阅读说明：本技术 氧杂环壬二烯衍生物、其药物组合物、其制备方法及用途 (Oxacyclononadiene derivative, pharmaceutical composition thereof, preparation method and application thereof ) 是由 王启卫 张翔 成大智 张雪玲 李俊龙 黄晴菲 李青竹 戴青松 何鑫磊 于 2019-11-27 设计创作，主要内容包括：本发明提供了一种氧杂环壬二烯衍生物、其立体化学异构体、其溶剂合物或其药学上可接受的盐,该氧杂环壬二烯衍生物能够起到较好的抗肿瘤效果。本发明还提供了该氧杂环壬二烯衍生物的制备方法,包括如下步骤：在反应器中加入钯催化剂,随后,将双氰基二烯及烯基环状碳酸酯溶解于溶剂中,在氩气的保护下加入反应器中,于15～22℃温度下反应20～30h,浓缩纯化后得到氧杂环壬二烯衍生物；其制备方法简单,收率高,便于工业化推广应用。此外,本发明还提供了一种以该氧杂环壬二烯衍生物为活性成分的的药物组合物及该氧杂环壬二烯用于制备抗肿瘤药物的用途。(The invention provides an oxacyclononadiene derivative, a stereochemical isomer thereof, a solvate thereof or a pharmaceutically acceptable salt thereof, wherein the oxacyclononadiene derivative can have a good anti-tumor effect. The invention also provides a preparation method of the oxacyclononadiene derivative, which comprises the following steps: adding a palladium catalyst into a reactor, then dissolving dicyanodiene and alkenyl cyclic carbonate into a solvent, adding the solution into the reactor under the protection of argon, reacting for 20-30 h at the temperature of 15-22 ℃, and concentrating and purifying to obtain an oxacyclononadiene derivative; the preparation method is simple, high in yield and convenient for industrial popularization and application. In addition, the invention also provides a pharmaceutical composition taking the oxacyclononadiene derivative as an active ingredient and application of the oxacyclononadiene in preparing antitumor drugs.)

氧杂环壬二烯衍生物、其药物组合物、其制备方法及用途

技术领域

本发明涉及医药化工的领域，具体而言，涉及一种氧杂环壬二烯衍生物、其药物组合物、其制备方法及用途。

背景技术

氧杂环壬二烯骨架广泛存在于天然产物和合成药物中，相关研究表明含有该骨架的化合物具有多种重要的生物活性和药物活性，对此类化合物的取代基修饰、结构类似物的衍生化以及进一步生物学活性的评价成为了研究热点。

目前，现有技术关于氧杂环壬二烯相关结构类似物的合成研究取得了一定的进展，但是，现有技术关于氧杂环壬二烯的相关化合物的生产工艺复杂，产物收率低，大大限制了其工业化生产。如何简便的高收率制备氧杂环壬二烯衍生物是目前的研究难点。

发明内容

本发明的目的在于提供一种氧杂环壬二烯衍生物(式12化合物)、其药物组合物、其制备方法及用途，该氧杂环壬二烯衍生物能够起到较好的抗肿瘤效果，其制备方法简单，收率高，便于工业化推广应用。

由此，发明人提供了下述发明：

本发明的其中一个方面涉及式(12)所示的氧杂环壬二烯衍生物、其立体化学异构体、其溶剂合物或其药学上可接受的盐，

式中：R¹选自苯基、取代的苯基、萘基或噻吩基；

其中，R¹中取代的苯基是指被选自下列基团的取代基在对位或间位取代的苯基：烷基、烷氧基或卤素；

R²选自甲基、乙基或叔丁基；

R³选自苯基、取代的苯基、萘基或噻吩基；

其中，R³中取代的苯基是指被一个或多个选自下列基团的取代基在任意位置取代的苯基：烷基、烷氧基、硝基或卤素。

上述烷基是指具有1～4个碳原子的直链或支链的烷基，包括：甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基等；优选为1～3个碳原子的直链烷基；特别优选为甲基或乙基；进一步优选为甲基；

上述烷氧基是指具有1～4个碳原子的直链或支链烷氧基，包括：甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、异丁氧基、叔丁氧基、仲丁氧基、戊氧基、己氧基等；优选为1～3个碳原子的直链或支链烷氧基；特别优选为甲氧基或乙氧基；进一步优选为甲氧基；

上述卤素是指氟、氯、溴或碘原子；优选为氟、氯或溴原子；

上述萘基是指任意位点与氧杂环连接的萘基；优选为2-萘基，即萘环的2号位点与氧杂环连接；

上述噻吩基是指任意位点与氧杂环连接的噻吩基；优选为2-噻吩基，即噻吩环的2号位点与氧杂环连接；

R¹优选为苯基、甲基取代的苯基、甲氧基取代的苯基、氯原子取代的苯基或溴原子取代的苯基；

R³优选为苯基、甲基取代的苯基、乙基取代的苯基、甲氧基取代的苯基、氟原子取代的苯基、氯原子取代的苯基或溴原子取代的苯基；

优选的，式(12)所示的化合物选自下述结构式之一：

本发明还提供了上述化合物的制备方法，包括如下步骤：在反应器中加入钯催化剂，随后，将双氰基二烯(5)及烯基环状碳酸酯(11)溶解于溶剂中，在氩气的保护下加入反应器中，于15～22℃的温度下反应20～30h，浓缩纯化后得到氧杂环壬二烯衍生物(12)；制备式(12)化合物的技术路线如下所示：

上述制备方法中，反应需要在无水无氧的条件下进行，如，在实验室中进行反应时，可以在干燥的Schlenk试管中进行；

上述制备方法中，优选的，将溶解于溶剂中的反应物双氰基二烯(5)和烯基环状碳酸酯(11)缓慢注入反应器中，如，在实验室中进行反应时，可以通过注射器注入反应器中；

上述制备方法中，钯催化剂为零价钯与膦配体形成的配合物；优选的，钯催化剂为四三苯基膦钯、四呋喃基膦钯或四三丁基膦钯，进一步优选为四三苯基膦钯；

上述制备方法中，溶剂为乙腈、二氯甲烷、氯仿或甲苯；优选为乙腈；

上述制备方法中，钯催化剂、双氰基二烯(5)和烯基环状碳酸酯(11)的摩尔比满足：0.04～0.06:0.8～1.5:1.2～2.2；优选的，钯催化剂、双氰基二烯(5)和烯基环状碳酸酯(11)的摩尔比满足：0.04～0.05:0.9～1.2:1.4～1.6；进一步优选的，钯催化剂、双氰基二烯(5)和烯基环状碳酸酯(11)的摩尔比满足：0.05:1:1.5；

上述制备方法中，反应温度为15～22℃，优选为18～20℃，进一步优选为20℃；

上述制备方法中，反应时间为20～30h，优选为24h。

上述双氰基二烯(5)的制备方法为：

步骤一：

步骤二：

上述双氰基二烯(5)的制备方法具体可以是：

步骤一：将醛1(1.0eq)投入250mL的圆底烧瓶中，加入蒸馏水(100mL)作为溶剂，放入干净的搅拌子，再加入丙二腈(1.2eq)，置于室温下反应12h。TLC检测反应结束后，有大量固体析出，过滤，滤饼用石油醚洗涤，干燥后白色固体产物苄叉丙二腈3；

步骤二：称取苄叉丙二腈3(1.0eq)，催化剂PPh₃(0.2eq)加入带有搅拌磁子250mL圆底烧瓶中，组装带恒压滴液漏斗的反应装置，氩气保护下，准确量取甲苯25mL用注射器打入圆底烧瓶中，再准确量取丙炔酸酯4(1.2eq)，甲苯40mL用注射器打入恒压滴液漏斗中，于75℃下打开恒压滴液漏斗的旋塞，将丙炔酸酯的甲苯溶液缓慢滴加到苄叉丙二腈的甲苯溶液中，反应3h。TLC检测反应结束后，浓缩纯化得到黄色油状目标产物双氰基二烯5；

上述烯基环状碳酸酯(11)的制备方法是：

步骤一：

步骤二：

步骤三：

上述烯基环状碳酸酯(11)的制备方法具体可以是：

步骤一：在150mL圆底烧瓶中，放入干净的搅拌子，并依次量取苯乙酮或取代的苯乙酮6(1.0eq)，三氟醋酸碘苯(2.0eq)，乙腈-水溶液70mL(v/v＝5:1)，三氟醋酸(2.0eq)。随后，置于在80℃下回流反应2h。TLC检测反应完毕后，浓缩反应液，再用二氯甲烷萃取，收集有机相，浓缩纯化得到目标产物羟基苯乙酮7；

步骤二：准确称取羟基苯乙酮7(1.0eq)于250mL圆底烧瓶中，在氩气保护下，加入50mL无水THF作为为反应溶剂，于0℃冰浴条件下缓慢滴加乙烯基溴化镁(2.5eq)。滴加完毕后，室温反应3h。TLC检测反应完毕后，反应液用饱和氯化铵溶液淬灭，再用乙酸乙酯萃取，收集有机相，干燥，浓缩，纯化得到目标产物烯基乙二醇类化合物9。

步骤三：准确称量烯基乙二醇9(1.0eq)，三光气(0.5eq)，于100mL圆底烧瓶中，氩气保护下，加入50mL二氯甲烷为反应溶剂，于0℃冰浴条件下缓慢滴加吡啶(4.0eq)。滴加完毕后，移除冰浴，室温反应2h。TLC检测反应完毕后，反应液用饱和氯化铵溶液淬灭，乙酸乙酯萃取，收集有机相，干燥，浓缩，纯化得到目标产物烯基环状碳酸酯11。

本发明还提供了一种药物组合物，其包含至少一种作为活性成分的上述式(12)所定义的氧杂环壬二烯衍生物、其立体化学异构体、其溶剂合物或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的载体。

上述药学上可接受的载体是指药学领域常规的药物载体，例如，稀释剂、赋形剂、水、填充剂、粘合剂、润湿剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体、润滑剂、香味剂、甜味剂等。

本发明的药物组合物，可以是水剂、粉剂、片剂、粒剂、胶囊等各种剂型。

本发明还提供了上述氧杂环壬二烯衍生物、其立体化学异构体、其溶剂合物或其药学上可接受的盐在制备抗肿瘤药物中的用途。

优选的，该抗肿瘤药物是用于治疗乳腺癌和黑色素瘤中至少一种疾病的药物。

本发明的有益效果是：

1.本发明的氧杂环壬二烯衍生物(12)，是一类新的化合物，经试验例的验证表明，该化合物具有良好的抗肿瘤效果，可以应用于制备抗肿瘤药物中，具有广阔的市场应用前景；

2.本发明通过将双氰基二烯(5)和烯基环状碳酸酯(11)作为反应物，制备了一种具有氧杂环壬二烯骨架结构的化合物(12)，该化合物的制备过程简单，收率高，工艺条件易于实现并便于控制，易于实现工业化。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍。

图1是本发明实施例1制得的产物的单晶结构图。

具体实施方式

为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。

关于本发明使用的技术术语的定义，除非另有说明，本文中基团或者术语提供的初始定义适用于整篇说明书的该基团或者术语，例如，对R¹、R²、R³基团的定义适用于整篇说明书的定义；对于本文没有具体定义的术语，应该根据公开内容和上下文，给出本领域技术人员能够给予它们的含义。

“取代”是指分子中的氢原子被其它不同的原子或分子所替换；

“药学上可接受的盐”指本发明化合物与酸或碱所形成的适合用作药物的盐，药学上可接受的盐包括无机盐和有机盐，一类优选的盐是本发明化合物与碱金属形成的盐，适合形成盐的碱金属包括但并不限于：锂、钠，钾、钙、镁等。

下面的实施例可以使本专业技术人员更全面的理解本发明，但不以任何方式限制本发明。

实施例1

化合物：(3E,7Z)-5,5-二氰基-4,8-二苯基-2,5,6,9-四氢氧杂环壬二烯-3-乙酸乙酯

制备方法：

S1、制备双氰基二烯5：

步骤一：将苯甲醛1(1.0eq)投入250mL的圆底烧瓶中，加入蒸馏水(100mL)作为溶剂，放入干净的搅拌子，再加入丙二腈(1.2eq)，置于室温下反应12h。TLC检测反应结束后，有大量固体析出，过滤，滤饼用石油醚洗涤，干燥后白色固体产物苄叉丙二腈3；

步骤二：称取苄叉丙二腈3(1.0eq)，催化剂PPh₃(0.2eq)加入带有搅拌磁子250mL圆底烧瓶中，组装带恒压滴液漏斗的反应装置，氩气保护下，准确量取甲苯25mL用注射器打入圆底烧瓶中，再准确量取丙炔酸乙酯(1.2eq)，甲苯40mL用注射器打入恒压滴液漏斗中，于75℃下打开恒压滴液漏斗的旋塞，将丙炔酸乙酯的甲苯溶液缓慢滴加到苄叉丙二腈的甲苯溶液中，反应3h。TLC检测反应结束后，浓缩纯化得到黄色油状目标产物双氰基二烯5；

S2、制备烯基环状碳酸酯11：

步骤一：在150mL圆底烧瓶中，放入干净的搅拌子，并依次量取苯乙酮(1.0eq)，三氟醋酸碘苯(2.0eq)，乙腈-水溶液70mL(v/v＝5:1)，三氟醋酸(2.0eq)。随后，置于在80℃下回流反应2h。TLC检测反应完毕后，浓缩反应液，再用二氯甲烷萃取，收集有机相，浓缩纯化得到目标产物羟基苯乙酮7；

步骤二：准确称取羟基苯乙酮7(1.0eq)于250mL圆底烧瓶中，在氩气保护下，加入50mL无水THF作为为反应溶剂，于0℃冰浴条件下缓慢滴加乙烯基溴化镁(2.5eq)。滴加完毕后，室温反应3h。TLC检测反应完毕后，反应液用饱和氯化铵溶液淬灭，再用乙酸乙酯萃取，收集有机相，干燥，浓缩，纯化得到目标产物烯基乙二醇类化合物9。

步骤三：准确称量烯基乙二醇9(1.0eq)，三光气(0.5eq)，于100mL圆底烧瓶中，氩气保护下，加入50mL二氯甲烷为反应溶剂，于0℃冰浴条件下缓慢滴加吡啶(4.0eq)。滴加完毕后，移除冰浴，室温反应2h。TLC检测反应完毕后，反应液用饱和氯化铵溶液淬灭，乙酸乙酯萃取，收集有机相，干燥，浓缩，纯化得到目标产物烯基环状碳酸酯11；

S3、制备氧杂环壬二烯12：

在一干燥的Schlenk试管中加入四三苯基膦钯(0.05eq)作为催化剂，随后，将双氰基二烯5(1eq)及烯基环状碳酸酯11(1.5eq)溶解于1mL乙腈中，在氩气的保护下，用注射器打入Schlenk试管中，反应24小时，反应完成后浓缩纯化得到目标产物12。

产物为白色固体，产率90％；

¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ(ppm):7.55(d,J＝6.6Hz,2H),7.45–7.33(m,6H),7.20(d,J＝8.4Hz,2H),6.25(t,J＝9.0Hz,1H),4.61(s,2H),4.57(s,2H),3.85(q,J＝7.2Hz,2H),3.63(d,J＝9.0Hz,2H),0.80(t,J＝7.2Hz,3H).

¹³C NMR(150MHz,CDCl₃)δ(ppm):167.6,143.8,139.4,138.9,137.4,135.9,129.7,128.7,128.6,128.1,126.6,122.2,114.2,66.6,63.4,61.5,40.2,39.0,13.4.

实施例1产物的单晶数据(参见图1和下表)：

表Crystal data and structure refinement for 1.

实施例2

化合物：(3E,7Z)-4-(3-氯苯基)-5,5-二氰基-8-苯基-2,5,6,9-四氢氧杂环壬二烯-3-乙酸乙酯

制备方法：

与实施例1的制备方法的区别在于：

(1)步骤S3中，反应催化剂为四三呋喃基膦钯；反应温度为15℃；四呋喃基膦钯、双氰基二烯5和所述烯基环状碳酸酯11的摩尔比满足：0.04:0.8:1.2；反应时间为20h；反应溶剂为二氯甲烷；

(2)化合物1为3-氯苯甲醛，化合物4为丙炔酸乙酯，化合物6为苯乙酮；产物为淡黄色固体，产率69％；

¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ(ppm):7.54(d,J＝7.8Hz,2H),7.41–7.36(m,4H),7.33(t,J＝8.4Hz,1H),7.20(s,1H),7.10(d,J＝7.2Hz,1H),6.24(t,J＝9.0Hz,1H),4.61(s,2H),4.56(d,J＝4.8Hz,2H),3.91(q,J＝6.0Hz,2H),3.62(d,J＝11.4Hz,2H),0.87(t,J＝7.2Hz,3H).

¹³C NMR(150MHz,CDCl₃)δ(ppm):167.2,143.9,139.2,138.8,137.5,136.8,134.6,130.0,129.8,128.74,128.68,128.3,126.6,126.4,122.0,114.0,66.8,63.4,61.7,39.9,39.1,13.8.

实施例3

化合物：(3E,7Z)-4-(3-溴苯基)-5,5-二氰基-8-苯基-2,5,6,9-四氢氧杂环壬二烯-3-乙酸乙酯

制备方法：

与实施例1的制备方法的区别在于：

(1)步骤S3中，反应催化剂为四三丁基膦钯；反应温度为22℃；四三丁基膦钯、双氰基二烯5和所述烯基环状碳酸酯11的摩尔比满足：0.06:1.5:2.2；反应时间为30h；

(2)化合物1为3-溴苯甲醛，化合物4为丙炔酸乙酯，化合物6为苯乙酮；

产物为黄色半固体，产率53％；

¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ(ppm):7.59–7.51(m,3H),7.44–7.36(m,3H),7.36–7.32(m,1H),7.28(d,J＝8.4Hz,1H),7.15(d,J＝7.8Hz,1H),6.23(t,J＝9.0Hz,1H),4.60(s,2H),4.56(d,J＝4.2Hz,2H),3.91(q,J＝7.2Hz,2H),3.62(dd,J＝9.0,5.4Hz,2H),0.87(t,J＝7.2Hz,3H).

¹³C NMR(150MHz,CDCl₃)δ(ppm):167.2,143.9,139.2,139.1,137.7,136.8,132.7,131.1,130.1,128.7,128.8,126.9,126.5,122.5,122.0,114.0,66.8,63.4,61.7,39.9,39.1,13.4.

实施例4

化合物：(3E,7Z)-4-(3-甲基苯基)-5,5-二氰基-8-苯基-2,5,6,9-四氢氧杂环壬二烯-3-乙酸乙酯

制备方法：

与实施例1的制备方法的区别在于：化合物1为3-甲基苯甲醛，化合物4为丙炔酸乙酯，化合物6为苯乙酮；

产物为无色半固体，产率82％；

¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ(ppm):7.56(d,J＝6.6Hz,2H),7.43–7.34(m,3H),7.27(t,J＝7.2Hz,1H),7.21(d,J＝7.2Hz,1H),7.00(d,J＝5.4Hz,2H),6.27(t,J＝9.0Hz,1H),4.59(s,2H),4.56(d,J＝3.0Hz,2H),3.87(q,J＝7.2Hz,2H),3.61(d,J＝9.0Hz,2H),2.34(s,3H),0.81(t,J＝7.2Hz,3H).

¹³C NMR(150MHz,CDCl₃)δ(ppm):167.7,143.5,139.4,139.3,138.4,137.3,135.5,130.4,128.7,128.65,128.58,128.5,126.6,125.1,122.4,114.2,66.2,63.1,61.4,40.2,39.0,21.3,13.4.

实施例5

化合物：(3E,7Z)-4-(4-氯苯基)-5,5-二氰基-8-苯基-2,5,6,9-四氢氧杂环壬二烯-3-乙酸乙酯

制备方法：

与实施例1的制备方法的区别在于：化合物1为4-氯苯甲醛，化合物4为丙炔酸乙酯，化合物6为苯乙酮；

产物为淡黄色固体，产率72％；

¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ(ppm):7.54(d,J＝6.6Hz,2H),7.43–7.36(m,4H),7.34(t,J＝7.2Hz,1H),7.20(brs,1H),7.10(d,J＝7.2Hz,1H),6.24(t,J＝9.0Hz,1H),4.61(s,2H),4.56(d,J＝4.2Hz,2H),3.91(q,J＝7.2Hz,2H),3.62(d,J＝9.0Hz,2H),0.87(t,J＝7.2Hz,3H).

¹³C NMR(150MHz,CDCl₃)δ(ppm):167.2,143.9,139.2,138.8,136.8,134.6,129.8,128.74,128.68,128.3,126.6,126.4,122.0,114.0,66.8,63.4,61.7,39.9,39.1,13.5.

实施例6

化合物：(3E,7Z)-4-(4-溴苯基)-5,5-二氰基-8-苯基-2,5,6,9-四氢氧杂环壬二烯-3-乙酸乙酯

制备方法：

与实施例1的制备方法的区别在于：化合物1为4-溴苯甲醛，化合物4为丙炔酸乙酯，化合物6为苯乙酮；

产物为淡黄色固体，产率51％；

¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ(ppm):7.57–7.48(m,4H),7.44–7.33(m,3H),7.06(d,J＝8.4Hz,2H),6.19(t,J＝9.0Hz,1H),4.61(s,2H),4.57(s,2H),3.90(q,J＝7.2Hz,2H),3.64(d,J＝9.0Hz,2H),0.88(t,J＝7.2Hz,3H).

¹³C NMR(150MHz,CDCl₃)δ(ppm):167.3,144.3,139.3,137.7,136.7,136.2,131.8,129.9,128.8,128.7,126.6,124.1,121.9,114.1,67.2,63.8,61.7,39.9,39.2,13.5.

实施例7

化合物：(3E,7Z)-4-(4-甲基苯基)-5,5-二氰基-8-苯基-2,5,6,9-四氢氧杂环壬二烯-3-乙酸乙酯

制备方法：

与实施例1的制备方法的区别在于：化合物1为4-甲基苯甲醛，化合物4为丙炔酸乙酯，化合物6为苯乙酮；

产物为白色固体，产率77％；

¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ(ppm):7.55(d,J＝7.8Hz,2H),7.44–7.33(m,3H),7.18(d,J＝7.2Hz,2H),7.08(d,J＝7.8Hz,2H),6.25(t,J＝9.0Hz,1H),4.59(s,2H),4.55(s,2H),3.87(q,J＝7.2Hz,2H),3.60(d,J＝9.0Hz,2H),2.36(s,3H),0.84(t,J＝7.2Hz,3H).

¹³C NMR(150MHz,CDCl₃)δ(ppm):167.7,143.6,139.7,139.4,139.1,135.6,134.4,129.2,128.7,128.6,128.0,126.6,122.4,114.3,66.3,63.3,61.5,40.3,38.9,21.4,13.5.

实施例8

化合物：(3E,7Z)-4-(4-甲氧基苯基)-5,5-二氰基-8-苯基-2,5,6,9-四氢氧杂环壬二烯-3-乙酸乙酯

制备方法：

与实施例1的制备方法的区别在于：化合物1为4-甲氧基苯甲醛，化合物4为丙炔酸乙酯，化合物6为苯乙酮；

产物为黄色半固体，产率88％

¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ(ppm):7.55(d,J＝7.2Hz,2H),7.43–7.32(m,3H),7.12(d,J＝9.0Hz,2H),6.88(d,J＝8.3Hz,2H),6.24(t,J＝8.4Hz,1H),4.59(s,2H),4.55(s,2H),3.89(q,J＝7.2Hz,2H),3.81(s,3H),3.60(d,J＝9.0Hz,2H),0.87(t,J＝7.8Hz,3H).

¹³C NMR(150MHz,CDCl₃)δ(ppm):167.8,160.4,143.7,139.4,138.7,135.9,129.6,129.5,128.7,128.6,126.6,122.3,114.3,113.9,66.5,63.4,61.5,55.3,40.4,39.0,13.6.

实施例9

化合物：(3E,7Z)-4-(2-萘基)-5,5-二氰基-8-苯基-2,5,6,9-四氢氧杂环壬二烯-3-乙酸乙酯

制备方法：

与实施例1的制备方法的区别在于：化合物1为2-萘甲醛，化合物4为丙炔酸乙酯，化合物6为苯乙酮；

产物为淡黄色固体，产率71％

¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ(ppm):7.87(d,J＝7.8Hz,1H),7.84(d,J＝7.8Hz,1H),7.74(d,J＝8.4Hz,1H),7.63(s,1H),7.59(d,J＝6.6Hz,2H),7.56–7.48(m,2H),7.46–7.37(m,3H),7.34(dd,J＝8.4,2.4Hz,1H),6.28(t,J＝9.0Hz,1H),4.83–4.52(m,4H),3.85–3.69(m,3H),3.69–3.58(m,1H),0.60(t,J＝7.2Hz,3H).

¹³C NMR(150MHz,CDCl₃)δ(ppm):167.7,143.9,139.4,139.1,136.3,134.8,133.3,132.6,128.7,128.6,128.3,128.2,127.9,127.8,127.2,126.9,126.6,125.2,122.3,114.3,114.2,66.8,63.5,61.5,40.2,39.2,13.3.

实施例10

化合物：(3E,7Z)-4-(2-噻吩基)-5,5-二氰基-8-苯基-2,5,6,9-四氢氧杂环壬二烯-3-乙酸乙酯

制备方法：

与实施例1的制备方法的区别在于：化合物1为2-噻吩甲醛，化合物4为丙炔酸乙酯，化合物6为苯乙酮；

产物为黄色半固体，产率96％

¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ(ppm):7.54(d,J＝8.4Hz,2H),7.42(dd,J＝6.6,1.8Hz,1H),7.41–7.33(m,3H),7.06–7.01(m,2H),6.23(t,J＝9.0Hz,1H),4.61(s,2H),4.54(s,2H),3.96(q,J＝7.2Hz,2H),3.58(d,J＝9.0Hz,2H),0.94(t,J＝7.2Hz,3H).

¹³C NMR(150MHz,CDCl₃)δ(ppm):167.2,143.9,139.3,139.2,136.3,131.8,129.4,128.65,128.55,127.9,127.0,126.6,122.2,114.0,67.1,63.7,61.7,40.7,38.8,13.6.

实施例11

化合物：(3E,7Z)-5,5-二氰基-4,8-二苯基-2,5,6,9-四氢氧杂环壬二烯-3-乙酸甲酯

制备方法：

与实施例1的制备方法的区别在于：化合物1为苯甲醛，化合物4为丙炔酸甲酯，化合物6为苯乙酮；

产物为淡黄色半固体，产率87％

¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ(ppm):7.56(d,J＝8.4Hz,2H),7.45–7.35(m,6H),7.20(d,J＝7.8Hz,2H),6.29(t,J＝9.0Hz,1H),4.60(s,2H),4.55(s,2H),3.60(d,J＝9.0Hz,2H),3.38(s,3H).

¹³C NMR(150MHz,CDCl₃)δ(ppm):168.0,143.5,139.5,139.3,137.3,135.6,129.7,128.7,128.6,127.9,126.6,122.4,114.1,66.2,63.0,52.3,40.2,38.9.

实施例12

化合物：(3E,7Z)-5,5-二氰基-4,8-二苯基-2,5,6,9-四氢氧杂环壬二烯-3-乙酸叔丁酯

制备方法：

与实施例1的制备方法的区别在于：化合物1为苯甲醛，化合物4为丙炔酸叔丁酯，化合物6为苯乙酮；

产物为白色固体，产率82％

¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ(ppm):7.56(d,J＝7.2Hz,2H),7.45–7.33(m,6H),7.20(d,J＝7.2Hz,2H),6.23(t,J＝9.0Hz,1H),4.58(s,2H),4.57(s,2H),3.62(d,J＝9.0Hz,2H),1.07(s,9H).

¹³C NMR(150MHz,CDCl₃)δ(ppm):166.7,143.8,139.5,137.5,137.3,136.7,129.5,128.7,128.6,128.5,126.6,125.5,122.2,114.3,82.7,66.7,63.7,40.1,39.0,27.3.

实施例13

化合物：(3E,7Z)-4-苯基-5,5-二氰基-8-(2-氟苯基)-2,5,6,9-四氢氧杂环壬二烯-3-乙酸乙酯

制备方法：

与实施例1的制备方法的区别在于：化合物1为苯甲醛，化合物4为丙炔酸乙酯，化合物6为2-氟苯乙酮；

产物为白色固体，产率85％

¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ(ppm):7.50–7.37(m,4H),7.36–7.30(1H),7.23(d,J＝6.6Hz,2H),7.17(t,J＝7.2Hz,1H),7.10(dd,J＝10.2,8.4Hz,1H),6.16(t,J＝9.0Hz,1H),4.63(s,2H),4.54(s,2H),3.84(q,J＝7.2Hz,2H),3.67(d,J＝9.0Hz,2H),0.80(t,J＝7.2Hz,3H).

¹³C NMR(150MHz,CDCl₃)δ(ppm):167.5,159.6(d,J_C-F＝247.1Hz),140.2,138.6,137.4,135.9,130.2(d,J_C-F＝2.9Hz),130.1(d,J_C-F＝8.7Hz),129.7,128.6,128.1,127.4(d,J_C-F＝12.9Hz),125.8,124.5(d,J_C-F＝3.0Hz),116.0(d,J_C-F＝21.5Hz),114.2,67.4,64.1,61.5,40.1,38.7,13.4.

实施例14

化合物：(3E,7Z)-4-苯基-5,5-二氰基-8-(3-氯苯基)-2,5,6,9-四氢氧杂环壬二烯-3-乙酸乙酯

制备方法：

与实施例1的制备方法的区别在于：化合物1为苯甲醛，化合物4为丙炔酸乙酯，化合物6为3-氯苯乙酮；

产物为淡黄色固体，产率87％

¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ(ppm):7.55(s,1H),7.47–7.36(m,4H),7.36–7.30(m,2H),7.19(d,J＝8.4Hz,2H),6.27(t,J＝9.0Hz,1H),4.60(s,2H),4.52(s,2H),3.86(q,J＝7.2Hz,2H),3.62(d,J＝9.0Hz,2H),0.80(t,J＝7.2Hz,3H).

¹³C NMR(150MHz,CDCl₃)δ(ppm):167.5,142.6,141.2,138.8,137.2,135.8,134.7,130.0,129.7,128.6,128.1,126.8,124.8,123.5,114.1,66.4,63.4,61.6,40.0,38.9,13.4.

实施例15

化合物：(3E,7Z)-4-苯基-5,5-二氰基-8-(3-溴苯基)-2,5,6,9-四氢氧杂环壬二烯-3-乙酸乙酯

制备方法：

与实施例1的制备方法的区别在于：化合物1为苯甲醛，化合物4为丙炔酸乙酯，化合物6为3-溴苯乙酮；

产物为白色固体，产率93％

¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ(ppm):7.70(s,1H),7.53–7.46(m,2H),7.45–7.35(m,3H),7.27(t,J＝8.4Hz,1H),7.19(d,J＝7.2Hz,2H),6.26(t,J＝9.0Hz,1H),4.61(s,2H),4.52(s,2H),3.86(q,J＝7.2Hz,2H),3.62(d,J＝9.0Hz,2H),0.80(t,J＝7.2Hz,3H).

¹³C NMR(150MHz,CDCl₃)δ(ppm):167.5,142.5,141.5,138.8,137.2,135.8,131.6,130.2,129.73,129.69,128.6,128.1,125.2,123.5,122.8,114.1,66.4,63.5,61.6,40.0,38.9,13.4.

实施例16

化合物：(3E,7Z)-4-苯基-5,5-二氰基-8-(3-硝基苯基)-2,5,6,9-四氢氧杂环壬二烯-3-乙酸乙酯

制备方法：

与实施例1的制备方法的区别在于：化合物1为苯甲醛，化合物4为丙炔酸乙酯，化合物6为3-硝基苯乙酮；

产物为淡黄色固体，产率95％

¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ(ppm):8.43(s,1H),8.23(d,J＝8.4Hz,1H),7.92(d,J＝8.4Hz,1H),7.59(t,J＝8.4Hz,1H),7.46–7.35(m,3H),7.19(d,J＝6.0Hz,2H),6.39(t,J＝9.0Hz,1H),4.62(s,2H),4.57(s,2H),3.87(q,J＝7.2Hz,2H),3.65(d,J＝8.4Hz,2H),0.79(t,J＝7.2Hz,3H).

¹³C NMR(150MHz,CDCl₃)δ(ppm):167.4,148.5,141.6,141.1,138.8,137.0,135.8,132.6,129.83,129.81,128.7,128.0,125.0,123.3,121.5,113.9,66.0,63.4,61.7,39.9,38.8,13.4.

实施例17

化合物：(3E,7Z)-4-苯基-5,5-二氰基-8-(3-甲基苯基)-2,5,6,9-四氢氧杂环壬二烯-3-乙酸乙酯

制备方法：

与实施例1的制备方法的区别在于：化合物1为苯甲醛，化合物4为丙炔酸乙酯，化合物6为3-甲基苯乙酮；

产物为无色半固体，产率91％

¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ(ppm):7.46–7.34(m,5H),7.28(t,J＝8.4Hz,1H),7.23–7.16(m,3H),6.26(t,J＝8.4Hz,1H),4.61(s,2H),4.55(s,2H),3.86(q,J＝7.2Hz,2H),3.61(q,J＝9.0Hz,2H),2.39(s,3H),0.80(t,J＝7.2Hz,3H).

¹³C NMR(150MHz,CDCl₃)δ(ppm):167.6,143.7,139.4,139.0,138.3,137.4,135.8,129.6,129.3,128.6,128.1,127.3,123.7,122.1,114.2,66.4,63.2,61.5,40.2,39.0,21.5,13.4.

实施例18

化合物：(3E,7Z)-4-苯基-5,5-二氰基-8-(3-甲氧基苯基)-2,5,6,9-四氢氧杂环壬二烯-3-乙酸乙酯

制备方法：

与实施例1的制备方法的区别在于：化合物1为苯甲醛，化合物4为丙炔酸乙酯，化合物6为3-甲氧基苯乙酮；

产物为白色固体，产率81％

¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ(ppm):7.44–7.35(m,3H),7.31(t,J＝8.4Hz,1H),7.20(d,J＝6.0Hz,2H),7.13(d,J＝8.4Hz,1H),7.10(s,1H),6.91(d,J＝7.2Hz,1H),6.24(t,J＝9.0Hz,1H),4.61(s,2H),4.55(s,2H),3.85(q,J＝7.2Hz,2H),3,84(s,3H),3.62(d,J＝9.0Hz,2H),0.79(t,J＝7.2Hz,3H).

¹³C NMR(150MHz,CDCl₃)δ(ppm):167.6,159.8,143.8,140.9,138.9,137.4,135.9,129.7,129.6,128.6,128.1,122.4,119.0,114.2,114.0,112.4,66.7,63.5,61.5,55.3,40.2,39.0,13.4.

实施例19

化合物：(3E,7Z)-4-苯基-5,5-二氰基-8-(4-氟苯基)-2,5,6,9-四氢氧杂环壬二烯-3-乙酸乙酯

制备方法：

与实施例1的制备方法的区别在于：化合物1为苯甲醛，化合物4为丙炔酸乙酯，化合物6为4-氟苯乙酮；

产物为淡黄色固体，产率86％

¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ(ppm):7.57–7.50(m,2H),7.44–7.35(m,3H),7.19(d,J＝7.2Hz,2H),7.08(t,J＝7.8Hz,2H),6.20(t,J＝8.4Hz,1H),4.60(s,2H),4.53(s,2H),3.85(q,J＝7.8Hz,2H),3.61(d,J＝9.0Hz,2H),0.80(t,J＝7.2Hz,3H).

¹³C NMR(150MHz,CDCl₃)δ(ppm):167.6,163.0(d,J_C-F＝247.1Hz),142.8,138.9,137.3,135.8,135.5(d,J_C-F＝2.9Hz),129.7,128.6,128.4(d,J_C-F＝8.7Hz),128.1,122.3,115.6(d,J_C-F＝21.6Hz),114.1,66.5,63.4,61.5,40.2,39.0,13.4.

实施例20

化合物：(3E,7Z)-4-苯基-5,5-二氰基-8-(4-氯苯基)-2,5,6,9-四氢氧杂环壬二烯-3-乙酸乙酯

制备方法：

与实施例1的制备方法的区别在于：化合物1为苯甲醛，化合物4为丙炔酸乙酯，化合物6为4-氯苯乙酮；

产物为无色半固体，产率81％

¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ(ppm):7.49(d,J＝8.4Hz,2H),7.44–7.34(m,5H),7.18(d,J＝7.2Hz,2H),6.24(t,J＝9.0Hz,1H),4.59(s,2H),4.53(s,2H),3.85(q,J＝7.2Hz,2H),3.61(d,J＝9.0Hz,2H),0.79(t,J＝7.2Hz,3H).

¹³C NMR(150MHz,CDCl₃)δ(ppm):167.6,142.7,138.9,137.8,137.3,135.8,134.6,129.7,128.9,128.6,128.1,127.9,122.8,114.1,66.4,63.4,61.6,40.1,39.0,13.4.

实施例21

化合物：(3E,7Z)-4-苯基-5,5-二氰基-8-(4-溴苯基)-2,5,6,9-四氢氧杂环壬二烯-3-乙酸乙酯

制备方法：

与实施例1的制备方法的区别在于：化合物1为苯甲醛，化合物4为丙炔酸乙酯，化合物6为4-溴苯乙酮；

产物为白色固体，产率77％

¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ(ppm):7.52(d,J＝9.0Hz,2H),7.46–7.36(m,5H),7.18(d,J＝7.2Hz,2H),6.24(t,J＝9.0Hz,1H),4.59(s,2H),4.52(s,2H),3.85(q,J＝7.2Hz,2H),3.61(d,J＝9.0Hz,2H),0.79(t,J＝7.2Hz,3H).

¹³C NMR(150MHz,CDCl₃)δ(ppm):167.6,142.7,138.9,138.3,137.2,135.8,131.8,129.7,128.6,128.2,128.1,122.84,122.81,114.1,66.3,63.4,61.6,40.0,39.0,13.4.

实施例22

化合物：(3E,7Z)-4-苯基-5,5-二氰基-8-(4-甲基苯基)-2,5,6,9-四氢氧杂环壬二烯-3-乙酸乙酯

制备方法：

与实施例1的制备方法的区别在于：化合物1为苯甲醛，化合物4为丙炔酸乙酯，化合物6为4-甲基苯乙酮；

产物为淡黄色固体，产率82％

¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ(ppm):7.45(d,J＝8.4Hz,2H),7.43–7.36(m,3H),7.23–7.18(m,4H),6.24(t,J＝9.0Hz,1H),4.59(s,2H),4.54(s,2H),3.85(q,J＝7.8Hz,2H),3.60(d,J＝9.0Hz,2H),2.38(s,3H),0.80(t,J＝7.2Hz,3H).

¹³C NMR(150MHz,CDCl₃)δ(ppm):167.6,143.4,139.0,138.6,137.4,136.4,135.8,129.6,129.4,128.6,128.1,126.5,121.5,114.2,66.3,63.2,61.5,40.2,39.0,21.2,13.4.

实施例23

化合物：(3E,7Z)-4-苯基-5,5-二氰基-8-(4-乙基苯基)-2,5,6,9-四氢氧杂环壬二烯-3-乙酸乙酯

制备方法：

与实施例1的制备方法的区别在于：化合物1为苯甲醛，化合物4为丙炔酸乙酯，化合物6为4-乙基苯乙酮；

产物为白色固体，产率91％

¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ(ppm):7.48(d,J＝7.8Hz,2H),7.44–7.35(m,3H),7.25–7.19(m,4H),6.25(t,J＝9.0Hz,1H),4.60(s,2H),4.55(s,2H),3.85(q,J＝7.2Hz,2H),3.60(d,J＝8.4Hz,2H),2.67(q,J＝7.8Hz,2H),1.26(t,J＝7.8Hz,3H),0.80(t,J＝7.2Hz,3H).

¹³C NMR(150MHz,CDCl₃)δ(ppm):167.6,144.9,143.4,139.0,137.4,136.7,135.8,129.6,128.6,128.2,128.1,126.6,121.5,114.2 66.3,63.2,61.5,40.3,39.0,28.5,15.4,13.4.

实施例24

化合物：(3E,7Z)-4-苯基-5,5-二氰基-8-(4-甲氧苯基)-2,5,6,9-四氢氧杂环壬二烯-3-乙酸乙酯

制备方法：

与实施例1的制备方法的区别在于：化合物1为苯甲醛，化合物4为丙炔酸乙酯，化合物6为4-甲氧基苯乙酮；

产物为淡黄色半固体，产率81％

¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ(ppm):7.51(d,J＝9.0Hz,2H),7.44–7.35(m,3H),7.20(d,J＝6.6Hz,2H),6.92(d,J＝9.0Hz,2H),6.21(t,J＝9.0Hz,1H),4.59(s,2H),4.53(s,2H),3.85(q,J＝7.2Hz,2H),3.84(s,3H),3.59(d,J＝9.0Hz,2H),0.80(t,J＝6.6Hz,3H).

¹³C NMR(150MHz,CDCl₃)δ(ppm):167.7,159.9,142.8,139.0,137.4,135.8,131.7,129.6,128.6,128.1,127.9,120.7,114.2,114.0,66.2,63.1,61.5,55.3,40.3,39.1,13.4.

实施例25

化合物：(3E,7Z)-4-苯基-5,5-二氰基-8-(3,4-二氯苯基)-2,5,6,9-四氢氧杂环壬二烯-3-乙酸乙酯

制备方法：

与实施例1的制备方法的区别在于：化合物1为苯甲醛，化合物4为丙炔酸乙酯，化合物6为3,4-二氯苯乙酮；

产物为白色固体，产率78％

¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ(ppm):7.66(d,J＝2.4Hz,1H),7.46(d,J＝8.4Hz,1H),7.44–7.36(m,4H),7.18(d,J＝6.6Hz,2H),6.27(t,J＝9.0Hz,1H),4.59(s,2H),4.50(s,2H),3.86(q,J＝7.2Hz,2H),3.61(d,J＝9.6Hz,2H),0.80(t,J＝7.2Hz,3H).

¹³C NMR(150MHz,CDCl₃)δ(ppm):167.5,141.6,139.4,138.8,137.1,135.8,132.9,132.8,130.6,129.8,128.65,128.59,128.1,125.9,123.8,114.0,66.1,63.4,61.6,40.0,38.9,13.4.

实施例26

化合物：(3E,7Z)-4-苯基-5,5-二氰基-8-(2-萘基)-2,5,6,9-四氢氧杂环壬二烯-3-乙酸乙酯

制备方法：

与实施例1的制备方法的区别在于：化合物1为苯甲醛，化合物4为丙炔酸乙酯，化合物6为2-乙酰萘；

产物为白色固体，产率91％

¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ(ppm):8.04(s,1H),7.92–7.82(m,3H),7.68(d,J＝10.2Hz,1H),7.56–7.47(m,2H),7.44–7.35(m,3H),7.21(d,J＝6.0Hz,2H),6.41(t,J＝9.0Hz,1H),4.68(s,2H),4.66(s,2H),3.86(q,J＝7.8Hz,2H),3.68(d,J＝8.4Hz,2H),0.79(t,J＝7.2Hz,3H).

¹³C NMR(150MHz,CDCl₃)δ(ppm):167.6,143.4,138.9,137.4,136.5,135.9,133.3,133.1,129.7,128.8,128.6,128.4,128.1,127.6,126.6,126.5,126.0,124.2,122.7,114.2,66.4,63.4,61.5,40.2,39.2,13.4.

实施例27

化合物：(3E,7Z)-4-苯基-5,5-二氰基-8-(2-噻吩基)-2,5,6,9-四氢氧杂环壬二烯-3-乙酸乙酯

制备方法：

与实施例1的制备方法的区别在于：化合物1为苯甲醛，化合物4为丙炔酸乙酯，化合物6为2-乙酰噻吩；

产物为淡黄色固体，产率63％

¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ(ppm):7.44–7.36(m,3H),7.29(d,J＝4.2Hz,1H),7.25(d,J＝3.6Hz,1H),7.21(d,J＝6.6Hz,2H),7.05(dd,J＝4.8,3.6Hz,1H),6.36(t,J＝9.0Hz,1H),4.60(s,2H),4.58(s,2H),3.83(q,J＝7.2Hz,2H),3.60(d,J＝9.0Hz,2H),0.77(t,J＝7.2Hz,3H).

¹³C NMR(150MHz,CDCl₃)δ(ppm):167.5,142.1,139.2,137.3,137.2,135.7,129.7,128.6,128.1,127.9,125.9,125.7,120.0,114.1,65.8,63.4,61.5,40.2,39.0,13.4.

试验例抗肿瘤研究

以下通过试验例来具体说明本发明的有益效果。

1、实验肿瘤细胞株

人乳腺癌MB468细胞株、人乳腺癌SKBR3细胞株、人乳腺癌MB231细胞株、小鼠黑色素瘤A375细胞株均由四川大学生物治疗国家重点实验室提供，以上肿瘤细胞均冻存于四川大学生物治疗国家重点实验室。

2、实验方法

2.1细胞的准备及处理

4种肿瘤细胞均培养于含10％灭活新生小牛血清的RPMI-1640培养液，37℃、5％CO₂培养箱中生长至80％细胞融合，用0.1％胰酶溶液消化，制成单细胞悬液，调整细胞浓度为5×10⁴个/mL，均匀接种于96孔微量培养板中，每组3个复孔，100μL/孔，置37℃饱和湿度、5％CO₂孵箱内培养24h后，正常对照组加入含等量的培养液；加入浓度梯度的受试药物(100、50、25、12.5、6.25μg/mL)，每个浓度设3个复孔，实验平行2次。待药物与细胞作用24h后，每孔加入10μL MTT溶液(5mg/mL)，继续培养4h后每孔加入100μL DMSO，振荡混匀，使结晶物充分溶解，在酶标仪490nm波长处测其吸光度值(A值)，各个浓度组取其平均值。

2.2肿瘤细胞增殖抑制率的测定

按下列公式计算细胞增殖抑制率：细胞增殖抑制率(％)＝(1－试验组A值/对照组A值)×100％。所有实验数据采用SPSS 13.0进行统计分析。实验结果采用Probit求得IC₅₀值。

3、实验结果

分别以实施例1～实施例27所得到的化合物作为受试药物，实施例1～实施例27的化合物依次记为化合物001～化合物027，得到试验结果如表2所示：

表2实施例1～实施例27中的化合物对受试细胞生长的抑制情况

需要说明的是：表2中上述指标的数值大于50，则证明有抗肿瘤效果。

从表2可以看出，实施例1～实施例27的化合物均具有明显的抗肿瘤效果。

综上所述，本发明的化合物具有优异的抗肿瘤活性，且本发明化合物的制备方法简单、反应条件温和、反应收率高，具有广阔的市场应用前景。

以上仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。