阅读说明：本技术 甲酰胺晶体 (Formamide crystal ) 是由 刘培岩 左保燕 马建佳 陶秀梅 陈鹏 于 2019-09-30 设计创作，主要内容包括：本发明涉及1-(2,4-二氯苄基)-N-(2,6-二氟苯基)-1H-吲哚-3-甲酰胺晶型C以及制备和表征这些晶型的方法、含有这些多晶型物的组合物以及这些组合物的用途。本发明的药物晶型克服了以其它晶型存在的式I化合物由于引湿性等原因导致药物不稳定的问题,可局部给药、皮肤(皮内)给药或透皮给药于皮肤或粘膜。<Image he="697" wi="462" file="DDA0002223933420000011.GIF" imgContent="drawing" imgFormat="GIF" orientation="portrait" inline="no"></Image>(The present invention relates to 1- (2, 4-dichlorobenzyl) -N- (2, 6-difluorophenyl) -1H-indole-3-carboxamide form C and methods of preparing and characterizing these forms, compositions containing these polymorphs, and uses of these compositions. The medicine crystal form overcomes the problem that the compound of the formula I existing in other crystal forms causes unstable medicines due to hygroscopicity and the like, and can be locally administered, dermally (intracutaneously) administered or transdermally administered to skin or mucous membranes.)

甲酰胺晶体

技术领域

本发明涉及了一种式(I)的化合物1-(2,4-二氯苄基)-N-(2,6-二氟苯基)-1H-吲哚-3-甲酰胺晶型C以及制备和表征这些晶型的方法、含有这些多晶型物的组合物以及这些这些组合物的用途。

背景技术

肥大细胞可通过释放过敏介质导致过敏或者过敏性反应，它还参与有获得性和先天性免疫和自身免疫以及细菌感染免疫。此外研究表明肥大细胞除了与过敏炎症，例如支气管哮喘、过敏性鼻炎和结膜炎、湿疹、角化病等相关之外还与中枢神经系统疾病、一些肿瘤的发生以及代谢紊乱和非过敏导致的炎性疾病有关。炎症是导致糖尿病患者血脂异常、神经病变等并发症的重要因素。所以肥大细胞稳定剂对预防和缓解糖尿病有关的病症有一定的作用。

WO2017/123826描述具有药理性质的肥大细胞稳定剂。其中所公开的肥大细胞稳定剂的一个实例为1-(2,4-二氯苄基)-N-(2,6-二氟苯基)-1H-吲哚-3-甲酰胺。但是1-(2,4-二氯苄基)-N-(2,6-二氟苯基)-1H-吲哚-3-甲酰胺未经重结晶的原料，极其易吸潮，导致原料不稳定。并且，其在制备局部给药制剂中由于溶解性和颗粒均匀度达不到发挥有效剂量的所需浓度，造成难于制成有效局部给药制剂。

发明内容

基于上述现有技术的缺陷，基于药物稳定和局部给药制剂的需求，本发明提供式I化合物1-(2,4-二氯苄基)-N-(2,6-二氟苯基)-1H-吲哚-3-甲酰胺的晶型C为无水晶型，其通过由Cu-Ka放射线辐射得到的粉末X-射线衍射图谱来表征，该图谱包括2θ:7.66,8.27,9.06,13.27,14.34,14.88,15.34,16.57,16.80,21.05,22.21,22.61,23.09,28.77和29.10°位置的主峰，其中，每个峰具有+/-0.2°的误差幅度。

优选，所述的1-(2，4-二氯苄基)-N-(2，6-二氟苯基)-1H-吲哚-3-甲酰胺晶型C，通过TGA/DSC来表征，在该热分析中，晶型C表现出在179.5℃(起始温度)处有一个吸热峰。其中，该温度具有+/-1℃的误差幅度。

本发明进一步提供一种权利要求1所述晶型的制备方法，其特征在于，所述方法包括将A晶型或其他晶型的化合物MCS-01在有机溶剂中，控温析晶2～48h，过滤，干燥，得到化合物MCS-01的晶型C。

优选地，所述的化合物MCS-01晶型C的制备方法，其特征在于有机溶剂包括醇类、乙酸乙酯、乙酸异丙酯、乙腈、丙酮、甲基异丁酮、二氯甲烷、氯仿、甲基叔丁基醚、***、异丙醚、四氢呋喃、2甲基四氢呋喃、1，4-二氧六环、甲苯、正庚烷中的任意一种或其混合溶剂，或有机溶剂与水的混合溶剂，优选乙醇、甲醇、异丙醇、乙酸乙酯、甲基叔丁基醚、丙酮、正庚烷中的任意一种或其混合溶剂，或与水的混合溶剂，尤其优选甲醇、乙醇、异丙醇、乙酸乙酯、甲基叔丁基醚、丙酮、水中的任一种溶剂或其混合溶剂。

优选地，所述的化合物MCS-01晶型C的制备方法，其特征在于任意一种溶剂或其混合溶剂的量按照A晶型或其他晶型的化合物MCS-01重量的10～200倍为标准，优选20～100倍。

更进一步优选地，所述的化合物MCS-01晶型C的制备方法，其特征在于任意一种混合溶剂比例为49/1～1/19，优选19/1～1/9。

更进一步优选地，所述的化合物MCS-01晶型C的制备方法，其特征在于控温温度为-20～50℃，优选-10～30℃。

更进一步优选地，所述的化合物MCS-01晶型C的制备方法，其特征在于搅拌时间为2～48h，优选16～24h。

更进一步优选地，所述的化合物MCS-01晶型C的制备方法，其特征在于干燥温度为10～80℃，优选40～60℃。

本发明还提供所述的1-(2，4-二氯苄基)-N-(2，6-二氟苯基)-1H-吲哚-3-甲酰胺多晶型物在制备用于肥大细胞稳定剂的药物的用途。

进一步地，所述的1-(2，4-二氯苄基)-N-(2，6-二氟苯基)-1H-吲哚-3-甲酰胺多晶型物在制备用于治疗与肥大细胞相关的各种疾病、紊乱或病症的药物的用途。

进一步地，所述的1-(2，4-二氯苄基)-N-(2，6-二氟苯基)-1H-吲哚-3-甲酰胺多晶型物用作肥大细胞稳定剂的药物可用于包括但不限于延迟外周糖尿病神经病变(PN)的发作、逆转或降低有需要的个体获得外周糖尿病神经病变的风险，还可以用于延迟患有糖尿病的个体的伤口的发作、降低其发展的风险或加速其愈合。

进一步地，所述的1-(2，4-二氯苄基)-N-(2，6-二氟苯基)-1H-吲哚-3-甲酰胺多晶型物用于制备预防患有糖尿病的个体中基质金属肽酶9(MMP-9)增加，加速足部溃疡愈合的药物。

本发明提供一种药物组合物，所述药物组合物包含权利要求1-3中任一项所述的晶型以及一种以上药学上可接受的赋形剂。

本发明的有益效果为：

本发明的药物晶型克服了以其它晶型存在的式I化合物由于引湿性等原因导致药物不稳定的问题。

本发明的药物晶型可局部给药、皮肤(皮内)给药或透皮给药于皮肤或粘膜。用于该目的的典型的剂型包括胶体、水凝胶、洗液、溶液、霜剂、软膏、隔离剂、敷料剂、泡沫、薄膜、皮肤贴片、晶片、埋植剂、海绵、纤维、绷带和微乳液。也可使用脂质体。典型的载体包括醇、水、矿物油、液体凡士林、白色凡士林、甘油、聚乙二醇和丙二醇。

附图说明

图1为本发明提供的1-(2，4-二氯苄基)-N-(2，6-二氟苯基)-1H-吲哚-3-甲酰胺无水晶型C的XRPD图谱。

图2为本发明提供的1-(2，4-二氯苄基)-N-(2，6-二氟苯基)-1H-吲哚-3-甲酰胺无水晶型C的TGA/DSC热分析图谱。

图3为本发明提供的1-(2，4-二氯苄基)-N-(2，6-二氟苯基)-1H-吲哚-3-甲酰胺无水晶型C的PLM图。

具体实施方式

实施例1：

10g化合物1-(2，4-二氯苄基)-N-(2，6-二氟苯基)-1H-吲哚-3-甲酰胺加入200mL甲醇，加热至50℃搅拌0.5h，过滤，滤液冷却至5℃保温搅拌析晶18h，过滤，在50℃真空干燥6h，得到8.84g晶型C产品，收率88.4％。

实施例2：

10g化合物1-(2，4-二氯苄基)-N-(2，6-二氟苯基)-1H-吲哚-3-甲酰胺加入600mL乙醇，加热至70℃搅拌0.5h，过滤，滤液冷却至5℃保温搅拌析晶18h，过滤，在50℃真空干燥8h，得到8.82g晶型C产品，收率88.2％。

实施例3：

10g1-(2，4-二氯苄基)-N-(2，6-二氟苯基)-1H-吲哚-3-甲酰胺加入800mL乙醇，加热至70℃搅拌0.5h，过滤，滤液冷却至-10℃保温搅拌析晶16h，过滤，在60℃真空干燥6h，得到8.90g晶型C产品，收率89.0％。

实施例4：

10g1-(2，4-二氯苄基)-N-(2，6-二氟苯基)-1H-吲哚-3-甲酰胺加入800mL乙醇，加热至70℃搅拌0.5h，过滤，滤液冷却至20℃保温搅拌析晶24h，过滤，在60℃真空干燥6h，得到8.74g晶型C产品，收率87.4％。

实施例5：

10g1-(2，4-二氯苄基)-N-(2，6-二氟苯基)-1H-吲哚-3-甲酰胺加入1000mL异丙醇，加热至80℃搅拌0.5h，过滤，滤液冷却至5℃保温搅拌析晶24h，过滤，在60℃真空干燥8h，得到9.02g晶型C产品，收率90.2％。

实施例6：

10g 1-(2，4-二氯苄基)-N-(2，6-二氟苯基)-1H-吲哚-3-甲酰胺加入250mL乙酸乙酯，在70℃搅拌0.5h，过滤，滤液在25℃搅拌24h，过滤，滤饼在50℃真空干燥，得到8.80g晶型C产品，收率88.0％。

实施例7：

10g1-(2，4-二氯苄基)-N-(2，6-二氟苯基)-1H-吲哚-3-甲酰胺加入200mL甲醇，加热至50℃搅拌0.5h，过滤，向滤液滴加10ml水，在25℃保温搅拌析晶24h，过滤，在50℃真空干燥6h，得到8.96g晶型C产品，收率89.6％。

实施例8：

10g1-(2，4-二氯苄基)-N-(2，6-二氟苯基)-1H-吲哚-3-甲酰胺加入600mL乙醇，加热至70℃搅拌0.5h，过滤，向滤液滴加30ml水，在25℃保温搅拌析晶24h，过滤，在50℃真空干燥6h，得到8.93g晶型C产品，收率89.3％。

实施例9：

10g 1-(2，4-二氯苄基)-N-(2，6-二氟苯基)-1H-吲哚-3-甲酰胺加入200mL乙酸乙酯，在70℃搅拌0.5h，过滤，向滤液滴加200ml正庚烷，滤液在25℃搅拌24h，过滤，滤饼在60℃真空干燥，得到8.79g晶型C产品，收率87.9％。

实施例10：

10g1-(2，4-二氯苄基)-N-(2，6-二氟苯基)-1H-吲哚-3-甲酰胺混悬在在200mL甲醇，在60℃加热溶解0.5h，过滤，向滤液滴加甲基叔丁基醚800ml，在室温条件下搅拌48h，过滤，滤饼在60℃真空干燥，得到9.16g晶型C产品，收率91.6％。

实施例11：

10g1-(2，4-二氯苄基)-N-(2，6-二氟苯基)-1H-吲哚-3-甲酰胺悬在在200mL丙酮，在60℃加热溶解0.5h，过滤，向滤液滴加甲基叔丁基醚800ml，在室温条件下搅拌48h，过滤，滤饼在50℃真空干燥，得到9.04g晶型C产品，收率90.4％。

实施例12：

10g1-(2，4-二氯苄基)N-(2，6-二氟苯基)-1H-吲哚-3-甲酰胺混悬在在250mL乙酸乙酯/乙醇(1/19，v/v)中，在70℃加热溶解0.5h，过滤，滤液在室温条件下搅拌48h，过滤，滤饼在60℃真空干燥，得到9.13g晶型C产品，收率91.3％。

实施例13水合物晶型A的制备

用60mL丙酮将1-(2，4-二氯苄基)N-(2，6-二氟苯基)-1H-吲哚-3-甲酰胺30g溶解后，配置成澄清溶液，向200mL的正庚烷中逐滴加入配置好的澄清溶液的良溶剂，边滴加边搅拌至有固体析出后，离心分离干燥得12g水合物晶型A。

实施例14无水晶型B的制备

将1-(2，4-二氯苄基)-N-(2，6-二氟苯基)-1H-吲哚-3-甲酰胺100g在1L水中室温下悬浮搅拌3天后，离心并45℃干燥8小时制得62g无水晶型B。

实施例15水合物晶型D的制备

将1-(2，4-二氯苄基)-N-(2，6-二氟苯基)-1H-吲哚-3-甲酰胺150g溶解在200mL的水中，再将其滴加到1L水中，待有固体析出后，继续室温下搅拌3天后离心，将固体50℃下干燥8小时后制得80g水合物晶型D。

实验例1对晶型A/B/C/D/G基于动态蒸汽吸附分析(DVS)的吸湿性研究

动态水分吸附(DVS)曲线在SMS(surface Measurement Systems)的DVSIntrinsic上采集。在25℃时的相对湿度用LiCl，Mg(NO₃)₂和KCl的潮解点校正。

恒温25℃下，在基于动态蒸汽吸附分析(DVS)的吸湿性研究中，水合物晶型A随着湿度降低，质量减小，之后随着湿度增加到80％RH，吸湿增重0.12％，表明晶型A几乎无引湿性。

恒温25℃下，在基于动态蒸汽吸附分析(DVS)的吸湿性研究中，无水晶型B随着湿度增加到80％RH，吸湿增重0.14％，表明晶型B几乎无引湿性。

恒温25℃下，在基于动态蒸汽吸附分析(DVS)的吸湿性研究中，无水晶型C随着湿度增加到80％RH，吸湿增重0.01％，表明晶型C几乎无引湿性。

恒温25℃下，在基于动态蒸汽吸附分析(DVS)的吸湿性研究中，水合物晶型D随着湿度增加到80％RH，吸湿增重0.54％，表明晶型D略有引湿性。

恒温25℃下，在基于动态蒸汽吸附分析(DVS)的吸湿性研究中，无水晶型G随着湿度增加到80％RH，吸湿增重0.3％，表明晶型G几乎无引湿性。

表1 A/B/C/D/G晶型的DVS研究列表

*：引湿性的定义参考中国药典2010版

实验例2无水晶型C的稳定性研究

高效液相色谱在Agilent 1260HPLC上采集。

将无水晶型C的固体样品分别放置在80℃下放置24小时，在25℃/60％RH和40℃/75％RH条件下放置一周，通过HPLC面积纯度和XRPD表征结果评估其化学纯度和固体晶型的变化。

表2晶型C稳定性评估总结

实验例3通过偏光显微镜(PLM)对无水晶型C表征

偏光显微镜数据通过Axio Scope.A1蔡司显微镜在室温下进行采集。

本发明中无水晶型C的颗粒形貌为针状晶体(外观蓬松)，长度约为50～100μm(附图3)。

上述详细说明是针对本发明其中之一可行实施例的具体说明，该实施例并非用以限制本发明的专利范围，凡未脱离本发明的等效实施或变更，均应包含于本发明技术方案的范围内。