金针菇菌种保藏培养基、金针菇培养料及其应用
阅读说明：本技术 金针菇菌种保藏培养基、金针菇培养料及其应用 (Needle mushroom strain preservation culture medium, needle mushroom culture material and application thereof ) 是由 孙瑞祥 王磊 杨树德 程显好 王璐 高可 唐琦 刘瑞辰 于 2020-06-17 设计创作，主要内容包括：本发明提供一种用于金针菇菌种保藏培养基,包含金针菇根组织液和基础培养基；所述金针菇根组织液是通过包括下述步骤的方法制备得到的：除去金针菇根基部的培养料,将金针菇根部榨汁。本发明还提供了金针菇菌种的保藏的方法。本发明的另一方面还提供了金针菇培养料及用其培养金针菇的方法。本发明通过将金针菇根组织液加入培养基中,使菌种继代时间明显延长,延长了菌种的使用期限。(The invention provides a culture medium for preserving flammulina velutipes strains, which comprises flammulina velutipes root tissue fluid and a basic culture medium; the needle mushroom root tissue fluid is prepared by the method comprising the following steps: removing culture medium from needle mushroom root, and squeezing. The invention also provides a method for preserving the flammulina velutipes strains. The invention also provides a needle mushroom culture material and a method for culturing needle mushrooms by using the needle mushroom culture material. According to the invention, the needle mushroom root tissue fluid is added into the culture medium, so that the subculture time of the strain is obviously prolonged, and the service life of the strain is prolonged.)
技术领域
本发明属于食用菌菌种保藏、食用菌生产及加工领域，具体地说涉及将金针菇菌种保藏以及金针菇生产的方法。
背景技术
近年来工厂化金针菇生产发展迅猛，金针菇生产企业快速崛起，行业整体态势较好。然而，菌种来源及保藏成为限制国内金针菇企业发展的重要因素。目前我国金针菇企业菌种来源主要靠国外引种，引种费用昂贵，每次引种可用3到4个月；然而，金针菇菌种易退化、在保藏过程中易产生粉孢子，会影响菌种正常使用，降低菌种出菇能力。因此，培育新品种、延长菌种保存时间，是企业迫切解决的问题。
发明内容
针对上述需要，本发明的目的是提供一种培养基能够抑制金针菇粉孢子形成、延长金针菇菌种保存时间，而本发明提供的金针菇培养料能够显著促进子实体长势。
本发明提供的技术方案如下：
一种用于金针菇菌种保藏培养基，包含金针菇根组织液和基础培养基；
所述金针菇根组织液是通过包括下述步骤的方法制备得到的：
除去金针菇根基部的培养料，将金针菇根部榨汁。
该金针菇菌种保藏培养基能够抑制金针菇粉孢子形成、延长金针菇菌种保存时间。
在根据本发明的一个实施方案中，以mL：g计，所述金针菇根组织液与基础培养基的比例为1：3-5。
在根据本发明的一个实施方案中，所述基础培养基为马铃薯葡萄糖琼脂培养基。
本发明还提供了上述金针菇菌种保藏培养基在金针菇菌种保藏中的应用，包括：将配制好的金针菇菌种保藏培养基灭菌，然后在灭菌并冷却后的金针菇菌种保藏培养基上接种金针菇菌种。
进一步地，接种金针菇菌种的方法为用接种钩转接菌种块。
本发明的再一个方面提供了一种用于生产金针菇的培养料，包含固体料、水和金针菇根组织液；
其中，所述固体料由棉籽壳、麸皮和石膏组成；
以g:ml计，所述固体料与水的比例为1：1-1.5；
所述金针菇根组织液与水的体积比为1：9-10。
在根据本发明的一个实施方案中，所述固体料中棉籽壳、麸皮和石膏的质量比为35-45：8-10：1。
进一步还提供了上述金针菇培养料的制备方法，包括：
1)称取适量的固体料，并将各原料充分搅拌混匀；
2)将适量水与适量金针菇根组织液混匀，得到混合液；
3)将混合液与固体料混合均匀，分装至菌瓶中灭菌，即得。
本发明的另一个方面提供了一种金针菇的培养方法，包括：
1)将适量金针菇菌种接种于如权利要求6或7所述的金针菇培养料的菌瓶中，置于18℃黑暗环境中培养；
2)菌丝满瓶后，搔掉菌瓶表面料面后，向菌瓶中注入灭菌后的含有金针菇根组织液的混合液；
3)将完成步骤2)后的菌瓶置于16℃，空气相对湿度87％的环境中，直到菌瓶料面形成原基；
4)待原基长至3-4cm左右时，将温度降至10-16℃，湿度调至90％，直至采收；
其中，所述含有金针菇根组织液的混合液由金针菇根组织液和水混合形成，所述金针菇根组织液与水的比例为1：9-10。
进一步地，以ml:g计，所述混合液与菌瓶比例为1：40-60；优选为1：50。
本发明的金针菇菌种保藏培养基可以延长金针菇菌丝在平皿中的生长时间，使菌丝洁白粗壮；使金针菇菌种继代时间明显延长，延长了菌种的使用期限。
而本发明提供的金针菇生产培养料可使菌丝更加浓密；可促进子实体的长势。本发明通过利用金针菇根组织液使金针菇菌种保藏时间得到延长，同时也促进了菇体长势。本发明的方法应用简便、原材料易得；与其他添加剂相比，金针菇根组织液应用过程绿色、安全，符合绿色产品的生产规程；在菇根利用的基础上促进了子实体的长势；将金针菇根组织液在拌料、注水时加入，可减少水资源的消耗；金针菇菇根提取组织液后可加快剩余部分烘干速度，与正常烘干相比减少电耗。
附图说明
图1为接种后第20天产生粉孢子情况；其中，在a、b、c基础培养基中加入的金针菇根组织液的比例分别为0％、10％、20％；
图2为对20天菌龄菌种进行转接，第六天生长状况；其中，在a、b、c基础培养基中加入的金针菇根组织液的比例分别为0％、10％、20％。
图3为金针菇搔菌后12天子实体生长状况，其中在a、b培养料中金针菇根组织液添加比例分别为0％、10％。
具体实施方式
以下实施例用于说明本申请，但不用来限制本申请的范围。
下面将更详细地描述本申请的具体实施例。提供这些实施例是为了能够更透彻地理解本申请，并且能够将本申请的范围完整的传达给本领域的技术人员。
如在通篇说明书及权利要求当中所提及的“包含”或“包括”为一开放式用语，故应解释成“包含但不限定于”。说明书后续描述为实施本申请的较佳实施方式，然所述描述乃以说明书的一般原则为目的，并非用以限定本申请的范围。本申请的保护范围当视所附权利要求所界定者为准。
如无特殊说明，本发明中所用到的试剂均可以商购途径购买得到。
实施例1金针菇菌种保藏
称取马铃薯葡萄糖琼脂培养基10g，将金针菇根组织液按0％、10％、20％比例添加到三角瓶中，定容至250ml，用封口膜封口后于121℃下灭菌25分钟。
待培养基冷却至40℃左右时，将其倒入灭菌后的平板中，每个平板20ml。用直径5mm的打孔器将长满菌丝的平板在同一直径上打孔，用接种针将菌种块转接到平板中央，观察菌丝长速和长势及粉孢子产生情况。
图1所示为接种后第20天产生粉孢子情况；其中，在a、b、c基础培养基中加入的金针菇根组织液的比例分别为0％、10％、20％；菌丝生长状况如表1所示：
表1菌丝生长状况
注：“+”表示菌丝浓密程度，“++”表示菌丝较密，“+++”表示菌丝密集，“++++”表示菌丝浓密。
从表1可以看出，随着金针菇根组织液添加比例的升高，菌丝更加洁白浓密，菌丝鲜重有所增加，菌丝长速略有下降，菌丝的分支密度提高，粉孢子产生面积比例明显减小、粉孢子出现时间明显延长。
图2为对20天菌龄菌种进行转接，第六天生长状况；其中，在a、b、c基础培养基中加入的金针菇根组织液的比例分别为0％、10％、20％。菌丝生长状况如表2所示：
表2菌丝生长状况
注：“+”表示菌丝浓密程度，“++”表示菌丝较密，“+++”表示菌丝密集，“++++”表示菌丝浓密。
从表2可以看出，随着金针菇根组织液添加比例的升高，菌丝变得洁白浓密，长速略有加快，增强了菌种的长势与活力。
实施例2金针菇的培养：
称取棉籽壳8kg,麸皮1.8kg，石膏0.2kg，将各原料充分搅拌混匀，按料水比1：1.2将水称出，把金针菇根组织液按10％比例加入水中充分混匀，将水加入料中，边加入边搅拌，充分搅拌后，将原料装入1200ml规格的菌瓶中，每瓶装料0.9kg。在121℃下，灭菌2.5h。
菌瓶冷却至室温后，接入金针菇液体种。置于18℃黑暗环境中培养。
菌丝满瓶后，搔掉菌袋表层料面，将灭菌后金针菇根组织液按10％比例加入水中充分混匀后，向菌袋中注入20ml。
搔菌后将菌瓶置于16℃，空气相对湿度87％的环境中，待6-7天后菌瓶料面形成原基。待原基长至3-4cm左右时，将温度降至14℃左右，湿度调至90％，直至采收。图3为金针菇搔菌后12天子实体生长状况，其中在a、b培养料中金针菇根组织液添加比例分别为0％、10％。如图3所示，添加了金针菇根组织液后子实体长势更好，菌丝更加浓密。
应注意的是，以上实例仅用于说明本发明的技术方案而非对其进行限制。尽管参照所给出的实例对本发明进行了详细说明，但是本领域的普通技术人员可根据需要对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的精神和范围。