阅读说明：本技术 一种磷丙替诺福韦杂质的制备方法 (Preparation method of fosaprevir impurity ) 是由 冉艳 蒲通 陈恬 王乃星 李建学 朱燕萍 钟惺 泮育平 于 2020-03-13 设计创作，主要内容包括：本发明公开了一种式II所示的磷丙替诺福韦杂质的制备方法,所述制备方法的反应路线如下:<Image he="120" wi="700" file="DDA0002409878550000011.GIF" imgContent="drawing" imgFormat="GIF" orientation="portrait" inline="no"></Image>所述反应在复合催化剂的催化下进行；所述复合催化剂是由有机碱A和有机碱B组成,所述的有机碱A选自三乙胺、N,N-二异丙基乙胺、二乙胺、二异丙胺中的至少一种,所述的有机碱B选自4-二甲氨基吡啶、咪唑、吡啶、4-二甲基吡啶中的至少一种。本发明具有反应转化率高、所得产物纯度高的优势。(The invention discloses a preparation method of a fosinoprofovir impurity shown in a formula II, which comprises the following reaction route: the reaction is carried out under the catalysis of a composite catalyst; the composite catalyst consists of an organic base A and an organic base B, wherein the organic base A is selected from at least one of triethylamine, N-diisopropylethylamine, diethylamine and diisopropylamine, and the organic base B is selected from at least one of 4-dimethylaminopyridine, imidazole, pyridine and 4-dimethylpyridine. The method has the advantages of high reaction conversion rate and high purity of the obtained product.)

一种磷丙替诺福韦杂质的制备方法

技术领域

本发明涉及一种药物杂质的制备方法，特别涉及磷丙替诺福韦原料药中PMPA酸酐杂质(化学名称：(R)-[[2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙氧基]甲基]磷酸酐，CAS:1607007-18-0)的制备方法，属于医药及其中间体技术领域。

背景技术

磷丙替诺福韦(TAF)是美国吉利德公司在富马酸替诺福韦二吡呋酯(TDF，Tenofovir Disoproxil Fumarate)基础上所开发的新一代核苷类逆转录酶抑制剂。与TDF中链状磷酸酯结构有所不同，TAF含有磷酸苯酚酯和磷酰丙氨酸异丙酯片段，因此血浆稳定性突出，在进入感染的细胞后能很大程度上保持结构的完整，能有效避免代谢不稳定以及由此带来的肾骨毒性。自2016年起，欧洲药品管理局、美国FDA先后批准了多个抗HBV或HIV的TAF单方或复方制剂(如Vemlidy，Genvoya，Odefsey，Descovy)，TAF正逐渐成为吉利德公司在感染性炎症领域的重磅利器。目前报道的合成磷丙替诺福韦的工艺路线主要都是从起始物料PMPA出发，与苯氧基部分相连，得到关键中间体1(GS-6948)。再通过活化，接上L-丙氨酸异丙酯部分得到游离碱GS-7340，最后与富马酸成盐得到TAF。

目前合成关键中间体1(GS-6948)主要有两条工艺路线。原研吉利德公司2001年在WO0208241A2专利路线中，报道了通过PMPA与苯酚在DCC/Et₃N条件下生成GS-6948(路线1)。2012年，吉利德公司在WO2013052094A2专利路线中，又报道了PMPA与亚磷酸三苯酯经DMAP/Et₃N缩合，得到关键中间体GS-6948(路线2)。经过研究发现，不管是路线1还是路线2的条件，PMPA酸酐均作为一个关键活性中间体参与其中，并成为PMPA至GS-6948合成阶段存在的关键工艺杂质。在WO2013052094A2专利路线中甚至提及，在判定反应终点时，PMPA酸酐量应低于5％。

目前报道制备PMPA酸酐杂质的合成路线非常少，CN 109081853A公开了以PMPA为原料，经DIPEA/DCC在DMF条件下制备PMPA酸酐，但其收率非常低，仅40％左右，而且后期还需要制备柱进行纯化精制，操作复杂。

发明内容

本发明的目的是提供一种反应转化率高、所得产物纯度高的磷丙替诺福韦杂质——PMPA酸酐的制备方法。

为实现上述发明目的，本发明采用如下技术方案：

一种式II所示的PMPA酸酐的制备方法，所述制备方法的反应路线如下:

所述反应在复合催化剂的催化下进行；所述复合催化剂是由有机碱A和有机碱B组成，所述的有机碱A选自三乙胺、N,N-二异丙基乙胺、二乙胺、二异丙胺中的至少一种，所述的有机碱B选自4-二甲氨基吡啶、咪唑、吡啶、4-二甲基吡啶中的至少一种。

本发明具体推荐所述制备方法按照如下进行：将化合物I溶于有机溶剂中，加入复合催化剂和脱水剂，通过脱水反应制备式II所示的PMPA酸酐。

本发明所述PMPA酸酐的制备方法，复合催化剂的使用可以有效提高反应转化率。

作为优选，所述的复合催化剂中，有机碱A与有机碱B的摩尔比为1：0.5～1。进一步优选所述复合催化剂由三乙胺与4-二甲氨基吡啶按照摩尔比1：0.5～1组合而成，更进一步优选三乙胺与4-二甲氨基吡啶的摩尔比为1：0.5。

作为优选，所述复合催化剂与化合物I的摩尔比为2～4，更优选2.5～3。

作为优选，所述脱水反应的反应温度为40～80℃，更优选50～60℃。

作为优选，所述脱水反应的反应时长为15～30h，更优选20～24h。

作为优选，所述有机溶剂选自二氯甲烷、1,2-二氯乙烷、四氢呋喃、乙腈、甲苯、环丁砜中的一种，更优选乙腈。作为优选，所述有机溶剂与化合物I的投料重量比为6～12，更优选8～10。

作为优选，所述脱水剂选自Ν,Ν’-二环己基碳二亚胺、二异丙基碳二亚胺、1-(3-二甲胺基丙基)-3-乙基碳二亚胺中的一种，更优选Ν,Ν’-二环己基碳二亚胺。作为优选，所述脱水剂与化合物I的摩尔比为0.5～2，更优选1.5～2。

作为优选，采用以下后处理方式得到PMPA酸酐：反应完毕，将反应液冷却至室温，调pH至2～3，充分搅拌后过滤，所得滤饼加水搅匀，调pH至9～10，充分搅拌后过滤，所得滤液降温至0～5℃，再次调pH至2～3，保温析晶2～10h，过滤，所得滤饼于75℃～90℃干燥8～10h，得白色固体PMPA酸酐。本发明的后处理方式操作简单，所得产物收率高、HPLC纯度达到98％以上。进一步优选所述的“调pH至2～3，保温析晶2～10h”按照如下实施：调节pH＝3，加入少量晶种，保温搅拌2～4h，析出固体，继续调节pH＝2.0～2.5，保温结晶4～6h。

本发明中，一般使用盐酸调节pH至酸性，使用氢氧化钠调节pH至碱性。

本发明特别优选所述PMPA酸酐的制备方法按照如下实施：将化合物I溶于乙腈中，加入复合催化剂三乙胺/4-二甲氨基吡啶以及脱水剂Ν,Ν’-二环己基碳二亚胺，在50～60℃下进行脱水反应20～24h，反应完毕，将反应液冷却至室温，调pH至2～3，充分搅拌后过滤，所得滤饼加水搅匀，调pH至9～10，充分搅拌后过滤，所得滤液降温至0～5℃，再次调节pH＝3，加入少量晶种，保温搅拌2～4h，析出固体，继续调节pH＝2.0～2.5，保温结晶4～6h，过滤，所得滤饼于75℃～90℃干燥8～10h，得白色固体PMPA酸酐；

所述复合催化剂中三乙胺与4-二甲氨基吡啶的摩尔比为1：0.5～1，所述复合催化剂与化合物I的投料摩尔比为2.5～3，所述脱水剂与化合物I的投料摩尔比为1.5～2，所述乙腈与化合物I的投料重量比为8～10。

与现有技术相比，本发明的优点在于：

(1)本发明使用复合催化剂制备磷丙替诺福韦杂质PMPA酸酐，可以有效提高反应转化率。

(2)本发明采用的后处理方式操作简单，产物收率高、纯度高(HPLC纯度98％以上)。

(3)本发明的脱水反应条件温和(优选反应温度50-60℃)，催化剂用量少。

综上，本发明的磷丙替诺福韦杂质PMPA酸酐的制备方法反应条件温和、后处理操作简单、所得产物纯度高，更利于磷丙替诺福韦的杂质对照品研究。

附图说明

图1实施例I中PMPA酸酐的HPLC图；

图2实施例I中PMPA酸酐的¹H-NMR图谱；

图3实施例I中PMPA酸酐的¹³C-NMR图谱；

具体实施方式

以下通过具体实施例详细说明本发明的实施过程和产生的有益效果，旨在帮助阅读者更好地理解本发明的实质和特点，不作为对本案可实施范围的限定。

化合物的结构是通过核磁共振(NMR)或(和)质谱(MS)来确定的。NMR位移(δ)以10^-6(ppm)的单位给出。NMR的测定是用(BrukerAvance III 600)核磁仪，测定溶剂为氘代二甲基亚砜(DMSO-d₆)，内标为四甲基硅烷(TMS)。MS的测定用(Agilent 6120B(ESI))。HPLC的测定使用安捷伦1260DAD高压液相色谱仪(Zorbax SB-C18100×4.6mm)。

本发明的已知的起始原料可以采用或按照本领域已知的方法来合成，或可购买于泰坦科技、安耐吉化学、上海德默、成都科龙化工、韶远化学科技、百灵威科技等公司。

实施例中无特殊说明，反应在氮气氛下进行。

实施例中无特殊说明，溶液是指水溶液。

实施例中无特殊说明，反应的温度为室温。

室温为最适宜的温度，为20℃～30℃。

实施例1

室温下，向500ml三口圆底烧瓶中加入20g PMPA(1eq)、250ml乙腈搅拌均匀，室温下滴加14.1g三乙胺(2eq)，滴加完成后依次加入8.5gDMAP(1eq)、14.4g DCC(2eq)，升温至约50℃，保温反应约24h。停止反应，降温至室温，滴加18％HCl水溶液至pH＝3，搅拌30min，过滤，少量乙腈淋洗，滤液弃去(主要含DMAP)。滤饼加200ml水搅匀，用30％NaOH水溶液调至pH＝10，搅拌30min，过滤，滤饼弃去(DCU)。滤液降温至约5℃，滴加18％HCl水溶液至pH＝3，加入少量晶种，保温搅拌约3h，析出大量白色固体。继续滴加18％HCl水溶液至pH＝2.0-2.5，搅拌降温至约0℃，保温结晶5h，过滤，滤饼用少许乙醇淋洗后，样品于80℃热鼓风烘干，得白色固体样品约17.5g。

HPLC的分析谱图如图1所示，¹H-NMR及¹³C-NMR核磁数据分别如图2及图3所示。

实施例2

室温下，向500ml三口圆底烧瓶中加入20g PMPA(1eq)、250ml乙腈搅拌均匀，室温下滴加14.1g三乙胺(2eq)，滴加完成后依次加入17gDMAP(2eq)、14.4g DCC(2eq)，升温至约50℃，保温反应约24h。停止反应，降温至室温，滴加18％HCl水溶液至pH＝3，搅拌30min，过滤，少量乙腈淋洗，滤液弃去(主要含DMAP)。滤饼加200ml水搅匀，用30％NaOH水溶液调至pH＝10，搅拌30min，过滤，滤饼弃去(DCU)。滤液降温至约5℃，滴加18％HCl水溶液至pH＝3，加入少量晶种，保温搅拌约3h，析出大量白色固体。继续滴加18％HCl水溶液至pH＝2.0-2.5，搅拌降温至约0℃，保温结晶5h，过滤，滤饼用少许乙醇淋洗后，样品于80℃热鼓风烘干，得白色固体样品约16.2g。

实施例3

室温下，向500ml三口圆底烧瓶中加入20g PMPA(1eq)、250ml乙腈搅拌均匀，室温下滴加10.2g二乙胺(2eq)，滴加完成后依次加入17gDMAP(2eq)、14.4g DCC(2eq)，升温至约50℃，保温反应约24h。停止反应，降温至室温，滴加18％HCl水溶液至pH＝3，搅拌30min，过滤，少量乙腈淋洗，滤液弃去(主要含DMAP)。滤饼加200ml水搅匀，用30％NaOH水溶液调至pH＝10，搅拌30min，过滤，滤饼弃去(DCU)。滤液降温至约5℃，滴加18％HCl水溶液至pH＝3，加入少量晶种，保温搅拌约3h，析出大量白色固体。继续滴加18％HCl水溶液至pH＝2.0-2.5，搅拌降温至约0℃，保温结晶5h，过滤，滤饼用少许乙醇淋洗后，样品于80℃热鼓风烘干，得白色固体样品约15.8g。

实施例4

室温下，向500ml三口圆底烧瓶中加入20g PMPA(1eq)、250ml乙腈搅拌均匀，室温下滴加18.0g N,N-二异丙基乙胺(2eq)，滴加完成后依次加入8.5gDMAP(1eq)、8.8g DIC(2eq)，升温至约50℃，保温反应约24h。停止反应，降温至室温，滴加18％HCl水溶液至pH＝3，搅拌30min，过滤，少量乙腈淋洗，滤液弃去(主要含DMAP)。滤饼加200ml水搅匀，用30％NaOH水溶液调至pH＝10，搅拌30min，过滤，滤饼弃去(DCU)。滤液降温至约5℃，滴加18％HCl水溶液至pH＝3，加入少量晶种，保温搅拌约3h，析出大量白色固体。继续滴加18％HCl水溶液至pH＝2.0-2.5，搅拌降温至约0℃，保温结晶5h，过滤，滤饼用少许乙醇淋洗后，样品于80℃热鼓风烘干，得白色固体样品约15.3g。

实施例5

室温下，向500ml三口圆底烧瓶中加入20g PMPA(1eq)、250ml乙腈搅拌均匀，室温下滴加10.2g二乙胺(2eq)，滴加完成后依次加入5.5g吡啶(1eq)、14.4g DCC(2eq)，升温至约50℃，保温反应约24h。停止反应，降温至室温，滴加18％HCl水溶液至pH＝3，搅拌30min，过滤，少量乙腈淋洗，滤液弃去(主要含DMAP)。滤饼加200ml水搅匀，用30％NaOH水溶液调至pH＝10，搅拌30min，过滤，滤饼弃去(DCU)。滤液降温至约5℃，滴加18％HCl水溶液至pH＝3，加入少量晶种，保温搅拌约3h，析出大量白色固体。继续滴加18％HCl水溶液至pH＝2.0-2.5，搅拌降温至约0℃，保温结晶5h，过滤，滤饼用少许乙醇淋洗后，样品于80℃热鼓风烘干，得白色固体样品约14.6g。

实施例6

室温下，向500ml三口圆底烧瓶中加入20g PMPA(1eq)、250ml乙腈搅拌均匀，室温下滴加14.1g三乙胺(2eq)，滴加完成后依次加入8.5gDMAP(1eq)、8.8g DIC(2eq)，升温至约50℃，保温反应约24h。停止反应，降温至室温，滴加18％HCl水溶液至pH＝3，搅拌30min，过滤，少量乙腈淋洗，滤液弃去(主要含DMAP)。滤饼加200ml水搅匀，用30％NaOH水溶液调至pH＝10，搅拌30min，过滤，滤饼弃去(DCU)。滤液降温至约5℃，滴加18％HCl水溶液至pH＝3，加入少量晶种，保温搅拌约3h，析出大量白色固体。继续滴加18％HCl水溶液至pH＝2.0-2.5，搅拌降温至约0℃，保温结晶5h，过滤，滤饼用少许乙醇淋洗后，样品于80℃热鼓风烘干，得白色固体样品约16.0g。

对比例1

室温下，向500ml三口圆底烧瓶中加入20g PMPA(1eq)、250ml乙腈搅拌均匀，室温下滴加14.1g三乙胺(2eq)，滴加完成后加入14.4g DCC(2eq)，升温至约50℃，保温反应约24h。停止反应，降温至室温，滴加18％HCl水溶液至pH＝3，搅拌30min，过滤，少量乙腈淋洗，滤液弃去(主要含DMAP)。滤饼加200ml水搅匀，用30％NaOH水溶液调至pH＝10，搅拌30min，过滤，滤饼弃去(DCU)。滤液降温至约5℃，滴加18％HCl水溶液至pH＝3，加入少量晶种，保温搅拌约3h，析出大量白色固体。继续滴加18％HCl水溶液至pH＝2.0-2.5，搅拌降温至约0℃，保温结晶5h，过滤，滤饼用少许乙醇淋洗后，样品于80℃热鼓风烘干，得白色固体样品约9.7g。

对比例2

室温下，向500ml三口圆底烧瓶中加入20g PMPA(1eq)、250ml乙腈搅拌均匀，依次加入8.5gDMAP(1eq)、14.4g DCC(2eq)，升温至约50℃，保温反应约24h。停止反应，降温至室温，滴加18％HCl水溶液至pH＝3，搅拌30min，过滤，少量乙腈淋洗，滤液弃去(主要含DMAP)。滤饼加200ml水搅匀，用30％NaOH水溶液调至pH＝10，搅拌30min，过滤，滤饼弃去(DCU)。滤液降温至约5℃，滴加18％HCl水溶液至pH＝3，加入少量晶种，保温搅拌约3h，析出大量白色固体。继续滴加18％HCl水溶液至pH＝2.0-2.5，搅拌降温至约0℃，保温结晶5h，过滤，滤饼用少许乙醇淋洗后，样品于80℃热鼓风烘干，得白色固体样品约8.2g。