阅读说明：本技术 一种含酶抑菌剂的中药发酵饲料及其制备方法 (Traditional Chinese medicine fermented feed containing enzyme bacteriostat and preparation method thereof ) 是由 胡晓歌 李雪刚 王旭光 于 2020-06-11 设计创作，主要内容包括：本发明公开了一种含酶抑菌剂的中药发酵饲料,主要由以下质量的原料组成：酶抑菌剂0.2-1.5kg,纤维素酶0.5-1kg、木聚糖酶0.5-1kg、发酵载体60-150kg,酸奶饮料1-5kg,鲜牛奶0-5kg、饲料载体80-200kg、葡萄糖2-4kg,酿酒酵母3-5kg,粪肠球菌3-6kg,地衣3-8kg。本发明还提供了所述含酶抑菌剂的中药发酵饲料的制备方法。本发明的中药发酵饲料含有酶抑菌剂,可以优化家畜肠道环境,提高食欲,增加采食量,有利于家畜体内产生抗菌物质,提升家畜抗病能力。(The invention discloses a traditional Chinese medicine fermented feed containing an enzyme bacteriostatic agent, which mainly comprises the following raw materials by mass: 0.2-1.5kg of enzyme bacteriostatic agent, 0.5-1kg of cellulase, 0.5-1kg of xylanase, 60-150kg of fermentation carrier, 1-5kg of yoghurt beverage, 0-5kg of fresh milk, 80-200kg of feed carrier, 2-4kg of glucose, 3-5kg of saccharomyces cerevisiae, 3-6kg of enterococcus faecalis and 3-8kg of lichen. The invention also provides a preparation method of the traditional Chinese medicine fermented feed containing the enzyme bacteriostatic agent. The traditional Chinese medicine fermented feed contains the enzyme bacteriostatic agent, can optimize the intestinal environment of livestock, improve appetite, increase feed intake, facilitate the production of antibacterial substances in the bodies of the livestock and improve the disease resistance of the livestock.)

一种含酶抑菌剂的中药发酵饲料及其制备方法

技术领域

本发明涉及中药发酵饲料领域，具体涉及一种含酶抑菌剂的中药发酵饲料及其制备方法。

背景技术

饲料是养殖业发展的物质基础，直接关系到家畜产品质量安全以及农业、农村经济发展和人民生活水平的提高。随着养殖业的发展，大多数的养殖户逐步认识到发酵饲料在家禽和牲畜生产中的重要性。越来越多的养殖户使用发酵饲料喂养家禽和牲畜。

目前市场上的发酵饲料存在的基本问题是夏季容易发霉，主要原因是夏天室内温度偏高，空气湿度偏大，霉菌容易生长繁殖，当饲料接触空气后，很快会滋生霉菌，导致饲料霉变。而且市场上的发酵饲料大多以好氧发酵为主，安全性差、好氧发酵容易产生霉菌等杂菌污染，而且发酵过程中产生大量的热和气体，饲料的能量损失较严重，发酵后饲料失重在20％左右，甚至更高。

为了抑制霉菌的生长繁殖，一些厂家会在饲料里添加一定的化学抑菌剂，虽然可以抑制霉菌的生长繁殖，也会对饲料里其他的有益菌的繁殖产生一定的抑制作用，影响了发酵饲料的使用效果，从而进一步影响了家畜产品的质量。

发明内容

为了解决现有技术中存在的问题，本发明旨在提供一种含酶抑菌剂的中药发酵饲料及其制备方法，用于降低饲料的pH值，抑制有害菌的生长繁殖，促进有益菌的快速增殖，从而提高饲料的品质，延长保质期。

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种含酶抑菌剂的中药发酵饲料，主要由以下质量的原料组成：酶抑菌剂0.2-1.5kg，纤维素酶0.5-1kg、木聚糖酶0.5-1kg、发酵载体60-150kg，酸奶饮料1-5kg，鲜牛奶0-5kg、饲料载体80-200kg、葡萄糖2-4kg，酿酒酵母3-5kg，粪肠球菌3-6kg，地衣3-8kg。

进一步地，主要由以下质量的原料组成：酶抑菌剂0.5-1kg、纤维素酶0.8-1kg、木聚糖酶0.8-1kg、发酵载体80-120kg，酸奶饮料2.5-4kg，鲜牛奶2-5kg、饲料载体100-150kg、葡萄糖2.5-3.6kg，酿酒酵母3.5-4kg，粪肠球菌3.2-4.6kg，地衣3.8-6.8kg。

所述的酶抑菌剂为葡萄糖氧化酶。

所述的发酵载体为中药组合物；所述的中药组合物为甘草10-15kg、淫羊藿8-20kg、黄芪6-12kg、菟丝子6-25kg、白术5-15kg、党参5-18kg、山楂8-25kg、金银花12-20kg。

所述酸奶饮料中包含保加利亚乳杆菌，嗜热链球菌，乳酸菌。

所述的饲料载体为玉米、豆粕中任意一种或两种。

一种上述的含酶抑菌剂的中药发酵饲料的制备方法，主要包括以下步骤：

(1)称取一定量鲜牛奶加热到65-70℃，加入足量纯化水，待温度降到25-30℃，再加入酸奶、葡萄糖、酿酒酵母、粪肠球菌和地衣，搅拌均匀，倒入灭菌发酵罐密封发酵；

(2)向步骤(1)所得的发酵液里再加入一定量的葡糖糖和温水，搅拌均匀，所得发酵液备用；

(3)称取若干的发酵载体依次进行粗碎、双向动态逆流提取，固液分离，得水提取药液，

(4)将步骤(3)中制得的水提取药液经过干燥，干燥后的固体与酶抑菌剂、步骤(2)中的发酵液混合均匀，装入发酵袋，在发酵室里密封发酵5-10天，即得所述的发酵饲料。

所述的步骤(3)中萃取采用的是双向动态逆流提取的具体方法为：水作为双向动态逆流提取的浸提剂，对粗碎后的古体发酵载体进行浸提。

所述的双向动态逆流提取左侧逆向进浸提剂的速度为600～650L/h，右侧逆向进浸提剂的速度为180～220L/h，固体原料药的加料速度为120～140kg/h，螺旋杆转速为16～18rpm/min，螺旋推进器转速为20-30rpm/min。

所述的双向动态逆流提取的温度为70-90℃，提取时间为7-10h。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

(1)相比于其他化学抑菌剂，生物酶抑菌剂的优势在于其作为生物制剂，安全性更高，添加于发酵饲料里不仅可以抑制霉菌的生长繁殖，也可以促进有益菌的生长繁殖。

(2)生物酶抑菌剂在家畜养殖中的作用:清除家畜体内特别是肠道内致病因子，优化肠道环境，提高食欲，增加采食量，替代抗生素和益生菌，保护免疫系统，增强肝脏功能，降低家畜体内的药物残留，提高畜产品品质。

(3)生物酶抑菌剂在家畜疾病防治中的作用:可以快速解除毒素中毒，特别是霉菌毒素中毒；可以辅助药物治疗疾病，增加疗效，加快痊愈。

(4)中药发酵与益生菌发生协同作用，提升抗菌、免疫系统能力。中药发酵与益生菌发生协同作用后，中药中的抗菌物质更容易释放出来，益生菌也受到中药促增殖作用的影响，加快生长家畜繁殖的速度，更有利于家畜体内产生抗菌物质，提升家畜抗病能力。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步详细的阐述，但应当理解本发明的保护范围并不受具体实施方式的限制。

实施例1

一种含生物酶抑菌剂的中药发酵饲料，主要由以下质量的原料组成：纤维素酶0.5kg、木聚糖酶0.5kg、葡萄糖氧化酶0.2kg、甘草10kg、淫羊藿8kg、黄芪6kg、菟丝子12kg、白术8kg、党参10kg、山楂8kg、金银花15gkg、酸奶饮料2kg、鲜牛奶3kg、玉米100kg、豆粕80kg、葡萄糖2kg、酿酒酵母3kg、粪肠球菌3.5kg、地衣4kg。

上述含生物酶抑菌剂的中药发酵饲料的制备方法，包括如下步骤：

(1)按质量称取鲜牛奶加热到65℃，加入足量纯化水，待温度降到25℃，再加入酸奶、葡萄糖、酿酒酵母、粪肠球菌、地衣，置入混合机搅拌均匀，放入灭菌发酵罐密封发酵；

(2)向步骤(1)所得的发酵液里加入一定量的葡糖糖和温水，搅拌均匀，所得发酵液备用:

(3)按质量称取发酵载体甘草、淫羊藿、黄芪、菟丝子、白术、党参、山楂、金银花，混合均匀后进行粗碎，粗碎细度为10目筛，以纯化水作为浸提剂对粗碎后的固体中药发酵载体进行双向动态逆流提取，固体中药发酵载体从右侧上料口行进至左侧末端掏料器后逆向进浸提剂，左侧逆向进浸提剂预先加热至65℃，控制左侧逆向进浸提剂的速度为600L/h，右侧逆向进浸提剂的速度为180L/h，固体物料的加料速度为120kg/h，螺旋杆转速为16rpm/min，螺旋推进器转速为20rpm/min，提取的温度为70℃，提取时间为7小时；

(4)收集步骤(3)双向动态逆流提取结束后的液体浸提液，依次经过卧式螺旋离心机、碟式分离机进行固液分离，分离所得药液经喷雾干燥后，与葡萄糖氧化酶、纤维素酶和木聚糖酶、步骤(2)的发酵液混合均匀，装入发酵袋，在发酵室里密封发酵8天，即得所述的发酵饲料。

实施例2

一种含生物酶抑菌剂的中药发酵饲料，主要由以下质量的原料组成：纤维素酶0.7kg、木聚糖酶0.7kg、葡萄糖氧化酶1kg、甘草12kg、淫羊藿15kg、黄芪10kg、菟丝子18kg、白术10kg、党参14kg、山楂17kg、金银花18kg、酸奶饮料3.8kg、牛奶3.5kg、玉米105kg、豆粕95kg、葡萄糖2.8kg、酿酒酵母3.6kg、粪肠球菌4.8kg、地衣5.6kg。

上述含生物酶抑菌剂的中药发酵饲料的制备方法，包括如下步骤：

(1)按质量称取鲜牛奶加热到68℃，加入足量纯化水，待温度降到27℃，再加入酸奶、葡萄糖、酿酒酵母、粪肠球菌、地衣，置入混合机搅拌均匀，放入灭菌发酵罐密封发酵；

(2)向步骤(1)所得的发酵液里加入一定量的葡糖糖和温水，搅拌均匀，所得发酵液备用:

(3)按质量称取发酵载体甘草、淫羊藿、黄芪、菟丝子、白术、党参、山楂、金银花，混合均匀后进行粗碎，粗碎细度为10目筛，以纯化水作为浸提剂对粗碎后的固体中药发酵载体进行双向动态逆流提取，固体中药发酵载体从右侧上料口行进至左侧末端掏料器后逆向进浸提剂，左侧逆向进浸提剂预先加热至75℃，控制左侧逆向进浸提剂的速度为630L/h，右侧逆向进浸提剂的速度为200L/h，固体物料的加料速度为130kg/h，螺旋杆转速为17rpm/min，螺旋推进器转速为25rpm/min，提取的温度为80℃，提取时间为8小时；

(4)收集步骤(3)双向动态逆流提取结束后的液体浸提液，依次经过卧式螺旋离心机、碟式分离机进行固液分离，分离所得药液经喷雾干燥后，与葡萄糖氧化酶、纤维素酶和木聚糖酶、步骤(2)的发酵液混合均匀，装入发酵袋，在发酵室里密封发酵5天，即得所述的发酵饲料。

实施例3

一种含生物酶抑菌剂的中药发酵饲料，主要由以下质量的原料组成：纤维素酶1kg、木聚糖酶1kg、葡萄糖氧化酶1.2kg、甘草15kg、淫羊藿20kg、黄芪12kg、菟丝子24kg、白术15kg、党参17kg、山楂22kg、金银花20kg、酸奶饮料5kg、牛奶4.8kg、玉米110kg、豆粕90kg、葡萄糖3.8kg、酿酒酵母4.9kg、粪肠球菌5.7kg、地衣7.8kg。

上述含生物酶抑菌剂的中药发酵饲料的制备方法，包括如下步骤：

(1)按质量称取鲜牛奶加热到70℃，加入足量纯化水，待温度降到30℃，再加入酸奶、葡萄糖、酿酒酵母、粪肠球菌、地衣，置入混合机搅拌均匀，放入灭菌发酵罐密封发酵；

(2)向步骤(1)所得的发酵液里加入一定量的葡糖糖和温水，搅拌均匀，所得发酵液备用:

(3)按质量称取发酵载体甘草、淫羊藿、黄芪、菟丝子、白术、党参、山楂、金银花，混合均匀后进行粗碎，粗碎细度为10目筛，以纯化水作为浸提剂对粗碎后的固体中药发酵载体进行双向动态逆流提取，固体中药发酵载体从右侧上料口行进至左侧末端掏料器后逆向进浸提剂，左侧逆向进浸提剂预先加热至80℃，控制左侧逆向进浸提剂的速度为650L/h，右侧逆向进浸提剂的速度为220L/h，固体物料的加料速度为140kg/h，螺旋杆转速为18rpm/min，螺旋推进器转速为30rpm/min，提取的温度为90℃，提取时间为10小时；

(4)收集步骤(3)双向动态逆流提取结束后的液体浸提液，依次经过卧式螺旋离心机、碟式分离机进行固液分离，分离所得药液经喷雾干燥后，与葡萄糖氧化酶、纤维素酶和木聚糖酶、步骤(2)的发酵液混合均匀，装入发酵袋，在发酵室里密封发酵5天，即得所述的发酵饲料。

试验例

1.菌种培养试验

称量4吨载体，均分为4等份，分别作为空白对照组、实验组1、实验组2、实验组3,分别在空白对照组中再加入0.5-1kg纤维素酶和0.5-1kg木聚糖酶；实验组1中再加入0.5-1kg纤维素酶、0.5-1kg木聚糖酶和0.2-0.5kg葡萄糖氧化酶；实验组2中再加入0.5-1kg纤维素酶、0.5-1kg木聚糖酶和0.5-1kg葡萄糖氧化酶；实验组3中再加入0.5-1kg纤维素酶、0.5-1kg木聚糖酶和1-1.5kg葡萄糖氧化酶。四组实验在相同条件下进行菌种培养试验，具体菌种培养结果见表1。

菌种培养的方法如下：

(1)稀释样品：准确称取待测样品10g，置入装有90mL无菌水并放有小玻璃珠的250mL三角瓶中，在旋转式摇床上200r/min充分振荡30min，即成10^-1稀释液；再用0.5mL无菌吸管，吸取10^-1稀释液0.5mL移入装有4.5mL无菌水的试管中，充分混匀即成10^-2稀释液；再换一支无菌吸管吸取10^-2菌液1mL移入装有9mL无菌水试管中，即成10^-3稀释液；以此类推，连续稀释，制成10^-4、10^-5、10^-6、10^-7、10^-8等一系列稀释度菌液，供平板接种用。

(2)接种：1)涂布法(酵母)

用100uL移液器分别吸取不同稀释度菌悬液100uL，分别加至直径为9cm的培养平皿的麦芽汁琼脂培养基表面，用无菌玻璃刮刀将菌悬液均匀涂于琼脂表面。每个样品根据菌量不同取两个相邻合适稀释梯度，每个梯度做三个平行。

2)涂布法(粪肠球菌)

用100uL移液器分别吸取不同稀释度菌悬液100uL，分别加至直径为9cm的培养平皿的MRS培养基表面，用无菌玻璃刮刀将菌悬液均匀涂于培养基表面。每个样品根据菌量不同取两个相邻合适稀释梯度，每个梯度做三个平行。

3)倾注法(地衣芽孢杆菌)

用1mL移液器分别吸取不同稀释度菌悬液1mL，分别加至直径为9cm的培养皿里，将事先冷却好的营养琼脂培养基加入培养皿中，摇匀，待冷却凝固。每个样品根据菌量不同取两个相邻合适稀释梯度，每个梯度做三个平行。

将上述3种接种菌种的培养皿置入培养箱在28℃下倒置培养24～72h，分别观察菌落形态后计数。

(3)菌落计数

当只有一个稀释度，其菌落数在30-300之间时，则以该菌落数乘以稀释倍数；若有两个稀释度，其菌落数均在30-300之间，应按两者菌落数总数之比值来决定。若其比值小于2，计算两者的平均数乘以稀释倍数；若大于2则计数其中较小的菌落数乘以稀释倍数。

每克样品的活菌数(CFU/g)＝菌落平均数×稀释倍数×10

表1空白对照组和实验组在相同培养条件下的菌种培养试验结果

	空白对照组	实验组1	实验组2	实验组3
					霉菌(CFU/g)	1.5×10<sup>3</sup>	50	＜10	＜10
氨基酸	8.62％	26.06％	28.21％	26.95％
					蛋白质	10.15％	29.06％	29.64％	29.15％
酵母(CFU/kg)	1.9×10<sup>8</sup>	1.0×10<sup>9</sup>	2.8×10<sup>10</sup>	6.7×10<sup>9</sup>
					粪肠球菌(CFU/kg)	1.8×10<sup>9</sup>	4×10<sup>9</sup>	1.9×10<sup>10</sup>	4.9×10<sup>9</sup>
地衣芽孢杆菌(CFU/kg)	9.9×10<sup>8</sup>	3.4×10<sup>9</sup>	4.6×109	1.5×10<sup>9</sup>
					水分(％)	30.5	30.7	30.3	30.8
pH值	5.3	4.9	4.4	4.5

从表1中可以看出，与空白对照组相比，加入葡萄糖氧化酶后，可以显著降低霉菌的总数，提高氨基酸和蛋白质的含量，提高菌种的存活度，也可以降低饲料的pH值，而且酸性环境可以进一步抑制霉菌的生长，促进有益菌的生长繁殖，从而延长饲料的保质期；随着葡萄糖氧化酶投料量的增加，发酵饲料的pH值进一步降低，霉菌的数量进一步下降，菌种的数量进一步增加，从而验证了葡萄糖氧化酶可以通过降低饲料的pH值，从而抑制霉菌的生长，延长饲料的保质期。但是随着葡萄糖氧化酶的投料量的进一步增加，发酵饲料的菌种数量霉菌数量、氨基酸总量、蛋白质含量并没有增加，pH值也没有降低，因此为了节约生产成本，同时保证产品品质，葡萄糖氧化酶的最佳投料量为0.5-1kg。

2.养殖试验

实验组1：30kg发酵饲料+1000kg的普通饲料，其中添加0.5-1kg纤维素酶、0.5-1kg木聚糖酶和0.2-0.5kg葡萄糖氧化酶。

实验组2：30kg发酵饲料+1000kg的普通饲料，其中添加0.5-1kg纤维素酶、0.5-1kg木聚糖酶和0.5-1kg葡萄糖氧化酶。

实验组3：30kg发酵饲料+1000kg普通饲料，其中添加0.5-1kg纤维素酶、0.5-1kg木聚糖酶和1-1.5kg葡萄糖氧化酶。

空白对照组：不添加发酵饲料，其他同实验组2。

选择体重相近，健康状况良好且相同，约30kg的小猪200只，平均分成4组，分别作为实验组1、实验组2、实验组3和对照组，总共进行为期30天的采食量、日增重、腹泻率的对比试验，试验期间采用常规圈养，每天上午7点、下午5点各喂食一次，保证所有猪能够自由采食，饲养过程中，每天早上6点对空腹猪进行称量，记录实验数据。经过为期30天的试验，统计结果如表2。

表2四组实验条件下猪的生长指标情况

生长指标	空白对照组	实验组1	实验组2	实验组3
					采食量/日	1.2kg	1.4kg	1.6kg	1.5kg
腹泻率	2％	0％	0％	0％
					体重增量/日	0.4kg	0.6kg	0.9kg	0.8kg

从表2中可以看出：采用本发明生产的发酵饲料，对猪的饲养效果更好，可以显著提高猪的采食量，降低腹泻率，提高猪的日体重增量，降低料肉比，给养殖户带来更大的养殖效益；而且葡萄糖氧化酶的投料量为0.5-1kg时，猪的采食量、腹泻率和日体重增量都是最优的，由此可见，葡萄糖氧化酶最佳投料量为0.5-1kg，这样既能够保证产品的品质，也能够节约生产成本。

以上所述，仅为本发明的较佳的具体实施例，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围内。