阅读说明：本技术 用于增加血液半衰期的抗体fc变体 (Antibody FC variants for increasing blood half-life ) 是由 郑相泽 高翔焕 李泰揆 崔昭瑛 李秀汉 孙明湖 金秀珍 朴昭罗 朴钟植 林周铉 于 2018-04-06 设计创作，主要内容包括：本发明涉及包含Fc变体的多肽或包含该多肽的抗体,其中用不同的氨基酸序列置换人抗体Fc结构域的氨基酸序列的一部分。本发明的Fc变体可以用于多种抗体和Fc融合构建体中。在一个方面,本发明的抗体或Fc融合构建体是用于治疗、诊断或研究的试剂,优选为治疗性试剂。本发明的Fc变体可以通过优化氨基酸序列的一部分而使体内半衰期最大化,并且可用于癌症的治疗。本发明的抗体和Fc融合构建体用于杀伤靶抗原,例如含有癌细胞的靶细胞。替代地,本发明的抗体和Fc融合构建体用于阻断、拮抗或干扰靶抗原,以便拮抗例如细胞因子或细胞因子受体。(The present invention relates to a polypeptide comprising an Fc variant in which a portion of the amino acid sequence of the Fc domain of a human antibody is replaced with a different amino acid sequence or an antibody comprising the polypeptide. The Fc variants of the invention can be used in a variety of antibodies and Fc fusion constructs. In one aspect, the antibody or Fc fusion construct of the invention is an agent for therapy, diagnosis or research, preferably a therapeutic agent. The Fc variants of the present invention can maximize half-life in vivo by optimizing a portion of the amino acid sequence, and are useful in the treatment of cancer. The antibodies and Fc fusion constructs of the invention are useful for killing target antigens, such as target cells containing cancer cells. Alternatively, the antibodies and Fc fusion constructs of the invention are used to block, antagonize, or interfere with a target antigen, in order to antagonize, for example, a cytokine or cytokine receptor.)

用于增加血液半衰期的抗体FC变体

技术领域

本发明涉及具有增加的血液半衰期的新型抗体Fc变体和用于制备抗体Fc变体的方法。

背景技术

随着生物技术如基因重组和细胞培养的最新进展，在世界范围内对蛋白质的结构和功能进行了大量研究。生物技术促进人们更好地理解重要现象，并在阐明各种疾病的发病机理以为疾病的有效诊断和治疗铺平道路，从而极大地改善生活质量方面起着决定性作用。特别地，由于1975年开发了通过将B细胞与骨髓瘤细胞融合来产生单克隆抗体的杂交瘤技术(Kohler和Milstein，Nature，256：495-497，1975)，所以在包括癌症、自身免疫性疾病、炎症、心血管疾病和感染的临床应用中已经对使用治疗性抗体的免疫疗法进行了广泛研究和开发。

与现有的小分子药物相比，治疗性抗体对靶标的特异性更高、生物毒性更小且副作用更少。治疗性抗体的另一个优势是它们的长的血液半衰期(约3周)。由于这些优点，治疗性抗体被认为是最有效的癌症治疗方法。实际上，大型制药公司和研究机构已将其研发能力集中在特异性结合并有效去除包括致癌因子的癌细胞的治疗性抗体上。罗氏、安进、强生、雅培和BMS是目前正在开发治疗性抗体药物的主要制药公司。特别地，罗氏公司开发了用于抗癌治疗的三种新颖的治疗性抗体，即赫赛汀、阿瓦斯汀和美罗华，在2012年，其治疗性抗体销售额达到195亿美元，在全球市场上获得了可观的利润，目前引领抗体药物的全球市场。由于类克(Remicade)销量的增长，开发类克的强生公司在全球抗体市场中正在迅速扩张。众所周知，其他制药公司例如雅培和BMS拥有许多处于开发最后阶段的治疗性抗体。结果，包括对目标疾病特异且几乎没有副作用的治疗性抗体在内的生物医学正在迅速取代主导全球制药市场的小分子药物。

抗体的Fc区域募集免疫白细胞或血清补体分子，然后触发缺陷细胞如肿瘤细胞或受感染细胞的清除。Cγ2和Cγ3结构域之间的Fc界面介导与新生儿Fc受体(FcRn)的相互作用，其结合使内吞的抗体从内体循环回血流(Raghavan等人，1996，Annu Rev Cell DevBiol 12：181-220；Ghetie等人，2000，Annu Rev Immunol 18：739-766)。该过程，加上由于全长IgG抗体分子的大尺寸而导致的肾过滤阻碍，使得抗体血清的半衰期延长为1周至3周。此外，Fc与FcRn的结合在抗体转运中起关键作用。因此，Fc区域对于通过细胞内运输和循环机制延长循环抗体的血清持久性至关重要。

考虑到治疗剂的半衰期，作为治疗剂的抗体或Fc-融合蛋白的施用需要预定的注射频率。较长的体内半衰期可减少注射频率或降低剂量。因此，在目前正在进行的许多临床研究中，许多努力集中在通过将突变引入Fc结构域以增加抗体的半衰期或将变体引入Fc结构域以实现最大的ADCC效应，来开发下一代抗癌治疗性抗体和抗癌治疗性蛋白(Modifiedfrom Cancer Immunol Res.2015/Thomson Reuters)。

然而，尽管研究小组致力于开发针对FcRn的结合亲和力增强的一些蛋白和抗体，并且通过将一些突变引入Fc结构域来延长体内半衰期，但仍未实现体内半衰期的显著增加。在这些情况下，迫切需要开发最佳突变的抗体。

提供背景技术的描述仅仅是为了更好地理解本发明的背景，而不应被认为对应于本领域技术人员已知的现有技术。

发明详述

发明要解决的问题

本发明人认真地进行了研究，以有效地增加现有治疗性蛋白或抗体的体内半衰期，结果发现通过用不同的氨基酸序列置换野生型Fc结构域的氨基酸序列的一部分来优化治疗性蛋白或抗体，使得可以在保持其卓越活性的同时最大化地延长血液半衰期。

本发明的一个目的是提供一种包含Fc变体的多肽，该Fc变体通过用不同的氨基酸序列置换人抗体Fc结构域的氨基酸序列的一部分而产生。

本发明的另一个目的是提供一种包含所述多肽的抗体。

本发明的另一个目的是提供一种编码所述多肽的核酸分子。

本发明的另一个目的是提供一种包含所述核酸分子的载体。

本发明的另一个目的是提供一种包含所述载体的宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供一种包含多肽、抗体、核酸分子或载体的组合物。

本发明的另一个目的是提供制备多肽或抗体的方法。

本发明的另一个目的是提供筛选多肽的方法。

根据本文的详细描述、权利要求书和附图，本发明的其他目的和优点将变得更加显而易见。

解决问题的手段

本发明的一个方面提供了一种包含Fc变体的多肽，该Fc变体通过用不同的氨基酸序列置换人抗体Fc结构域的氨基酸序列的一部分而产生。

本发明的另一个方面提供了一种用于增加治疗性抗体或蛋白的血液半衰期的组合物，该组合物包含通过用不同的氨基酸序列置换人抗体Fc结构域的氨基酸序列的一部分而产生的Fc变体。

本发明人试图找到一种有效地增加现有治疗性蛋白或抗体的体内半衰期的方法，结果发现一种包含Fc变体的治疗性蛋白或抗体可以实现最大的体内半衰期，该Fc变体通过用不同的氨基酸序列置换和优化野生型Fc结构域的氨基酸序列的一部分而产生。

抗体是与特定抗原特异性结合的蛋白质。天然抗体是分子量为约150000道尔顿的异二聚糖蛋白，通常由两条相同的轻链(L)和两条相同的重链(H)组成。

本发明中使用的人抗体属于以下五种主要类别之一：IgA、IgD、IgE、IgG和IgM。人抗体优选是IgG抗体。抗体经木瓜蛋白酶消化产生两个Fab片段和一个Fc片段，而人IgG分子的Fc区域通过木瓜蛋白酶消化N端的Cys226而产生(Deisenhofer，Biochemistry 20：2361-2370，1981)。

抗体Fc结构域可以是IgA、IgM、IgE、IgD或IgG抗体或其修饰的Fc结构域。在一个实施方案中，结构域是IgG抗体的Fc结构域，例如IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3或IgG4抗体的Fc结构域。在一个实施方案中，Fc结构域可以是IgG1 Fc结构域，例如抗HER2抗体的Fc结构域，优选曲妥珠单抗的Fc结构域，更优选具有SEQ ID NO：28所示序列的Fc结构域。本发明的多肽可以任选地被部分或完全糖基化。除了Fc结构域之外，本发明的多肽还可包括一个或多于一个源自抗体的区域。另外，本发明的多肽可以包括源自抗体的抗原结合结构域，并且可以与另一多肽形成抗体或抗体样蛋白。

在此，根据本领域通常使用的Kabat EU编号系统来命名抗体Fc结构域的氨基酸残基，如Kabat等人，“Sequences of Proteins of Immunological Interest”第5版，U.S.Department of Health and Human Services，NIH Publication No.91-3242，1991中所述。

根据本发明的一个优选实施方案，经置换的Fc变体包括根据Kabat EU编号系统的M428L作为氨基酸置换。

根据本发明的一个优选实施方案，经置换的Fc变体包括据Kabat EU编号系统的a)M428L和b)Q311R或L309G作为氨基酸置换。

根据本发明的一个优选实施方案，经置换的Fc变体包括根据Kabat EU编号系统的P228L和M428L作为氨基酸置换。

根据本发明的一个优选实施方案，根据Kabat EU编号系统，包括氨基酸置换P228L和M428L的Fc变体包括在选自234位、264位、269位、292位、309位、342位、359位、364位、368位、388位、394位、422位、434位和445位的一个或多于一个位置处的另外的氨基酸置换。

另外的氨基酸置换可以是L309R和N434S。

另外的氨基酸置换可以是V264M、L368Q、E388D、V422D和P445S。

另外的氨基酸置换可以是R292L、T359A和S364G。

另外的氨基酸置换可以是L234F、E269D、Q342L、E388D和T394A。

根据本发明的一个优选实施方案，经置换的Fc变体包括根据Kabat EU编号系统的a)M428L和b)P230Q或P230S作为氨基酸置换。

根据本发明的一个优选实施方案，根据Kabat EU编号系统，包括氨基酸置换a)M428L和b)P230Q或P230S的经置换的Fc变体包括在选自243位、246位、295位、320位、356位、361位、384位和405位的一个或多于一个位置处的另外的氨基酸置换。

另外的氨基酸置换可以是F243Y、K246E、N361S和N384I。

另外的氨基酸置换可以是Q295L、K320M、D356E和F405I。

本发明涉及包括一个或多于一个氨基酸置换的Fc变体，该氨基酸置换调节Fc变体与新生儿Fc受体(FcRn)的结合和解离。特别地，本发明的Fc变体或其功能变体显示出在酸性条件(pH低于7)下对FcRn的结合亲和力增加，在中性pH条件下与FcRn的结合力非常低。

对其半衰期待增加的治疗性抗体没有特别限制，其实例包括多克隆抗体、单克隆抗体、微抗体、结构域抗体、双特异性抗体、抗体模拟物、嵌合抗体、抗体缀合物、人抗体、人源化抗体及其片段。

作为单克隆抗体，可提及例如人抗体，例如帕尼单抗(维克替比)、奥法木单抗(Arzerra)、戈利木单抗(欣普尼)和伊匹单抗(Yervoy)等；人源化抗体，例如托珠单抗(雅美罗)、曲妥珠单抗(赫赛汀)、贝伐单抗(阿瓦斯汀)、奥马珠单抗(索雷尔)、美泊利单抗(Bosatria)、吉妥珠单抗(麦罗塔)、帕利珠单抗(Synagis)、雷珠单抗(诺适得)、赛妥珠单抗(Cimzia)、奥瑞珠单抗、mogamulizumab(Poteligeo)和依库珠单抗(舒立瑞)；以及嵌合抗体，例如利妥昔单抗(美罗华)、西妥昔单抗(爱必妥)、英夫利昔单抗(类克)和巴利昔单抗(舒莱)。

对其半衰期待增加的治疗性蛋白没有特别限制，其实例包括：激素，例如胰岛素；细胞因子，例如生长因子、干扰素、白细胞介素、红细胞生成素、中性粒细胞生长因子和转化生长因子；Fc融合蛋白，例如依那西普(恩利)、阿柏西普(艾力雅、Zaltrap)、阿巴西普(奥瑞希纳)、阿法西普(Amevive)、贝拉西普(Nulojix)和列洛西普(Arcalyst)；治疗性肽，例如特立帕肽(复泰奥)、艾塞那肽(百泌达)、利拉鲁肽(诺和力)、兰瑞肽(索马杜林)、普兰林肽(Symlin)和恩夫韦肽(Fuzeon)；以及多肽包括部分或全部的VEGF受体、Her2受体、G蛋白偶联受体和离子通道的细胞表面受体。

治疗性抗体或蛋白的半衰期可通过与本发明的多肽或编码该多肽的核酸结合或引入到表达该核酸的载体中而延长。

根据本发明的一个优选实施方案，在5.6至6.4(优选5.8至6.2)的pH下，Fc变体比野生型Fc结构域对FcRn的结合亲和力提高了至少10％、至少20％、至少30％、至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％、至少90％或至少100％，或者是野生型Fc结构域对FcRn的结合亲和力的至少2倍、至少3倍、至少4倍、至少5倍、至少6倍、至少7倍、至少8倍、至少9倍、至少10倍、至少20倍、至少30倍、至少40倍、至少50倍、至少60倍、至少70倍、至少80倍、至少90倍或至少100倍。

根据本发明的一个优选实施方案，在7.0至7.8(优选7.2至7.6)的pH下，Fc变体与新生儿Fc受体(FcRn)的解离程度可以与野生型Fc结构域与新生儿Fc受体(FcRn)的解离程度相同或没有实质上的改变。

根据本发明的一个实施方案，经置换的Fc变体表现出在弱酸性条件下(例如，在5.8至6.2的pH下)比野生型Fc或其他开发的Fc变体更高的结合亲和力，并且其在中性条件下(例如，在7.4的pH下)的解离程度与野生型Fc或其他开发的Fc变体的解离程度相同或基本相等或更高(参见实施例4和实施例8)。

根据本发明的一个优选实施方案，与野生型相比，经置换的Fc变体具有长的半衰期。

根据本发明的经置换的Fc变体的半衰期可以比野生型Fc结构域长至少10％、至少20％、至少30％、至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％、至少90％或至少100％，或是野生型Fc结构域的至少2倍、至少3倍、至少4倍、至少5倍、至少6倍、至少7倍、至少8倍、至少9倍或至少10倍。

根据本发明的一个实施方案，与野生型相比，经置换的Fc变体具有显著改善的体内半衰期(参见实施例11和表3)。

如本文所用，“Fcγ受体”或“FcγR”是指与IgG抗体的Fc区域结合并由FcγR基因编码的蛋白家族的任何成员。这些Fcγ受体或FcγR的实例包括但不限于：FcγRI(CD64)，包括FcγRIa、FcγRIb和FcγRIc；FcγRII(CD32)，包括FcγRIIa、FcγRIIb和FcγRIIc；FcγRIII(CD16)，包括FcγRIIIa和FcγRIIIb；和未发现的FcγR。FcγR可源自哺乳动物生物体，包括人、小鼠、大鼠、兔和猴子以及其他生物体。

如本文所用，“FcRn”或“新生儿Fc受体”是指与IgG抗体的Fc区域结合并且至少部分由FcRn基因编码的蛋白。FcRn可源自哺乳动物生物体，包括人、小鼠、大鼠、兔和猴子以及其他生物体。功能性FcRn蛋白包括称为重链和轻链的两个多肽。轻链是β-2-微球蛋白，重链由FcRn基因编码。

本发明的另一方面提供了一种包含多肽的抗体。

如本文所用，术语“抗体”是指多克隆抗体、单克隆抗体、微抗体、结构域抗体、双特异性抗体、抗体模拟物、嵌合抗体、抗体缀合物、人抗体、人源化抗体或其片段(例如，抗原结合抗体片段)。

根据本发明的一个优选实施方案，可以通过优化相应的抗体Fc区域(例如，M428L和Q311R；或M428L和L309G)来最大化Fc结构域或包含Fc结构域的多肽的半衰期。

本发明的另一方面提供了编码所述多肽的核酸分子、包含所述核酸分子的载体或包含所述载体的宿主细胞。

本发明的核酸分子可以是分离的或重组的核酸分子。这样的核酸的实例包括单链和双链DNA和RNA及其相应的互补序列。分离的核酸可以是从天然来源分离的。在这种情况下，将分离的核酸与存在于要从中分离核酸的对象的基因组中的周边基因序列分离。分离的核酸可以理解为由模板酶促或化学合成的核酸，例如PCR产物、cDNA分子或寡核苷酸。在这种情况下，由该程序产生的核酸可以理解为分离的核酸分子。分离的核酸分子代表分离片段形式或作为较大核酸构建体的一部分的核酸分子。当核酸与另一核酸序列以功能关系排列时，核酸被“可操作地连接”。例如，当表达为前蛋白时，前序列或分泌型前导序列的DNA与多肽的DNA可操作地连接，该前蛋白是分泌前的多肽。将影响多肽序列转录的启动子或增强子可操作地连接至编码序列，或将核糖体结合位点可操作地连接至编码序列，当这样排列时会促进翻译。通常，术语“可操作地连接”是指待连接的DNA序列彼此相邻。对于分泌型前导序列，术语“可操作地链接”是指分泌型前导序列在同一前导框中彼此相邻存在。但是，所需的增强子不一定是连续的。通过在方便的限制性内切酶位点的连接来进行连接。在不存在这样的位点的情况下，根据本领域已知的合适方法使用合成的寡核苷酸衔接体或接头。

如本文所用，术语“载体”用于指可以将核酸序列***其中以引入细胞中从而可以进行复制的载体。核酸序列可以是“外源的”或“异源的”。载体包括质粒、黏粒和病毒(例如噬菌体)。本领域技术人员可以通过标准的重组技术构建载体，该技术在Maniatis等人，Molecular Cloning，A Laboratory Manual，Cold Spring Harbor Press，Cold SpringHarbor，N.Y.，1988；和Ausubel等人，In：Current Protocols in Molecular Biology，John，Wiley & Sons，Inc，NY，1994)中描述。

如本文所用，术语“表达载体”是指含有编码至少一部分能够被转录的基因产物的核酸序列的载体。在一些情况下，RNA分子随后被翻译为蛋白质、多肽或肽。表达载体可以包含各种“控制序列”。除了控制转录和翻译的控制序列外，载体和表达载体还可以包含具有其他功能的核酸序列。

如本文所用，术语“宿主细胞”是指能够复制载体或表达由载体编码的基因的任何转基因生物体。合适的生物体包括真核生物和原核生物。宿主细胞可以被载体转染或转化。转染或转化是指用于将外源核酸分子转移或引入宿主细胞的过程。

本发明的宿主细胞优选是细菌细胞、CHO细胞、HeLa细胞、HEK293细胞、BHK-21细胞、COS7细胞、COP5细胞、A549细胞或NIH3T3细胞，但不限于此。

本发明的另一方面提供了一种用于产生包含人抗体Fc变体的多肽的方法，其包括：a)培养包含载体的宿主细胞，该载体包含编码该多肽的核酸分子；和b)收集由宿主细胞表达的多肽。

本发明的另一方面提供了一种用于制备抗体的方法，其包括：a)培养表达包含所述多肽的抗体的宿主细胞；b)纯化由宿主细胞表达的抗体。

在本发明的方法中，可以通过过滤、HPLC、阴离子交换或阳离子交换、高效液相色谱法(HPLC)、亲和色谱法或其组合，优选使用蛋白A的亲和色谱法来纯化抗体。

本发明的另一方面提供了一种用于筛选包含Fc变体的多肽的方法，其包括：构建包括根据Kabat EU编号系统的M428L作为突变的Fc变体的文库；和b)从包括M428L突变的Fc变体中分选出在pH为5.6至6.4下对FcRn具有比野生型更高亲和力的Fc变体。

包括M428L突变的Fc变体可以包括至少一个另外的氨基酸置换。

根据本发明的优选实施方案，另外的氨基酸置换包括作为突变的Q311R或L309G。

根据本发明的一个优选实施方案，另外的氨基酸置换包括作为突变的P228L。

包括P228L突变的Fc变体可以包括至少一个另外的氨基酸置换。

另外的氨基酸置换没有特别限制，但优选为在选自根据Kabat EU编号系统的234位、264位、269位、292位、309位、342位、359位、364位、368位、388位、394位、422位、434位和445位的至少一个位置处的氨基酸突变。

根据本发明的一个优选实施方案，另外的氨基酸置换包括作为突变的P230Q或P230S。

包括P230突变的Fc变体可以包括至少一个另外的氨基酸置换。

另外的氨基酸置换没有特别限制，但优选为在选自根据Kabat EU编号系统的243位、246位、295位、320位、356位、361位、384位和405位的至少一个位置处的氨基酸突变。

本发明的筛选方法可以使用荧光激活细胞分选(FACS)或自动流式细胞术。流式细胞术的仪器是本领域技术人员众所周知的。这些仪器的实例包括FACSAria、FACS StarPlus、FACScan和FACSort(加利福尼亚州福斯特城的Becton Dickinson)，Epics C(佛罗里达州海厄利亚的Coulter Epics分部)，MOFLO(科罗拉多州科罗拉多斯普林斯的Cytomation)和MOFLO-XDP(印第安纳州印第安纳波利斯的Beckman Coulter)。流式细胞术通常涉及液体样品中细胞或其他颗粒的分离。通常，流式细胞术的目的是分析经分离的颗粒的一种或多于一种特征，例如标记的配体或其他分子的存在。颗粒一个接一个地通过传感器，并根据大小、折射度、光散射度、不透明度、粗糙度、形状、荧光等被分选。

本发明的另一方面提供了包含多肽、抗体、核酸分子或载体的组合物，所述多肽包含具有一个或多于一个氨基酸置换的Fc变体。

根据本发明的一个优选实施方案，所述组合物是用于预防或治疗癌症的药物组合物。

根据本发明的一个优选实施方案，药物组合物(或多肽、抗体、核酸分子或载体)识别癌症抗原。

根据本发明的一个实施方案，Fc变体具有与对照组(例如曲妥珠单抗)相当或更高的抗体依赖性细胞毒性(ADCC)活性，从而实现了显著增加的半衰期和高抗癌活性(参见实施例13和图18)。

本发明的药物组合物可以包括(a)多肽、抗体、编码该多肽的核酸分子或包含该核酸分子的载体和(b)药学上可接受的载剂。

本发明的又一方面提供了用于预防或治疗癌症的方法，其包括将药物组合物施用于对象。

通过本发明的方法预防或治疗的癌症的类型不受限制。可施用本发明的药物组合物以治疗许多癌症，包括白血病和淋巴瘤例如急性淋巴细胞白血病、急性非淋巴细胞白血病、慢性淋巴细胞白血病、慢性髓细胞白血病、霍奇金氏病、非霍奇金氏淋巴瘤，多发性骨髓瘤，儿童时期的实体瘤例如脑瘤、神经母细胞瘤、视网膜母细胞瘤、肾母细胞瘤、骨肿瘤和软组织肉瘤，成年人的常见实体瘤例如肺癌、乳腺癌、***癌、泌尿癌、子宫癌、口腔癌、胰腺癌、黑色素瘤和其他皮肤癌、胃癌、卵巢癌、脑瘤、肝癌、喉癌、甲状腺癌、食道癌和睾丸癌。

根据本发明的药物组合物的药学上可接受的载剂可以是本领域已知的任何载剂。适用于本发明药物组合物的载剂的实例包括但不限于乳糖、右旋糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露醇、淀粉、***胶、磷酸钙、藻酸盐、明胶、硅酸钙、微晶纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、纤维素、水、糖浆、甲基纤维素、羟基苯甲酸甲酯、羟基苯甲酸丙酯、滑石、硬脂酸镁和矿物油。本发明的药物组合物还可以包含至少一种选自润滑剂、润湿剂、甜味剂、调味剂、乳化剂、助悬剂和防腐剂的添加剂。合适的药学上可接受的载剂和制剂的详细信息可以在Remington’sPharmaceutical Sciences(第19版，1995年)中找到。

本发明的药物组合物可以经口或肠胃外给药，优选肠胃外给药。例如，本发明的药物组合物可以通过静脉内、局部或腹膜内注射给药。

对象没有特别限制，但优选地解释为包括脊椎动物，更优选为包括人类和黑猩猩的灵长类动物，包括狗和猫的家庭宠物，包括牛、马、绵羊和山羊的家畜，以及包括小鼠和大鼠的啮齿动物。

根据本发明的药物组合物的合适剂量取决于多种因素，例如剂型、给药方式、患者的年龄、体重、性别和病理状况、饮食、给药时间和途径、***速率和响应性。本领域普通技术人员可以容易地确定并开出用于所需治疗或预防的根据本发明药物组合物的有效剂量。根据本发明的一个优选实施方案，根据本发明的药物组合物的日剂量为0.0001mg/kg至100mg/kg。

本发明的药物组合物可以通过本领域普通技术人员容易进行的合适方法制备成单位剂量形式或与药学上可接受的载剂和/或赋形剂一起分配在多剂量容器中。本发明的药物组合物可以是在油或水性介质中的溶液、混悬剂或乳剂形式。本发明的药物组合物可以是提取物、散剂、颗粒剂、片剂或胶囊剂的形式。本发明的药物组合物还可以包含分散剂或稳定剂。

本发明的药物组合物可以用于单一疗法。或者，本发明的药物组合物可以与通常的化学疗法或放射疗法组合使用。这种组合疗法对癌症治疗更为有效。可以与本发明的组合物一起使用的化学治疗剂包括顺铂、卡铂、甲基苄肼、氮芥、环磷酰胺、异环磷酰胺、美法仑、苯丁酸氮芥、白消安、亚硝基脲、放线菌素D、柔红霉素、阿霉素、博莱霉素、普卡霉素(plicomycin)、丝裂霉素、依托泊苷、他莫昔芬、紫杉醇、反铂、5-氟尿嘧啶、长春新碱、长春碱和氨甲蝶呤等。可以与本发明的组合物一起使用的放射疗法包括X射线辐照和γ射线辐照。

发明效果

本发明的特征和优点总结如下。

(i)本发明提供了一种包含Fc变体的多肽，该Fc变体通过用不同的氨基酸序列置换人抗体Fc结构域的氨基酸序列的一部分而产生。

(ii)本发明还提供了产生多肽或包含该多肽的抗体的方法。

(iii)本发明的Fc变体适用于癌症的治疗，因为其体内半衰期可以通过优化氨基酸序列的一部分而最大化。

具体实施方式

，但是对于本领域技术人员而言显而易见的是，这些具体实施方式仅是优选的实施方案，并不旨在限制本发明的范围。因此，本发明的实质范围应该由所附的权利要求和它们的等同物所限定。