一种10-羰基多西他赛的制备方法
阅读说明：本技术 一种10-羰基多西他赛的制备方法 (Preparation method of 10-carbonyl docetaxel ) 是由 黄春 陆叶梦 王莉佳 王旭阳 于 2021-09-02 设计创作，主要内容包括：本发明公开了一种10-羰基多西他赛的制备方法,其技术方案包括以下步骤：S1：将多西他赛用溶剂溶清,加入重金属盐,搅拌反应,反应完全后,抽滤,浓缩有机相得降解混合物；S2：降解混合物进行柱层析纯化,流动相为二氯甲烷、甲醇和乙酸,收集产物段浓缩,用环己烷打浆,抽滤干燥即得10-羰基多西他赛,本发明的优点在于通过高效降解和巧妙的纯化设计,有较高的收率,操作简易,产品纯度好。(The invention discloses a preparation method of 10-carbonyl docetaxel, which comprises the following steps: s1: dissolving docetaxel in a solvent, adding heavy metal salt, stirring for reaction, performing suction filtration after the reaction is completed, and concentrating an organic phase to obtain a degradation mixture; s2: the degraded mixture is purified by column chromatography, the mobile phase is dichloromethane, methanol and acetic acid, the product is collected and concentrated, the product is pulped by cyclohexane, and the 10-carbonyl docetaxel is obtained by suction filtration and drying.)
技术领域
本发明涉及抗癌药物领域，尤其涉及一种10-羰基多西他赛的制备方法。
背景技术
多西他赛，为紫杉类药物，它的药理作用是通过促进微管双聚体装配成徼管，同时通过防止去多聚化过程而使徼管稳定，阻滞细胞于G2和M期，从而抑制癌细胞的有丝分裂和增殖。
多西他赛的一个降解产物为10-羰基多西他赛，它被欧洲药典(EP)收录为杂质B。为了更好地与国际接轨，在多西他赛的质量研究中也需要对该杂质进行深入研究，因此很有必要制备高纯度的10-羰基多西他赛。10-羰基多西他赛的制备过程主要通过降解来实现，降解过程总是伴随着7-表-10-羰基多西他赛(多西他赛杂质D)一起产生。10-羰基多西他赛性质较为特殊，在纯度较高后非常容易进一步降解为7-表-10-羰基多西他赛，导致常规的分离方法很难实现高纯度10-羰基多西他赛的制备。
发明内容
针对上述现有技术的缺点，本发明的目的是提供一种10-羰基多西他赛的制备方法，其优点在于通过高效降解和巧妙的纯化设计，有较高的收率，操作简易，产品纯度好。
本发明的上述技术目的是通过以下技术方案得以实现的：
一种10-羰基多西他赛的制备方法，包括以下步骤：
S1：将多西他赛用溶剂溶清，加入重金属盐，搅拌反应，反应完全后，抽滤，浓缩有机相得降解混合物；
S2：降解混合物进行柱层析纯化，流动相为二氯甲烷、甲醇和乙酸，收集产物段浓缩，用环己烷打浆，抽滤干燥即得10-羰基多西他赛；
上述制备过程发生的反应路线如下：
进一步的，在步骤S1中，溶剂为甲醇、乙醇、N,N-二甲基甲酰胺中的一种或多种组合。
进一步的，在步骤S1中，重金属盐为醋酸铜、碳酸铜、乙酸锰(III)，乙酸钴(III),碳酸银中的一种。
进一步的，在步骤S1中，反应温度为65～80℃，反应时间3～8h。
进一步的，在步骤S2中，二氯甲烷为预先冷冻，二氯甲烷的温度条件为0℃以下。
进一步的，在步骤S2中，二氯甲烷、甲醇和乙酸的体积比为100:1:0.1。
进一步的，在步骤S1中，多西他赛用甲醇溶清，之后加入醋酸铜，升温至65℃搅拌下回流反应8h。
进一步的，在步骤S1中，多西他赛用N,N-二甲基甲酰胺溶清，加入碳酸铜，升温至80℃搅拌下回流反应3h。
进一步的，多西他赛用乙醇溶清，之后加入重金属盐，重金属盐为乙酸钴(III)，升温至78℃搅拌下回流反应8h。
进一步的，多西他赛用N,N-二甲基甲酰胺溶清，之后加入重金属盐，重金属盐为碳酸银，升温至80℃搅拌下回流反应3h。
综上所述，本发明具有以下有益效果：
1.通过筛选几种重金属盐，可以选择性氧化10位羟基得到目标物10-羰基多西他赛，反应中主要产物只有10-羰基多西他赛和7-表-10-羰基多西他赛，原料降解完全且产物种类少，不仅有利于工业生生产，也对多西他赛质量研究有重要意义。
2.避免了传统强氧化剂导致的7位和侧链2’位羟基同时氧化，出现产物增多，影响最终的收率。
附图说明
图1为本发明实施例1所得10-羰基多西他赛的HPLC图谱。
图2为本发明实施例1所得10-羰基多西他赛的MS图谱。
图3为本发明实施例1所得10-羰基多西他赛的1H NMR图谱。
图4为本发明实施例1所得10-羰基多西他赛的13C NMR图谱。
图5为本发明对比例3所得10-羰基多西他赛的HPLC图谱
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图和具体实施方式对本发明提出的装置作进一步详细说明。根据下面说明，本发明的优点和特征将更清楚。须知，本说明书所附图均仅用以配合说明书所揭示的内容，以供熟悉此技术的人士了解与阅读，并非用以限定本发明实施的限定条件，故不具技术上的实质意义，任何结构的修饰、比例关系的改变或大小的调整，在不影响本发明所能产生的功效及所能达成的目的下，均应仍落在本发明所揭示的技术内容能涵盖的范围内。
实施例1：
步骤S1：将10g多西他赛用200ml甲醇溶清，加入2g醋酸铜，升温至65℃搅拌下回流反应8h。反应完全后，将反应液抽滤，滤液浓缩得降解混合物。
S2：降解混合物用少量二氯甲烷溶清后湿法上样，进行柱层析纯化(普通200～300目硅胶)，流动相为二氯甲烷、甲醇和乙酸(体积比为100:1:0.1)，其中二氯甲烷为预先冷冻的(0℃以下)，收集产物段浓缩，加少量环己烷打浆，抽滤后干燥即得3.4g 10-羰基多西他赛，纯度为97.366％，液相图谱见附图1。
10-羰基多西他赛结构见式一：
如图2所示，本实施例中10-羰基多西他赛的MS图谱，其中，其质荷比m/z＝828.3[M+Na]+，可以推断分子量为805，与目标化合物一致。
如图3所示，为本实施例10-羰基多西他赛的1H NMR图谱，1H NMR(500MHz,CDCl3)δ:7.31～8.12(10H,ArH),6.22(1H,t,J＝8.9Hz,H13),5.81(1H,d,J＝6.8Hz,H35),5.39(1H,H30),5.26(1H,H2),4.90(1H,d,J＝8.6Hz,H5),4.63(1H,s,H29),4.31(1H,d,J＝8.5Hz,H20a),4.18(1H,d,J＝8.5Hz,H20b),4.02(1H,dd,J＝10.5Hz,7.1Hz,H7),3.62(1H,d,J＝6.7Hz,H3),2.56(1H,m,H6a),2.37(5H,3H27 overlapped with 2H14),1.92(3H,s,H18),1.85(1H,m,H6b),1.73(3H,s,H19),1.43(Solvent Cyclohexane),1.34(9H,s,H38),1.29(3H,s,H16/H17),1.26(3H,s,H16/H17)；
如图4所示，本实施例10-羰基多西他赛13C NMR图谱，其中，13C NMR(125MHz,CDCl3)δ:206.116,193.962,172.753,170.167,166.972,155.468,146.996,141.655,138.233,133.874,130.207,128.937,128.896,128.771,128.148,126.754,84.231,80.661,80.344,79.264,76.153,74.66,73.521,72.105,68.705,58.392,56.315,45.35,40.912,35.578,35.403,28.178,26.898(Solvent Cyclohexane),23.887,22.493,14.186,8.362.
实施例2：
步骤S1：将10g多西他赛用200ml N,N-二甲基甲酰胺溶清，加入2g碳酸铜，升温至80℃搅拌下回流反应3h。反应完全后，将反应液抽滤，滤液浓缩得降解混合物。
S2：降解混合物用少量二氯甲烷溶清后湿法上样，进行柱层析纯化，流动相为二氯甲烷、甲醇和乙酸(体积比为100:1:0.1)，其中二氯甲烷为预先冷冻的(0℃以下)，收集产物段浓缩，加少量环己烷打浆，抽滤后干燥即得2.8g 10-羰基多西他赛，纯度为96.8％，总收率为28％。
实施例3：
步骤S1：将10g多西他赛用200ml乙醇溶清，加入2g乙酸钴(III)，升温至78℃搅拌下回流反应8h。反应完全后，将反应液抽滤，滤液浓缩得降解混合物。
S2：降解混合物用少量二氯甲烷溶清后湿法上样，进行柱层析纯化(普通200～300目硅胶)，流动相为二氯甲烷、甲醇和乙酸(体积比为100:1:0.1)，其中二氯甲烷为预先冷冻的(0℃以下)，收集产物段浓缩，加少量环己烷打浆，抽滤后干燥即得3.8g 10-羰基多西他赛，纯度为97.8％，总收率为34％，总收率为38％。
实施例4：
步骤S1：将10g多西他赛用200ml N,N-二甲基甲酰胺溶清，加入2g碳酸银，升温至80℃搅拌下回流反应3h。反应完全后，将反应液抽滤，滤液浓缩得降解混合物。
S2：降解混合物用少量二氯甲烷溶清后湿法上样，进行柱层析纯化，流动相为二氯甲烷、甲醇和乙酸(体积比为100:1:0.1)，其中二氯甲烷为预先冷冻的(0℃以下)，收集产物段浓缩，加少量环己烷打浆，抽滤后干燥即得0.8g 10-羰基多西他赛，纯度为95.3％。收率较低，反应的主要产物为7-表多西他赛。
对比例1(使用双氧水作为氧化剂)：
将2g多西他赛用40ml甲醇溶清，加入2ml 30％双氧水，升温至65℃搅拌下回流反应3h。原料反应完后得到的产物主要为侧链水解的产物，基本未观测到目标物10-羰基多西他赛。
对比例2(使用二氧化锰为氧化剂)：
将2g多西他赛用40ml甲醇溶清，加入0.5g二氧化锰，升温至65℃搅拌下回流反应3h。原料反应完后得到的产物大致有7个，10-羰基多西他赛占比较少，分离较难。
对比例3(使用二氧化铅为氧化剂)：
将2g多西他赛用40ml N,N-二甲基甲酰胺溶清，加入0.5g二氧化铅，升温至65℃搅拌下回流反应3h。原料反应完后得到的产物大致有7个，10-羰基多西他赛占比较少。
对比例4(使用三氟化钴氧化剂)：
将2g多西他赛用40ml N,N-二甲基甲酰胺溶清，加入0.5g三氟化钴，升温至65℃搅拌下回流反应3h。原料反应完后得到的产物复杂，有十多个产物，未见10-羰基多西他赛。
对比例5(使用常规手段柱层析配合制备液相进行纯化)：
步骤S1：将10g多西他赛用200ml甲醇溶清，加入2g醋酸铜，升温至65℃搅拌下回流反应8h。反应完全后，将反应液抽滤，滤液浓缩得降解混合物；
S2：降解混合物用少量二氯甲烷溶清后湿法上样，进行柱层析纯化(普通200～300目硅胶)，流动相为二氯甲烷、甲醇(体积比为100:1)，柱层析过程中在洗脱完7-表-10-羰基多西他赛之后，全是10-羰基多西他赛和7-表-10-羰基多西他赛的交叉，收集浓缩得纯度较低的10-羰基多西他赛。
将上述10-羰基多西他赛以少量乙腈溶清后，进行制备液相纯化(填料为常规C-18反相填料)，50％～70％乙腈升梯，收集第一个主峰的洗脱液(30min完成洗脱)，洗脱液浓缩后析出固体，抽滤、干燥得10-羰基多西他赛，纯度为28.261％，图谱见附图5，目标产物大部分转化为降解产物7-表-10-羰基多西他赛。
由对比例可知：1.常规的氧化试剂无法使多西他赛大比例降解为10-羰基多西他赛；2.常温进行硅胶柱层析的过程，10-羰基多西他赛会在洗脱的过程大量发生进一步降解得到7-表-10-羰基多西他赛；3.制备液相(C-18反相填料)液无法实现10-羰基多西他赛的有效纯化，即使整个过程10-羰基多西他赛与填料接触时间低于30min。
本发明通过较低温的流动相以及加入稳定剂乙酸可以有效抑制10-羰基多西他赛的降解，从而最终得到纯度较高的10-羰基多西他赛。
以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。