阅读说明：本技术 一种壳聚糖微球材料的制备方法 (Preparation method of chitosan microsphere material ) 是由 蔡杰 钟奕 张俐娜 于 2019-02-01 设计创作，主要内容包括：本发明公开了一种壳聚糖微球材料的制备方法。首先将壳聚糖加入到碳酸氢盐的水溶液,直接搅拌溶解壳聚糖；或者将壳聚糖用稀酸溶解后再用碱中和,无需分离,继续加入碳酸氢盐,搅拌溶解壳聚糖；将壳聚糖加入到碱液或碳酸盐的水溶液中,通入二氧化碳,生成碳酸氢盐来溶解壳聚糖；将甲壳素进行脱乙酰化反应生成壳聚糖,调整碱液浓度后,通入二氧化碳,生成碳酸氢盐来溶解壳聚糖。加入稳定剂有助于增强溶解能力。将壳聚糖溶液作为水相,在油相的辅助下,利用膜乳化器、微流控设备和常规搅拌装置,得到壳聚糖乳滴,将乳滴固化后得到壳聚糖凝胶微球。本发明避免了壳聚糖在酸性或者强碱性条件下的降解,有利于保证壳聚糖溶液加工过程中的稳定性。(The invention discloses a preparation method of a chitosan microsphere material. Firstly, adding chitosan into a bicarbonate aqueous solution, and directly stirring to dissolve the chitosan; or dissolving chitosan with dilute acid, neutralizing with alkali, adding bicarbonate, and stirring to dissolve chitosan; adding chitosan into an aqueous solution of alkali liquor or carbonate, and introducing carbon dioxide to generate bicarbonate to dissolve the chitosan; performing deacetylation reaction on chitin to generate chitosan, adjusting the concentration of alkali liquor, and introducing carbon dioxide to generate bicarbonate to dissolve the chitosan. The addition of a stabilizer helps to enhance the dissolving capacity. Taking the chitosan solution as a water phase, obtaining chitosan emulsion droplets by using a membrane emulsifier, a microfluidic device and a conventional stirring device with the assistance of an oil phase, and solidifying the emulsion droplets to obtain the chitosan gel microspheres. The invention avoids the degradation of chitosan under acidic or strong alkaline conditions, and is beneficial to ensuring the stability of the chitosan solution in the processing process.)

一种壳聚糖微球材料的制备方法

技术领域

本发明属于天然高分子和高分子材料领域，具体涉及一种壳聚糖微球材料的制备方法。

背景技术

壳聚糖是甲壳素脱乙酰化的产物，当甲壳素的N-脱乙酰度在55％以上时，甲壳素转变为壳聚糖。甲壳素和壳聚糖在自然界中的储量是仅次于纤维素的一类天然高分子。

壳聚糖微球材料是以壳聚糖为主要原料，经过溶解和乳液化形成乳滴，经过化学交联或物理交联后形成微球状的多功能高分子材料。壳聚糖微球材料不但具有良好的生物相容性和生物可降解性，还具有抗菌性，能够促进伤口的愈合，具有止血作用，在生物医疗领域、药物载体材料等领域有着广泛的应用。壳聚糖微球的制备技术是当今新材料技术领域研究的研究热点。

为了制备壳聚糖微球材料，需要我们选择合适的溶剂，合适的化学交联剂和凝固剂来实现溶液的凝胶化转变。壳聚糖分子间存在大量的氢键，结晶度高，不溶于水和常用的有机溶剂，从而限制了壳聚糖的应用。传统的方法使用低浓度的醋酸水溶液或者盐酸水溶液作为溶剂，将壳聚糖溶解，经过乳液化后转变为乳滴，再使用碱液中和得到微球；或者通过向油相或水相中加入化学交联剂，壳聚糖发生分子间的交联反应，乳滴转变为微球。近年来，受碱/尿素水溶剂体系低温溶解纤维素的启发，我国科学工作者发现壳聚糖能通过冷冻解冻的方法溶解在碱/尿素水溶液中，为制备壳聚糖微球材料提供了新的思路。

目前，用于溶解壳聚糖的碱性水溶剂包括氢氧化锂-氢氧化钠-尿素的组合(专利201110099176.3)，氢氧化锂-氢氧化钾-尿素的组合(专利201310405191.5)，氢氧化钠-尿素的组合(Zhang W,Xia W.Dissolution and stability of chitosan in a sodiumhydroxide/urea aqueous solution[J].Journal of Applied Polymer Science,2014,131(3):1082-1090.)，氢氧化锂-尿素的组合(Li C,Han Q,Guan Y,et al.Michaelreaction of chitosan with acrylamides in an aqueous alkali–urea solution[J].Polymer Bulletin,2015,72(8):2075-2087.)。这些组合溶剂在溶解甲壳素和壳聚糖的过程中，都需要经过一次或者多次的冷冻-解冻循环。冷冻-解冻过程耗费大量能源，对设备要求高，对于工业化生产是一个重大难题。

目前，还没有使用弱碱性水溶液溶解壳聚糖来制备壳聚糖微球材料的报道。壳聚糖在弱碱性水溶液中十分稳定，不容易发生降解，不具备腐蚀性，特别适合工业生产。

发明内容

本发明要解决的技术问题在于提供一种壳聚糖微球材料的制备的方法。本申请的突出点在于提供一种经济的水溶剂体系溶解壳聚糖，溶解过程无需冷冻-解冻，溶液性质稳定，不易发生壳聚糖分子链的降解，为大规模制备壳聚糖微球材料提供新方法。

本发明提供的技术方案具体如下：

第一方面，提供一种壳聚糖微球材料的制备方法，包括以下步骤：

(1)配制弱碱性水溶液，所述弱碱性水溶液由碳酸氢盐、稳定剂和水组成；其中，碳酸氢盐的终浓度为：0.2～1.5mol·kg^-1，所述稳定剂的终浓度为0.6～5.0mol·kg^-1尿素或0.3～1.2mol·kg^-1硫脲或两种的混合物，余量为水；

(2)制备壳聚糖弱碱性水溶液：将壳聚糖加入到步骤(1)的弱碱性水溶液中，在不超过35℃的条件下连续搅拌30分钟以上，离心脱泡后，得到透明的壳聚糖溶液；

(3)制备壳聚糖微球材料：将步骤(2)得到的壳聚糖弱碱性水溶液通过膜乳化器、微流控设备、常规搅拌装置中的任意一种在油相和油性乳化剂的辅助下形成乳滴，乳滴经过凝胶化以后，形成微球；

所述的碳酸氢盐为单一碳酸氢盐的水溶液，或是多种碳酸氢盐的水溶液混合物。

优选地，上述步骤(1)配制的弱碱性水溶液中碳酸氢盐的质量分数为0.3～1.2mol·kg^-1，所述稳定剂为1～4.0mol·kg^-1尿素或0.4～1.0mol·kg^-1硫脲，余量为水。

第二方面，提供一种壳聚糖微球材料的制备方法，包括以下步骤：

(1)将壳聚糖溶解在稳定剂和浓度为0.1～1.0mol·kg^-1的无机或有机酸水溶液中，加入适量的碱调节溶液pH到中性，壳聚糖析出；所述稳定剂为终浓度0.3～5.0mol·kg^-1尿素或0.3～1.2mol·kg^-1硫脲或两者的混合物；所述调节溶液pH的碱是碱性氢氧化物、碱金属碳酸盐、碱土金属碳酸盐、碱金属碳酸氢盐、碱土金属碳酸氢盐、氨水、碳酸铵、碳酸氢铵中的任意一种，或是它们的混合物；所述无机或有机酸优选为醋酸、盐酸、柠檬酸等；

(2)向(1)中壳聚糖和水的混合物加入碳酸氢盐，在冰点到35℃的条件下连续搅拌10分钟以上，壳聚糖溶解，离心脱泡后，得到透明的壳聚糖溶液；所述的碳酸氢盐终浓度为0.2～1.5mol·kg^-1；

(3)制备壳聚糖微球材料：将步骤(2)得到的壳聚糖弱碱性水溶液通过膜乳化器、微流控设备、常规搅拌装置中的任意一种在油相和油性乳化剂的辅助下形成乳滴，乳滴经过凝胶化以后，形成微球；

所述的碳酸氢盐为单一碳酸氢盐的水溶液，或是多种碳酸氢盐的水溶液混合物。

优选地，上述步骤(1)中加入的稳定剂的终浓度范围优选为1.0～4.0mol·kg^-1尿素或0.4～1.0mol·kg^-1硫脲；步骤(2)中所述碳酸氢盐的终浓度范围优选为0.3～1.2mol·kg^-1。

第三方面，提供一种壳聚糖微球材料的制备方法，包括以下步骤：

(1)配制碱性水溶液，所述碱性水溶液由碱性氢氧化物或碳酸盐、稳定剂和水组成；其中，碱性氢氧化物的终浓度为0.2～1.5mol·kg^-1，碳酸盐的终浓度为0.10～0.75mol·kg^-1，所述稳定剂的终浓度为0.6～5.0mol·kg^-1尿素或0.3～1.2mol·kg^-1硫脲或两者的混合物，余量为水；

(2)将壳聚糖加入到步骤(1)的碱性水溶液中，通入二氧化碳，在冰点到35℃的条件下连续搅拌30分钟以上，当溶液pH值到7～10左右时，壳聚糖溶解，离心脱泡后，得到透明的壳聚糖溶液；

(3)制备壳聚糖微球材料：将步骤(2)得到的壳聚糖弱碱性水溶液通过膜乳化器、微流控设备、常规搅拌装置中的任意一种在油相和油性乳化剂的辅助下形成乳滴，乳滴经过凝胶化以后，形成微球；

所述的碱性氢氧化物为金属氢氧化物、氢氧化铵、季铵碱，优选为氢氧化锂、氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化铵，或是它们的混合物；所述的碳酸盐为碳酸锂、碳酸钠、碳酸钾、碳酸铵，或是它们的混合物。

优选地，步骤(1)配制的碱性水溶液中氢氧化物的终浓度优选为0.3～1.2mol·kg^-1，碳酸盐的终浓度优选为0.15～0.6mol·kg^-1，所述稳定剂优选的终浓度范围是质量摩尔浓度为1.0～4.0mol·kg^-1尿素或0.4～1.0mol·kg^-1硫脲，余量为水。

第四方面，提供一种壳聚糖微球材料的制备方法，包括以下步骤：

(1)将甲壳素和质量摩尔浓度为8.0～12.5mol·kg^-1氢氧化钠水溶液或氢氧化钾水溶液混合后，加热进行脱乙酰化反应生成壳聚糖；

(2)将(1)所得混合物中氢氧化钠或氢氧化钾的终浓度调整为0.2～1.5mol·kg^-1，将混合物温度降低到冰点到35℃之间，加入稳定剂，在室温下通入二氧化碳，当溶液pH值到7～10左右时，氢氧化钠或氢氧化钾已经转变为碳酸氢盐，壳聚糖发生溶解；所述稳定剂为终浓度0.6～5.0mol·kg^-1尿素或0.4～1.0mol·kg^-1硫脲中的一种或两者的混合物；优选地，稳定剂的终浓度为1.0～4.0mol·kg^-1尿素或0.4～1.0mol·kg^-1硫脲中的一种或两者的混合物；优选地，所述碳酸氢盐的终浓度为0.3～1.2mol·kg^-1；

(3)制备壳聚糖微球材料：将步骤(2)得到的壳聚糖弱碱性水溶液通过膜乳化器、微流控设备、常规搅拌装置中的任意一种在油相和油性乳化剂的辅助下形成乳滴，乳滴经过凝胶化以后，形成微球；

所述的碳酸氢盐为单一碳酸氢盐的水溶液，或是多种碳酸氢盐的水溶液混合物。

优选地，步骤(2)中调整混合物中氢氧化钠或氢氧化钾的浓度的方法是：将步骤(1)所得混合物经过过滤、压榨除去过量的氢氧化钠或氢氧化钾水溶液，加适量的水使混合物中氢氧化钠或者氢氧化钾的终浓度为0.2～1.5mol·kg^-1。

优选地，上述的碳酸氢盐包括碱金属碳酸氢盐、碱土金属碳酸氢盐、碳酸氢铵，优选碳酸氢钠、碳酸氢钾、碳酸氢铵、碳酸氢镁中的一种或多种。

优选地，上述制备方法中步骤(3)所述的油相是常温下呈液体状且与水不互溶的油性物质和油溶性乳化剂组成，所述油性物质可使用液体石蜡、石油醚、橄榄油、棉籽油、豆油、葵花籽油、其他烷类碳氢化合物等；油性乳化剂必须使用溶解于所使用的油性物质，可使用失水山梨醇倍半油酸酯(Arlace183)、甘油醚的聚合物(如PO-500、PO-310)、聚氧乙烯氢化蓖麻油、失水山梨醇三油酸酯(司班85)、失水山梨醇单油酸酯(司班80)、失水山梨醇三硬脂酸酯(司班65)、吐温80、亲油-亲水嵌段共聚物等。油相中乳化剂的浓度为0.5～10％。

优选地，上述制备方法中步骤(3)所述的壳聚糖水溶液与油相的体积比为1:1～1:1000，优选为1:2～1:100。

优选地，利用膜乳化器得到乳滴的方法是将壳聚糖水溶液(水相)用压力通过微孔膜压入到油相中，得到尺寸均一的乳滴；利用微流控设备得到乳滴的方法是用微量泵输送油相和水相到微流控芯片中的两条相交的通道，油相作为连续相将水相分隔开，形成单分散的乳滴；利用常规搅拌装置得到乳滴的方法是将油相和水相混合后，进行机械搅拌，将水相分散到油相中，形成乳滴。

上述制备方法中乳滴转变为微球的固化方式是采用物理的方法或化学的方法。包括能使壳聚糖分子发生化学交联反应的化学交联剂、使壳聚糖脱水的凝固剂。

所述化学交联剂为相当于壳聚糖单体摩尔比为0.1～10的常用交联剂，包括醛类交联剂、缩水甘油醚类交联剂、环氧化合物、环烯醚萜类、多酚类，优选戊二醛、环氧氯丙烷、京尼平、原花青素；

所述凝固剂是酰胺、二甲基亚砜、乙酸乙酯、丙酮、醇类、盐、酸中的任一种或多种的混合水溶液；优选的盐浓度为0～40wt％，酸浓度为0％～20wt％，醇类的浓度为0％～100wt％；醇类优选为甲醇、乙醇；盐类优选为铵盐、钠盐、钾盐、镁盐、钙盐、铝盐；

固化反应结束后，将所得微球依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮、水洗涤，干燥后得到壳聚糖微球成品。

第五方面，提供一种壳聚糖微球材料，由上述任意一种壳聚糖微球材料的制备方法制备得到。

第六方面，提供一种多功能壳聚糖微球的制备方法，在上述制备壳聚糖微球的过程中可以引入功能性有机或无机添加剂，或者引入不同的高分子进行共混。

优选地，所述功能性有机或无机添加剂包括增塑剂、补强剂、耐火材料添加剂、染料、光学稳定剂、抗菌抑菌剂、导电材料、表面活性剂中的一种或几种。

优选地，所述功能性有机或无机添加剂包括石墨烯及其衍生物、碳纳米管及其衍生物、金属或金属氧化物纳米粒子、有机框架化合物或二硫化钼等，所述共混的高分子包括高分子纳米纤维、动物蛋白、植物蛋白、海藻酸盐、胶原、纤维素及其衍生物、导电高分子、聚乙烯醇、聚乙二醇等。

第七方面，提供一种多功能壳聚糖微球材料，由第六方面所述的多功能壳聚糖微球的制备方法制备得到。

第八方面，提供一种氮元素掺杂的碳气凝胶微球的制备方法，将上述壳聚糖微球或多功能壳聚糖微球在惰性气体氛围的保护下，在150℃以上热处理得到碳气凝胶微球。

与已有技术相比较，本发明提供一种绿色、节能的方法得到高质量的壳聚糖微球材料。本发明的优点在于所采用的碳酸氢盐水溶液是一种弱碱性的溶剂体系，不具备腐蚀性，溶液稳定性好，而且从壳聚糖溶液制备壳聚糖微球的过程条件温和，无需冷冻-解冻，制备方法绿色环保，无毒害物残留。

具体实施方式

通过以下详细说明可以进一步理解本发明的特点和优点。所提供的实施例仅是对本发明方法的说明，而不以任何方式限制本发明揭示的其余内容。

以下实施例和对比例中所采用的壳聚糖都是从含有α-甲壳素和β-甲壳素的天然的虾壳、蟹壳、鱿鱼顶骨、硅藻、昆虫等生物中提取出来的，具体提取步骤为用碱液浸泡除去蛋白质，酸液浸泡除去无机盐，用氧化剂脱色，水洗后干燥，得到纯化的甲壳素。壳聚糖是通过甲壳素在氢氧化钠或者氢氧化钾水溶液中发生脱乙酰化反应后制备的，或者是从试剂公司购买到的壳聚糖纯品。

实施例1

将虾壳用碱液浸泡除去蛋白质，酸液浸泡除去无机盐，用过氧化氢水溶液进行脱色，得到纯化的甲壳素。将甲壳素在浓度为12.5mol·kg^-1氢氧化钠水溶液中加热1h进行脱乙酰化反应，得到脱乙酰度为70％左右的壳聚糖。预先准备浓度为0.2mol·kg^-1碳酸氢锂—0.6mol·kg^-1尿素水溶液97g，加入3g壳聚糖，在10℃下搅拌3h，离心脱泡后得到透明的壳聚糖溶液。。壳聚糖原液和2倍体积比的油相(液体石蜡中含有0.5％的司班80)，壳聚糖单体和环氧基摩尔比为1:10的环氧氯丙烷混合后，转速800rpm搅拌1h后形成微球。将所得微球倒入含水量为90wt％乙醇水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为20微米。氮气吸附测得其BET比表面积为360m²/g。

实施例2

将蟹壳用碱液浸泡除去蛋白质，酸液浸泡除去无机盐，用过氧化氢溶液进行脱色，得到纯化的甲壳素。将甲壳素在浓度为8.0mol·kg^-1氢氧化钾水溶液中加热2h进行脱乙酰化反应，得到脱乙酰度为60％左右的壳聚糖。预先准备浓度为0.2mol·kg^-1碳酸氢钠—0.6mol·kg^-1尿素水溶液97g，加入3g壳聚糖，在20℃下搅拌60min，离心脱泡后得到透明的壳聚糖溶液。将孔径为4.7微米的疏水性膜置于亲油性物质中浸润，使孔膜充分湿润以确保膜上的疏水连完全舒展开。将司班85加入到1L液体石蜡和石油醚的混合油相中，搅拌至完全溶解作为油相(液体石蜡和石油醚体积比为1：1，油相中含有1％的司班85)。将100g壳聚糖溶液在一定压力下，通过孔径均一的疏水性微孔膜压入油相中，得到壳聚糖乳液。向乳液中加入壳聚糖单体和京尼平摩尔比为1:1的戊二醛混合后，转速300rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球依次用石油醚、丙酮、乙醇和丙酮洗涤，水洗后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为15微米。氮气吸附测得其BET比表面积为320m²/g。

实施例3

将鱿鱼骨用碱液浸泡除去蛋白质，酸液浸泡除去无机盐，得到纯化的甲壳素。将甲壳素在浓度为10.0mol·kg^-1氢氧化钾水溶液中加热2h进行脱乙酰化反应，得到脱乙酰度为60％左右的壳聚糖。预先准备浓度为0.2mol·kg^-1碳酸氢钾—0.6mol·kg^-1尿素水溶液97g，加入3g壳聚糖，在30℃下搅拌180min，离心脱泡后得到透明的壳聚糖溶液。将孔径为13微米的疏水性膜置于亲油性物质中浸润，使孔膜充分湿润以确保膜上的疏水连完全舒展开。将油溶性乳化剂加入到1L液体石蜡和石油醚的混合油相中，搅拌至完全溶解作为油相(液体石蜡和石油醚体积比为1：1，油相中含有1％的司班85)。将100g壳聚糖溶液在一定压力下，通过孔径均一的疏水性微孔膜压入油相中，得到壳聚糖乳液。向乳液中加入壳聚糖单体和京尼平摩尔比为1:10的京尼平混合后，转速300rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入含水量为80wt％乙醇水溶液进行再生，离心，取沉淀物用石油醚、丙酮、乙醇丙酮和水分别洗后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为30微米。氮气吸附测得其BET比表面积为400m²/g。

实施例4

将虾壳用碱液浸泡除去蛋白质，酸液浸泡除去无机盐，用过氧化氢水溶液进行脱色，得到纯化的甲壳素。将甲壳素在浓度为10.0mol·kg^-1氢氧化钠水溶液中加热2h进行脱乙酰化反应，得到脱乙酰度为70％左右的壳聚糖。预先准备浓度为0.4mol·kg^-1碳酸氢铵—0.6mol·kg^-1尿素水溶液97g，加入3g壳聚糖，在0℃下搅拌60min，离心脱泡后得到透明的壳聚糖溶液。将孔径为19微米的疏水性膜置于亲油性物质中浸润，使孔膜充分湿润以确保膜上的疏水连完全舒展开。将司班80加入到1L液体石蜡和石油醚的混合油相中，搅拌至完全溶解作为油相(液体石蜡和石油醚体积比为1：1，油相中含有5％的司班80)。将100g壳聚糖溶液在一定压力下，通过孔径均一的疏水性微孔膜压入油相中，得到壳聚糖乳液。向乳液中加入壳聚糖单体和京尼平摩尔比为1:0.1的京尼平混合后，转速300rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入含水量为90wt％乙醇水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为60微米。氮气吸附测得其BET比表面积为360m²/g。

实施例5

将蟹壳用碱液浸泡除去蛋白质，酸液浸泡除去无机盐，用过氧化氢水溶液进行脱色，得到纯化的甲壳素。将甲壳素在浓度为8.0mol·kg^-1氢氧化钠水溶液中加热2h进行脱乙酰化反应，得到脱乙酰度为60％左右的壳聚糖。预先准备浓度为0.4mol·kg^-1碳酸氢镁—0.6mol·kg^-1尿素水溶液97g，加入3g壳聚糖，在0℃下搅拌60min，离心脱泡后得到透明的壳聚糖溶液。将司班80加入到1L液体石蜡和石油醚的混合油相中，搅拌至完全溶解作为油相(液体石蜡和石油醚体积比为1：1，油相中含有10％的司班80)。将壳聚糖溶液和油相通过微量泵输送到微流控芯片(芯片中油相通道直径为350微米，水相通道直径为16微米)，形成单分散的液滴；将收集的液滴置于盐含量为40wt％的氯化镁溶液中进行凝胶化，除去有机溶剂；将所得微球倒入含水量为70wt％乙醇水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为40微米。氮气吸附测得其BET比表面积为390m²/g。

实施例6

将鱿鱼顶骨用碱液浸泡除去蛋白质，酸液浸泡除去无机盐，得到纯化的甲壳素。将甲壳素在浓度为9.0mol·kg^-1氢氧化钠水溶液中加热2h进行脱乙酰化反应，得到脱乙酰度为70％左右的壳聚糖。预先准备浓度为0.3mol·kg^-1碳酸氢锂—5mol·kg^-1尿素水溶液95g，加入5g壳聚糖，在0℃下搅拌60min，离心脱泡后得到透明的壳聚糖溶液。将司班85加入到1L液体石蜡和石油醚的混合油相中，搅拌至完全溶解作为油相(液体石蜡和石油醚体积比为1：1，油相中含有1％的司班85)。将壳聚糖溶液和油相通过微量泵输送到微流控芯片(芯片中油相通道直径为350微米，水相通道直径为50微米)，形成单分散的液滴；将收集的液滴置于盐含量为20wt％的氯化镁溶液中进行凝胶化，除去有机溶剂；将所得微球倒入含水量为50wt％乙醇水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为75微米。氮气吸附测得其BET比表面积为430m²/g。

实施例7

将虾壳用碱液浸泡除去蛋白质，酸液浸泡除去无机盐，得到纯化的甲壳素。将甲壳素在浓度为11.5mol·kg^-1氢氧化钾水溶液中加热40min进行脱乙酰化反应，得到脱乙酰度为70％左右的壳聚糖。预先准备浓度为0.3mol·kg^-1碳酸氢钠—5mol·kg^-1尿素水溶液95g，加入5g壳聚糖，在10℃下搅拌60min，离心脱泡后得到透明的壳聚糖溶液。将司班80加入到1L液体石蜡和石油醚的混合油相中，搅拌至完全溶解作为油相(液体石蜡和石油醚体积比为1：1，油相中含有1％的司班80)。将壳聚糖溶液和油相通过微量泵输送到微流控芯片(芯片中油相通道直径为350微米，水相通道直径为30微米)，形成单分散的液滴；将收集的液滴置于盐含量为20wt％的氯化镁溶液中进行凝胶化，除去有机溶剂；将所得微球倒入含水量为30wt％乙醇水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为42微米。氮气吸附测得其BET比表面积为380m²/g。

实施例8

将蟹壳用碱液浸泡除去蛋白质，酸液浸泡除去无机盐，得到纯化的甲壳素。将甲壳素在浓度为11.0mol·kg^-1氢氧化钾水溶液中加热40min进行脱乙酰化反应，得到脱乙酰度为70％左右的壳聚糖。预先准备浓度为0.3mol·kg^-1碳酸氢钾—5mol·kg^-1尿素水溶液95g，加入5g壳聚糖，在20℃下搅拌120min，离心脱泡后得到透明的壳聚糖溶液。壳聚糖原液和5倍体积比的油相(橄榄油和吐温80，吐温80的浓度为0.5％)，相当于壳聚糖单体1倍摩尔比的原花青素混合后，转速1000rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入含水量为10wt％乙醇水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为20微米。氮气吸附测得其BET比表面积为360m²/g。

实施例9

将虾壳用碱液浸泡除去蛋白质，酸液浸泡除去无机盐，得到纯化的甲壳素。将甲壳素在浓度为12.5mol·kg^-1氢氧化钾水溶液中加热40min进行脱乙酰化反应，得到脱乙酰度为80％左右的壳聚糖。预先准备浓度为0.3mol·kg^-1碳酸氢铵—5mol·kg^-1尿素水溶液95g，加入5g壳聚糖，在10℃下搅拌120min，离心脱泡后得到透明的壳聚糖溶液。该壳聚糖原液和5倍体积比的油相(橄榄油和吐温80，吐温80占比为6％)，相当于壳聚糖单体0.1倍摩尔比的戊二醛混合后，转速1000rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入乙醇进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为30微米。氮气吸附测得其BET比表面积为290m²/g。

实施例10

将虾壳用碱液浸泡除去蛋白质，酸液浸泡除去无机盐，得到纯化的甲壳素。将甲壳素在质量分数为11.0mol·kg^-1氢氧化钾水溶液中加热40min进行脱乙酰化反应，得到脱乙酰度为70％左右的壳聚糖。预先准备浓度为0.3mol·kg^-1碳酸氢镁—5mol·kg^-1尿素水溶液95g，加入5g壳聚糖，在10℃下搅拌120min，离心脱泡后得到透明的壳聚糖溶液。壳聚糖原液和5倍体积比的油相(液体石蜡和司班80，司班80占比为1％)，相当于壳聚糖单体10倍摩尔比的戊二醛混合后混合后，转速1000rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入含水量为70wt％甲醇水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为15微米。氮气吸附测得其BET比表面积为420m²/g。

实施例11

将甲壳素在浓度为10.0mol·kg^-1氢氧化钠水溶液中加热2h进行脱乙酰化反应，得到脱乙酰度为70％左右的壳聚糖。预先准备浓度为0.8mol·kg^-1碳酸氢锂—1mol·kg^-1尿素水溶液94g，加入6g壳聚糖，在0℃下搅拌30min，离心脱泡后得到透明的壳聚糖溶液。壳聚糖原液和5倍体积比的油相(液体石蜡和司班80，司班80占比为0.5％)，相当于壳聚糖单体2倍摩尔比的戊二醛混合后，转速1000rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入含水量为50wt％甲醇水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为10微米。氮气吸附测得其BET比表面积为430m²/g。

实施例12

将甲壳素在浓度为10.0mol·kg^-1氢氧化钾水溶液中加热40min进行脱乙酰化反应，得到脱乙酰度为70％左右的壳聚糖。预先准备浓度为0.8mol·kg^-1碳酸氢钠—1mol·kg^-1尿素水溶液94g，加入6g壳聚糖，在10℃下搅拌100min，离心脱泡后得到透明的壳聚糖溶液。壳聚糖原液和5倍体积比的油相(橄榄油和司班80，司班80的浓度为0.5％)混合后，转速1000rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入含水量为30wt％甲醇水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为2微米。氮气吸附测得其BET比表面积为470m²/g。

实施例13

将甲壳素在浓度为11.0mol·kg^-1氢氧化钾水溶液中加热40min进行脱乙酰化反应，得到脱乙酰度为70％左右的壳聚糖。预先准备浓度为0.8mol·kg^-1碳酸氢钾—1mol·kg^-1尿素水溶液94g，加入6g壳聚糖，在20℃下搅拌180min，离心脱泡后得到透明的壳聚糖溶液。壳聚糖原液和5倍体积比的油相(橄榄油和司班80，司班80的浓度为0.5％)混合后，转速1000rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入含水量为10wt％甲醇水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为5微米。氮气吸附测得其BET比表面积为460m²/g。

实施例14

将甲壳素在浓度为11.0mol·kg^-1氢氧化钾水溶液中加热40min进行脱乙酰化反应，得到脱乙酰度为70％左右的壳聚糖。预先准备浓度为0.8mol·kg^-1碳酸氢铵—1mol·kg^-1尿素水溶液94g，加入6g壳聚糖，在10℃下搅拌100min，离心脱泡后得到透明的壳聚糖溶液。壳聚糖原液和10倍体积比的油相(橄榄油和吐温80，吐温80占比为1％)混合后，转速1000rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入甲醇进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为40微米。氮气吸附测得其BET比表面积为350m²/g。

实施例15

将甲壳素在浓度为11.0mol·kg^-1氢氧化钾水溶液中加热40min进行脱乙酰化反应，得到脱乙酰度为70％左右的壳聚糖。预先准备浓度为0.8mol·kg^-1碳酸氢镁—1mol·kg^-1尿素水溶液94g，加入6g壳聚糖，在10℃下搅拌100min，离心脱泡后得到透明的壳聚糖溶液。壳聚糖原液和5倍体积比的油相(橄榄油和吐温80，吐温80的浓度为0.5％)混合后，转速1000rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入质量分数40wt％氯化镁水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为20微米。氮气吸附测得其BET比表面积为340m²/g。

实施例16

将甲壳素在浓度为10.0mol·kg^-1氢氧化钠水溶液中加热2h进行脱乙酰化反应，得到脱乙酰度为70％左右的壳聚糖。预先准备浓度为1.2mol·kg^-1碳酸氢锂—4mol·kg^-1尿素水溶液97g，加入3g壳聚糖，在0℃下搅拌60min，离心脱泡后得到透明的壳聚糖溶液。壳聚糖原液和5倍体积比的油相(橄榄油和吐温80，吐温80占比为1％)混合后，转速1000rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入质量分数20wt％氯化钾水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为30微米。氮气吸附测得其BET比表面积为290m²/g。

实施例17

将甲壳素在浓度为11.0mol·kg^-1氢氧化钾水溶液中加热40min进行脱乙酰化反应，得到脱乙酰度为70％左右的壳聚糖。预先准备浓度为1.2mol·kg^-1碳酸氢钠—4mol·kg^-1尿素水溶液97g，加入3g壳聚糖，在10℃下搅拌120min，离心脱泡后得到透明的壳聚糖溶液。壳聚糖原液和5倍体积比的油相(橄榄油和司班80，司班80的浓度为0.5％)混合后，转速1000rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入质量分数10wt％硫酸钠水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为30微米。氮气吸附测得其BET比表面积为320m²/g。

实施例18

将甲壳素在浓度为11.0mol·kg^-1氢氧化钾水溶液中加热40min进行脱乙酰化反应，得到脱乙酰度为70％左右的壳聚糖。预先准备浓度为1.2mol·kg^-1碳酸氢钾—4mol·kg^-1尿素水溶液97g，加入3g壳聚糖，在20℃下搅拌120min，离心脱泡后得到透明的壳聚糖溶液。壳聚糖原液和2.5倍体积比的油相(橄榄油和吐温80，吐温80的浓度为0.5％)混合后，在室温下，转速900rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入质量分数5wt％氯化钙水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为40微米。氮气吸附测得其BET比表面积为350m²/g。

实施例19

将甲壳素在浓度为11.5mol·kg^-1氢氧化钾水溶液中加热40min进行脱乙酰化反应，得到脱乙酰度为70％左右的壳聚糖。预先准备浓度为1.2mol·kg^-1碳酸氢铵—4mol·kg^-1尿素水溶液97g，加入3g壳聚糖，在10℃下搅拌60min，离心脱泡后得到透明的壳聚糖溶液。壳聚糖原液和5倍体积比的油相(橄榄油和司班80，司班80占比为5％)，壳聚糖单体1倍摩尔比的环氧氯丙烷混合后，在室温下，转速900rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入质量分数20wt％醋酸水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为60微米。氮气吸附测得其BET比表面积为260m²/g。

实施例20

将甲壳素在浓度为12.5mol·kg^-1氢氧化钾水溶液中加热40min进行脱乙酰化反应，得到脱乙酰度为70％左右的壳聚糖。预先准备浓度为1.2mol·kg^-1碳酸氢镁—4mol·kg^-1尿素水溶液97g，加入3g壳聚糖，在10℃下搅拌60min，离心脱泡后得到透明的壳聚糖溶液。壳聚糖原液和5倍体积比的油相(橄榄油和吐温80，吐温80的浓度为0.5％)混合后，在室温下，转速900rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入质量分数10wt％硫酸水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为70微米。氮气吸附测得其BET比表面积为360m²/g。

实施例21

将甲壳素在浓度为11.0mol·kg^-1氢氧化钠水溶液中加热2h进行脱乙酰化反应，得到脱乙酰度为70％左右的壳聚糖。预先准备浓度为1.5mol·kg^-1碳酸氢锂—2mol·kg^-1尿素水溶液98g，加入2g壳聚糖，在0℃下搅拌60min，壳聚糖溶解，离心脱泡后得到透明的壳聚糖溶液。壳聚糖原液和100倍体积比的油相(异辛烷和司班80，司班80占比为0.5％)混合后，在室温下，转速900rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入质量分数5wt％磷酸水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为30微米。氮气吸附测得其BET比表面积为250m²/g。

实施例22

将甲壳素在浓度为11.0mol·kg^-1氢氧化钾水溶液中加热90min进行脱乙酰化反应，得到脱乙酰度为80％左右的壳聚糖。预先准备浓度为1.5mol·kg^-1碳酸氢钠—2mol·kg^-1尿素水溶液98g，加入2g壳聚糖，在10℃下搅拌30min，离心脱泡后得到透明的壳聚糖溶液。将壳聚糖原液和100倍体积比的油相(橄榄油和司班80，司班80占比为5％)混合后，在室温下，转速900rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入质量分数10wt％氯化钾—20wt％乙醇水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为120微米。氮气吸附测得其BET比表面积为280m²/g。

实施例23

将甲壳素在浓度为11.0mol·kg^-1氢氧化钾水溶液中加热50min进行脱乙酰化反应，得到脱乙酰度为70％左右的壳聚糖。预先准备浓度为1.5mol·kg^-1碳酸氢钾—2mol·kg^-1尿素水溶液98g，加入2g壳聚糖，在15℃下搅拌200min，离心脱泡后得到透明的壳聚糖溶液。将壳聚糖原液和50倍体积比的油相(橄榄油和司班80，司班80的浓度为0.5％)混合后，在室温下，转速900rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入质量分数10wt％醋酸—60wt％乙醇水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为150微米。氮气吸附测得其BET比表面积为290m²/g。

实施例24

将甲壳素在浓度为11.0mol·kg^-1氢氧化钾水溶液中加热50min进行脱乙酰化反应，得到脱乙酰度为70％左右的壳聚糖。预先准备浓度为1.5mol·kg^-1碳酸氢铵—2mol·kg^-1尿素水溶液98g，加入2g壳聚糖，在5℃下搅拌120min，离心脱泡后得到透明的壳聚糖溶液。将壳聚糖原液和50倍体积比的油相(橄榄油和吐温80，吐温80的浓度为0.5％)混合后，在室温下，转速900rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入质量分数20wt％氯化镁—60wt％乙醇水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为100微米。氮气吸附测得其BET比表面积为360m²/g。

实施例25

将甲壳素在浓度为11.0mol·kg^-1氢氧化钾水溶液中加热50min进行脱乙酰化反应，得到脱乙酰度为70％左右的壳聚糖。预先准备浓度为1.5mol·kg^-1碳酸氢镁—2mol·kg^-1尿素水溶液98g，加入2g壳聚糖，在5℃下搅拌120min，离心脱泡后得到透明的壳聚糖溶液。将壳聚糖原液和10倍体积比的油相(橄榄油和吐温80，吐温80的浓度为0.5％)混合后，在室温下，转速900rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入质量分数20wt％氯化铝—60wt％乙醇水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为20微米。氮气吸附测得其BET比表面积为360m²/g。

实施例26

将甲壳素在浓度为11.0mol·kg^-1氢氧化钾水溶液中加热50min进行脱乙酰化反应，得到脱乙酰度为70％左右的壳聚糖。预先准备浓度为0.3mol·kg^-1碳酸氢锂—0.3mol·kg^-1碳酸氢钠—0.3mol·kg^-1碳酸氢钾—0.3mol·kg^-1碳酸氢铵—0.3mol·kg^-1碳酸氢镁—2mol·kg^-1尿素水溶液98g，加入2g壳聚糖，在5℃下搅拌120min，离心脱泡后得到透明的壳聚糖溶液。将壳聚糖原液和10倍体积比的油相(橄榄油和吐温80，吐温80的浓度为0.5％)混合后，在室温下，转速900rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入含水量为70wt％乙醇水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为40微米。氮气吸附测得其BET比表面积为310m²/g。

实施例27

将将甲壳素在浓度为11.0mol·kg^-1氢氧化钠水溶液中加热1h进行脱乙酰化反应，得到脱乙酰度为70％左右的壳聚糖。预先准备浓度为0.2mol·kg^-1碳酸氢锂—0.3mol·kg^-1硫脲水溶液97g，加入3g壳聚糖，在10℃下搅拌3h，离心脱泡后得到透明的壳聚糖溶液。将壳聚糖原液和5倍体积比的油相(液体石蜡和司班80，司班80占比为0.5％)混合后，在室温下，转速900rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入含水量为50wt％乙醇水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为60微米。氮气吸附测得其BET比表面积为270m²/g。

实施例28

将甲壳素在浓度为11.0mol·kg^-1氢氧化钾水溶液中加热1h进行脱乙酰化反应，得到脱乙酰度为80％左右的壳聚糖。预先准备浓度为0.2mol·kg^-1碳酸氢钠—0.3mol·kg^-1硫脲水溶液97g，加入3g壳聚糖，在20℃下搅拌60min，离心脱泡后得到透明的壳聚糖溶液。将壳聚糖原液和5倍体积比的油相(橄榄油和司班80，司班80占比为5％)混合后，在室温下，转速900rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入含水量为30wt％乙醇水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为30微米。氮气吸附测得其BET比表面积为320m²/g。

实施例29

将甲壳素在浓度为11.0mol·kg^-1氢氧化钾水溶液中加热2h进行脱乙酰化反应，得到脱乙酰度为60％左右的壳聚糖。预先准备浓度为0.2mol·kg^-1碳酸氢钾—0.3mol·kg^-1硫脲水溶液97g，加入3g壳聚糖，在30℃下搅拌180min，离心脱泡后得到透明的壳聚糖溶液。将壳聚糖原液和5倍体积比的油相(异辛烷和司班80，司班80占比为0.5％)混合后，在室温下，转速900rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入含水量为10wt％乙醇水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为100微米。氮气吸附测得其BET比表面积为230m²/g。

实施例30

将甲壳素在浓度为10.0mol·kg^-1氢氧化钠水溶液中加热2h进行脱乙酰化反应，得到脱乙酰度为70％左右的壳聚糖。预先准备浓度为0.4mol·kg^-1碳酸氢铵—0.3mol·kg^-1硫脲水溶液97g，加入3g壳聚糖，在0℃下搅拌60min，离心脱泡后得到透明的壳聚糖溶液。壳聚糖原液和5倍体积比的油相(橄榄油和司班80，司班80占比为5％)混合后，在室温下，转速900rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入乙醇进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为30微米。氮气吸附测得其BET比表面积为250m²/g。

实施例31

将甲壳素在浓度为12.5mol·kg^-1氢氧化钠水溶液中加热2h进行脱乙酰化反应，得到脱乙酰度为70％左右的壳聚糖。预先准备浓度为0.4mol·kg^-1碳酸氢镁—0.3mol·kg^-1硫脲水溶液97g，加入3g壳聚糖，在0℃下搅拌60min，离心脱泡后得到透明的壳聚糖溶液。壳聚糖原液和5倍体积比的油相(橄榄油和司班80，司班80占比为5％)混合后，在室温下，转速900rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入含水量为70wt％甲醇水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为30微米。氮气吸附测得其BET比表面积为290m²/g。

实施例32

将甲壳素在浓度为10.0mol·kg^-1氢氧化钠水溶液中加热2h进行脱乙酰化反应，得到脱乙酰度为70％左右的壳聚糖。预先准备浓度为0.3mol·kg^-1碳酸氢锂—1.2mol·kg^-1硫脲水溶液95g，加入5g壳聚糖，在0℃下搅拌60min，离心脱泡后得到透明的壳聚糖溶液。壳聚糖原液和5倍体积比的油相(橄榄油和司班80，司班80占比为4％)混合后，在室温下，转速900rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入含水量为50wt％甲醇水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为30微米。氮气吸附测得其BET比表面积为320m²/g。

实施例33

将甲壳素在浓度为11.0mol·kg^-1氢氧化钾水溶液中加热40min进行脱乙酰化反应，得到脱乙酰度为70％左右的壳聚糖。预先准备浓度为0.3mol·kg^-1碳酸氢钠—1.2mol·kg^-1硫脲水溶液95g，加入5g壳聚糖，在10℃下搅拌60min，离心脱泡后得到透明的壳聚糖溶液。将壳聚糖原液和2倍体积比的油相(橄榄油和司班80，司班80占比为5％)混合后，在室温下，转速900rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入含水量为30wt％甲醇水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为30微米。氮气吸附测得其BET比表面积为250m²/g。

实施例34

将甲壳素在浓度为11.0mol·kg^-1氢氧化钾水溶液中加热40min进行脱乙酰化反应，得到脱乙酰度为70％左右的壳聚糖。预先准备浓度为0.3mol·kg^-1碳酸氢钾—1.2mol·kg^-1硫脲水溶液95g，加入5g壳聚糖，在20℃下搅拌120min，离心脱泡后得到透明的壳聚糖溶液。壳聚糖原液和2倍体积比的油相(橄榄油和司班80，司班80的浓度为0.5％)混合后，在室温下，转速900rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入含水量为10wt％甲醇水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为30微米。氮气吸附测得其BET比表面积为250m²/g。

实施例35

将甲壳素在浓度为11.0mol·kg^-1氢氧化钾水溶液中加热40min进行脱乙酰化反应，得到脱乙酰度为70％左右的壳聚糖。预先准备浓度为0.3mol·kg^-1碳酸氢铵—1.2mol·kg^-1硫脲水溶液95g，加入5g壳聚糖，在10℃下搅拌120min，离心脱泡后得到透明的壳聚糖溶液。壳聚糖原液和5倍体积比的油相(橄榄油和司班80，司班80占比为5％)混合后，在室温下，转速900rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入质量分数为10wt％氯化钾水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为30微米。氮气吸附测得其BET比表面积为320m²/g。

实施例36

将甲壳素在浓度为12.5mol·kg^-1氢氧化钾水溶液中加热35min进行脱乙酰化反应，得到脱乙酰度为70％左右的壳聚糖。预先准备浓度为0.3mol·kg^-1碳酸氢镁—1.2mol·kg^-1硫脲水溶液95g，加入5g壳聚糖，在10℃下搅拌120min，离心脱泡后得到透明的壳聚糖溶液。壳聚糖原液和1倍体积比的油相(橄榄油和司班80，司班80占比为5％)混合后，在室温下，转速900rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入质量分数为20wt％醋酸钾水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为30微米。氮气吸附测得其BET比表面积为250m²/g。

实施例37

将甲壳素在浓度为12.5mol·kg^-1氢氧化钠水溶液中加热2h进行脱乙酰化反应，得到脱乙酰度为70％左右的壳聚糖。预先准备浓度为0.8mol·kg^-1碳酸氢锂—0.4mol·kg^-1硫脲水溶液94g，加入6g壳聚糖，在0℃下搅拌30min，离心脱泡后得到透明的壳聚糖溶液。壳聚糖原液和5倍体积比的油相(橄榄油和司班80，司班80的浓度为0.5％)混合后，在室温下，转速900rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入质量分数为10wt％柠檬酸钠水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为10微米。氮气吸附测得其BET比表面积为400m²/g。

实施例38

将甲壳素在浓度为11.0mol·kg^-1氢氧化钾水溶液中加热40min进行脱乙酰化反应，得到脱乙酰度为70％左右的壳聚糖。预先准备浓度为0.8mol·kg^-1碳酸氢钠—0.4mol·kg^-1硫脲水溶液94g，加入6g壳聚糖，在10℃下搅拌100min，离心脱泡后得到透明的壳聚糖溶液。壳聚糖原液和1倍体积比的油相(橄榄油和司班80，司班80占比为4％)混合后，在室温下，转速900rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入质量分数为10wt％氯化钾—30wt％乙醇水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为30微米。氮气吸附测得其BET比表面积为250m²/g。

实施例39

将甲壳素在浓度为11.0mol·kg^-1氢氧化钾水溶液中加热40min进行脱乙酰化反应，得到脱乙酰度为70％左右的壳聚糖。预先准备浓度为0.8mol·kg^-1碳酸氢钾—0.4mol·kg^-1硫脲水溶液94g，加入6g壳聚糖，在20℃下搅拌180min，离心脱泡后得到透明的壳聚糖溶液。壳聚糖原液和5倍体积比的油相(橄榄油和司班80，司班80占比为4％)混合后，在室温下，转速900rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入质量分数为10wt％氯化镁—40wt％乙醇水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为30微米。氮气吸附测得其BET比表面积为320m²/g。

实施例40

将甲壳素在浓度为11.0mol·kg^-1氢氧化钾水溶液中加热40min进行脱乙酰化反应，得到脱乙酰度为70％左右的壳聚糖。预先准备浓度为0.8mol·kg^-1碳酸氢铵—0.4mol·kg^-1硫脲水溶液94g，加入6g壳聚糖，在10℃下搅拌100min，离心脱泡后得到透明的壳聚糖溶液。壳聚糖原液和5倍体积比的油相(橄榄油和司班80，司班80占比为5％)混合后，在室温下，转速900rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入质量分数为10wt％氯化铝—40wt％乙醇水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为30微米。氮气吸附测得其BET比表面积为250m²/g。

实施例41

将甲壳素在浓度为11.0mol·kg^-1氢氧化钾水溶液中加热40min进行脱乙酰化反应，得到脱乙酰度为70％左右的壳聚糖。预先准备浓度为0.8mol·kg^-1碳酸氢镁—0.4mol·kg^-1硫脲水溶液94g，加入6g壳聚糖，在10℃下搅拌100min，离心脱泡后得到透明的壳聚糖溶液。壳聚糖原液和5倍体积比的油相(橄榄油和司班80，司班80占比为5％)混合后，在室温下，转速900rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入质量分数为10wt％氯化钙—40wt％乙醇水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为30微米。氮气吸附测得其BET比表面积为250m²/g。

实施例42

将甲壳素在浓度为10.0mol·kg^-1氢氧化钠水溶液中加热2h进行脱乙酰化反应，得到脱乙酰度为70％左右的壳聚糖。预先准备浓度为1.2mol·kg^-1碳酸氢锂—1mol·kg^-1硫脲水溶液97g，加入3g壳聚糖，在0℃下搅拌60min，离心脱泡后得到透明的壳聚糖溶液。壳聚糖原液和5倍体积比的油相(橄榄油和司班80，司班80占比为5％)混合后，在室温下，转速900rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入质量分数为10wt％氯化镁—40wt％甲醇水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为30微米。氮气吸附测得其BET比表面积为320m²/g。

实施例43

将甲壳素在浓度为11.0mol·kg^-1氢氧化钾水溶液中加热40min进行脱乙酰化反应，得到脱乙酰度为70％左右的壳聚糖。预先准备浓度为1.2mol·kg^-1碳酸氢钠—1mol·kg^-1硫脲水溶液97g，加入3g壳聚糖，在10℃下搅拌120min，离心脱泡后得到透明的壳聚糖溶液。壳聚糖原液和5倍体积比的油相(橄榄油和司班80，司班80占比为5％)混合后，在室温下，转速900rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入质量分数为5wt％氯化铝—40wt％甲醇水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为10微米。氮气吸附测得其BET比表面积为340m²/g。

实施例44

将甲壳素在浓度为11.5mol·kg^-1氢氧化钾水溶液中加热40min进行脱乙酰化反应，得到脱乙酰度为70％左右的壳聚糖。预先准备浓度为1.2mol·kg^-1碳酸氢钾—1mol·kg^-1硫脲水溶液97g，加入3g壳聚糖，在20℃下搅拌120min，离心脱泡后得到透明的壳聚糖溶液。壳聚糖原液和5倍体积比的油相(橄榄油和司班80，司班80占比为5％)混合后，在室温下，转速900rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入含水量为70wt％乙醇水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为30微米。氮气吸附测得其BET比表面积为250m²/g。

实施例45

将甲壳素在浓度为11.5mol·kg^-1氢氧化钾水溶液中加热40min进行脱乙酰化反应，得到脱乙酰度为70％左右的壳聚糖。预先准备浓度为1.2mol·kg^-1碳酸氢铵—1mol·kg^-1硫脲水溶液97g，加入3g壳聚糖，在20℃下搅拌60min，离心脱泡后得到透明的壳聚糖溶液。壳聚糖原液和5倍体积比的油相(橄榄油和司班80，司班80占比为5％)混合后，在室温下，转速900rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入含水量为50wt％乙醇水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为30微米。氮气吸附测得其BET比表面积为320m²/g。

实施例46

将甲壳素在浓度为11.0mol·kg^-1氢氧化钾水溶液中加热40min进行脱乙酰化反应，得到脱乙酰度为70％左右的壳聚糖。预先准备浓度为1.2mol·kg^-1碳酸氢镁—1mol·kg^-1硫脲水溶液97g，加入3g壳聚糖，在10℃下搅拌60min，离心脱泡后得到透明的壳聚糖溶液。壳聚糖原液和5倍体积比的油相(橄榄油和司班80，司班80占比为5％)混合后，在室温下，转速900rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入含水量为30wt％乙醇水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为30微米。氮气吸附测得其BET比表面积为250m²/g。

实施例47

将甲壳素在浓度为12.5mol·kg^-1氢氧化钠水溶液中加热2h进行脱乙酰化反应，得到脱乙酰度为70％左右的壳聚糖。预先准备浓度为1.5mol·kg^-1碳酸氢锂—0.4mol·kg^-1硫脲水溶液98g，加入2g壳聚糖，在0℃下搅拌60min，壳聚糖溶解，离心脱泡后得到透明的壳聚糖溶液。壳聚糖原液和5倍体积比的油相(橄榄油和司班80，司班80占比为5％)混合后，在室温下，转速900rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入含水量为20wt％乙醇水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为10微米。氮气吸附测得其BET比表面积为350m²/g。

实施例48

将甲壳素在浓度为11.0mol·kg^-1氢氧化钾水溶液中加热90min进行脱乙酰化反应，得到脱乙酰度为80％左右的壳聚糖。预先准备浓度为1.5mol·kg^-1碳酸氢钠—0.4mol·kg^-1硫脲水溶液98g，加入2g壳聚糖，在10℃下搅拌30min，离心脱泡后得到透明的壳聚糖溶液。壳聚糖原液和5倍体积比的油相(橄榄油和司班80，司班80占比为5％)混合后，在室温下，转速900rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入含水量为10wt％乙醇水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为30微米。氮气吸附测得其BET比表面积为320m²/g。

实施例49

将甲壳素在浓度为10.0mol·kg^-1氢氧化钾水溶液中加热50min进行脱乙酰化反应，得到脱乙酰度为70％左右的壳聚糖。预先准备浓度为1.5mol·kg^-1碳酸氢钾—0.4mol·kg^-1硫脲水溶液98g，加入2g壳聚糖，在15℃下搅拌200min，离心脱泡后得到透明的壳聚糖溶液。壳聚糖原液和5倍体积比的油相(橄榄油和司班80，司班80占比为6％)混合后，在室温下，转速900rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入含水量为70wt％甲醇水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为30微米。氮气吸附测得其BET比表面积为320m²/g。

实施例50

将甲壳素在浓度为11.0mol·kg^-1氢氧化钾水溶液中加热50min进行脱乙酰化反应，得到脱乙酰度为70％左右的壳聚糖。预先准备浓度为1.5mol·kg^-1碳酸氢铵—0.4mol·kg^-1硫脲水溶液98g，加入2g壳聚糖，在5℃下搅拌120min，离心脱泡后得到透明的壳聚糖溶液。壳聚糖原液和5倍体积比的油相(橄榄油和司班80，司班80占比为5％)混合后，在室温下，转速900rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入含水量为50wt％甲醇水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为30微米。氮气吸附测得其BET比表面积为260m²/g。

实施例51

将甲壳素在浓度为11.5mol·kg^-1氢氧化钾水溶液中加热50min进行脱乙酰化反应，得到脱乙酰度为70％左右的壳聚糖。预先准备浓度为0.8mol·kg^-1碳酸氢铵—1mol·kg^-1尿素—0.4mol·kg^-1硫脲水溶液98g，加入2g壳聚糖，在5℃下搅拌120min。壳聚糖原液和5倍体积比的油相(橄榄油和司班80，司班80占比为5％)混合后，在室温下，转速900rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入含水量为30wt％甲醇水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为30微米。氮气吸附测得其BET比表面积为310m²/g。

实施例52

将购买的2g分析纯壳聚糖溶解在98g浓度为0.1mol·kg^-1醋酸—0.3mol·kg^-1尿素的酸性水溶液中，加入等摩尔比的氢氧化钠进行中和后，壳聚糖析出，继续加入碳酸氢钠使其终浓度为0.3mol·kg^-1碳酸氢钠，在10℃下搅拌10min得到壳聚糖溶液。壳聚糖原液和5倍体积比的油相(橄榄油和司班80，司班80占比为5％)混合后，在室温下，转速900rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入含水量为10wt％甲醇水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为30微米。氮气吸附测得其BET比表面积为280m²/g。

实施例53

将购买的3g分析纯壳聚糖溶解在97g浓度为0.5mol·kg^-1醋酸—1.0mol·kg^-1尿素的酸性水溶液中，加入等摩尔比的碳酸钠进行中和后，壳聚糖析出，继续加入碳酸氢钠使其终浓度为1.2mol·kg^-1碳酸氢钠，在15℃下搅拌30min得到壳聚糖溶液。壳聚糖原液和5倍体积比的油相(橄榄油和司班80，司班80占比为5％)混合后，在室温下，转速900rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入含水量为70wt％乙醇水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为30微米。氮气吸附测得其BET比表面积为270m²/g。

实施例54

将购买的3g分析纯壳聚糖溶解在97g浓度为1.0mol·kg^-1醋酸—4.0mol·kg^-1尿素的酸性水溶液中，加入等摩尔比的碳酸氢钾进行中和后，壳聚糖析出，继续加入碳酸氢钠使其终浓度为1.0mol·kg^-1碳酸氢钠，在10℃下搅拌10min得到壳聚糖溶液。壳聚糖原液和5倍体积比的油相(橄榄油和司班80，司班80占比为5％)混合后，在室温下，转速900rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入含水量为50wt％乙醇水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为10微米。氮气吸附测得其BET比表面积为350m²/g。

实施例55

将购买的2g分析纯壳聚糖溶解在98g浓度为0.1mol·kg^-1盐酸—5.0mol·kg^-1尿素的酸性水溶液中，加入等摩尔比的碳酸铵进行中和后，壳聚糖析出，继续加入碳酸氢钾使其终浓度为0.3mol·kg^-1碳酸氢钾，在5℃下搅拌10min得到壳聚糖溶液。壳聚糖原液和5倍体积比的油相(橄榄油和司班80，司班80占比为5％)混合后，在室温下，转速900rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入含水量为30wt％乙醇水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为30微米。氮气吸附测得其BET比表面积为290m²/g。

实施例56

将购买的3g分析纯壳聚糖溶解在97g浓度为0.5mol·kg^-1盐酸—1.0mol·kg^-1尿素的酸性水溶液中，加入等摩尔比的碳酸氢镁进行中和后，壳聚糖析出，继续加入碳酸氢钾使其终浓度为1.2mol·kg^-1碳酸氢钾，在0℃下搅拌10min得到壳聚糖溶液。壳聚糖原液和5倍体积比的油相(橄榄油和司班80，司班80占比为5％)混合后，在室温下，转速900rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入含水量为10wt％乙醇水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为30微米。氮气吸附测得其BET比表面积为310m²/g。

实施例57

将购买的2g分析纯壳聚糖溶解在98g浓度为1.0mol·kg^-1盐酸—4.0mol·kg^-1尿素的酸性水溶液中，加入等摩尔比的氨水进行中和后，壳聚糖析出，继续加入碳酸氢镁使其终浓度为0.2mol·kg^-1碳酸氢镁，在10℃下搅拌10min得到壳聚糖溶液。壳聚糖原液和5倍体积比的油相(橄榄油和司班80，司班80占比为5％)混合后，在室温下，转速900rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入质量分数为30wt％硝酸钾水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为30微米。氮气吸附测得其BET比表面积为320m²/g。

实施例58

将购买的2g分析纯壳聚糖溶解在98g浓度为0.1mol·kg^-1柠檬酸—0.3mol·kg^-1尿素的酸性水溶液中，加入等摩尔比的氢氧化钠进行中和后，壳聚糖析出，继续加入碳酸氢钾使其终浓度为1.5mol·kg^-1碳酸氢钾，在5℃下搅拌10min得到壳聚糖溶液。壳聚糖原液和5倍体积比的油相(橄榄油和司班80，司班80占比为5％)混合后，在室温下，转速900rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入含水量为15wt％乙醇水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为30微米。氮气吸附测得其BET比表面积为290m²/g。

实施例59

将购买的3g分析纯壳聚糖溶解在97g浓度为0.5mol·kg^-1柠檬酸—1.0mol·kg^-1尿素的酸性水溶液中，加入等摩尔比的氢氧化钾进行中和后，壳聚糖析出，继续加入碳酸氢铵使其终浓度为1.2mol·kg^-1碳酸氢铵，在0℃下搅拌10min得到壳聚糖溶液。壳聚糖原液和5倍体积比的油相(橄榄油和司班80，司班80占比为5％)混合后，在室温下，转速900rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入质量分数为15wt％溴化钾水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为30微米。氮气吸附测得其BET比表面积为320m²/g。

实施例60

将购买的3g分析纯壳聚糖溶解在98g浓度为1.0mol·kg^-1柠檬酸—4.0mol·kg^-1尿素的酸性水溶液中，加入等摩尔比的氢氧化钠进行中和后，壳聚糖析出，继续加入碳酸氢镁使其终浓度为0.2mol·kg^-1碳酸氢镁，在10℃下搅拌10min得到壳聚糖溶液。壳聚糖原液和5倍体积比的油相(橄榄油和司班80，司班80占比为5％)混合后，在室温下，转速900rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入含水量为20wt％乙醇水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为10微米。氮气吸附测得其BET比表面积为340m²/g。

实施例61

将甲壳素在浓度为10.0mol·kg^-1氢氧化钾水溶液中加热50min进行脱乙酰化反应，得到脱乙酰度为70％左右的壳聚糖。预先准备浓度为0.6mol·kg^-1碳酸钠—2mol·kg^-1尿素水溶液98g，加入2g壳聚糖，并通入二氧化碳调节溶液pH为10.0，在5℃下搅拌30min，离心脱泡后得到透明的壳聚糖溶液。壳聚糖原液和5倍体积比的油相(橄榄油和司班80，司班80占比为5％)混合后，在室温下，转速900rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入质量分数为10wt％氯化钠—10wt％甲醇水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为30微米。氮气吸附测得其BET比表面积为280m²/g。

实施例62

将甲壳素在浓度为11.0mol·kg^-1氢氧化钾水溶液中加热50min进行脱乙酰化反应，得到脱乙酰度为70％左右的壳聚糖。预先准备浓度为0.15mol·kg^-1碳酸铵—4mol·kg^-1尿素水溶液98g，加入2g壳聚糖，并通入二氧化碳调节溶液pH为9.1，在5℃下搅拌60min，离心脱泡后得到透明的壳聚糖溶液。壳聚糖原液和5倍体积比的油相(橄榄油和司班80，司班80占比为10％)混合后，在室温下，转速900rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入含水量为70wt％乙醇水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为10微米。氮气吸附测得其BET比表面积为340m²/g。

实施例63

将甲壳素在浓度为11.0mol·kg^-1氢氧化钾水溶液中加热50min进行脱乙酰化反应，得到脱乙酰度为70％左右的壳聚糖。预先准备浓度为0.3mol·kg^-1氢氧化锂—5mol·kg^-1尿素水溶液98g，加入2g壳聚糖，并通入二氧化碳调节溶液pH为7.0，在5℃下搅拌60min，离心脱泡后得到透明的壳聚糖溶液。壳聚糖原液和2倍体积比的油相(橄榄油和司班80，司班80占比为5％)混合后，在室温下，转速900rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入质量分数为5wt％醋酸钾—25wt％乙醇水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为30微米。氮气吸附测得其BET比表面积为290m²/g。

实施例64

将甲壳素在浓度为11.5mol·kg^-1氢氧化钾水溶液中加热50min进行脱乙酰化反应，得到脱乙酰度为70％左右的壳聚糖。预先准备浓度为0.8mol·kg^-1氨水—1mol·kg^-1尿素水溶液98g，加入2g壳聚糖，并通入二氧化碳调节溶液pH为9.2，在5℃下搅拌60min，离心脱泡后得到透明的壳聚糖溶液。壳聚糖原液和5倍体积比的油相(橄榄油和司班80，司班80占比为5％)混合后，在室温下，转速900rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入质量分数为10wt％氯化钠—20wt％乙醇水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为30微米。氮气吸附测得其BET比表面积为320m²/g。

实施例65

将甲壳素在浓度为11mol·kg^-1氢氧化钾水溶液中加热50min进行脱乙酰化反应，得到脱乙酰度为70％左右的壳聚糖。预先准备浓度为0.2mol·kg^-1氢氧化钠—0.3mol·kg^-1尿素水溶液98g，加入2g壳聚糖，并通入二氧化碳调节溶液pH为8.7，在5℃下搅拌60min，离心脱泡后得到透明的壳聚糖溶液。壳聚糖原液和5倍体积比的油相(橄榄油和司班80，司班80占比为5％)混合后，在室温下，转速900rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入质量分数为10wt％氯化钙水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为30微米。氮气吸附测得其BET比表面积为250m²/g。

实施例66

将甲壳素在浓度为11mol·kg^-1氢氧化钾水溶液中加热50min进行脱乙酰化反应，得到脱乙酰度为70％左右的壳聚糖。预先准备浓度为1.5mol·kg^-1氢氧化钾—5mol·kg^-1尿素水溶液98g，加入2g壳聚糖，并通入二氧化碳调节溶液pH为9.0，在5℃下搅拌60min，离心脱泡后得到透明的壳聚糖溶液。壳聚糖原液和15倍体积比的油相(橄榄油和司班80，司班80占比为5％)混合后，在室温下，转速900rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入质量分数为5wt％硫酸钾水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为30微米。氮气吸附测得其BET比表面积为320m²/g。

实施例67

将甲壳素在浓度为10mol·kg^-1氢氧化钾水溶液中加热50min进行脱乙酰化反应，得到脱乙酰度为70％左右的壳聚糖。预先准备浓度为0.75mol·kg^-1碳酸钾—0.3mol·kg^-1硫脲水溶液98g，加入2g壳聚糖，并通入二氧化碳调节溶液pH为9.0，在35℃下搅拌12h，离心脱泡后得到透明的壳聚糖溶液。壳聚糖原液和50倍体积比的油相(橄榄油和司班80，司班80占比为5％)混合后，在室温下，转速900rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入质量分数为10wt％醋酸钠水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为30微米。氮气吸附测得其BET比表面积为285m²/g。

实施例68

将甲壳素在浓度为12.5mol·kg^-1氢氧化钾水溶液中加热50min进行脱乙酰化反应，得到脱乙酰度为70％左右的壳聚糖。预先准备浓度为0.1mol·kg^-1碳酸钠—1.2mol·kg^-1硫脲水溶液98g，加入2g壳聚糖，并通入二氧化碳调节溶液pH为9.0，在5℃下搅拌60min，离心脱泡后得到透明的壳聚糖溶液。壳聚糖原液和100倍体积比的油相(橄榄油和司班80，司班80占比为4％)混合后，在室温下，转速300rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入甲醇中进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为200微米。氮气吸附测得其BET比表面积为320m²/g。

实施例69

预先准备浓度为10mol·kg^-1的氢氧化钠水溶液，加入4g甲壳素，将混合物加热90分钟发生脱乙酰化反应，脱乙酰度为75％左右，将混合物冷却至室温，通过过滤、压榨的方式除去多余的氢氧化钠水溶液，加入水和一定的尿素，调节氢氧化钠溶液的浓度为0.2mol·kg^-1尿素的浓度为2mol·kg^-1，向碱液中通入二氧化碳调节溶液pH到10.0，在10℃下搅拌60min，离心脱泡后，得到透明的壳聚糖溶液。壳聚糖原液和10倍体积比的油相(橄榄油和司班80，司班80占比为5％)混合后，在室温下，转速900rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入含水量为10wt％甲醇水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为30微米。氮气吸附测得其BET比表面积为360m²/g。

实施例70

预先准备浓度为12.5mol·kg^-1的氢氧化钠水溶液，加入4g甲壳素，将混合物加热90分钟发生脱乙酰化反应，脱乙酰度为80％左右，将混合物冷却至室温，通过过滤、压榨的方式除去多余的氢氧化钠水溶液，加入水和一定的尿素，调节氢氧化钠溶液的浓度为0.3mol·kg^-1尿素的浓度为2mol·kg^-1，向碱液中通入二氧化碳调节溶液pH到9.0，在10℃下搅拌60min，离心脱泡后，得到透明的壳聚糖溶液。壳聚糖原液和5倍体积比的油相(橄榄油和司班80，司班80占比为5％)混合后，在室温下，转速900rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入含水量为30wt％甲醇水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为70微米。氮气吸附测得其BET比表面积为290m²/g。

实施例71

预先准备浓度为10mol·kg^-1的氢氧化钾水溶液，加入4g甲壳素，将混合物加热90分钟发生脱乙酰化反应，脱乙酰度为75％左右，将混合物冷却至室温，通过过滤、压榨的方式除去多余的氢氧化钾水溶液，加入水和一定的尿素，调节氢氧化钾溶液的浓度为0.8mol·kg^-1尿素的浓度为5mol·kg^-1，向碱液中通入二氧化碳调节溶液pH到7.0，在10℃下搅拌60min，离心脱泡后，得到透明的壳聚糖溶液。壳聚糖原液和4倍体积比的油相(橄榄油和吐温80，司班80的浓度为10％)混合后，在室温下，转速900rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入含水量为50wt％甲醇水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为100微米。氮气吸附测得其BET比表面积为320m²/g。

实施例72

预先准备浓度为12.5mol·kg^-1的氢氧化钾水溶液，加入4g甲壳素，将混合物加热90分钟发生脱乙酰化反应，脱乙酰度为80％左右，将混合物冷却至室温，通过过滤、压榨的方式除去多余的氢氧化钾水溶液，加入水和一定的尿素，调节氢氧化钾溶液的浓度为0.8mol·kg^-1尿素的浓度为4mol·kg^-1，向碱液中通入二氧化碳调节溶液pH到9，在10℃下搅拌60min，离心脱泡后，得到透明的壳聚糖溶液。壳聚糖原液和5倍体积比的油相(橄榄油和司班80，司班80占比为5％)混合后，在室温下，转速900rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入含水量为70wt％甲醇水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为70微米。氮气吸附测得其BET比表面积为260m²/g。

实施例73

预先准备浓度为12.5mol·kg^-1的氢氧化钾水溶液，加入4g甲壳素，将混合物加热90分钟发生脱乙酰化反应，脱乙酰度为80％左右，将混合物冷却至室温，通过过滤、压榨的方式除去多余的氢氧化钾水溶液，加入水和一定的尿素，调节氢氧化钾溶液的浓度为1.5mol·kg^-1尿素的浓度为4mol·kg^-1，向碱液中通入二氧化碳调节溶液pH到9，在10℃下搅拌60min，离心脱泡后，得到透明的壳聚糖溶液。壳聚糖原液和100倍体积比的油相(橄榄油和司班80，司班80占比为5％)混合后，在室温下，转速900rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入乙醇进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为100微米。氮气吸附测得其BET比表面积为250m²/g。

实施例74

预先准备浓度为12.5mol·kg^-1的氢氧化钾水溶液，加入4g甲壳素，将混合物加热90分钟发生脱乙酰化反应，脱乙酰度为80％左右，将混合物冷却至室温，通过过滤、压榨的方式除去多余的氢氧化钾水溶液，加入水和一定的尿素，调节氢氧化钾溶液的浓度为1.2mol·kg^-1尿素的浓度为4mol·kg^-1，向碱液中通入二氧化碳调节溶液pH到9.0，在10℃下搅拌60min，离心脱泡后，得到透明的壳聚糖溶液。向壳聚糖溶液中加入质量分数为1％的海藻酸钠，搅拌溶解，离心脱泡后得到壳聚糖/海藻酸钠溶液。将壳聚糖/海藻酸钠溶液和10倍体积比的油相(橄榄油和司班80，司班80占比为10％)混合后，在室温下，转速900rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入含水量为10wt％乙醇水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖/海藻酸钠微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为30微米。氮气吸附测得其BET比表面积为250m²/g。

实施例75

将甲壳素在浓度为11.0mol·kg^-1氢氧化钾水溶液中加热40min进行脱乙酰化反应，得到脱乙酰度为70％左右的壳聚糖。预先准备浓度为1.2mol·kg^-1碳酸氢钾—4mol·kg^-1尿素水溶液97g，加入0.5g氧化石墨烯，超声分散后，加入2.5g壳聚糖，在20℃下搅拌120min，离心脱泡后得到透明的壳聚糖/氧化石墨烯溶液。壳聚糖/氧化石墨烯原液和2.5倍体积比的油相(橄榄油和吐温80，吐温80的浓度为0.5％)混合后，在室温下，转速900rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入含水量为30wt％乙醇水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖/氧化石墨烯微球。用扫描电镜观察壳聚糖微球的形貌，经过统计微球的直径，其平均尺寸为40微米。氮气吸附测得其BET比表面积为350m²/g。吸附实验表明壳聚糖/氧化石墨烯微球对四环素有很好的效果，每1g壳聚糖/氧化石墨烯微球可以吸附400mg四环素。

实施例76

将甲壳素在浓度为11.0mol·kg^-1氢氧化钾水溶液中加热40min进行脱乙酰化反应，得到脱乙酰度为70％左右的壳聚糖。预先准备浓度为1.2mol·kg^-1碳酸氢钾—4mol·kg^-1尿素水溶液97g，加入0.5g氧化石墨烯，超声分散后，加入2.5g壳聚糖，在20℃下搅拌120min，离心脱泡后得到透明的壳聚糖/氧化石墨烯溶液。壳聚糖/氧化石墨烯原液和2.5倍体积比的油相(橄榄油和吐温80，吐温80的浓度为0.5％)混合后，在室温下，转速900rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入含水量为50wt％乙醇水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖/氧化石墨烯微球。将得到的壳聚糖/氧化石墨烯微球从室温以10℃/min加热到1000℃，氮气作为保护气体，得到氮元素掺杂碳气凝胶微球。由氮气吸附-解吸附实验得到碳气凝胶的比表面积为1089m²/g。

实施例77

将甲壳素在浓度为11.0mol·kg^-1氢氧化钾水溶液中加热40min进行脱乙酰化反应，得到脱乙酰度为70％左右的壳聚糖。预先准备浓度为1.2mol·kg^-1碳酸氢钾—4mol·kg^-1尿素水溶液97g，加入3g壳聚糖，在20℃下搅拌120min，离心脱泡后得到透明的壳聚糖溶液。壳聚糖溶液和2倍体积比的油相(橄榄油和司班80，司班80的浓度为0.5％)混合后，在室温下，转速900rpm搅拌2h后形成微球。将所得微球倒入含水量为70wt％乙醇水溶液进行再生，离心，取沉淀物依次用石油醚、丙酮、乙醇、丙酮和水洗涤后冷冻干燥，得到壳聚糖微球。将得到的壳聚糖微球从室温以10℃/min加热到1000℃，氮气作为保护气体，得到氮元素掺杂碳气凝胶微球。由氮气吸附-解吸附实验得到碳气凝胶的比表面积为1179m²/g。