阅读说明：本技术 一种用于免疫细胞p16染色的封闭液 (A kind of confining liquid for immunocyte p16 dyeing ) 是由 黄子权 于 2019-08-28 设计创作，主要内容包括：本发明公开了一种用于免疫细胞p16染色的封闭液,按重量份计,包括PBS缓冲液55份、动物非免疫血清5份、蔗糖5份、吐温－20 5份、Proclin300 1份、脱脂奶粉20份,蒸馏水100份。本发明通过增加Proclin300,可以增强封闭液的稳定性,防止动物非免疫血清和脱脂奶粉等营养成分变质,从而可以使得封闭液的保存时间更长。而蔗糖可以对动物非免疫血清和脱脂奶粉起到保护作用,使得动物非免疫血清和脱脂奶粉更加稳定,还可以在封闭液接触空气中起到抗氧化的作用,保护动物非免疫血清和脱脂奶粉。另外,通过添加吐温－20和动物非免疫血清、脱脂奶粉结合使用,则在封闭时会起到清洗非特异性结合或结合不牢固的蛋白的作用,从而使得特异性结合增强。(The invention discloses a kind of confining liquids for immunocyte p16 dyeing, by weight, including 55 parts of PBS buffer solution, 5 parts of animal non-immune serum, 5 parts of sucrose, 5 parts of Tween-20,1 part of Proclin300,20 parts of skimmed milk power, 100 parts of distilled water.The present invention can be enhanced the stability of confining liquid, prevent the nutritional ingredients such as animal non-immune serum and skimmed milk power rotten, so that the holding time of confining liquid is longer by increasing Proclin300.And sucrose can play a protective role to animal non-immune serum and skimmed milk power, so that animal non-immune serum and skimmed milk power are more stable, can also play the role of oxidation resistant, protection animal non-immune serum and skimmed milk power in confining liquid ingress of air.In addition, being used in combination by addition Tween-20 and animal non-immune serum, skimmed milk power, then can play the role of cleaning non-specific binding in closing or combining unstable albumen, so that specific binding enhancing.)

一种用于免疫细胞p16染色的封闭液

技术领域

本发明涉及液基细胞学免疫细胞化学领域，具体涉及一种用于免疫细胞p16染色的封闭液。

背景技术

***是妇科最常见的恶性肿瘤之一，其发病率仅次于乳腺癌并呈年轻化趋势，严重危害妇女身体健康。然而，***又是唯一明确病因，有望成为第一个被人类攻克的肿瘤。因此，预防及早期筛查对降低***的发病及死亡率具有重要意义。

目前，***诊断的主要方法有：宫颈脱落细胞学检查、人***瘤病毒(HPV)检测、***镜检查、病理活检等。细胞学检测主要是通过病理医生对宫颈脱落细胞进行病理染色后再于显微镜下进行观察诊断。该方法操作较为简便，患者无痛苦，适合进行常规筛查。

现有的用于免疫细胞p16染色的蛋白类封闭液普遍存在易变质、不稳定、保存时间短的缺陷，从而严重影响免疫细胞p16染色效果。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明旨在提供一种用于免疫细胞p16染色的封闭液，有助于延长封闭液的保存时间，增强其稳定性，从而保证免疫细胞p16染色效果。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种用于免疫细胞p16染色的封闭液，按重量份计，包括PBS缓冲液55份、动物非免疫血清5份、蔗糖5份、吐温－20 5份、Proclin3001份、脱脂奶粉20份，蒸馏水100份。

进一步地，所述动物非免疫血清为质量浓度5－15％的山羊血清。

进一步地，所述吐温－20的质量浓度为0.2％。

进一步地，PBS缓冲液的浓度为0.01～0.2mol/L。

进一步地，所述Proclin300的质量浓度为0.1％。

上述封闭液可以应用在免疫细胞p16染色中。

本发明的有益效果在于：

本发明的用于免疫细胞p16染色的封闭液中，通过增加Proclin300，可以增强封闭液的稳定性，防止动物非免疫血清和脱脂奶粉等营养成分变质，从而可以使得封闭液的保存时间更长。而蔗糖可以对动物非免疫血清和脱脂奶粉起到保护作用，使得动物非免疫血清和脱脂奶粉更加稳定，还可以在封闭液接触空气中起到抗氧化的作用，保护动物非免疫血清和脱脂奶粉。另外，通过添加吐温－20和动物非免疫血清、脱脂奶粉结合使用，则在封闭时会起到清洗非特异性结合或结合不牢固的蛋白的作用，从而使得特异性结合增强。

具体实施方式

以下将对本发明作进一步的描述，需要说明的是，本实施例以本技术方案为前提，给出了详细的实施方式和具体的操作过程，但本发明的保护范围并不限于本实施例。

实施例1

本实施例提供一种用于免疫细胞p16染色的封闭液，按重量份计，包括PBS缓冲液55份、动物非免疫血清5份、蔗糖5份、吐温－20 5份、Proclin300 1份、脱脂奶粉20份，蒸馏水100份。

在本实施例中，所述动物非免疫血清为质量浓度5－15％的山羊血清。

在本实施例中，所述吐温－20的质量浓度为0.2％。

在本实施例中，PBS缓冲液的浓度为0.01～0.2mol/L。

在本实施例中，所述Proclin300的质量浓度为0.1％。

在上述用于免疫细胞p16染色的封闭液中，通过在封闭液中增加Proclin300，可以增强封闭液的稳定性，防止动物非免疫血清和脱脂奶粉等营养成分变质，从而可以使得封闭液的保存时间更长。而蔗糖可以对动物非免疫血清和脱脂奶粉起到保护作用，使得动物非免疫血清和脱脂奶粉更加稳定，还可以在封闭液接触空气中起到抗氧化的作用，保护动物非免疫血清和脱脂奶粉。另外，通过添加吐温－20和动物非免疫血清、脱脂奶粉结合使用，则在封闭时会起到清洗非特异性结合或结合不牢固的蛋白的作用，从而使得特异性结合增强。

上述封闭液可以特别适用于免疫细胞p16染色。

实施例2

本实施例提供一种制备上述封闭液的方法，包括如下步骤：

S1、先用1/3的蒸馏水溶解脱脂奶粉；

S2、再用1/3的蒸馏水溶解蔗糖；

S3、将PBS缓冲液、动物非免疫血清、溶解后的蔗糖、吐温－20、Proclin300、溶解后的脱脂奶粉和剩余的蒸馏水混合搅拌，并调节pH至7.2－7.8，得到所述用于免疫细胞p16染色的封闭液。

对于本领域的技术人员来说，可以根据以上的技术方案和构思，给出各种相应的改变和变形，而所有的这些改变和变形，都应该包括在本发明权利要求的保护范围之内。