阅读说明：本技术 一种标记的含异氰基的脂肪酸类衍生物及其应用 (Marked fatty acid derivative containing isocyano group and application thereof ) 是由 张华北 强兵朝 于 2018-11-16 设计创作，主要内容包括：本发明涉及一种标记的含异氰基的脂肪酸类衍生物及其应用,其通式如式Ⅰ所示,其中,M为标记的锝<Sup>99m</Sup>Tc或铼Re；R、R1、R2、R3、R4和R5均为H、脂肪族链或脂环族链,这五个基团为完全相同、完全不相同或部分相同的基团；z为1-6的整数,p为0或1,n为1-28的正整数；t为0-5的整数,a为0-5的整数。本发明提供了一种完全新型的结构类型,其具有较低的肝本底、肺本底、肾本底,但在心肌中的滞留时间长,滞留率高,可作为一种新型的心肌代谢显像剂,具有重要的临床应用前景。<Image he="159" wi="700" file="DDA0001868162530000011.GIF" imgContent="drawing" imgFormat="GIF" orientation="portrait" inline="no"></Image>(The invention relates to a marked fatty acid derivative containing isocyano and application thereof, wherein the general formula is shown as formula I, wherein M is marked technetium 99m Tc or rhenium Re; r, R1, R2, R3, R4 and R5 are all H, aliphatic chains or alicyclic chains, and the five groups are completely identical, completely different or partially identical; z is an integer from 1 to 6, p is 0 or 1, n is a positive integer from 1 to 28; t is an integer of 0 to 5, and a is an integer of 0 to 5. The invention provides a completely novel structure type, which has lower liver background, lung background and kidney background, but has long detention time and high detention rate in cardiac muscle, can be used as a novel cardiac muscle metabolism developer, and has important clinical application prospect.)

一种标记的含异氰基的脂肪酸类衍生物及其应用

技术领域

本发明涉及一种医药、化学技术领域，具体涉及一种标记的含异氰基的脂肪酸类衍生物及其应用。

背景技术

脂肪酸是最简单的一种脂，它是许多更复杂的脂的组成成分。脂肪酸在有充足氧供给的情况下，可氧化分解为CO₂和H₂O，释放大量能量，因此脂肪酸是机体主要能量来源之一。尤其是心肌收缩的主要能量来源。

脂肪酸在心肌中的作用肌收缩的过程需要较高的能量，因此必须有持续的、高效的ATP来维持收缩功能、基础代谢及离子交换平衡。在人的正常心肌中，脂肪酸的氧化可提供心肌所需能量的60％-80％]，另外心肌还可以通过氧化葡萄糖、丙酮酸、氨基酸和乳酸等能源物质来获得生理活动所需要的能量。当生物体处在血糖浓度较低或者空腹时，心脏对脂肪酸的摄取能力很强，此时心肌的耗氧量几乎都提供用于脂肪酸的氧化。

当心肌供氧充分时，脂肪酸可以通过β-氧化高效地为心肌提供能量；当心肌缺血或供氧低下时，此时脂肪酸的β-氧化受到了抑制，变成糖代谢为心肌代谢提供能量，心肌对脂肪酸的利用率下降。

心肌脂肪酸显像剂的代谢路径基本类似于游离脂肪酸。脂肪酸的氧化分为 3步，第一步是脂肪酸在细胞液中进行的活化，脂肪酸被脂酰CoA合成酶催化生产脂酰CoA，第二步是脂酰CoA转运进入线粒体，第三步是脂酰CoA发生β-氧化。长链脂肪酸经过一次β-氧化，从β碳原子的位置开始掉2个碳的乙酰CoA，生成少两个碳的脂酰CoA，在此过程中释放出大量的能量。

脂酰CoA在心肌内发生β-氧化分为4步，分别为α和β位脱去一个H、加水、脱氢生成β-脂酰CoA、硫解，每步对应不同的酶：脂酰辅酶A脱氢酶、烯酰辅酶A水合酶、3-OH脂酰辅酶A脱氢酶、β-酮酯酰辅酶A硫解酶。

目前，临床上应用的心肌代谢显像剂主要包括：用于PET显像的[11C]- 棕榈酸盐和[18F]-FDG，和用于SPECT显像的[123I]-IPPA和[123I]BMIPP。其中11C的半衰期仅为110min，对标记和显像的速度有较高的要求，18F-FDG 价格较为昂贵，而放射性碘标记的药物在体内易脱碘，而且需从专门的公司购买放射性碘标记的药物，这些不同的药物都有自身无法克服的缺点。99mTc 具有优良的核素性质，它的半衰期为6h，便于药物的标记、运输和使用，且价格低廉、获取方便，另一个极其重要的优点是99mTc具有不同的化合价(+1～ +7)，可以形成多种不同配位结构，配位数多为5，6，7。其中有已实现药盒化的标记方法，方便临床应用。但是，目前仍没有99mTc标记的心肌代谢显像剂成功用于临床。

接着在2008年，Byung Chul Lee等在化合物[99mTc]CpTT-PA的结构基础上引入羰基，设计并合成了化合物99mTc-CpTT-16-oxo-HAD，目的是增加亲水性，降低肝摄取。该化合物在心肌内以β-氧化的方式代谢，最终代谢生成化合物99mTc-CpTT-4-oxo-butyric acid，比化合物[99mTc]CpTT-PA的心肌摄取值更高，但是肝本底、肺本底和肾本底较高，没有得到理想的靶与非靶比。

2012年，曾华辉等在化合物99mTc-CpTT-16-oxo-HAD的长链的结构基础上引入酰胺键，合成了化合物99mTc-CpTT-6-oxo-HAUA，该化合物的在肝中的有所降低，但是心肌摄取值比较低，心肌摄取在1min时仅为4.37％ID/g。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的是提供一种标记的含异氰基的脂肪酸类衍生物及其应用，解决了现有技术中存在的不足。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现：

一种标记的含异氰基的脂肪酸类衍生物，其通式如式Ⅰ所示：

其中，M为标记的锝^99mTc或标记的铼Re；

R、R1、R2、R3、R4和R5均为H、脂肪族链或脂环族链，这五个基团为完全相同、完全不相同或部分相同的基团；

z为1-6的整数，6-z即为6减去z，p为0或1，n为1-28的正整数；t为 0-5的整数，a为0-5的整数。

进一步地，若p为1，a和t均为1时，式Ⅰ为以下通式Ⅱ：

若p为0时，a和t均为1时，式Ⅰ为以下通式Ⅲ：

一种标记的含异氰基的脂肪酸类衍生物在心肌显像剂中的应用。

本发明提供了一种标记的含异氰基的脂肪酸类衍生物及其应用，其主要具有如下效果：本发明提供了一种完全新型的结构类型，即当该新结构中的至少一个配体末端为羧酸或酯基时，即z不等于0时，该化合物在心肌中的摄取高、滞留时间长，可作为心肌脂肪酸代谢显像剂，具有重要的临床应用前景。

附图说明

对本发明中涉及到的谱图进行简单说明，如下所示。

图1是本发明实施例4所述的配体1的质谱图；

图2是本发明实施例3所述的产物Ⅰ-1-Re的质谱图；

图3是本发明实施例3所述的产物Ⅰ-1-Re的HPLC图；

图4是本发明实施例3所述的Ⅰ-2-Re的质谱图；

图5是本发明实施例3所述的Ⅰ-2-Re的HPLC图；

图6是本发明实施例3所述的Ⅰ-1-^99mTc的HPLC图；

图7是本发明实施例3所述的Ⅰ-2-^99mTc的HPLC图；

图8是本发明实施例5所述的Ⅰ-3-Re的质谱图；

图9是本发明实施例5所述的Ⅰ-4-Re的质谱图；

图10是本发明实施例5所述的Ⅰ-4-Re的HPLC图；

图11是本发明实施例5所述的Ⅰ-4-^99mTc的HPLC图；

图12是本发明实施例6所述的Ⅰ-5-Re的质谱图；

图13是本发明实施例6所述的Ⅰ-5-Re的HPLC谱图；

图14是本发明实施例6所述的Ⅰ-6-Re的HPLC谱图；

图15是本发明实施例6所述的Ⅰ-6-Re的质谱图；

图16是本发明实施例6所述的Ⅰ-5-^99mTc的HPLC谱图；

图17是本发明实施例6所述的Ⅰ-6-^99mTc的HPLC谱图；

图18是本发明实施例5所述的Ⅰ-3-Re的HPLC谱图；

图19是本发明实施例5所述的Ⅰ-3-^99mTc的液相图。

具体实施方式

以下提供的本发明的实施例的详细描述并非旨在限制要求保护的本发明的范围，而是仅仅表示本发明的选定实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通方法人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1

一种标记的含异氰基的脂肪酸类衍生物，其通式如式Ⅰ所示：

其中，M为标记的锝^99mTc或标记的铼Re；R、R1、R2、R3、R4和R5 均为H、脂肪族链或脂环族链，这五个基团为完全相同、完全不相同或部分相同的基团。

z为1-6的整数，6-z即为6减去z，例如：若z为2，则6-z为4；p为0 或1，n为1-28的正整数；t为0-5的整数，a为0-5的整数。

优选地，R、R1、R2、R3、R4和R5均为H或脂肪族链，脂肪族链优选为脂肪烃，可更优选为1-28个C的脂肪烃。

优选地，所述a和t为1-3的整数，更优选为：a和t均为1。

优选地，n为1-15的正整数，如1、3、5、7、9、11、13、15等等。

优选地，若p为1，a和t均为1时，式Ⅰ为以下通式Ⅱ：

若p为0时，a和t均为1时，式Ⅰ为以下通式Ⅲ：

更优选地，若p为1，a和t均为1时，通式Ⅰ包括但不限于以下化合物：

若p为0，a和t均为1时，通式Ⅰ包括但不限于以下化合物：

其中，M为标记的锝^99mTc，R、R1、R2、R3、R4和R5均为H或1-4个 C的脂肪烃，n为1-28的正整数。

在本实施例中，R更优选为H、CH₃或CH₂CH₃，R1、R2、R3、R4和R5 均更优选为甲基CH₃

实施例2

选实施例1中的化合物的合成路线和方法如下所示：

1、配体1的合成

①合成路线如下：

其中，R6与实施例1中的R一致，n和a的参数与实施例一致，这里不再重复说明。

②合成过程如下：

化合物1的合成：于圆底烧瓶中加入30mL(0.37mol)甲酸乙酯，用恒压滴液漏斗缓慢滴加0.07mol的原料1，升温至60℃加热36h后旋掉溶剂，即得产品6.78g，产率97.3％。

化合物3的合成：于圆底烧瓶中加入7.96mmol化合物2，16mL乙醇，室温下用恒压滴液漏斗滴加3.79g(31.84mmol)SOCl₂后升温回流8h。旋掉溶剂，加入少量水后，二氯甲烷萃取两次，合并有机相，无水NaSO₄干燥，过滤，旋去溶剂，得产物。

化合物4的合成：于圆底烧瓶中加入7.96mmol化合物3，置于冰浴中，加入31.84mmol甲酸后再缓慢滴加三乙胺。滴加完毕，加热至50℃反应过夜。加入盐水后乙酸乙酯萃取，有机相分别水洗，1mol/L盐酸洗，饱和碳酸钠洗，盐水洗。硫酸钠干燥后旋掉溶剂，得到粗产物直接进行下一步反应。加入甲醇和1滴浓盐酸，于室温下反应2h，旋去大部分甲醇后，加入少量水和乙酸乙酯萃取，饱和碳酸钠洗，水洗，盐水洗，得到有机相，干燥，旋去溶剂，经过 TLC纯化后，得到产品。

化合物5的合成：于圆底烧瓶中加入1.02g(10.33mmol)化合物1，加入10mL无水二氯甲烷，10.33mmol化合物4，12.8mol乙酸汞，常温搅拌14h 后过滤，旋去溶剂后，溶解于二氯甲烷中，缓慢分批加入10.84mmol NaBH₄，继续搅拌2h后过滤。滤液旋去溶剂，得到产品。

配体1的合成：于圆底烧瓶中加入10.33mmol化合物5，加入10mL无水二氯甲烷，10.33mmol三乙胺，缓慢滴加4.08g(12.8mol)三氯氧磷，滴加完毕常温搅拌6h停止反应，加入80mL 20％碳酸钠水溶液，搅拌45min后二氯甲烷萃取两次，合并有机相，盐水洗后无水MgSO₄干燥。过滤后选调溶剂，得到粗产品，经液相提纯后的产物。

2、配体2的合成

①合成路线如下：

其中，R5与实施例1中的R5一致，t的参数也与实施例一致，这里不再重复说明。

②合成过程为：

化合物1的合成：于圆底烧瓶中加入30mL(0.37mol)甲酸乙酯，用恒压滴液漏斗缓慢滴加0.07mol的原料1，升温至60℃加热36h后旋掉溶剂，即得产品6.78g，产率97.3％。

配体2的合成：于圆底烧瓶中加入10.33mmol化合物6，加入10mL无水二氯甲烷，10.33mmol三乙胺，缓慢滴加4.08g(12.8mol)三氯氧磷，滴加完毕常温搅拌6h停止反应，加入80mL 20％碳酸钠水溶液，搅拌45min后二氯甲烷萃取两次，合并有机相，盐水洗后无水MgSO₄干燥。过滤后选调溶剂，得到粗产品，经液相提纯后的产物。

3、配体3的合成

①合成路线如下：

②合成过程为：

20ml的甲醇加入圆底烧瓶中，将5mmol的化合物1溶解在甲醇中，然后加入20ml甲酸乙酯和750μl的三乙胺，回流36小时，旋去溶剂，剩余物溶解于二氯甲烷中，水洗三次，油相旋干得无色油状物2。

化合物2(3.0mol)溶解在15ml二氯甲烷中，加入15.0mol的三乙胺。在0℃下滴加3.3mmol POCl₃在30min，室温反应3h然后用饱和NaHCO₃淬灭，用无水MgSO₄干燥，过滤浓缩，经快速硅胶柱(流动相为二氯甲烷)的化合物3。

4、通式Ⅱ的合成

若M为^99mTc时，则合成方法为：配体1和配体2按摩尔比投料[即，配体1：配体2＝m：(6-m)]，总量约1-5mg，溶解于10毫升小瓶中的700μl生理盐水中，然后将200μL CB(柠檬酸缓冲液，0.1m，pH＝6.6)和20μl的SnCl 2·2H2O溶液(1毫克SnCl 2·2H2O/1毫升)加入小瓶中。在加入100μl含99 MTcCO4的盐水(370-3700Mbq)后，将溶液在100℃加热30分钟。二氯甲烷萃取，氮气吹扫除去二氯甲烷，然后溶于200μL甲醇中用0.3N NaOH 50μL 处理在70C反应10min，冷却后用0.1N HCl 150μL酸化，再用二氯甲烷萃取，用HPLC纯化(水：甲醇＝8:2)，即得到^99mTc标记的通式Ⅱ。

若M为铼时，则合成方法为：将两个配体、NH₄ReO₄和无水氯化亚锡溶于水中，使用龙胆酸调pH＝6，煮沸30分钟，二氯甲烷萃取，旋去二氯甲烷，得通式Ⅱ，且得到酯，即R为脂肪族。

然后将所得的酯溶于甲醇中用0.3N NaOH在70℃反应10min，冷却后用 0.1N HCl酸化至pH＝2，再用二氯甲烷萃取，用HPLC纯化(水：甲醇＝8:2)，得通式Ⅱ，且得酸，即R＝H。

5、通式Ⅲ的合成

配体2和配体3按摩尔比投料[即，配体2：配体3＝(6-m)：m]，具体过程与通式Ⅱ的合成过程一致，这里不再重复限定。

实施例3

以M＝Re和^99mTc，m＝1，n＝5为例来合成下述化合物Ⅰ-1-Re(酯)、Ⅰ -2-Re(酸)、Ⅰ-1-^99mTc(酯)和Ⅰ-2-^99mTc(酸)。

配体1的合成路线：

合物1的合成：于圆底烧瓶中加入30mL(0.37mol)甲酸乙酯，用恒压滴液漏斗缓慢滴加5g(0.07mol)2-甲基丙烯胺(原料1)，升温至60℃加热36h 后旋掉溶剂，即得产品6.78g，产率97.3％。

化合物3的合成：于圆底烧瓶中加入1.56g(7.96mmol)6-溴己酸(即化合物2)和16mL乙醇，室温下用恒压滴液漏斗滴加3.79g(31.84mmol)SOCl₂后升温回流8h。旋掉溶剂，加入少量水后，二氯甲烷萃取两次，合并有机相，无水NaSO₄干燥，过滤，旋去溶剂，得1.59g产物，即化合物3，收率89.2％。

化合物4的合成：于圆底烧瓶中加入1.56g(7.96mmol)6-溴己酸乙酯(即化合物3)，置于冰浴中，加入3.79g(31.84mmol)甲酸后再缓慢滴加三乙胺。滴加完毕，加热至50℃反应过夜。加入盐水后乙酸乙酯萃取，有机相分别水洗，1mol/L盐酸洗，饱和碳酸钠洗，盐水洗。硫酸钠干燥后旋掉溶剂，得到粗产物直接进行下一步反应；即直接加入甲醇和1滴浓盐酸，于室温下反应2 h，旋去大部分甲醇后，加入少量水和乙酸乙酯萃取，饱和碳酸钠洗，水洗，盐水洗，得到有机相，干燥，旋去溶剂，经过TLC纯化后，得到产品，即得到化合物4，收率82.2％。

化合物5的合成：于圆底烧瓶中加入1.02g(10.33mmol)化合物1，加入 10mL无水二氯甲烷，1.80g(10.33mmol)6-羟基乙酸乙酯(即化合物4)，4.08g (12.8mol)乙酸汞，常温搅拌14h后过滤，旋去溶剂后，溶解于二氯甲烷中，缓慢分批加入0.41g(10.84mmol)NaBH₄，继续搅拌2h后过滤。滤液旋去溶剂，得到产品，即得到化合物5，收率为70％。

配体1的合成：于圆底烧瓶中加入1.02g(10.33mmol)化合物5，加入10mL 无水二氯甲烷，1.80g(10.33mmol)三乙胺，缓慢滴加4.08g(12.8mol)三氯氧磷，滴加完毕常温搅拌6h停止反应，加入80mL 20％碳酸钠水溶液，搅拌45 min后二氯甲烷萃取两次，合并有机相，盐水洗后无水MgSO₄干燥。过滤后选调溶剂，得到粗产品，经液相提纯后的产物，即为配体1，收率为75％。

配体2

的合成：合成方法与实施例2一致，这里不再赘述。

目标产物Ⅰ-1-Re的合成：然后按如下摩尔投料比投料，配体2：配体1： NH₄ReO₄：无水氯化亚锡＝5:1:1:4，将这些原料溶于水中，使用龙胆酸调pH＝6，煮沸30分钟，二氯甲烷萃取，旋去二氯甲烷，得到酯，即以下化合物Ⅰ-1-Re，用HPLC纯化(水：甲醇＝8:2)，见图2和3，ESI＝993.48。

将所得的化合物Ⅰ-1-Re溶于甲醇中用0.3N NaOH在70℃下反应10min，冷却后用0.1N HCl酸化至pH＝2，再用二氯甲烷萃取，用HPLC纯化(水:甲醇＝8:2)，得产物酸(R＝H)，即终产物Ⅰ-2-Re，见图4-5所示，ESI＝965.50。

目标产物Ⅰ-1-^99mTc的合成：加入配体1mg(配体2与配体1的摩尔比为5： 1)，溶解于10毫升小瓶中的700μL生理盐水中，然后将200μLCB(柠檬酸缓冲液，0.1m，pH＝6.6)和20μL的SnCl₂·2H₂O溶液(1毫克SnCl ₂·2H₂O/1 毫升)加入小瓶中。在加入100μL含^99mTcO₄ ^-的盐水(370-3700Mbq)后，将溶液在100℃加热30分钟。二氯甲烷萃取，氮气吹扫除去二氯甲烷，得到相应的酯，即目标产物Ⅰ-1-^99mTc，用HPLC(水：甲醇＝8:2)出峰位置(见液相图6)与Ⅰ-1-Re的相应酯一致，说明具有相应的结构。

然后将上面得到的目标产物Ⅰ-1-^99mTc溶于200μL甲醇中用0.3N NaOH 50μL处理在70℃反应10min，冷却后用0.1N HCl 150μL酸化，再用二氯甲烷萃取，得目标产物Ⅰ-2-^99mTc，用HPLC纯化(水:甲醇＝8:2)，其谱图见图7，与Ⅰ-2-Re的液相图谱基本一致，说明具有相同的结构。

目标产物Ⅰ-1-^99mTc的生物分布：实验前将雌性KM鼠(22-25g,n＝5)禁食12h，将纯化后的放射性配合物Ⅰ-1-^99mTc配成100μCi/mL的生理盐水(含10％乙醇)溶液。取100μL上述溶液稀释至10mL，作为％ID。通过尾静脉注射100μL上述溶液，分别在5,15,30和60min、120min五个时间点断颈处死，收集血、脑、心、肝、脾、肺、肾、肌、骨及尾，称其质量并测量计数，计算各组织和器官的计数分布(单位：％ID/g)

表2 M＝^99mTc，m＝1，n＝5的生物分布(％ID/g,n＝5,mean±SD)

通过上述结果发现，本发明中的化合物效果非常优异。

在本实施例中，由于标记的锝^99mTc具有放射性，无法直接测其质谱图，故通常先合成铼Re标记的目标产物，测其质谱图和液相等，若产物没有问题，则以相同方法制备锝^99mTc标记的目标产物，然后测其液相，并将该液相谱图与Re标记的目标产物的液相谱图进行对比，若基本一致，则可确定锝^99mTc 标记的目标产物的结构。本发明中其它实施例中也是通过该方法确认。

实施例4

以m＝1，n＝3，R、R1、R2、R3、R4和R5均为CH₃为例来合成下述化合物Ⅰ-2。

1、

将150mL无水甲醇加入到250mL圆底烧瓶中，加入0.760mL(0.84g)γ-丁内酯(99％)，量取8.4mL Et3N，加入恒压滴液漏斗缓慢滴加，在60℃条件下回流21h。减压蒸馏无水甲醇，二氯甲烷萃取，减压蒸馏二氯甲烷，得到1.06g 产物，产率92％。该过程也可采用实施例2中配体1的合成过程来进行制备，即可从化合物2合成化合物3，再用化合物3合成化合物4，即为上述产物。

2、

将150mL甲酸乙酯加入到250mL圆底烧瓶中，称取5.0g 2-甲基烯丙基胺 (97％)加入恒压滴液漏斗，60℃油浴回流3h，升温到70℃回流14h，减压蒸馏，得到6.49g产物，产率96％。

3、

量取20mL无水二氯甲烷加入到100mL圆底烧瓶中，按原料比1：1称取 1.25N的乙酸汞缓慢加入反应液中，常温搅拌14h。滤纸过滤，将滤液放入冰浴中，缓慢加入0.4N NaBH₄，待搅拌30min，常温下搅拌4h。滤纸过滤，将滤液倒入沙星漏斗，减压抽滤，减压蒸馏得到0.73N产物，产率73％。

4、

称取1.0N原料加入到装有20mL无水二氯甲烷的圆底烧瓶中，加入2.45N 的无水Et₃N、称取1.1N无水POCl₃加入到装有10mL无水二氯甲烷的恒压滴液漏斗中，在冰浴条件下缓慢滴加。常温下搅拌15h。将反应液加入到20％ Na₂CO₃溶液中搅拌3h，过滤，二氯甲烷萃取3次，减压蒸馏得到0.82N产物，即配体1，产率82％，质谱图见图1，ESI(M+H＝199.9)。

5、

配体1(n＝3，R＝H)和配体2按摩尔比投料1：5，总量约4mg，溶解于10毫升小瓶中的700μL生理盐水中，然后将200μL CB(柠檬酸缓冲液，0.1 m，pH＝6.6)和20μL的SnCl ₂·2H₂O溶液(1毫克SnCl₂·2H₂O/1毫升)加入小瓶中。在加入100μL含^99mTcO₄ ^-的盐水(370-3700Mbq)后，将溶液在100℃加热30分钟。二氯甲烷萃取，氮气吹扫除去二氯甲烷，然后溶于200μl甲醇中用0.3N NaOH 50μL处理在70C反应10min，冷却后用0.1N HCl 150μL 酸化，再用二氯甲烷萃取，用HPLC纯化(水：甲醇＝8:2)，得上述终产物Ⅰ-2。

6、终产物Ⅰ-2的生物分布情况

实验前将雌性KM鼠(22-25g,n＝5)禁食12h，将纯化后的放射性配合物Ⅰ-2配成100μCi/mL的生理盐水(含10％乙醇)溶液。取100μL上述溶液稀释至10mL，作为％ID。通过尾静脉注射100μL上述溶液，分别在5,15,30和60 min、120min五个时间点断颈处死，收集血、脑、心、肝、脾、肺、肾、肌、骨及尾，称其质量并测量计数，计算各组织和器官的计数分布(单位：％ID/g)

表1·终产物Ⅰ-2的生物分布(％ID/g,n＝5,mean±SD)

通过上述结果发现，本发明中的化合物效果优异。

在本实施例中，目标产物鉴定方法与实施例3一致，本实施例省略终产物谱图和相应的铼标记的合成。

实施例5

以M＝^99mTc，m＝6，n＝5，R6为乙基或H，为例来测试以下化合物Ⅰ-3和Ⅰ-4的生物分布情况。

合成路线：

配体1的合成方法与实施例3一致，这里不再赘述。

化合物Ⅰ-3-Re的合成：将配体1、NH₄ReO₄和无水氯化亚锡溶于水中(按如下摩尔投料比投料，配体1：NH₄ReO₄：无水氯化亚锡＝6:1:4溶于水中)，使用龙胆酸调pH＝6，煮沸30分钟，二氯甲烷萃取，旋去二氯甲烷，得到酯 (R为脂肪族)，即Ⅰ-3-Re，见图8和18所示，ESI＝1633.76。

然后将化合物Ⅰ-3-Re溶于甲醇中用0.3N NaOH在70℃反应10min，冷却后用0.1NHCl酸化至pH＝2，再用二氯甲烷萃取，用HPLC纯化(水：甲醇＝8:2)，得酸(R＝H)，即为化合物Ⅰ-4-Re，见图9-10，ESI＝1465.64。

目标产物Ⅰ-3-^99mTc的合成：配体(n＝5，R＝-CH₂CH₃)1mg，溶解于10 毫升小瓶中的700μL生理盐水中，然后将200μLCB(柠檬酸缓冲液，0.1m， pH＝6.6)和20μL的SnCl₂·2H2O溶液(1毫克SnCl ₂·2H₂O/1毫升)加入小瓶中。在加入100μL含^99mTcO₄ ^-的盐水(370-3700Mbq)后，将溶液在100℃加热30分钟。二氯甲烷萃取，氮气吹扫除去二氯甲烷，得到相应的酯，即目标产物Ⅰ-3-^99mTc，其液相图谱参见图19，其出峰时间与Ⅰ-3-Re基本一致。

目标产物Ⅰ-4-^99mTc的合成：然后将上面得到的产物溶于200μL甲醇中用 0.3NNaOH50μL处理在70C反应10min，冷却后用0.1N HCl 150μL酸化，再用二氯甲烷萃取，得终产物Ⅰ-4-^99mTc，用HPLC纯化(水：甲醇＝8:2)，其液相谱图如图11所示，则出峰时间与Ⅰ-4-Re基本一致。

终产物Ⅰ-4-^99mTc的生物分布：实验前将雌性KM鼠(22-25g,n＝5)禁食 12h，将纯化后的放射性配合物Ⅰ-4-^99mTc配成100μCi/mL的生理盐水(含 10％乙醇)溶液。取100μL上述溶液稀释至10mL，作为％ID。通过尾静脉注射100μL上述溶液，分别在5,15,30和60min、120min五个时间点断颈处死，收集血、脑、心、肝、脾、肺、肾、肌、骨及尾，称其质量并测量计数，计算各组织和器官的计数分布(单位：％ID/g)。

表3 M＝^99mTc，m＝6，n＝5的生物分布(％ID/g,n＝5,mean±SD)

通过上述结果发现，整体效果较佳。

实施例6

通式Ⅲ中的目标产物Ⅰ-5和Ⅰ-6的合成。

合成过程：

5mmol的化合物1溶解在20ml的甲醇中圆底烧瓶中，然后加入20ml甲酸乙酯和750μl的三乙胺，回流36小时，旋去溶剂，剩余物溶解于二氯甲烷中，水洗三次，油相旋干的46％的无色油状物2。

化合物2(3.0mol)溶解在15ml二氯甲烷中，加入15.0mol的三乙胺。在 0℃下滴加3.3mmol POCl₃在30min，室温反应3h然后用饱和NaHCO₃淬灭，用无水MgSO₄干燥，过滤浓缩，经快速硅胶柱(流动相为二氯甲烷)的化合物3，即为配体3，产率89％，测定质谱，其质谱数据为：ESI(M+H)＝170.3。

配体2

的合成方法见实施例3。

终产物Ⅰ-5-Re的合成：按如下摩尔投料比投料，配体2：配体3： NH₄ReO₄：无水氯化亚锡＝5:1:1:4，并将这些组分均溶于水中，使用龙胆酸调 pH＝5煮沸30分钟，二氯甲烷萃取，旋去二氯甲烷，得到相应的酯配合物，即Ⅰ-5-Re，用HPLC纯化(水：甲醇＝8:2)，如图12-13所示，ESI＝921.78。

终产物Ⅰ-6-Re的合成：将Ⅰ-5-Re溶于甲醇中，用0.3N NaOH在70℃反应10min，冷却后用0.1N HCl酸化至pH＝2，再用二氯甲烷萃取，得到相应的酸，即为Ⅰ-6-Re，用HPLC纯化(水：甲醇＝8:2)，如图14-15所示，ESI＝907.49。

目标产物Ⅰ-5-^99mTc的合成：按配体2和配体3的摩尔比投料5:1，总量约 4mg，溶解于10毫升小瓶中的700μL生理盐水中，然后将200μL CB(柠檬酸缓冲液，0.1m，pH＝6.6)和20μL的SnCl ₂·2H₂O溶液(1毫克SnCl₂·2H₂O/1 毫升)加入小瓶中。再加入100μL含^99mTcO₄ ^-的盐水(370-3700Mbq)后，将溶液在100℃加热30分钟；二氯甲烷萃取，氮气吹扫除去二氯甲烷，得到相应的酯，即目标产物Ⅰ-5-^99mTc，用HPLC(水：甲醇＝8:2)出峰位置(见液相图16所示)与酯Ⅰ-5-Re的时间一致，说明具有相应的结构。

目标产物Ⅰ-6-^99mTc的合成：将Ⅰ-5-^99mTc溶于200μl甲醇中用0.3N NaOH 50μL处理在70℃反应10min，冷却后用0.1N HCl 150μL酸化，再用二氯甲烷萃取，得目标产物Ⅰ-6-^99mTc，用HPLC纯化(水：甲醇＝8:2)，如图17所示，其与Ⅰ-6-Re相应的液相图谱基本一致，说明具有相同的结构。

以上所述仅为本发明的优选实施例，并不用于限制本发明，对于本领域技术人员而言，本发明可以有各种改动和变化。凡在本发明的精神和原理之内所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。