丝素蛋白/羟基磷灰石复合支架及其制备方法
阅读说明：本技术 丝素蛋白/羟基磷灰石复合支架及其制备方法 (Fibroin albumen/hydroxyapatite compound rest and preparation method thereof ) 是由 卿湘城 邵云菲 邵增务 张克勤 彭一中 于 2019-09-26 设计创作，主要内容包括：本申请涉及生物医学领域,具体而言,涉及一种丝素蛋白/羟基磷灰石复合支架及其制备方法。一种丝素蛋白/羟基磷灰石复合支架的制备方法,包括：采用微波对浸泡在SBF溶液中的丝素蛋白支架进行辅助矿化反应,使丝素蛋白支架的表面和内部沉积羟基磷灰石。在微波的作用下,SBF溶液能够吸收微波能量,使得SBF溶液中的离子运动加速,促进矿化反应加速,同时由于各部位离子能量吸收比较均匀,所以矿化比较均匀,从而在丝素蛋白支架上沉积均匀的羟基磷灰石。(This application involves fields of biomedicine, in particular to a kind of fibroin albumen/hydroxyapatite compound rest and preparation method thereof.A kind of preparation method of fibroin albumen/hydroxyapatite compound rest, comprising: auxiliary mineralising reaction is carried out to the silk fibroin bracket being immersed in SBF solution using microwave, makes surface and the inside deposition hydroxyapatite of silk fibroin bracket.Under the action of microwave, SBF solution can absorb microwave energy, so that the ion motion in SBF solution accelerates, mineralising reaction is promoted to accelerate, simultaneously because each position ion energy absorb it is relatively uniform, so mineralising is relatively uniform, thus in silk fibroin bracket depositing homogeneous hydroxyapatite.)
技术领域
本申请涉及生物医学领域，具体而言，涉及一种丝素蛋白/羟基磷灰石复合支架及其制备方法。
背景技术
丝素蛋白/羟基磷灰石复合支架是利用天然生丝物质制得的骨支架材料。这种丝素蛋白/羟基磷灰石复合支架具有更好的生物相容性和可调控的降解性。
但是，目前传统的丝素蛋白/羟基磷灰石复合支架制备时存在矿化时间长，效率低的问题。
发明内容
本申请实施例的目的在于提供一种丝素蛋白/羟基磷灰石复合支架及其制备方法，其旨在改善现有的丝素蛋白/羟基磷灰石复合支架矿化时间长，效率低的问题。
第一方面，本申请提供一种技术方案：
一种丝素蛋白/羟基磷灰石复合支架的制备方法，包括：
对浸泡有丝素蛋白支架的SBF溶液进行微波辐照，以进行矿化反应，使丝素蛋白支架的表面和内部沉积羟基磷灰石。
在微波的作用下，SBF溶液能够吸收微波能量，使得SBF溶液中的离子运动加速，促进矿化反应加速，同时由于各部位离子能量吸收比较均匀，所以矿化比较均匀，从而在丝素蛋白支架上沉积均匀的羟基磷灰石。
在本申请的其他实施例中，上述对浸泡有丝素蛋白支架的SBF溶液进行微波辐照的步骤包括：在封闭的环境中，对浸泡有丝素蛋白支架的SBF溶液进行微波辐照。
封闭的环境，更有利于SBF溶液吸收微波能量，均匀矿化。
在本申请的其他实施例中，上述采用微波辐照的单次时间为14-16S，微波辐照的次数为8-10次。
在上述的微波辐照的时间以及微波辐照的次数范围内，能够保证羟基磷灰石形貌和成分。超过上述的范围，时间太长溶液温度升温过高，影响矿化的羟基磷灰石形貌和成分，时间太短反应时间不够，沉积效果差。
在本申请的其他实施例中，上述丝素蛋白支架是通过将丝素溶液冷冻干燥制得。
在本申请的其他实施例中，上述丝素溶液是通过将第一丝素溶液和第二丝素溶液混合得到，丝素溶液的浓度为1.8-2.2w/v％；
第一丝素溶液是将第三丝素溶液在56-64℃浓缩得到，第三丝素溶液的浓度为5.5-6.5w/v％；第一丝素溶液的浓度为18-23w/v％；
第二丝素溶液是将第一丝素溶液加水稀释至浓度为0.4-0.6w/v％后在55-65℃孵化至形成纳米纤维后制得。
孵化制得具有纳米纤维结构的丝素支架，使丝素支架具有更好的多孔结构，提高羟基磷灰石沉积的均匀性。
在本申请的其他实施例中，上述第三丝素溶液是将生丝煮沸后去除丝胶蛋白得丝素，然后将丝素干燥后溶于LiBr溶液中溶解后，经过过滤、透析、离心后制得。
将丝素干燥后溶于LiBr溶液，能够充分地溶解丝素。
在本申请的其他实施例中，上述将生丝煮沸后去除丝胶蛋白的步骤，包括：
将生丝在0.45-0.55w/v％的Na2CO3溶液中煮沸40-50min，然后洗涤除去丝胶蛋白。
采用上述的溶剂能够有效去除丝胶蛋白。
在本申请的其他实施例中，上述将丝素溶液冷冻干燥的步骤，包括：
将丝素溶液与甘油混合后，于-19～-21℃第一次冷冻干燥，然后再将第一次冷冻干燥制得的第一丝素支架浸泡于水中，去除甘油后，进行第二次冷冻干燥，制得丝素蛋白支架。
在本申请的其他实施例中，上述SBF溶液的浓度为1×SBF溶液。
SBF溶液的用量少，节约试剂。
第二方面，本申请提供一种技术方案：
一种丝素蛋白/羟基磷灰石复合支架，采用如上述的丝素蛋白/羟基磷灰石复合支架的制备方法制得。
该丝素蛋白/羟基磷灰石复合支架的表面和内部都均匀沉积有羟基磷灰石，均匀性好。
附图说明
为了更清楚地说明本申请实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本申请的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
图1为本申请实施例提供的丝素蛋白/羟基磷灰石复合支架的制备流程示意图；
图2为本申请实施例提供的丝素蛋白/羟基磷灰石复合支架以及传统SBF矿化丝素支架的扫描电镜图；
图3为本申请实施例提供的丝素蛋白/羟基磷灰石复合支架以及传统SBF矿化丝素支架力学性能；
图4为本申请实施例提供的丝素蛋白/羟基磷灰石复合支架以及传统SBF矿化丝素支架热分析测试图；
图5为本申请实施例提供的丝素蛋白/羟基磷灰石复合支架以及传统SBF矿化丝素支架降解性能；
图6为本申请实施例提供的丝素蛋白/羟基磷灰石复合支架以及传统SBF矿化丝素支架对BMSC增殖的影响；
图7为本申请实施例提供的丝素蛋白/羟基磷灰石复合支架以及传统SBF矿化丝素支架对BMSC成骨分化的影响。
具体实施方式
下面将结合实施例对本申请的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本申请，而不应视为限制本申请的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
此外，术语“第一”、“第二”、“第三”等仅用于区分描述，而不能理解为指示或暗示相对重要性。
SBF溶液(模拟体液)，是模拟人体体液的组分和pH值的一种溶液。SBF溶液主要由氯化钠、氯化钾、磷酸氢二钾、氯化镁、碳酸氢钠等组成。丝素蛋白支架浸泡于SBF溶液中，磷酸氢二钾等磷酸盐能够发生矿化反应，生成羟基磷灰石沉积在丝素蛋白支架上。发明人发现，这种条件下，磷酸盐发生矿化反应的速度比较慢，且矿化不均匀，如果要提高矿化速度，需要浓度更高的SBF溶液。
本申请实施方式提供一种丝素蛋白/羟基磷灰石复合支架的制备方法，包括：
对浸泡有丝素蛋白支架的SBF溶液采用微波辐照，以进行矿化反应，使丝素蛋白支架的表面和内部沉积羟基磷灰石。
微波是指频率为300MHz～3000GHz(3THz)的电磁波，波长在0.1毫米～1米之间的电磁波，微波具有吸收的特性。在微波的作用下，SBF溶液能够吸收微波能量，使得SBF溶液中的离子运动加速，促进矿化反应加速，同时由于各部位离子能量吸收比较均匀，所以矿化比较均匀，从而在丝素蛋白支架的表面和内部沉积均匀的羟基磷灰石。
进一步可选地，微波选择频率为2000-3000MHz。进一步可选地，微波选择频率为2100-2800MHz。例如，选择频率为2200MHz、2300MHz、2400MHz、2500MHz、2600MHz、2700MHz的微波。参照图1，在本申请的一些实施方式中，制备上述的丝素蛋白/羟基磷灰石复合支架方法包括：
S1、制备丝素溶液。
丝素溶液是通过将第一丝素溶液和第二丝素溶液混合得到，丝素溶液的浓度为1.8-2.2w/v％；
第一丝素溶液是将第三丝素溶液在56-64℃浓缩得到，第三丝素溶液的浓度为5.5-6.5w/v％；第一丝素溶液的浓度为18-23w/v％；
第二丝素溶液是将第一丝素溶液加水稀释至浓度为0.4-0.6w/v％后在55-65℃孵化至形成纳米纤维后制得。
通过将上述的第二丝素溶液在55-65℃孵化至形成纳米纤维，能够使得最终制得的丝素蛋白支架具有更多的多孔结构，从而为羟基磷灰石的沉积提供更多的附着位点，提高矿化效果。
通过将上述的第一丝素溶液的浓度浓缩至18-23w/v％，能够保证后续第一丝素溶液和第二丝素溶液混合后得到的丝素溶液的浓度为1.8-2.2w/v％，进而保证后续与SBF溶液矿化反应时，能够为羟基磷灰石的沉积提供更多的附着位点。
进一步可选地，将第三丝素溶液在56-64℃浓缩得到第一丝素溶液是在将第三丝素溶液置于烘干箱中大约24小时浓缩得到第一丝素溶液。
进一步地，第三丝素溶液是将生丝煮沸后去除丝胶蛋白得丝素，然后将丝素干燥后溶于LiBr溶液中溶解后，经过过滤、透析、离心后制得。
生丝是桑蚕茧缫丝后所得的产品。含有约20％的丝胶蛋白，沸煮后能够去除丝胶蛋白。
进一步可选地，将生丝煮沸后去除丝胶蛋白，包括：
将生丝在0.45-0.55w/v％的Na2CO3溶液中煮沸40-50min，然后用蒸馏水彻底洗涤以除去丝胶蛋白。
进一步可选地，将生丝煮沸后去除丝胶蛋白，包括：
将生丝在0.5w/v％的Na2CO3溶液中煮沸45min，然后用蒸馏水彻底洗涤以除去丝胶蛋白。
进一步地，上述LiBr溶液的浓度选择9.0-9.5mol/L。
进一步可选地，上述LiBr溶液的浓度选择9.3mol/L。
进一步地，将丝素干燥后溶于LiBr溶液中溶解是将丝素干燥后溶于LiBr溶液中，55-65℃下溶解0.8-1.2h。
进一步可选地，将丝素干燥后溶于LiBr溶液中溶解是将丝素干燥后溶于LiBr溶液中，60℃下溶解1h。
S2、制备丝素蛋白支架。
丝素蛋白支架是通过将丝素溶液冷冻干燥制得。
进一步地，将丝素溶液冷冻干燥的步骤，包括：
将丝素溶液与甘油混合后，于-19～-21℃第一次冷冻干燥，然后再将第一次冷冻干燥制得的第一丝素支架浸泡于水中，去除甘油后，进行第二次冷冻干燥，制得丝素蛋白支架。
进一步地，将丝素溶液冷冻干燥，包括：
将丝素溶液与甘油混合后，于-20℃第一次冷冻干燥，然后再将第一次冷冻干燥制得的第一丝素支架浸泡于水中，去除甘油后，进行第二次冷冻干燥，制得丝素蛋白支架。
示例性地，第一次冷冻干燥是将2w/v％的丝素溶液与其干重百分比为60％的甘油混合均匀，倒入96孔板中。在-20℃下放置12h，然后冷冻干燥。第二次冷冻干燥是将将第一次冷冻干燥得到的丝素支架浸泡于超纯水中48h以除去甘油，每2h更换一次水，再次冷冻干燥后获得丝素蛋白支架。
S3、采用微波对浸泡有丝素蛋白支架的SBF溶液辐照，进行矿化反应。
进一步可选地，SBF溶液的浓度为1×SBF溶液。
目前常见的对丝素蛋白支架进行矿化时，SBF溶液的浓度通常在2-10倍的SBF溶液，而本申请实施方式提供的丝素蛋白/羟基磷灰石复合支架的制备方法仅仅需要1倍的SBF溶液，因此能够有效地降低SBF溶液的用量，降低剩余SBF溶液造成的污染。
可选地，上述的1×SBF溶液包括：1.0MNaOH 40ml；HEPES 21.183g；NaCl 5.404g；KCl 0.225g；K2HPO4·3H2O 0.231g；MgCl2·3H2O 0.311g；CaCl2 0.292g；Na2SO4 0.072g；NaHCO3 0.355g以及1.0MNaOH 4.8mL。
需要说明的是，配置上述的1×SBF溶液时，是按照顺序依次加入1.0MNaOH 40ml；HEPES 21.183g；NaCl 5.404g；KCl 0.225g；K2HPO4·3H2O 0.231g；MgCl2·3H2O 0.311g；CaCl2 0.292g；Na2SO4 0.072g；NaHCO3 0.355g以及1.0MNaOH 4.8mL。
进一步地，采用微波对浸泡有丝素蛋白支架的SBF溶液辐照是在密封环境下，对浸泡有丝素蛋白支架的SBF溶液进行微波辐照。
示例性地，采用微波对浸泡有丝素蛋白支架的SBF溶液辐照是将浸泡有丝素蛋白支架的SBF溶液置于微波炉中进行微波辐照。
进一步可选地，微波炉的功率选择为600-800W。
示例性地，上述的微波炉进行微波辐照时电压220V，微波炉输出功率700W。微波主频率是2455MHz。
进一步地，采用微波辐照的时间为14-16S，微波辐照的次数为8-10次。
进一步可选地，采用微波辐照的时间为15S，微波辐照的次数为9次。
在上述的微波辐照的时间以及微波辐照的次数范围内，能够保证羟基磷灰石形貌和成分。超过上述的范围，时间太长溶液温度升温过高，影响矿化的羟基磷灰石形貌和成分，时间太短反应时间不够，沉积效果差。
示例性地，将浸泡有丝素蛋白支架的SBF溶液置于微波炉中进行微波辐照，打开微波炉，微波辐照15S，然后关闭微波炉15S。然后再打开微波炉，微波辐照15S，然后关闭微波炉15S；如此循环9次。
进一步可选地，采用微波进行辐照时，可以选择保持溶液静置，进行微波辐照，也可以选择使溶液旋转，进行微波辐照。
本申请实施方式提供的这种丝素蛋白/羟基磷灰石复合支架的制备方法操作简单，时间短，矿化速度快，效率高，矿化的均匀性好。
在申请一些实施方式中，可以选择将上述的步骤S3重复一次，中途换一次SBF溶液。
本申请的一些实施方式还提供了一种丝素蛋白/羟基磷灰石复合支架，采用如上述的丝素蛋白/羟基磷灰石复合支架的制备方法制得。该丝素蛋白/羟基磷灰石复合支架的表面和内部都均匀沉积有羟基磷灰石。
以下结合实施例对本申请的特征和性能作进一步的详细描述：
实施例1
本实施例提供的一种丝素蛋白/羟基磷灰石复合支架，是这样制得的：
1、将生丝在0.5w/v％的Na2CO3溶液中煮沸45min，然后用蒸馏水彻底洗涤以除去丝胶蛋白，干燥后将丝素溶于9.3mol/L的LiBr溶液中，60℃下溶解1h。经过滤、透析、离心后获得最终浓度约为6w/v％的丝素溶液。
2、将6w/v％的丝素溶液在60℃烘箱中24h缓慢浓缩至20w/v％。
3、用超纯水将浓缩溶液稀释至0.5w/v％，然后在60℃条件下孵化24h以诱导纳米纤维形成。
4、将浓缩的20w/v％丝素溶液与孵化后的0.5w/v％丝素溶液混合获得最终浓度为2w/v％的丝素溶液。
5、将2w/v％的丝素溶液与其干重百分比为60％的甘油混合均匀，倒入96孔板中。在-20℃下放置12h，然后冷冻干燥。
6、将冻干得到的丝素支架浸泡于超纯水中48h以除去甘油，每2h更换一次水，再次冷冻干燥后获得纯丝素蛋白支架。
7、将纯丝素蛋白支架浸泡在SBF溶液中，然后置于微波炉中转动微波辐照9次×15s。微波辐照时电压220V，微波炉输出功率700W，微波主频率为2455MHz。
8、更换SBF溶液，重复步骤7一次，获得微波辅助矿化的丝素蛋白/羟基磷灰石复合支架。
实施例2
本实施例提供的一种丝素蛋白/羟基磷灰石复合支架，是这样制得的：
1、将生丝在0.45w/v％的Na2CO3溶液中煮沸40min，然后用蒸馏水彻底洗涤以除去丝胶蛋白，干燥后将丝素溶于9.5mol/L的LiBr溶液中，55℃下溶解0.8h。经过滤、透析、离心后获得最终浓度约为5.5w/v％的丝素溶液。
2、将5.5w/v％的丝素溶液在60℃烘箱中24h缓慢浓缩至20w/v％。
3、用超纯水将浓缩溶液稀释至0.5w/v％，然后在60℃条件下孵化24h以诱导纳米纤维形成。
4、将浓缩的20w/v％丝素溶液与孵化后的0.5w/v％丝素溶液混合获得最终浓度为2w/v％的丝素溶液。
5、将2w/v％的丝素溶液与其干重百分比为60％的甘油混合均匀，倒入96孔板中。在-21℃下放置12h，然后冷冻干燥。
6、将冻干得到的丝素支架浸泡于超纯水中48h以除去甘油，每2h更换一次水，再次冷冻干燥后获得纯丝素蛋白支架。
7、将纯丝素蛋白支架浸泡在SBF溶液中，然后置于微波炉中转动微波辐照9次×15s。微波辐照时电压220V，微波炉输出功率700W，微波主频率为2450MHz。
8、更换SBF溶液，重复步骤7一次，获得微波辅助矿化的丝素蛋白/羟基磷灰石复合支架。
实施例3
本实施例提供的一种丝素蛋白/羟基磷灰石复合支架，是这样制得的：
1、将生丝在0.55w/v％的Na2CO3溶液中煮沸50min，然后用蒸馏水彻底洗涤以除去丝胶蛋白，干燥后将丝素溶于9.5mol/L的LiBr溶液中，55℃下溶解0.8h。经过滤、透析、离心后获得最终浓度约为4.5w/v％的丝素溶液。
2、将4.5w/v％的丝素溶液在60℃烘箱中24h缓慢浓缩至20w/v％。
3、用超纯水将浓缩溶液稀释至0.5w/v％，然后在60℃条件下孵化24h以诱导纳米纤维形成。
4、将浓缩的20w/v％丝素溶液与孵化后的0.5w/v％丝素溶液混合获得最终浓度为2w/v％的丝素溶液。
5、将2w/v％的丝素溶液与其干重百分比为60％的甘油混合均匀，倒入96孔板中。在-19℃下放置12h，然后冷冻干燥。
6、将冻干得到的丝素支架浸泡于超纯水中48h以除去甘油，每2h更换一次水，再次冷冻干燥后获得纯丝素蛋白支架。
7、将纯丝素蛋白支架浸泡在SBF溶液中，然后置于微波炉中微波辐照9次×15s。微波辐照时电压220V，微波炉输出功率700W，微波主频率为2550MHz。
8、更换SBF溶液，重复步骤7一次，获得微波辅助矿化的丝素蛋白/羟基磷灰石复合支架。
对比例1
提供一种传统SBF矿化丝素支架，与实施例1的制备步骤1-6相同，然后将步骤6制得的纯丝素蛋白支架浸泡于SBF溶液中矿化7天，中途换一次SBF溶液。
对实施例1-3提供的丝素蛋白/羟基磷灰石复合支架以及对比例1提供的传统SBF矿化丝素支架的性能进行考察。
实验例1
对实施例1-3提供的丝素蛋白/羟基磷灰石复合支架以及对比1提供的传统SBF矿化丝素支架采用扫描电镜观察形貌。
结果见附图2，附图2中，Control：纯丝素支架；MS：微波辅助矿化丝素支架；S：传统SBF矿化丝素支架。由电镜图可以得出，微波辅助制备的复合支架羟基磷灰石沉积的量更多，更均匀。
实验例2
对实施例1-3提供的丝素蛋白/羟基磷灰石复合支架以及对比1提供的传统SBF矿化丝素支架的力学性能进行检测：用美国FTC公司生产的质构仪对丝素蛋白/羟基磷灰石复合支架进行压缩实验，测试前先将支架材料在超纯水中浸泡4h，然后在室温条件下进行压缩测试，压缩速率为10mm/min。
力学性能检测实验步骤：
检测结果见附图3，附图3中，Control：纯丝素支架；MS：微波辅助矿化丝素支架；S：传统SBF矿化丝素支架。由图可以得出，微波辅助矿化丝素支架力学性能明显高于其它两个组。
实验例3
对实施例1-3提供的丝素蛋白/羟基磷灰石复合支架以及对比1提供的传统SBF矿化丝素支架进行热分析测试：利用热重分析仪对支架进行热分析测试，以评估矿化后支架材料的质量变化，测试在氮气环境中进行，测试温度为35℃到800℃，扫描速度为20℃min-1。
检测结果见附图4，附图4中，Control：纯丝素支架；MS：微波辅助矿化丝素支架；S：传统SBF矿化丝素支架。由图可以得出，将三组材料微波辐照后，微波辅助矿化丝素支架剩余治疗显著高于其它两组，提示微波辅助矿化丝素支架中羟基磷灰石含量更高。
实验例4
对实施例1-3提供的丝素蛋白/羟基磷灰石复合支架以及对比1提供的传统SBF矿化丝素支架降解性能测试：将支架称重后获得初始质量M0，将其浸泡在含有1U/mL蛋白酶ⅩⅩ的PBS溶液中，于37℃培养28天，每3天换液一次；将支架材料浸泡在不含酶的PBS溶液中做为对照组。浸泡持续至预设时间点时，将支架干燥称重获得其剩余质量M1。通过以下公式获得其剩余质量百分比：剩余质量％＝M1/M0×100％。
检测结果见附图5，附图5中，Control：纯丝素支架；MS：微波辅助矿化丝素支架；S：传统SBF矿化丝素支架。Control、MS、S和Control E、MS E、S E分别代表三组支架在PBS溶液和含有蛋白酶XIV溶液中的降解情况。由图中结果可以得出，传统SBF矿化丝素支架降解最快，而微波辅助法制备的复合支架稳定明显高于传统矿化支架，且由于表明矿化羟基磷灰石，MS组在含蛋白酶的溶液中稳定性高于纯丝素支架。
实验例5
考察实施例1-3提供的丝素蛋白/羟基磷灰石复合支架以及对比1提供的传统SBF矿化丝素支架对骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖的影响：通过CCK8测试各组支架材料对BMSCs增殖的影响，将5×104个细胞种在材料上，分别培养2、6、10、14天后，利用CCK8试剂孵育2小时候后，于波长450nm下测试每组吸光度。
检测结果见附图6，附图6中，Control：纯丝素支架；MS：微波辅助矿化丝素支架；S：传统SBF矿化丝素支架。在培养第10，14天时，MS组细胞数显著高于其它两组，提示BMSC在微波辅助矿化丝素支架上增殖更快。*P＜0.05，**P＜0.01。
实验例6
考察实施例1-3提供的丝素蛋白/羟基磷灰石复合支架以及对比1提供的传统SBF矿化丝素支架对BMSCs成骨分化的影响：利用PCR测试每组成骨标志基因的表达量，以测试支架材料对BMSCs成骨分化的影响，将2×105个细胞种在材料上，分别培养7、14天后，利用Trizol提取每组细胞RNA，逆转录后利用Real time-PCR仪进行PCR，以获得各组材料中成骨标志基因I型胶原蛋白α1(Col1a1)、Runx2以及骨钙素(ostocalcin，OCN)的表达情况及差异。
检测结果见附图7，附图7中，Control：纯丝素支架；MS：微波辅助矿化丝素支架；S：传统SBF矿化丝素支架。*P＜0.05，**P＜0.01，**P＜0.001。由图中可以得出，微波辅助矿化丝素支架中BMSC成骨分化标志基因ostocalcin(A),Col1a1(B)and Runx2(C)表达量最高，提示微波辅助法制备的丝素蛋白/羟基磷灰石支架促成骨分化能力最强。
以上所述仅为本申请的优选实施例而已，并不用于限制本申请，对于本领域的技术人员来说，本申请可以有各种更改和变化。凡在本申请的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本申请的保护范围之内。
- 上一篇：一种医用注射器针头装配设备
- 下一篇：一种具有抗疲劳和抗冲击特性的凝胶材料