阅读说明：本技术 一种纳米纤维素基3d打印的乳酸菌包埋材料及其制备方法与应用 (nano cellulose based 3D printed lactic acid bacteria embedding material and preparation method and application thereof ) 是由 王小英 周微 吴正国 于 2019-08-30 设计创作，主要内容包括：本发明公开了一种纳米纤维素基3D打印的乳酸菌包埋材料及其制备方法与应用。该方法包括：将海藻酸钠加入纳米纤维素溶液中,混匀,离心,得到混合液；将壳聚糖加入水中,混匀,加入冰醋酸,得到壳聚糖溶液；往壳聚糖溶液中加入乳酸菌菌粉,混匀,得到壳聚糖-乳酸菌菌悬液；将混合液作为外层材料,将壳聚糖-乳酸菌菌悬液作为内层材料,进行3D打印,得到打印产物；将氯化钙溶液喷淋在打印产物的表面上,进行固化,冷干得到所述纳米纤维素基3D打印的乳酸菌包埋材料。该纳米纤维素基3D打印的乳酸菌包埋材料,其以纳米纤维素和壳聚糖为载体固定乳酸菌,能够实现高效的酸奶连续式循环发酵,可解决乳酸菌保藏难、利用率低及成本高的问题。(The invention discloses a nano cellulose-based 3D printed lactic acid bacteria embedding material and a preparation method and application thereof. The method comprises the following steps: adding sodium alginate into the nano-cellulose solution, uniformly mixing, and centrifuging to obtain a mixed solution; adding chitosan into water, mixing, and adding glacial acetic acid to obtain chitosan solution; adding lactobacillus powder into the chitosan solution, and uniformly mixing to obtain chitosan-lactobacillus suspension; 3D printing is carried out on the mixed solution serving as an outer layer material and the chitosan-lactobacillus suspension serving as an inner layer material to obtain a printed product; and spraying a calcium chloride solution on the surface of the printed product, curing, and carrying out cold drying to obtain the lactobacillus embedding material for the nanocellulose-based 3D printing. According to the lactobacillus embedding material for the nanocellulose-based 3D printing, nanocellulose and chitosan are used as carriers to fix lactobacillus, efficient continuous circulating fermentation of yoghourt can be achieved, and the problems of difficult preservation, low utilization rate and high cost of the lactobacillus can be solved.)

一种纳米纤维素基3D打印的乳酸菌包埋材料及其制备方法与 应用

技术领域

本发明属于食品发酵领域，具体涉及一种纳米纤维素基3D打印的乳酸菌包埋材料及其制备方法与应用。

背景技术

目前，我国酸奶行业发展势头很足，其以独特的口感、风味、高的营养价值受到广大消费者的青睐。酸奶发酵所用到的乳酸菌是一类人体肠道益生菌，其在食品、医药等领域得到了广泛的开发与应用。由于湿态乳酸菌保藏期较短，目前常用真空冷冻干燥技术将湿态乳酸菌制成干态，以延长其保藏时间。但是，冻干的相转变过程会使微生物细胞损失、死亡或某些酶蛋白钝化。为此，需要开发一种良好的乳酸菌保护剂，以最大限度的降低乳酸菌的损伤、死亡等，提高其存活率。传统乳酸饮品、酸奶等的发酵是直接添加干态或湿态乳酸菌，为一次性添加发酵，菌种消耗大、操作复杂、成本高。

3D打印技术在精准设计和构造材料结构上具有突出优势。利用同轴3D打印技术精准构造具有中空微细管道结构的复合材料，材料中的中空微结构能够为乳酸菌的保存，活化和增殖提供条件。

纳米纤维素是一种天然多糖且具有优良的剪切稀化性能，适用于作为3D墨水的基质，同时纳米纤维素也是一种新型膳食纤维，对人体胃肠道具有保健作用。但是仅添加纳米纤维素的3D打印墨水的粘弹性不足。

发明内容

为了克服现有技术存在的上述不足，本发明的目的是提供一种纳米纤维素基3D打印的乳酸菌包埋材料及其制备方法与应用。

本发明提供的纳米纤维素基3D打印的乳酸菌包埋材料，其具体为一种无毒且能够为菌种的保藏、活化、增殖提供微环境的纳米纤维素基3D打印乳酸菌包埋材料。

本发明的目的还在于提供所述的一种纳米纤维素基3D打印的乳酸菌包埋材料的制备方法。所述制备方法采用纳米纤维素为外层打印墨水的基质，以海藻酸钠为流变增强剂，制备得到纳米纤维素基同轴3D打印外层墨水；同轴3D打印的内层采用分散在壳聚糖溶液基质中的乳酸菌菌悬液；然后通过同轴3D打印技术制备得到一种具有中空微管道的纳米纤维素基乳酸菌包埋复合材料，即所述纳米纤维素基3D打印的乳酸菌包埋材料。

本发明提供的一种纳米纤维素基3D打印的乳酸菌包埋材料的制备方法中，使用了固定化技术，利用物理或化学方法限制乳酸菌机动性，并保证活性，该技术为菌种的保藏开辟了新的途径。本发明将固定化技术与连续式培养技术相结合，开发一种将连续发酵和乳酸菌保藏技术结合起来的材料作为新型酸奶发酵剂以实现酸奶的连续接种和发酵。

本发明的目的至少通过如下技术方案之一实现。

本发明提供的一种纳米纤维素基3D打印的乳酸菌包埋材料的制备方法，其采用纳米纤维素与海藻酸钠的混合体系为外层打印墨水；采用分散在壳聚糖溶液中的乳酸菌菌悬液为内层打印溶液；通过同轴3D打印制备得到一种无毒且能够为菌种的保藏、活化、增殖提供微环境的纳米纤维素基3D打印乳酸菌包埋材料。

本发明提供的纳米纤维素基3D打印的乳酸菌包埋材料是一种酸奶连续发酵用纳米纤维素基乳酸菌包埋材料。

本发明提供了一种纳米纤维素基3D打印乳酸菌包埋材料及其制备方法及其应用。本发明提供了一种通过同轴3D打印技术制备的具有中空微结构的乳酸菌包埋材料，其外层采用纳米纤维素为基质，海藻酸钠为流变增强剂，内层为壳聚糖基质下的乳酸菌分散液。该材料以纳米纤维素和壳聚糖为载体固定乳酸菌，实现高效的酸奶连续式循环发酵，可解决乳酸菌保藏难、利用率低、成本高的问题。

本发明提供的一种纳米纤维素基3D打印的乳酸菌包埋材料的制备方法，包括如下步骤：

（1）搅拌条件下，将海藻酸钠加入纳米纤维素溶液中，混合均匀，然后灌装入打印容器中进行离心处理，以消除气泡，得到混合液（纳米纤维素与海藻酸钠的混合体系）；

（2）在室温条件下，将壳聚糖加入纯水中，混合均匀，然后加入冰醋酸（使壳聚糖充分溶解在水中），混合均匀，得到壳聚糖溶液；

（3）在搅拌条件下，往步骤（2）所述壳聚糖溶液中加入乳酸菌菌粉，混合均匀，得到壳聚糖-乳酸菌菌悬液；

（4）将步骤（1）所述混合液作为外层材料，将步骤（3）所述壳聚糖-乳酸菌菌悬液作为内层材料，进行同轴3D打印，得到3D打印产物（湿态纳米纤维素基3D打印乳酸菌包埋材料）；

（5）将氯化钙溶液均匀喷淋在步骤（4）所述3D打印产物的表面上，进行固化处理，然后冷冻干燥，得到所述纳米纤维素基3D打印的乳酸菌包埋材料。

进一步地，步骤（1）所述纳米纤维素溶液的质量体积比浓度为0.03-0.10g/mL；所述海藻酸钠和纳米纤维素溶液的质量比为1:10-1:100。

优选地，所述海藻酸钠为海藻酸钠干粉，其纯度级别为分析纯。

进一步地，步骤（1）所述离心处理的离心速率为2000-8000rpm，离心处理的时间为1-10min。

进一步地，步骤（2）所述壳聚糖与水的质量体积比为1-10：1g/L；所述冰醋酸的体积为所述壳聚糖溶液体积的0.5-2.0%（体积分数）。

进一步地，步骤（3）所述乳酸菌菌粉与所述壳聚糖溶液的质量比为1:5-1:100。

进一步地，步骤（4）所述同轴3D打印的打印压力为0.1-0.5MPa，所述同轴3D打印的针头尺寸为30G/21G-18G/14G；所述外层打印的速率为1-10mm/s；所述内层打印的速率为1-5mL/h。

进一步地，步骤（4）得到的3D打印产物无须干燥，直接在步骤（5）中用氯化钙溶液均匀喷淋到所述3D打印产物上以进行固化处理。

进一步地，步骤（5）所述氯化钙溶液的质量体积比浓度为0.01-0.1g/mL；所述3D打印产物（湿重）与氯化钙溶液的质量体积比为1-5：1g/mL。

进一步地，步骤（5）所述固化处理的时间为5-50s。

本发明提供一种由上述的制备方法制得的纳米纤维素基3D打印的乳酸菌包埋材料。

本发明提供的纳米纤维素基3D打印的乳酸菌包埋材料具有优异的3D打印性能且能够有效包埋、固定和保藏乳酸菌。本发明提供的纳米纤维素基3D打印的乳酸菌包埋材料能在4-25℃的条件下，保藏乳酸菌一年以上。

本发明提供的纳米纤维素基3D打印的乳酸菌包埋材料能够应用在酸奶发酵中，尤其是酸奶的连续发酵过程中。

由上述任一项所述的制备方法制得的一种酸奶连续发酵用纳米纤维素基3D打印乳酸菌包埋材料对乳酸菌具有良好的固定包埋作用。

本发明利用同轴3D打印技术，以天然多糖纤维素及壳聚糖为载体固定乳酸菌，制备出具有中空微管道的纳米纤维素基乳酸菌包埋材料，其能够为乳酸菌的固定、活化和增殖提供有利的微环境。从而实现高效的酸奶连续式循环发酵，可解决乳酸菌保藏难、利用率低及成本高的问题。本发明创新性地开发了一种新型食品发酵材料并拓展了3D打印技术在食品发酵领域的应用。

本发明为了满足作为同轴打印外层材料的要求，将海藻酸钠与纤维素纳米纤维复合以改善油墨的性质。如果要在包埋乳酸菌的同时实现其在中空微孔道中的均匀分散，使用的内层打印溶液需要具有一定的稠度。本发明提供的制备方法中，壳聚糖溶液可以提供合适的稠度，且其在酸性条件下能够分解成具有胃肠道保健功能的壳寡糖，并且在连续发酵过程中，打印材料内层的壳聚糖的缓慢释放可以抑制酸奶的过度发酵。因此，壳聚糖适合作为内层打印溶液的基质。

与现有技术相比，本发明具有如下优点和有益效果：

（1）本发明提供的制备方法，采用的原料为纳米纤维素、海藻酸钠和壳聚糖，其具有来源广、成本低及安全无毒的优点；本发明提供的纳米纤维素基3D打印的乳酸菌包埋材料性能稳定，其制备工艺简单，原料来源广，能耗低，有利于大规模工业化生产；

（2）本发明提供的制备方法，利用同轴3D打印技术设计和构建乳酸菌包埋复合材料中的中空微孔道，得到一种纳米纤维素基3D打印的乳酸菌包埋材料，该材料能够为乳酸菌的固定、活化和增殖提供结构条件，具有精确高效地设计构建材料内部结构的优势；

（3）本发明提供的纳米纤维素基3D打印的乳酸菌包埋材料，其能够有效包埋、固定和保藏乳酸菌，在4-25摄氏度条件下，乳酸菌能够在该材料中保藏一年以上；

（4）本发明提供的纳米纤维素基3D打印的乳酸菌包埋材料，经发酵后，该包埋材料（复合材料）中的内层壳聚糖可降解为壳寡糖等功能因子与发酵生产的酸奶复配，形成的复配型酸奶对胃肠道的具有保健作用；

（5）本发明提供的纳米纤维素基3D打印的乳酸菌包埋材料，如果应用于酸奶的连续发酵过程中，以发酵体系的体积为0.5-10L为例，本发明提供的纳米纤维素基3D打印的乳酸菌包埋材料仅需加入1-10g，即可实现酸奶连续接种发酵，能够降低酸奶发酵的成本，减少杂菌污染的几率，从而提高发酵效率。

附图说明

图1为实施例3得到的纳米纤维素基3D打印乳酸菌包埋材料的扫描电子显微镜图。

图2为实施例3得到的纳米纤维素基3D打印乳酸菌包埋材料干态样品中空微管道截面扫描电镜图。

图3为实施例3得到的纳米纤维素基3D打印乳酸菌包埋材料干态样品表面扫描电镜图。

具体实施方式

以下结合实例对本发明的具体实施作进一步说明，但本发明的实施和保护不限于此。需指出的是，以下若有未特别详细说明之过程，均是本领域技术人员可参照现有技术实现或理解的。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，视为可以通过市售购买得到的常规产品。

实施例1

一种纳米纤维素基3D打印的乳酸菌包埋材料的制备方法，包括如下步骤：

（1）在室温条件下，将0.2g海藻酸钠粉末加入20g浓度为0.03g/mL的纳米纤维素溶液中，混合均匀，然后灌注进3D打印针筒中，离心处理以消除气泡，离心处理的速率为2000rpm，离心处理的时间为1min，得到混合液；

（2）将0.01g壳聚糖加入10mL纯水中，搅拌均匀，使壳聚糖均匀分散在水中，然后加入0.05mL冰醋酸，混合均匀，使壳聚糖完全溶解，得到壳聚糖溶液；

（3）往步骤（2）所述壳聚糖溶液中加入2g乳酸菌菌粉，混合均匀，得到壳聚糖-乳酸菌菌悬液；

（4）将步骤（1）所述混合液作为外层材料，将步骤（3）所述壳聚糖-乳酸菌菌悬液作为内层材料，进行同轴3D打印，同轴3D打印的压力为0.1MPa，内层打印速率为1mL/h，外层打印速率为1mm/s，打印针头型号为30G/21G，得到3D打印产物；

（5）将浓度为0.01g/mL氯化钙溶液均匀喷淋在步骤（4）所述3D打印产物的表面上，所述3D打印产物(湿重)与所述氯化钙溶液的质量体积比为1：1g/mL，进行固化处理，固化处理的时间为5s，然后冷冻干燥，得的所述纳米纤维素基3D打印的乳酸菌包埋材料。

实施例1制得的纳米纤维素基3D打印的乳酸菌包埋材料效果与实施例3相似，同样对乳酸菌有良好的固定效果，乳酸菌附着在打印材料上，且其菌体形态饱满完整，可参照图1所示。实施例1制得的纳米纤维素基3D打印的乳酸菌包埋材料效果与实施例3相似，其形态同样保真度高，成型性好，质轻，易于保存和运输，其内部形成了结构完整的中空微孔道，有效地利用中空微管道结构固定、包埋和保藏乳酸菌，在此过程中并不会对乳酸菌的菌体结构造成伤害，可参照图2所示。实施例1制得的纳米纤维素基3D打印的乳酸菌包埋材料效果与实施例3相似，其表面同样较为致密，能够在储存过程中给菌种提供一定的保护，减少杂菌和噬菌体的污染，其表面分布着一些微孔，可以作为酸奶连续发酵时乳酸菌和原料乳的接触点，有利于连续接种发酵，可参照图3所示。

实施例2

一种纳米纤维素基3D打印的乳酸菌包埋材料的制备方法，包括如下步骤：

（1）在室温条件下，将0.3g海藻酸钠粉末加入20g浓度为0.04g/mL的纳米纤维素溶液中，混合均匀，然后灌注进3D打印针筒中，离心处理以消除气泡，离心处理的速率为3000rpm，离心处理的时间为3min，得到混合液；

（2）将0.03g壳聚糖加入10mL纯水中，搅拌均匀，使壳聚糖均匀分散在水中，然后加入0.07mL冰醋酸，混合均匀，使壳聚糖完全溶解，得到壳聚糖溶液；

（3）往步骤（2）所述壳聚糖溶液中加入1.5g乳酸菌菌粉，混合均匀，得到壳聚糖-乳酸菌菌悬液；

（4）将步骤（1）所述混合液作为外层材料，将步骤（3）所述壳聚糖-乳酸菌菌悬液作为内层材料，进行同轴3D打印，同轴3D打印的压力为0.2MPa，内层打印速率为2mL/h，外层打印速率为3mm/s，打印针头型号为25G/18G，得到3D打印产物；

（5）将浓度为0.03g/mL氯化钙溶液均匀喷淋在步骤（4）所述3D打印产物的表面上，所述3D打印产物 (湿重)与氯化钙溶液的质量体积比为2：1g/mL，进行固化处理，固化处理的时间为10s，然后冷冻干燥，得到所述纳米纤维素基3D打印的乳酸菌包埋材料。

实施例2制得的纳米纤维素基3D打印的乳酸菌包埋材料效果与实施例3相似，同样对乳酸菌有良好的固定效果，乳酸菌附着在打印材料上，且其菌体形态饱满完整，可参照图1所示。实施例2制得的纳米纤维素基3D打印的乳酸菌包埋材料效果与实施例3相似，其形态同样保真度高，成型性好，质轻，易于保存和运输，其内部形成了结构完整的中空微孔道，有效地利用中空微管道结构固定、包埋和保藏乳酸菌，在此过程中并不会对乳酸菌的菌体结构造成伤害，可参照图2所示。实施例2制得的纳米纤维素基3D打印的乳酸菌包埋材料效果与实施例3相似，其表面同样较为致密，能够在储存过程中给菌种提供一定的保护，减少杂菌和噬菌体的污染，其表面分布着一些微孔，可以作为酸奶连续发酵时乳酸菌和原料乳的接触点，有利于连续接种发酵，可参照图3所示。

实施例3

一种纳米纤维素基3D打印的乳酸菌包埋材料的制备方法，包括如下步骤：

（1）在室温条件下，将0.4g海藻酸钠粉末加入20g浓度为0.05g/mL的纳米纤维素溶液中，混合均匀，然后灌注进3D打印针筒中，离心处理以消除气泡，离心处理的速率为4000rpm，离心处理的时间为5min，得到混合液；

（2）将0.05g壳聚糖加入10mL纯水中，搅拌均匀，使壳聚糖均匀分散在水中，然后加入0.1mL冰醋酸，混合均匀，使壳聚糖完全溶解，得到壳聚糖溶液；

（3）往步骤（2）所述壳聚糖溶液中加入1.0g乳酸菌菌粉，混合均匀，得到壳聚糖-乳酸菌菌悬液；

（4）将步骤（1）所述混合液作为外层材料，将步骤（3）所述壳聚糖-乳酸菌菌悬液作为内层材料，进行同轴3D打印，同轴3D打印的压力为0.3MPa，内层打印速率为3mL/h，外层打印速率为4mm/s，打印针头型号为22G/19G，得到3D打印产物；

（5）将浓度为0.04g/mL氯化钙溶液均匀喷淋在步骤（4）所述3D打印产物的表面上，所述3D打印产物 (湿重)与氯化钙溶液的质量体积比为3：1g/mL，进行固化处理，固化处理的时间为20s，然后冷冻干燥，得到所述纳米纤维素基3D打印的乳酸菌包埋材料。

实施例3制备的纳米纤维素基3D打印乳酸菌包埋材料对嗜热链球菌有良好的固定效果，如图1的电镜图所示，乳酸菌附着在打印材料上，且其菌体形态饱满完整。通过此方法制备的酸奶连续发酵用纳米纤维素基3D打印乳酸菌包埋材料（即所述纳米纤维素基3D打印的乳酸菌包埋材料），其形态保真度高，成型性好，质轻，易于保存和运输。如图2所示，实施例3提供的纳米纤维素基3D打印的乳酸菌包埋材料内部形成了结构完整的中空微孔道，结合图1所示，实施例3提供的纳米纤维素基3D打印的乳酸菌包埋材料有效地利用中空微管道结构固定、包埋和保藏乳酸菌，在此过程中并不会对乳酸菌的菌体结构造成伤害。如图3所示，实施例3提供的纳米纤维素基3D打印的乳酸菌包埋材料表面较为致密，能够在储存过程中给菌种提供一定的保护，减少杂菌和噬菌体的污染。同时实施例3提供的纳米纤维素基3D打印的乳酸菌包埋材料表面分布着一些微孔，可以作为酸奶连续发酵时乳酸菌和原料乳的接触点，有利于连续接种发酵。

实施例4

一种纳米纤维素基3D打印的乳酸菌包埋材料的制备方法，包括如下步骤：

（1）在室温条件下，将1.0g海藻酸钠粉末加入20g浓度为0.06g/mL的纳米纤维素溶液中，混合均匀，然后灌注进3D打印针筒中，离心处理以消除气泡，离心处理的速率为6000rpm，离心处理的时间为8min，得到混合液；

（2）将0.08g壳聚糖加入10mL纯水中，搅拌均匀，使壳聚糖均匀分散在水中，然后加入0.15mL冰醋酸，混合均匀，使壳聚糖完全溶解，得到壳聚糖溶液；

（3）往步骤（2）所述壳聚糖溶液中加入0.5g乳酸菌菌粉，混合均匀，得到壳聚糖-乳酸菌菌悬液；

（4）将步骤（1）所述混合液作为外层材料，将步骤（3）所述壳聚糖-乳酸菌菌悬液作为内层材料，进行同轴3D打印，同轴3D打印的压力为0.4MPa，内层打印速率为4mL/h，外层打印速率为6mm/s，打印针头型号为19G/15G，得到3D打印产物；

（5）将浓度为0.05g/mL氯化钙溶液均匀喷淋在步骤（4）所述3D打印产物的表面上，所述3D打印产物(湿重)与氯化钙溶液的质量体积比为4：1g/mL，进行固化处理，固化处理的时间为30s，然后冷冻干燥，得到所述纳米纤维素基3D打印的乳酸菌包埋材料。

实施例4制得的纳米纤维素基3D打印的乳酸菌包埋材料效果与实施例3相似，同样对乳酸菌有良好的固定效果，乳酸菌附着在打印材料上，且其菌体形态饱满完整，可参照图1所示。实施例4制得的纳米纤维素基3D打印的乳酸菌包埋材料效果与实施例3相似，其形态同样保真度高，成型性好，质轻，易于保存和运输，其内部形成了结构完整的中空微孔道，有效地利用中空微管道结构固定、包埋和保藏乳酸菌，在此过程中并不会对乳酸菌的菌体结构造成伤害，可参照图2所示。实施例4制得的纳米纤维素基3D打印的乳酸菌包埋材料效果与实施例3相似，其表面同样较为致密，能够在储存过程中给菌种提供一定的保护，减少杂菌和噬菌体的污染，其表面分布着一些微孔，可以作为酸奶连续发酵时乳酸菌和原料乳的接触点，有利于连续接种发酵，可参照图3所示。

实施例5

一种纳米纤维素基3D打印的乳酸菌包埋材料的制备方法，包括如下步骤：

（1）在室温条件下，将2.0g海藻酸钠粉末加入20g浓度为0.10g/mL的纳米纤维素溶液中，混合均匀，然后灌注进3D打印针筒中，离心处理以消除气泡，离心处理的速率为8000rpm，离心处理的时间为10min，得到混合液；

（2）将0.10g壳聚糖加入10mL纯水中，搅拌均匀，使壳聚糖均匀分散在水中，然后加入0.2mL冰醋酸，混合均匀，使壳聚糖完全溶解，得到壳聚糖溶液；

（3）往步骤（2）所述壳聚糖溶液中加入0.1g乳酸菌菌粉，混合均匀，得到壳聚糖-乳酸菌菌悬液；

（4）将步骤（1）所述混合液作为外层材料，将步骤（3）所述壳聚糖-乳酸菌菌悬液作为内层材料，进行同轴3D打印，同轴3D打印的压力为0.5MPa，内层打印速率为5mL/h，外层打印速率为10mm/s，打印针头型号为18G/14G，得到3D打印产物；

（5）将浓度为0.1g/mL氯化钙溶液均匀喷淋在步骤（4）所述3D打印产物的表面上，所述3D打印产物(湿重)与氯化钙溶液的质量体积比为5：1g/mL，进行固化处理，固化处理的时间为50s，然后冷冻干燥，得到所述纳米纤维素基3D打印的乳酸菌包埋材料。

实施例5制得的纳米纤维素基3D打印的乳酸菌包埋材料效果与实施例3相似，同样对乳酸菌有良好的固定效果，乳酸菌附着在打印材料上，且其菌体形态饱满完整，可参照图1所示。实施例5制得的纳米纤维素基3D打印的乳酸菌包埋材料效果与实施例3相似，其形态同样保真度高，成型性好，质轻，易于保存和运输，其内部形成了结构完整的中空微孔道，有效地利用中空微管道结构固定、包埋和保藏乳酸菌，在此过程中并不会对乳酸菌的菌体结构造成伤害，可参照图2所示。实施例5制得的纳米纤维素基3D打印的乳酸菌包埋材料效果与实施例3相似，其表面同样较为致密，能够在储存过程中给菌种提供一定的保护，减少杂菌和噬菌体的污染，其表面分布着一些微孔，可以作为酸奶连续发酵时乳酸菌和原料乳的接触点，有利于连续接种发酵，可参照图3所示。

以上实施例仅为本发明较优的实施方式，仅用于解释本发明，而非限制本发明，本领域技术人员在未脱离本发明精神实质下所作的改变、替换、修饰等均应属于本发明的保护范围。