).

实施例25化合物25的制备

除了使用2-呋喃甲酸甲酯代替3-苯基丙酸甲酯之外，以与实施例1相同的方法制备化合物25。(无色油状液体，收率85％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.67–7.60(m,1H),7.35–7.30(m,2H),7.26–7.17(m,5H),6.83(dt,J＝15.5,1.4Hz,1H),6.58(dd,J＝3.6,1.7Hz,1H),2.90–2.84(m,2H),2.69–2.62(m,2H).

实施例26化合物26的制备

除了使用3-呋喃甲酸甲酯代替3-苯基丙酸甲酯之外，以与实施例1相同的方法制备化合物26。(无色油状液体，收率80％)

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ7.61(s,1H),7.36–7.11(m,8H),6.80(d,J＝15.5Hz,1H),6.54(s,1H),2.84(t,J＝7.6Hz,2H),2.63(dd,J＝14.8,6.9Hz,2H).

实施例27化合物27的制备

除了使用2-吡啶甲酸甲酯代替3-苯基丙酸甲酯之外，以与实施例1相同的方法制备化合物27。(褐色油状液体，收率70％)

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ8.70(ddd,J＝4.8,1.7,0.9Hz,1H),8.17–8.07(m,1H),7.85(td,J＝7.7,1.7Hz,1H),7.64(dt,J＝15.7,1.5Hz,1H),7.46(ddd,J＝7.5,4.8,1.2Hz,1H),7.36–7.15(m,6H),2.94–2.81(m,2H),2.73–2.61(m,2H).

实施例28化合物28的制备

除了使用3-吡啶甲酸甲酯代替3-苯基丙酸甲酯之外，以与实施例1相同的方法制备化合物28。(褐色油状液体，收率75％)

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ8.77(d,J＝5.9Hz,2H),7.61(d,J＝5.9Hz,2H),7.34–7.29(m,2H),7.25–7.19(m,3H),7.16–7.03(m,1H),6.75(d,J＝15.5Hz,1H),2.86(t,J＝7.6Hz,2H),2.67(dd,J＝14.7,7.1Hz,2H).

实施例29化合物29的制备

除了使用4-吡啶甲酸甲酯代替3-苯基丙酸甲酯之外，以与实施例1相同的方法制备化合物29。(褐色油状液体，收率78％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.10–9.03(m,1H),8.77(dd,J＝4.8,1.7Hz,1H),8.19–8.14(m,1H),7.43(ddd,J＝7.9,4.8,0.9Hz,1H),7.31(d,J＝7.0Hz,2H),7.25–7.20(m,3H),7.13(dt,J＝15.4,6.9Hz,1H),6.83(dt,J＝15.4,1.5Hz,1H),2.87(t,J＝7.6Hz,2H),2.73–2.63(m,2H).

实施例30化合物30的制备

除了使用6-吲哚甲酸甲酯代替3-苯基丙酸甲酯之外，以与实施例1相同的方法制备化合物30。(无色油状液体，收率60％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.80(s,1H),8.08(s,1H),7.76–7.66(m,2H),7.42(t,J＝2.8Hz,1H),7.38–7.31(m,2H),7.28–7.22(m,3H),7.17–7.08(m,1H),7.02(d,J＝15.4Hz,1H),6.62(d,J＝2.2Hz,1H),2.92–2.83(m,2H),2.67(dd,J＝15.0,7.1Hz,2H).

实施例31化合物31的制备

除了使用2-苯基苯甲酸甲酯代替3-苯基丙酸甲酯之外，以与实施例1相同的方法制备化合物31。(无色油状液体，收率60％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.49-7.53(m,2H),7.42(d,J＝7.4Hz,2H),7.37–7.24(m,8H),7.04(d,J＝6.9Hz,2H),6.58(dt,J＝15.7,6.8Hz,1H),5.96(d,J＝15.7Hz,1H),2.49–2.41(m,2H),2.30–2.22(m,2H).

实施例32化合物32的制备

除了使用3-苯基苯甲酸甲酯代替3-苯基丙酸甲酯之外，以与实施例1相同的方法制备化合物32。(无色油状液体，收率80％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.09(s,1H),7.83(d,J＝7.7Hz,1H),7.76(d,J＝8.0Hz,1H),7.60(d,J＝7.3Hz,2H),7.49–7.37(m,3H),7.37(t,J＝7.3Hz,1H),7.33–7.26(m,2H),7.24–7.16(m,3H),7.11(dt,J＝15.3,6.8Hz,1H),6.89(d,J＝15.4Hz,1H),2.85(t,J＝7.6Hz,2H),2.69–2.61(m,2H).

实施例33化合物33的制备

除了使用4-苯基苯甲酸甲酯代替3-苯基丙酸甲酯之外，以与实施例1相同的方法制备化合物33。(白色固体，收率81％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.96(d,J＝8.4Hz,2H),7.68(d,J＝8.4Hz,2H),7.63(d,J＝7.2Hz,2H),7.47(t,J＝7.4Hz,2H),7.40(t,J＝7.3Hz,1H),7.35–7.28(m,2H),7.25–7.20(m,3H),7.12(dt,J＝15.3,6.8Hz,1H),6.91(d,J＝15.4Hz,1H),2.87(t,J＝7.7Hz,2H),2.71–2.62(m,2H).

实施例34化合物34的制备

除了使用1-萘甲酸甲酯代替3-苯基丙酸甲酯之外，以与实施例1相同的方法制备化合物34。(无色油状液体，收率82％)

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ8.21(d,J＝9.4Hz,1H),7.92(d,J＝8.2Hz,1H),7.89–7.79(m,1H),7.57–7.42(m,4H),7.28(t,J＝7.1Hz,2H),7.16(t,J＝8.9Hz,3H),6.91–6.76(m,1H),6.62(d,J＝15.7Hz,1H),2.83–2.74(m,2H),2.58(dd,J＝14.8,6.9Hz,2H).

实施例35化合物35的制备

除了使用2-萘甲酸甲酯代替3-苯基丙酸甲酯之外，以与实施例1相同的方法制备化合物35。(无色油状液体，收率84％)

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ8.34(s,1H),8.02–7.79(m,4H),7.61–7.47(m,2H),7.29(d,J＝6.9Hz,2H),7.24–7.14(m,3H),7.10(t,J＝6.6Hz,1H),6.99(d,J＝15.4Hz,1H),2.86(t,J＝7.6Hz,2H),2.66(dd,J＝14.5,7.4Hz,2H).

实施例36化合物36的制备

除了使用2-苯并噻吩甲酸甲酯代替3-苯基丙酸甲酯之外，以与实施例1相同的方法制备化合物36。(无色油状液体，收率73％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.93(s,1H),7.88(d,J＝7.8Hz,2H),7.46(t,J＝7.2Hz,1H),7.40(t,J＝7.3Hz,1H),7.35–7.29(m,2H),7.25–7.14(m,4H),6.91(d,J＝15.3Hz,1H),2.88(t,J＝7.7Hz,2H),2.67(dd,J＝15.1,7.2Hz,2H).

实施例37化合物37的制备

除了使用3-甲基-2-噻吩甲酸甲酯代替3-苯基丙酸甲酯之外，以与实施例1相同的方法制备化合物37。(无色油状液体，收率82％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.40(d,J＝4.9Hz,1H),7.29(dd,J＝7.8,6.9Hz,2H),7.23–7.17(m,3H),7.07(dt,J＝15.1,6.9Hz,1H),6.96–6.93(m,1H),6.71(dt,J＝15.1,1.5Hz,1H),2.83(t,J＝7.7Hz,2H),2.65–2.57(m,2H),2.57(s,3H).

实施例38化合物38的制备

除了使用4-甲基-2-噻吩甲酸甲酯代替3-苯基丙酸甲酯之外，以与实施例1相同的方法制备化合物38。(无色油状液体，收率86％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.50(d,J＝1.1Hz,1H),7.32–7.26(m,2H),7.23–7.17(m,4H),7.11(dt,J＝15.3,6.9Hz,1H),6.75(dt,J＝15.3,1.5Hz,1H),2.87–2.78(m,2H),2.66–2.56(m,2H),2.27(d,J＝0.6Hz,3H).

实施例39化合物39的制备

除了使用5-甲基-2-噻吩甲酸甲酯代替3-苯基丙酸甲酯之外，以与实施例1相同的方法制备化合物39。(淡黄色油状液体，收率89％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.51(d,J＝3.6Hz,1H),7.33–7.26(m,2H),7.22–7.17(m,3H),7.09(dt,J＝15.3,6.9Hz,1H),6.79(dd,J＝3.8,1.0Hz,1H),6.74(dt,J＝15.3,1.5Hz,1H),2.85–2.79(m,2H),2.65–2.56(m,2H),2.52(d,J＝0.5Hz,3H).

实施例40化合物40的制备

除了使用2-甲基-3-吡唑甲酸甲酯代替3-苯基丙酸甲酯之外，以与实施例1相同的方法制备化合物40。(无色油状液体，收率71％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.48(d,J＝2.1Hz,1H),7.34–7.27(m,2H),7.24–7.18(m,3H),7.12(dt,J＝15.3,6.9Hz,1H),6.76(d,J＝2.1Hz,1H),6.68(dt,J＝15.4,1.5Hz,1H),4.19(s,3H),2.84(t,J＝7.6Hz,2H),2.68–2.57(m,2H).

实施例41化合物41的制备

除了使用4-(2-溴苯基)丁醛代替3-苯基丙醛，苯甲酸甲酯代替3-苯基丙酸甲酯之外，以与实施例1相同的方法制备化合物41。(无色油状液体，收率55％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.62–7.58(m,1H),7.38–7.34(m,1H),7.32–7.25(m,4H),7.23–7.15(m,3H),6.70(dt,J＝15.8,6.8Hz,1H),6.44(dt,J＝15.8,1.4Hz,1H),2.80(t,J＝7.7Hz,2H),2.66–2.56(m,2H).

实施例42化合物42的制备

除了使用4-(4-溴苯基)丁醛代替3-苯基丙醛，苯甲酸甲酯代替3-苯基丙酸甲酯之外，以与实施例1相同的方法制备化合物42。(黄色固体，收率77％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.91–7.85(m,2H),7.56(dd,J＝10.5,4.3Hz,1H),7.51–7.40(m,4H),7.12–6.99(m,3H),6.86(t,J＝8.4Hz,1H),2.81(t,J＝7.6Hz,2H),2.66–2.59(m,2H).

实施例43化合物43的制备

除了使用2-苯氧基乙醛代替3-苯基丙醛，苯甲酸甲酯代替3-苯基丙酸甲酯之外，以与实施例1相同的方法制备化合物43。(无色油状液体，收率72％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.03–7.96(m,2H),7.64–7.56(m,1H),7.51(dd,J＝10.7,4.3Hz,2H),7.39–7.29(m,3H),7.21(dt,J＝15.5,3.7Hz,1H),7.06–6.97(m,3H),4.84(m,2H).

实施例44化合物44的制备

除了使用2-N-苯基乙醛代替3-苯基丙醛，苯甲酸甲酯代替3-苯基丙酸甲酯之外，以与实施例1相同的方法制备化合物44。(无色油状液体，收率69％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.02–7.96(m,2H),7.59–7.52(m,1H),7.47–7.40(m,2H),7.19–7.12(m,2H),6.98–6.89(m,2H),6.80(dt,J＝15.7,5.3Hz,1H),6.58–6.53(m,2H),6.37(t,J＝5.2Hz,1H),4.31(t,J＝5.3Hz,2H).

实施例45化合物45的制备

除了使用2-N-苯基-N-甲基乙醛代替3-苯基丙醛，苯甲酸甲酯代替3-苯基丙酸甲酯之外，以与实施例1相同的方法制备化合物45。(无色油状液体，收率67％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.99(dd,J＝8.5,2.3Hz,2H),7.59–7.52(m,1H),7.43(dd,J＝8.5,7.3Hz,2H),7.26(dd,J＝8.1,6.8Hz,2H),7.00–6.95(m,2H),6.91–6.80(m,3H),4.29(d,J＝7.2Hz,2H),2.92(s,3H).

实施例46化合物46的制备

除了使用2-N,N-二苯基乙醛代替3-苯基丙醛，苯甲酸甲酯代替3-苯基丙酸甲酯之外，以与实施例1相同的方法制备化合物46。(无色油状液体，收率61％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.99(dd,J＝8.5,2.3Hz,1H),7.59–7.52(m,1H),7.46–7.39(m,1H),7.31(t,J＝7.3Hz,2H),7.18–7.13(m,1H),7.03–6.86(m,3H),4.67(d,J＝7.3Hz,1H).

实施例47化合物47的制备

除了使用2-苯硫基乙醛代替3-苯基丙醛，苯甲酸甲酯代替3-苯基丙酸甲酯之外，以与实施例1相同的方法制备化合物47。(无色油状液体，收率28％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.02–7.96(m,2H),7.58–7.53(m,1H),7.47–7.40(m,2H),7.37–7.26(m,4H),7.25–7.17(m,1H),7.00(d,J＝14.7Hz,1H),6.83(dt,J＝14.7,6.6Hz,1H),3.78(d,J＝6.5Hz,2H).

实施例48化合物48的制备

除了使用2-叔丁氧羰基氨基-3-苯基丙醛代替3-苯基丙醛，苯甲酸甲酯代替3-苯基丙酸甲酯之外，以与实施例1相同的方法制备化合物48。(白色固体，收率67％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.85(d,J＝7.5Hz,2H),7.54(t,J＝7.4Hz,1H),7.43(t,J＝7.6Hz,2H),7.33–7.15(m,7H),7.00–6.81(m,2H),4.70-4.79(m,2H),2.94(d,J＝6.1Hz,2H),1.42(s,9H).

实施例49化合物49的制备

化合物49的合成路线如下所示：

将苯乙酮11-1(233μL,2.0mmol)、苯甲醛11-2(244μL,2.4mmol)和乙醇(5mL)混合后，加入50％的KOH溶液(2.2mL)，室温反应2h，TLC监测反应完全后，停止反应，加入冰水淬灭，6M盐酸溶液中和至中性，有大量固体析出，过滤得到固体，EtOH重结晶得到产物49(黄色固体，收率92％),¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.05–7.98(m,2H),7.81(d,J＝15.7Hz,1H),7.64(dd,J＝6.2,2.6Hz,2H),7.61–7.46(m,4H),7.44–7.36(m,3H).

实施例50化合物50的制备

除了使用2-甲基苯甲醛代替苯甲醛之外，以与实施例49相同的方法制备化合物50。(黄色油状液体，收率89％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.12(d,J＝15.6Hz,1H),8.05–8.00(m,2H),7.71–7.67(m,1H),7.60–7.54(m,1H),7.52–7.41(m,3H),7.31–7.19(m,3H),2.46(s,3H).

实施例51化合物51的制备

除了使用2-羟基苯乙酮代替苯乙酮之外，以与实施例49相同的方法制备化合物51。(黄色固体，收率90％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ12.82(s,1H),7.98–7.88(m,2H),7.67(dd,J＝9.1,6.0Hz,3H),7.51(t,J＝7.6Hz,1H),7.45(d,J＝2.9Hz,3H),7.04(d,J＝8.4Hz,1H),6.95(t,J＝7.6Hz,1H).

实施例52化合物52的制备

除了使用2-甲氧基苯甲醛代替苯甲醛之外，以与实施例49相同的方法制备化合物52。(黄色固体，收率83％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.13(d,J＝15.9Hz,1H),8.02(d,J＝7.1Hz,2H),7.67–7.55(m,3H),7.50(t,J＝7.4Hz,2H),7.43–7.34(m,1H),7.00(t,J＝7.4Hz,1H),6.95(d,J＝8.3Hz,1H),3.91(d,J＝9.8Hz,3H).

实施例53化合物53的制备

除了使用3,5-二甲氧基苯甲醛代替苯甲醛之外，以与实施例49相同的方法制备化合物53。(黄色油状液体，收率86％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.01(d,J＝7.1Hz,2H),7.72(d,J＝15.7Hz,1H),7.62–7.56(m,1H),7.54–7.45(m,3H),6.78(d,J＝2.2Hz,2H),6.53(t,J＝2.2Hz,1H),3.83(s,6H).

实施例54化合物54的制备

除了使用3-甲氧基苯甲醛代替苯甲醛之外，以与实施例49相同的方法制备化合物54。(黄色固体，收率98％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.01(m,2H),7.76(d,J＝15.7Hz,1H),7.64-7.54(m,1H),7.54-7.43(m,3H),7.36-7.31(m,1H),7.24(m,1H),7.15(m,1H),7.03-6.91(m,1H),3.84(d,J＝0.8Hz,3H).

实施例55化合物55的制备

除了使用4-甲氧基苯甲醛代替苯甲醛之外，以与实施例49相同的方法制备化合物55。(黄色固体，收率90％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.01(d,J＝7.2Hz,2H),7.79(d,J＝15.7Hz,1H),7.56-7.62(m,3H),7.50(t,J＝7.4Hz,2H),7.42(d,J＝15.6Hz,1H),6.94(d,J＝8.7Hz,2H),3.86(s,3H).

实施例56化合物56的制备

除了使用2-三氟甲基苯甲醛代替苯甲醛之外，以与实施例49相同的方法制备化合物56。(淡黄色固体，收率88％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.14(dd,J＝15.6,2.1Hz,1H),8.01(d,J＝7.2Hz,2H),7.83(d,J＝7.8Hz,1H),7.73(d,J＝7.8Hz,1H),7.60(td,J＝7.1,1.4Hz,2H),7.53-7.49(m,3H),7.43(d,J＝15.6Hz,1H).

实施例57化合物57的制备

除了使用3-三氟甲基苯甲醛代替苯甲醛之外，以与实施例49相同的方法制备化合物57。(淡黄色固体，收率86％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.04(d,J＝7.1Hz,2H),7.90(s,1H),7.86–7.78(m,2H),7.67(d,J＝8.1Hz,1H),7.65–7.51(m,5H).

实施例58化合物58的制备

除了使用4-三氟甲基苯甲醛代替苯甲醛之外，以与实施例49相同的方法制备化合物58。(淡黄色固体，收率88％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.06–8.01(m,2H),7.81(d,J＝15.8Hz,1H),7.74(d,J＝8.3Hz,2H),7.67(d,J＝8.3Hz,2H),7.64–7.57(m,2H),7.51(dd,J＝13.8,6.6Hz,2H).

实施例59化合物59的制备

除了使用2-噻吩甲醛代替苯甲醛之外，以与实施例49相同的方法制备化合物59。(淡黄色固体，收率89％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.00(d,J＝8.0Hz,2H),7.94(d,J＝15.3Hz,1H),7.62–7.55(m,1H),7.54–7.47(m,2H),7.45–7.41(m,1H),7.39–7.30(m,2H),7.09(ddd,J＝5.0,3.0,1.1Hz,1H).

实施例60化合物60的制备

除了使用3-噻吩甲醛代替苯甲醛之外，以与实施例49相同的方法制备化合物60。(棕色固体，收率98％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.05–8.00(m,2H),7.83(d,J＝15.6Hz,1H),7.66–7.58(m,2H),7.53(t,J＝7.4Hz,2H),7.45(dd,J＝5.1,0.9Hz,1H),7.41(d,J＝2.9Hz,1H),7.37(d,J＝15.7Hz,1H).

实施例61化合物61的制备

除了使用2-吡啶甲醛代替苯甲醛之外，以与实施例49相同的方法制备化合物61。(白色固体，收率88％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.72(d,J＝4.0Hz,1H),8.19–8.10(m,3H),7.84–7.75(m,2H),7.66–7.59(m,1H),7.56–7.49(m,3H),7.33(ddd,J＝7.6,4.8,1.1Hz,1H).

实施例62化合物62的制备

除了使用3-吡啶甲醛代替苯甲醛之外，以与实施例49相同的方法制备化合物62。(白色固体，收率61％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.89(d,J＝2.0Hz,1H),8.66(dd,J＝4.8,1.3Hz,1H),8.05(d,J＝7.2Hz,2H),7.98(d,J＝8.0Hz,1H),7.82(d,J＝15.8Hz,1H),7.67–7.60(m,2H),7.55(t,J＝7.6Hz,2H),7.39(dd,J＝7.9,4.8Hz,1H).

实施例63化合物63的制备

除了使用4-吡啶甲醛代替3-苯基丙醛，苯甲酸甲酯代替3-苯基丙酸甲酯之外，以与实施例1相同的方法制备化合物63。(白色固体，收率86％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.69(d,J＝6.0Hz,2H),8.03(d,J＝7.1Hz,2H),7.69(d,J＝1.9Hz,2H),7.67–7.61(m,1H),7.53(t,J＝7.5Hz,2H),7.48(d,J＝6.1Hz,2H).

实施例64化合物64的制备

除了使用3-苯基苯甲醛代替3-苯基丙醛，苯甲酸甲酯代替3-苯基丙酸甲酯之外，以与实施例1相同的方法制备化合物64。(白色固体，收率92％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.07(d,J＝7.1Hz,2H),7.94–7.85(m,2H),7.69–7.60(m,6H),7.58–7.48(m,5H),7.42(t,J＝7.4Hz,1H).

实施例65化合物65的制备

除了使用1-萘甲醛代替苯甲醛之外，以与实施例49相同的方法制备化合物65。(淡黄色固体，收率55％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.68(d,J＝15.4Hz,1H),8.26(d,J＝8.3Hz,1H),8.09(d,J＝7.1Hz,2H),7.91(dd,J＝14.5,7.2Hz,3H),7.67–7.50(m,7H).

实施例66化合物66的制备

除了使用2-萘甲醛代替苯甲醛之外，以与实施例49相同的方法制备化合物66。(黄色固体，收率61％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.12–8.03(m,3H),7.99(d,J＝15.7Hz,1H),7.93–7.78(m,4H),7.66(d,J＝15.7Hz,1H),7.61(t,J＝7.4Hz,1H),7.57–7.48(m,4H).

实施例67化合物67的制备

除了使用2-苯并呋喃甲醛代替苯甲醛之外，以与实施例49相同的方法制备化合物67。(黄色固体，收率57％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.12–8.07(m,2H),7.73(d,J＝1.0Hz,2H),7.61(dd,J＝7.5,5.9Hz,2H),7.56–7.49(m,3H),7.43–7.37(m,1H),7.27(dd,J＝11.0,4.0Hz,1H),7.05(d,J＝0.7Hz,1H).

实施例68化合物68的制备

除了使用2-吲哚甲醛代替苯甲醛之外，以与实施例49相同的方法制备化合物68。(棕褐色固体，收率49％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.47(s,1H),8.06(d,J＝7.1Hz,2H),7.87(d,J＝15.6Hz,1H),7.64(dd,J＝21.4,7.6Hz,2H),7.54(t,J＝7.4Hz,2H),7.45–7.29(m,3H),7.16(t,J＝7.6Hz,1H),6.99(s,1H).

实施例69化合物69的制备

除了使用3-三氟甲基苯甲醛代替3-苯基丙醛，2-噻吩甲酸甲酯代替3-苯基丙酸甲酯之外，以与实施例1相同的方法制备化合物69。(白色固体，收率88％)

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ7.92–7.82(m,3H),7.80(d,J＝7.7Hz,1H),7.72(dd,J＝4.9,1.1Hz,1H),7.67(d,J＝7.8Hz,1H),7.56(t,J＝7.7Hz,1H),7.47(d,J＝15.6Hz,1H),7.21(dd,J＝4.9,3.8Hz,1H).

实施例70化合物70的制备

除了使用3-三氟甲基苯甲醛代替苯甲醛，3-噻吩乙酮代替苯乙酮之外，以与实施例49相同的方法制备化合物70。(白色固体，收率73％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.21(dd,J＝2.9,1.2Hz,1H),7.88(s,1H),7.80(t,J＝11.6Hz,2H),7.71–7.63(m,2H),7.55(t,J＝7.8Hz,1H),7.46(d,J＝15.7Hz,1H),7.39(dd,J＝5.1,2.9Hz,1H).

实施例71化合物71的制备

除了使用3-三氟甲基苯甲醛代替3-苯基丙醛，2-呋喃甲酸甲酯代替3-苯基丙酸甲酯之外，以与实施例1相同的方法制备化合物71。(白色固体，收率82％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.88(d,J＝15.3Hz,2H),7.81(d,J＝7.6Hz,1H),7.67(d,J＝12.5Hz,2H),7.54(dd,J＝20.7,11.8Hz,2H),7.38(d,J＝3.1Hz,1H),6.63(s,1H).

实施例72化合物72的制备

除了使用3-三氟甲基苯甲醛代替3-苯基丙醛，3-呋喃甲酸甲酯代替3-苯基丙酸甲酯之外，以与实施例1相同的方法制备化合物72。(白色固体，收率87％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.20(s,1H),7.86–7.77(m,3H),7.66(d,J＝7.6Hz,1H),7.54(dd,J＝16.0,8.2Hz,2H),7.28–7.18(m,1H),6.92(s,1H).

实施例73化合物73的制备

除了使用3-三氟甲基苯甲醛代替3-苯基丙醛，2-吡啶甲酸甲酯代替3-苯基丙酸甲酯之外，以与实施例1相同的方法制备化合物73。(白色固体，收率56％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.77(d,J＝4.5Hz,1H),8.37(d,J＝16.1Hz,1H),8.21(d,J＝7.8Hz,1H),8.01–7.86(m,4H),7.66(d,J＝7.7Hz,1H),7.60–7.49(m,2H).

实施例74化合物74的制备

除了使用3-三氟甲基苯甲醛代替3-苯基丙醛，3-吡啶甲酸甲酯代替3-苯基丙酸甲酯之外，以与实施例1相同的方法制备化合物74。(白色固体，收率55％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.77(d,J＝4.1Hz,1H),8.37(d,J＝16.1Hz,1H),8.21(d,J＝7.8Hz,1H),8.00–7.85(m,4H),7.66(d,J＝7.7Hz,1H),7.62–7.48(m,2H).

实施例75化合物75的制备

除了使用3-三氟甲基苯甲醛代替3-苯基丙醛，4-吡啶甲酸甲酯代替3-苯基丙酸甲酯之外，以与实施例1相同的方法制备化合物75。(白色固体，收率63％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.87(d,J＝5.8Hz,2H),7.96–7.75(m,5H),7.71(d,J＝7.8Hz,1H),7.59(t,J＝7.7Hz,1H),7.50(d,J＝15.8Hz,1H).

实施例76化合物76的制备

除了使用3-三氟甲基苯甲醛代替3-苯基丙醛，3-甲基-2-噻吩甲酸甲酯代替3-苯基丙酸甲酯之外，以与实施例1相同的方法制备化合物76。(白色固体，收率90％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.85(s,1H),7.82–7.76(m,2H),7.65(d,J＝7.8Hz,1H),7.55(t,J＝7.8Hz,1H),7.50(d,J＝4.9Hz,1H),7.38(d,J＝15.5Hz,1H),7.02(d,J＝4.9Hz,1H),2.66(s,3H).

实施例77化合物77的制备

除了使用3-三氟甲基苯甲醛代替3-苯基丙醛，4-甲基-2-噻吩甲酸甲酯代替3-苯基丙酸甲酯之外，以与实施例1相同的方法制备化合物77。(白色固体，收率80％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.88(s,1H),7.83(d,J＝15.7Hz,1H),7.79(d,J＝7.8Hz,1H),7.71(d,J＝1.2Hz,1H),7.66(d,J＝7.8Hz,1H),7.55(t,J＝7.8Hz,1H),7.44(d,J＝15.6Hz,1H),7.33–7.29(m,1H),2.34(d,J＝0.6Hz,3H).

实施例78化合物78的制备

除了使用3-三氟甲基苯甲醛代替3-苯基丙醛，1-甲基-1H-吡唑-5-甲酸甲酯代替3-苯基丙酸甲酯之外，以与实施例1相同的方法制备化合物78。(白色固体，收率55％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.90–7.77(m,3H),7.68(d,J＝7.8Hz,1H),7.60–7.52(m,2H),7.36(d,J＝15.7Hz,1H),6.99(d,J＝2.1Hz,1H),4.25(s,3H).实施例79化合物79的制备

除了使用3,5-二三氟甲基苯甲醛代替3-苯基丙醛，2-噻吩甲酸甲酯代替3-苯基丙酸甲酯之外，以与实施例1相同的方法制备化合物79。(淡黄色固体，收率62％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.05(s,2H),7.93(dd,J＝3.8,1.0Hz,1H),7.91(s,1H),7.87(d,J＝15.7Hz,1H),7.76(dd,J＝4.9,1.0Hz,1H),7.52(d,J＝15.6Hz,1H),7.23(dd,J＝4.9,3.9Hz,1H).

实施例80化合物80的制备

除了使用6-三氟甲基吡啶-2-甲醛代替3-苯基丙醛，2-噻吩甲酸甲酯代替3-苯基丙酸甲酯之外，以与实施例1相同的方法制备化合物80。(淡黄色固体，收率76％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.07(d,J＝15.1Hz,1H),8.00–7.91(m,2H),7.82(d,J＝15.2Hz,1H),7.74(d,J＝4.9Hz,1H),7.67(dd,J＝12.7,7.8Hz,2H),7.23(t,J＝4.1Hz,1H).

实施例81化合物81的制备

除了使用6-溴吡啶-2-甲醛代替3-苯基丙醛，2-噻吩甲酸甲酯代替3-苯基丙酸甲酯之外，以与实施例1相同的方法制备化合物81。(白色固体，收率73％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.03–7.96(m,2H),7.73(d,J＝4.9Hz,1H),7.69(d,J＝15.1Hz,1H),7.60(t,J＝7.7Hz,1H),7.48(d,J＝7.9Hz,1H),7.41(d,J＝7.4Hz,1H),7.21(t,J＝4.3Hz,1H).

实施例82化合物82的制备

除了使用6-氟吡啶-2-甲醛代替3-苯基丙醛，2-噻吩甲酸甲酯代替3-苯基丙酸甲酯之外，以与实施例1相同的方法制备化合物82。(淡黄色固体，收率81％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.97–7.90(m,2H),7.82(q,J＝7.8Hz,1H),7.72–7.65(m,2H),7.31(d,J＝7.2Hz,1H),7.17(t,J＝4.3Hz,1H),6.93(dd,J＝8.2,2.6Hz,1H).

实施例83化合物83的制备

除了使用喹啉-2-甲醛代替3-苯基丙醛，2-噻吩甲酸甲酯代替3-苯基丙酸甲酯之外，以与实施例1相同的方法制备化合物83。(白色固体，收率70％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.23(d,J＝8.4Hz,1H),8.16(d,J＝8.5Hz,1H),8.09(d,J＝15.4Hz,1H),8.04-7.97(m,2H),7.84(d,J＝8.2Hz,1H),7.81-7.72(m,2H),7.67(d,J＝8.4Hz,1H),7.59(t,J＝7.5Hz,1H),7.23(t,J＝4.4Hz,1H).

实施例84化合物84的制备

除了使用(6-甲酰基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯代替3-苯基丙醛，2-噻吩甲酸甲酯代替3-苯基丙酸甲酯之外，以与实施例1相同的方法制备化合物84。(白色固体，收率42％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.98(d,J＝8.4Hz,1H),7.91(d,J＝2.9Hz,1H),7.88(d,J＝15.1Hz,1H),7.75–7.65(m,3H),7.45(s,1H),7.21–7.17(m,1H),7.14(d,J＝7.3Hz,1H),1.54(s,9H).

实施例85化合物85的制备

除了使用N-甲基-(6-甲酰基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯代替3-苯基丙醛，2-噻吩甲酸甲酯代替3-苯基丙酸甲酯之外，以与实施例1相同的方法制备化合物85。(白色固体，收率55％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.96-7.86(m,2H),7.79–7.68(m,3H),7.68–7.62(m,1H),7.22–7.11(m,2H),3.50(s,3H),1.54(s,9H).

实施例86化合物86的制备

除了使用N-甲基-(6-甲酰基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯代替3-苯基丙醛，2-噻吩甲酸甲酯代替3-苯基丙酸甲酯之外，以与实施例1相同的方法制备化合物86。(黄色固体，收率59％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.94–7.85(m,2H),7.73-7.64(m,2H),7.54(t,J＝7.8Hz,1H),7.21(t,J＝4.3Hz,1H),6.85(d,J＝7.2Hz,1H),6.72(d,J＝8.6Hz,1H),3.67-3.57(m,8H),1.50(s,9H).

实施例87化合物87的制备

化合物87的合成路线如下所示：

步骤：

将化合物84(100mg,0.30mmol)溶于二氯甲烷10mL后，加入三氟乙酸2.0mL。室温反应4h，TLC监测反应完全后，停止反应，旋去大部分溶剂，加水5mL稀释，饱和的碳酸氢钠溶液中和至中性，有黄色固体析出，过滤得到固体，二氯甲烷重结晶得到产物87(黄色固体，收率83％),¹H NMR(400MHz,DMSO)δ8.27(d,J＝3.4Hz,1H),8.16(d,J＝4.9Hz,1H),8.09(d,J＝15.4Hz,1H),7.89(t,J＝7.6Hz,1H),7.56(d,J＝15.7Hz,1H),7.40(d,J＝7.2Hz,1H),7.36(t,J＝4.0Hz,1H),6.94(d,J＝8.7Hz,1H).

实施例88化合物88的制备

除了使用化合物85代替化合物84之外，以与实施例87相同的方法制备化合物88。(黄色固体，收率85％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.57(d,J＝15.9Hz,1H),8.46(d,J＝3.8Hz,1H),7.87–7.81(m,1H),7.79(d,J＝4.9Hz,1H),7.43(d,J＝16.0Hz,1H),7.25(t,J＝4.3Hz,1H),6.82(dd,J＝14.2,8.2Hz,2H),3.07(s,3H).

(二)生物活性检测实施例

检验实施例1：化合物对GPR52的阻断作用实验

将稳定表达GPR52的HEK293细胞株用胰酶消化后离心，用不含血清的DMEM培养液重悬，加入3-异丁基-1-甲基黄嘌呤(IBMX，sigma，STBC7632V)(终浓度为0.5μmol/L)，按2×10³个细胞/孔/5μL细胞密度接种至384孔板；然后加入含有100μM的化合物23或43的5μL无血清DMEM培养液，混合均匀，室温孵育30min；再用相应配体(WO-459(按照专利EP2518054A1方法制备)(100nM))刺激30min，最后分别加入稀释好的5μL cAMP-d2和5μLanti-cAMP-Cryptate，离心混合均匀，室温避光反应1h；最后在Envision2101多功能微孔板酶标仪读数，检测细胞内cAMP浓度。

本发明制备实施例制备的化合物对GPR52受体介导的cAMP反应的抑制作用见表1：

表1.化合物对GPR52受体介导的cAMP反应的抑制作用

实验结论：由表1可知，在生物活性评价中，本发明实施例的不饱和酮类化合物对GPR52均具有较好的抑制活性，其中有60个化合物的IC₅₀低于阳性化合物E7(E7的结构如图1所示，E7作为GPR52拮抗剂已申请专利，专利申请号：2017109088083)，有17个化合物的IC₅₀低于1.0μM，体现出不饱和酮类化合物具有很好的GPR52抑制活性。

检验实施例2：化合物GPR52的阻断作用及受体选择性分析

将稳定表达各种G蛋白偶联受体(包括GPR52，β2AR和GCGR)和HEK293细胞株用胰酶消化后离心，用不含血清培液重悬，加入IBMX(终浓度为0.5mmol/L)，按2×10³个细胞/孔/5μL细胞密度接种至384孔板；然后加入含有不同浓度化合物23或43的5μL无血清培液，混合均匀，室温孵育30min；再用相应配体(WO-459(100nM)，Isoproterenol(异丙(去甲)肾上腺素)(SIGMA，I6504)(100nM)，Glucagon(胰高血糖素)(SIGMA，G2044)(0.3nM))作为激动剂进行刺激30min，最后分别加入稀释好的5μL cAMP-d2和5μLanti-cAMP-Cryptate，离心混合均匀，室温避光反应1h；最后在Envision2101多功能微孔板酶标仪读数，检测细胞内cAMP浓度。

实验结论：如图2所示，代表性化合物23和43可以剂量依赖性地抑制GPR52的活性，而对β2AR和GCGR均无抑制活性，化合物23和43对GPR52受体表现出很好的选择性。

检验实施例3：GPR52的拮抗剂对亨廷顿模型中变异HTT蛋白水平的作用

在小鼠纹状体细胞系STHdh^Q7/^Q111中，加入含有不同浓度的化合物23和43，继续培养48小时。之后收集细胞，用含有1％Triton-X 100的缓冲液4℃裂解1小时，并超声处理10s以充***解。20,000g离心10分钟收集上清，即为可溶的Htt蛋白。

接下来，一方面通过蛋白质免疫印记实验(WB)检测可溶的Htt蛋白水平。首先，不同处理组间总蛋白量通过BCA方法进行测定，之后，相同总蛋白量样品在3％-8％的聚丙烯酰胺凝胶中进行变性电泳(SDS-PAGE)，之后通过干转将蛋白样品转印到醋酸纤维素膜(NC)上。后续将NC膜和Htt抗体4℃孵育过夜，并和偶联辣根过氧化物酶(HRP)的相应种属二抗孵育，之后进行显影检测。

另一方面通过实时荧光共振能量转移(Time resolved-fluorescence resonanceenergy transfer,TR-FRET)检测了化合物处理后细胞中的mHtt水平。首先，不同处理组间总蛋白量通过BCA方法进行测定。之后，向6μL相同总蛋白量样品中加入稀释好的4μL anti-mHtt-MW1-d2(1.4ng/ml)和anti-Htt-2E6-Terbium cryptate(0.023ng/ml)抗体混合物，混合均匀，4℃避光反应过夜，最后在Envision多功能微孔板酶标仪中读数，665nm和615nm读数比值即反应细胞内mHtt水平。

实验结论：如图3所示，代表性化合物23和43可以剂量依赖性地降低细胞中mHtt水平。