一种油菜花粉提取物的制备方法
阅读说明：本技术 一种油菜花粉提取物的制备方法 (Preparation method of rape pollen extract ) 是由 李元 申佳敏 张薇 林欣怡 苗宁宝 王卫东 于 2021-07-30 设计创作，主要内容包括：本发明提供一种油菜花粉提取物的制备方法,包括以下步骤：S1、制备混合油脂的油菜花粉肽溶液；S2、向S1的混合油脂的油菜花粉肽溶液中加入植物油,振荡,离心,分离出上层富含神经酸和花粉黄酮的油脂,下层溶液经过干燥处理得到油菜花粉肽。该方法通过加入少量的植物油打破乳化状态的临界点,实现一步同时制备出油菜花粉肽、富含神经酸和黄酮的油菜花粉油脂。此法提取神经酸工艺流程简单、省时省力、节约物资,同步提取神经酸和花粉黄酮无任何工业药物的残留,健康无污染,经简单处理后便可投入使用,制备油菜花粉肽粉同时提取神经酸,同步还可以将油菜花中的黄酮类物质提取出来,较大程度上对油菜花进行了充分利用。(The invention provides a preparation method of a rape pollen extract, which comprises the following steps: s1, preparing a rape pollen peptide solution of mixed oil; s2, adding vegetable oil into the rape pollen peptide solution of the mixed oil S1, oscillating, centrifuging, separating oil rich in nervonic acid and pollen flavone at the upper layer, and drying the solution at the lower layer to obtain the rape pollen peptide. The method can break the critical point of emulsified state by adding a small amount of vegetable oil, and can simultaneously prepare rape pollen peptide and rape pollen oil rich in nervonic acid and flavone in one step. The method has the advantages of simple process flow, time and labor saving, material saving, no industrial drug residue in the process of synchronously extracting the nervonic acid and the pollen flavone, health and no pollution, can be put into use after simple treatment, can be used for preparing the rape pollen peptide powder and simultaneously extracting the nervonic acid, can synchronously extract the flavonoid substances in the rape flowers, and fully utilizes the rape flowers to a greater extent.)
技术领域
本发明涉及保健食品技术领域，具体涉及一种油菜花粉提取物的制备方法。
背景技术
根据植物中有效成分的存在状态、极性、溶解性等的差异能够设计出合理的提取分离工艺。例如，油菜花粉中含有有效治疗前列腺肿大的油菜花粉黄酮，其油脂中还含有恢复神经损伤的神经酸。而花粉黄酮和神经酸均属于脂溶性物质，因此，神经酸和黄酮类物质可采用脂溶性溶剂进行抽提，如石油醚、乙醇等萃取有机物的方法对油菜花中的神经酸和黄酮类物质进行提取，但这类提取方法会存在溶剂残留、环境污染、成本偏大，厂房需要防爆要求较高等问题。
本发明是在制备花粉肽的基础上，利用蛋白酶降解花粉蛋白后，花粉油脂失去束缚而游离于花粉肽溶液中，因此，如何实现油水分离是本发明的关键。然而，油菜花粉的含油量较低，使得油脂与肽粉成乳化状态，在试验过程中发现，采用脂溶性溶剂进行抽提的方法很难将花粉油脂从花粉肽溶液中分离出来，且分离效果不佳。
发明内容
为解决上述问题，本发明的目的在于提供一种油菜花粉提取物的制备方法，该方法通过加入少量的植物油打破乳化状态的临界点，实现一步同时制备出油菜花粉肽、富含神经酸和黄酮的油菜花粉油脂。此法提取神经酸工艺流程简单、省时省力、节约物资，同步提取神经酸和花粉黄酮无任何工业药物的残留，健康无污染，经简单处理后便可投入使用，制备油菜花粉肽粉同时提取神经酸，同步还可以将油菜花中的黄酮类物质提取出来，较大程度上对油菜花进行了充分利用。
为实现上述目的，本发明的技术方案如下。
一种油菜花粉提取物的制备方法，包括以下步骤：
S1、制备混合油脂的油菜花粉肽溶液；
S2、向S1的混合油脂的油菜花粉肽溶液中加入植物油，振荡，离心，分离出上层富含神经酸和花粉黄酮的油脂，下层溶液经过干燥处理得到油菜花粉肽。
进一步，S2中，混合油脂的油菜花粉肽溶液与植物油的体积比为10～20：1。
进一步，S2中，所述植物油为油菜籽油、葵花籽油、玉米油、大豆油中的任意一种或多种的混合。
进一步，S2中，振荡时的转速为1000转/min，时间为1h。
进一步，S2中，离心时的转速为1000～2000转/min，时间为20min。
进一步，S1中，制备混合油脂的油菜花粉肽溶液的过程如下：
将油菜花粉颗粒破壁处理10min，之后加水混匀，在55℃恒温下调节pH至5.5，加入纤维素酶和果胶酶，搅拌2h；然后在60℃恒温下加入木瓜蛋白酶，搅拌1h；再于100℃灭活三种水解酶，管式离心机8000转/分钟离出上清液，取上清液减压浓缩，得到混合油脂的油菜花粉肽溶液。
更进一步，油菜花粉颗粒与水的质量比为1：5。
更进一步，油菜花粉颗粒与纤维素酶、果胶酶、木瓜蛋白酶的质量比为100：0.5～1：0.5～1：0.5～1。
本发明的有益效果：
1、本发明的方法通过加入少量的植物油打破乳化状态的临界点，实现一步同时制备出油菜花粉肽、富含神经酸和黄酮的油菜花粉油脂。此法提取神经酸工艺流程简单、省时省力、节约物资，同步提取神经酸和花粉黄酮无任何工业药物的残留，健康无污染，经简单处理后便可投入使用，制备油菜花粉肽粉同时提取神经酸，同步还可以将油菜花中的黄酮类物质提取出来，较大程度上对油菜花进行了充分利用。
2、油菜花粉肽溶液中油脂与花粉肽形成乳化状态而存在，花粉肽乳化油脂能力一旦突破临界值，其将失去乳化能力，释放出原有束缚的油脂，正是利用这个原理，在油菜花粉肽溶液中额外添加植物油，使其超过乳化能力的临界值，达到简单、易行、操作方便的油菜花粉中油脂提取方法。神经酸是油菜花粉油脂中的成分之一，随油脂同步提取出来，同时带出油溶性的油菜花粉黄酮。因此，此法还能使油菜花粉作为提取神经酸具有利用潜力的植物资源之一。
3、本发明采用三种酶分步加入水解的方式，这是由于木瓜蛋白酶是非特异降解蛋白的，一次性加入会降解其它酶的活性，分步加，前两个酶可以避免受到木瓜蛋白酶的影响，而完成纤维素和果胶的降解；之后再加入木瓜蛋白酶去降解蛋白制备肽粉，由此可提高酶解效率。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
下述各实施例中所述实验方法如无特殊说明，均为常规方法；所述试剂和材料，如无特殊说明，均可在市场上购买得到。
实施例1
一种油菜花粉提取物的制备方法，包括以下步骤：
S1、制备混合油脂的油菜花粉肽溶液
S1.1、将干燥的花粉颗粒经过破壁机将其破壁10分钟。
S1.2、将破壁好的花粉取适量放入提取釜中，按照1:5比例加入水，加热温度为55℃为宜，加入少量HCl调整pH至5.5，按花粉：纤维素酶：果胶酶＝100:0.5:0.5比例加入纤维素酶和果胶酶，作用2个小时。
S1.3、按花粉：木瓜蛋白酶＝100:1比例加入木瓜蛋白酶，60℃作用1小时，降解为花粉多肽。
S1.4、将S1.3的溶液于100℃灭活三种水解酶，用管式离心机8000转/分钟，离心分离出上清液。上清液倒入旋转蒸发器，在80℃，转速30-40转/min，旋转蒸发浓缩10倍，得到浓缩的油菜花粉肽溶液。
S2、按照浓缩的油菜花粉肽溶液：植物油＝100:5依次加入100mL油菜花粉肽浓缩溶液和5mL植物油，1000转/分钟，搅拌1小时，1000-2000转/分钟离心20分钟，收集上层油脂，即为富含神经酸和黄酮的油脂；离心所得下层的油菜花粉肽溶液用喷雾干燥法干燥，喷雾出口温度120-160℃，即得油菜花粉肽。
实施例2
一种油菜花粉提取物的制备方法，包括以下步骤：
S1、制备混合油脂的油菜花粉肽溶液
S1.1、将干燥的花粉颗粒经过破壁机将其破壁10分钟。
S1.2、将破壁好的花粉取适量放入提取釜中，按照1:5比例加入水，加热温度为55℃为宜，加入少量HCl调整pH至5.5，按花粉：纤维素酶：果胶酶＝100:1:1比例加入纤维素酶和果胶酶，作用2个小时。
S1.3、按花粉：木瓜蛋白酶＝100:1比例加入木瓜蛋白酶，60℃作用1小时，降解为花粉多肽。
S1.4、将S1.3的溶液于100℃灭活三种水解酶，用管式离心机8000转/分钟，离心分离出上清液。上清液倒入旋转蒸发器，在80℃，转速30-40转/min，旋转蒸发浓缩10倍，得到浓缩的油菜花粉肽溶液。
S2、按照浓缩的油菜花粉肽溶液：植物油＝50:5依次加入50mL油菜花粉肽浓缩溶液和5mL植物油，1000转/分钟，搅拌1小时，1000-2000转/分钟离心20分钟，收集上层油脂，即为富含神经酸和黄酮的油脂；离心所得下层的油菜花粉肽溶液用喷雾干燥法干燥，喷雾出口温度120-160℃，即得油菜花粉肽。
实施例3
一种油菜花粉提取物的制备方法，包括以下步骤：
S1、制备混合油脂的油菜花粉肽溶液
S1.1、将干燥的花粉颗粒经过破壁机将其破壁10分钟。
S1.2、将破壁好的花粉取适量放入提取釜中，按照1:5比例加入水，加热温度为55℃为宜，加入少量HCl调整pH至5.5，按花粉：纤维素酶：果胶酶＝100:0.75:0.75比例加入纤维素酶和果胶酶，作用2个小时。
S1.3、按花粉：木瓜蛋白酶＝100:0.5比例加入木瓜蛋白酶，60℃作用1小时，降解为花粉多肽。
S1.4、将S1.3的溶液于100℃灭活三种水解酶，用管式离心机8000转/分钟，离心分离出上清液。上清液倒入旋转蒸发器，在80℃，转速30-40转/min，旋转蒸发浓缩10倍，得到浓缩的油菜花粉肽溶液。
S2、按照浓缩的油菜花粉肽溶液：植物油＝75:5依次加入75mL油菜花粉肽浓缩溶液和5mL植物油，1000转/分钟，搅拌1小时，1000-2000转/分钟离心20分钟，收集上层油脂，即为富含神经酸和黄酮的油脂；离心所得下层的油菜花粉肽溶液用喷雾干燥法干燥，喷雾出口温度120-160℃，即得油菜花粉肽。
对比例1
一种油菜花粉提取物的制备方法，与实施例1的方法基本相同，其不同之处在于，
S2、按照浓缩的油菜花粉肽溶液：植物油＝100：3依次加入100mL油菜花粉肽浓缩溶液和3mL植物油，1000转/分钟，搅拌2小时，1000-2000转/分钟离心20分钟，收集上层油脂，即为富含神经酸和黄酮的油脂；离心所得下层的油菜花粉肽溶液用喷雾干燥法干燥，喷雾出口温度120-160℃，即得油菜花粉肽。
对比例2
一种油菜花粉提取物的制备方法，与实施例1的方法基本相同，其不同之处在于，
S2、按照浓缩的油菜花粉肽溶液：植物油＝100：1依次加入100mL油菜花粉肽浓缩溶液和1mL植物油，1000转/分钟，搅拌2小时，1000-2000转/分钟离心20分钟，收集上层油脂，即为富含神经酸和黄酮的油脂；离心所得下层的油菜花粉肽溶液用喷雾干燥法干燥，喷雾出口温度120-160℃，即得油菜花粉肽。
对比例3
一种油菜花粉提取物的制备方法，与实施例1的方法基本相同，其不同之处在于，
S2、按照浓缩的油菜花粉肽溶液：植物油＝100：10依次加入100mL油菜花粉肽浓缩溶液和10mL植物油，1000转/分钟，搅拌1小时，1000-2000转/分钟离心20分钟，收集上层油脂，即为富含神经酸和黄酮的油脂；离心所得下层的油菜花粉肽溶液用喷雾干燥法干燥，喷雾出口温度120-160℃，即得油菜花粉肽。
实施例1～3的方法得到的结果基本相同，因此以实施例1的结果与对比例1～3进行比较，用以说明本发明方法的效果。测定结果如表1和表2所示，其中，表1为实施例1与比较例1～3的萃取条件和结果；表2为实施例1中提取加入的植物油和提取出的油菜花粉油脂的含量测定结果。
表1实施例1与比较例1～3的萃取条件和结果
从表1可以看出，油菜花粉肽溶液用植物油萃取法萃取时，用油量少时，不仅不能打破油脂和肽粉乳化的临界点，还会把已经加入的油脂乳化掉，加入的比例为100:5时，油脂提取量和花粉黄酮量稳定，所用时间以1h最适宜。
表2实施例1中植物油和油菜花粉油脂的含量测定结果
其中，1#为提取加入的菜油。2#为提取出的油菜花粉油脂。
由表2结果可以看出，花粉油脂中含有神经酸，且本发明实施例1提取的神经酸含量达到1.19％。结合油菜花的高产量可以说明油菜花粉油脂具有极好的开发前景。
综上，本发明是以油菜花粉为原料，利用蛋白酶水解法制备油菜花粉肽，在此过程中油菜花粉中的油脂释放出来，油脂与肽乳化成一体，额外加入油后，破坏乳化状态，使油脂和油溶性黄酮类物质融入加入的油中，提取出油菜花粉油脂中神经酸和油溶性的黄酮类物质。并且油菜花种植广泛，生产成本低廉，易于大规模化的生产，更为经济适用。制备油菜花粉肽的同时同步提取油菜花粉中神经酸和黄酮，开发出用于制备功能性保健食品的优质原料，更有效的利用了花粉原料。
以上仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
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