一种新鲜母乳的长期冷藏方法
阅读说明：本技术 一种新鲜母乳的长期冷藏方法 (Long-term refrigeration method of fresh breast milk ) 是由 姚卫蓉 陈宇伦 施思倩 苏莹 池可心 谢云飞 于航 杨方威 于 2021-08-20 设计创作，主要内容包括：本发明公开了一种新鲜母乳的长期冷藏方法,属于食品保鲜领域。本发明向母乳中添加乳化剂并采用均质手段辅助冰箱冷藏母乳。分别测定了母乳冷藏期间酸臭味、pH、可滴定酸度和游离脂肪酸四个指标,结果发现采用该法冷藏的母乳达到3天以上,脂肪酸相关指标才出现突变,并且所有指标劣变延缓率均在40％以上,平均延缓率在70％以上。因此,本发明可以将冷藏母乳时间提升至3天以上,为新鲜母乳保藏提供了一种操作简单、成本低廉的新方法。(The invention discloses a long-term cold storage method of fresh breast milk, belonging to the field of food preservation. The invention adds the emulsifier into the breast milk and adopts a homogenizing method to assist the refrigerator to refrigerate the breast milk. Four indexes of acid odor, pH, titratable acidity and free fatty acid in the breast milk refrigeration period are respectively measured, and the result shows that when the breast milk refrigerated by the method is refrigerated for more than 3 days, the indexes related to the fatty acid are mutated, the degradation delay rate of all the indexes is more than 40%, and the average delay rate is more than 70%. Therefore, the invention can prolong the time for refrigerating the breast milk to more than 3 days, and provides a novel method with simple operation and low cost for preserving the fresh breast milk.)
技术领域
本发明涉及一种新鲜母乳的长期冷藏方法，属于食品保鲜领域。
背景技术
母乳是婴儿最佳的营养来源，其特点是成分适宜、易于消化且具有免疫调节性能和一定的抗感染功能，为婴儿提供营养和保护。近年来，迫于家庭、工作和社会环境的压力，许多年轻女性开始尝试用挤出乳喂养来代替传统的亲母喂养。在这过程中，新鲜母乳的家庭保藏问题越发突出，由于脂肪劣变导致母乳品质的急剧降低，婴幼儿拒绝接受喂养的现象经常发生，造成大量母乳的浪费。
母乳pH值指母乳中的氢离子的总数和总物质的量的比。可滴定酸度指的是所有酸性成分的总量即总酸度，包括未离解的酸的浓度和已离解的酸的浓度。母乳中脂质大致可分为胆固醇、中性脂肪、磷脂质、游离脂肪酸等。游离脂肪酸(Free Fat Acid，FFA)又称为非酯化脂肪酸(nonestesterified fatty acid，NEFA)，是脂肪分解产物之一。因此，pH值、可滴定酸度和游离脂肪酸构成母乳冷藏过程中监测脂肪酸变化的三个指标。
目前新鲜母乳保藏的方法有加热法、冷冻法和冷藏法，暂无其他辅助处理方式。加热法通过杀死微生物的方法来保证母乳安全性，但该法会加速蛋白和脂肪的水解，并且使某些生物功能成分(例如酶)失活。冷冻法形成的冰晶会破坏母乳的脂肪球膜的完整性。冷藏的方法能够有效的在短期内保持母乳营养以及生物活性，但该法在24h后极易出现脂肪分层现象，以及酸臭味的产生，导致母乳品质迅速劣变，使得婴幼儿难以接受，造成母乳的大量浪费。因此，采用一种简便的、能够满足普通家庭在冷藏母乳过程中既能保持风味也能维持新鲜度的方法迫在眉睫。
发明内容
[技术问题]
提供一种简便的、能够满足普通家庭在冷藏母乳过程中既能保持风味也能维持新鲜度的方法。
[技术方案]
为了解决上述问题，本发明提供了一种添加乳化剂并采用均质手段辅助母乳冷藏的方法，本发明的方法操作简单、成本低廉、显著改善母乳冷藏期间的酸臭味、pH、酸度、和游离脂肪酸等指标，延长了母乳的冷藏保质期。
本发明的技术构思是通过向母乳中添加大豆磷脂、蛋黄磷脂、单/双甘油脂肪酸酯、卡拉胶、柠檬酸脂肪酸甘油酯等食品级乳化剂，可以一定程度上降低后续均质过程中乳脂肪球界面膜来不及修复造成的脂肪氧化和脂肪球聚集的风险，进而减缓脂肪劣变进程。此外，部分食品级乳化剂能够适当补充母乳中的磷脂含量，提升母乳的营养价值。均质作为辅助手段将乳脂肪球细微化破碎，减小脂肪球直径，利用布朗运动的分散作用能够部分克服脂肪球聚集的趋势，使得脂肪球上浮速度减慢，改善脂肪氧化劣变，同时还使吸附于脂肪球表面的酪蛋白含量增加而改进粘度，提高蛋白质的可消化性以及增加光泽等目的。
本发明的第一目的在于提供一种新鲜母乳的长期冷藏方法，包括如下步骤：先将新鲜母乳均匀加热至45℃-65℃并加入质量分数为0.02％-0.10％的食品级乳化剂混合均匀，再依次经均质、冷却至室温和密封后置于-1-10℃环境中冷藏。所述方法处理后的母乳的冷藏保质期不少于3天。
其中，所述新鲜母乳是指母乳在挤出后立即保藏于-1℃-10℃的环境中，至后续的加热处理的最长时间间隔为2h。优选地，冷藏温度为-1℃-4℃。
作为本发明的一种
具体实施方式
，将新鲜母乳均匀加热具体采用水浴加热的方式。
作为本发明的一种具体实施方式，新鲜母乳均匀加热并加入食品级乳化剂后通过搅拌的方式混合均匀。
作为本发明的一种具体实施方式，冷却的方式为流动自来水冷却。
作为本发明的一种具体实施方式，由冰箱提供-1-10℃的冷藏环境。
作为本发明的一种具体实施方式，所述食品级乳化剂包括大豆磷脂、蛋黄磷脂、单/双甘油脂肪酸酯、卡拉胶、柠檬酸脂肪酸甘油酯中的至少一种。
作为本发明的一种具体实施方式，均质的条件：均质速度为10000-25000rpm/min，均质时间为5-15min。
作为本发明的一种具体实施方式，均质采用的设备为小型家用均质仪。
作为本发明的一种具体实施方式，包括如下步骤：
(1)将新鲜母乳均匀加热至45℃-65℃并加入质量分数为0.02％-0.10％的食品级乳化剂混合均匀；
(2)再将步骤(1)所得母乳经均质、冷却至室温和密封后置于-1-10℃环境中冷藏；冷藏过程中监测脂肪酸相关指标：酸臭味、pH、可滴定酸度和游离脂肪酸含量；脂肪酸相关指标发生突变即终止冷藏并由此确定母乳的冷藏保质期，其中酸臭味、pH、可滴定酸度或游离脂肪酸的突变是根据统计学上的p＜0.05水平出现显著性差异确定。
本发明的第二目的在于提供前述的长期冷藏方法在人类母乳或动物鲜奶冷藏保存中的应用。
本发明的第三目的在于提供由前述的长期冷藏方法制备的鲜母乳；所述鲜母乳的冷藏保质期不少于3天。
相较于现有技术，本发明的有益效果：
(1)本发明采用添加食品级乳化剂联合均质的处理手法，通过二者的协同作用，能够显著延缓脂肪劣变，从而显著改善母乳冷藏期间的酸臭味、pH、酸度、和游离脂肪酸等指标，延长了母乳的保质期，能够很好地维持母乳的冷藏新鲜度；同时冷藏后的母乳还能保持风味和营养价值。
(2)本发明提供的新鲜母乳的长期冷藏方法，通过添加食品级乳化剂联合均质处理，组合后的技术方案对于延缓脂肪劣变、延长了母乳的冷藏保质期的技术效果比单独添加食品级乳化剂和单独均质处理的冷藏处理的方法所能达到的冷藏效果的总和更优越。
(3)本发明向母乳中添加食品级乳化剂并采用均质手段辅助冰箱冷藏母乳，分别测定了母乳冷藏期间酸臭味、pH、可滴定酸度和游离脂肪酸四个指标，结果发现采用该法冷藏的母乳达到3天以上，脂肪酸相关指标才出现突变，并且所有指标劣变延缓率均在40％以上，平均延缓率在70％以上。因此，本发明可以将冷藏母乳时间提升至3天以上。
(4)本发明为家庭保藏新鲜母乳提供了一种新的方法，操作简便、成本低廉。
附图说明
图1为实施例1和对照例1的保藏母乳过程中酸臭味感官评定得分情况。
图2为实施例1和对照例1的保藏母乳过程中酸臭味感官评定得分情况拟合趋势线图。
图3为实施例1和对照例1的保藏母乳过程中pH值变化。
图4为实施例1和对照例1的保藏母乳过程中pH值变化拟合趋势线图。
图5为实施例1和对照例1的保藏母乳过程中酸度变化。
图6为实施例1和对照例1的保藏母乳过程中酸度变化拟合趋势线图。
图7为实施例1和对照例1的保藏母乳过程中游离脂肪酸变化。
图8为实施例1和对照例1的保藏母乳过程中游离脂肪酸变化拟合趋势线图。
注：上述图1、5、7中大写字母表示同一时间内的不同样品之间的显著性差异(组内差异)，小写字母表示同一样品在不同时间的差异(组间差异)，p<0.05；上述图1-8中均质+乳化剂组表示实施例1的结果，未处理组表示对照例1的结果。
具体实施方式
以下对本发明的优选实施例进行说明，应当理解实施例是为了更好地解释本发明，不用于限制本发明。
本发明实施例及对比例中所涉及的测试方法如下：
酸臭味指标取自12位感官评定员对母乳冷藏过程中酸臭味程度进行打分，一共设置0-5分(酸臭味程度随分值增加)，分值间隔为1分，最终得分为取平均值后的分值。
pH值通过pH计进行测定。
可滴定酸度采用GB5009.239-2016《食品安全国家标准食品酸度的测定》中的第一法-酚酞指示剂法进行测定。
游离脂肪酸含量采用游离脂肪酸(NEFA)测定试剂盒(比色法)来测定。
挥发性风味成分含量采用顶空固相微萃取－气质联用法(SPME－GC－MS)测定母乳的挥发性物质，取适量的液体母乳于20mL的螺口玻璃瓶，插入固相萃取头吸附平衡，40℃萃取20min，最后于GC进样口解析。GC－MS参数条件：色谱柱为毛细管色谱柱(TRWAXMS 30m×0.25mm×0.25mm)；升温程序：起始柱温40℃，保持3min，以4℃/min上升至120℃，再以10℃/min上升至240℃，保持8min。载气是高纯氦气，流速是1.0mL/min；不分流模式，进样口温度为250℃，传输线温度为240℃；质谱条件电子轰击(EI)离子源：电子能量70eV；离子源温度是240℃；灯丝电流50μA；质量扫描范围(m/z)：33～450u。定性方法：经过软件检索，同时结合NIST library的配比度，对鉴定结果进行分析。定量方法：根据峰面积归一化计算。
实施例1
一种新鲜母乳的长期冷藏方法，包括如下步骤：
(1)哺乳期志愿者提供2h内的新鲜母乳(新鲜母乳是指母乳在挤出后立即保藏于-1℃-10℃的环境中，至后续的加热处理的最长时间间隔为2h)。
(2)将所得新鲜母乳置于60℃的水浴中预热，并维持60℃恒温，得到恒温母乳。
(3)在恒温母乳中加入0.05％大豆磷脂(食品级乳化剂)，搅拌均匀。
(4)将步骤(3)所得母乳采用小型家用均质仪(规格800w，型号HB8020S，市售)均质，得到均质母乳：小型家用均质仪均质速度为25000rpm/min，均质时间为8min。
(5)将步骤(4)所得均质母乳采用流动自来水冷却到室温，密封。
(6)将步骤(5)所得母乳置于4℃冰箱中冷藏。
(7)冷藏过程中监测脂肪酸相关指标，所有指标均测定了母乳冷藏0、16、24、40、48、64、72、88和96h的时间点。
(8)确定脂肪酸相关指标发生突变的时间点。
对照例1(未处理)
传统新鲜母乳的冷藏方法，包括如下步骤：
(1)哺乳期志愿者提供2h内的新鲜母乳(新鲜母乳是指母乳在挤出后立即保藏于-1℃-10℃的环境中，至后续处理的最长时间间隔为2h)。
(2)将步骤(1)所得母乳置于4℃冰箱中冷藏。
(3)冷藏过程中监测脂肪酸相关指标，所有指标均测定了母乳冷藏0、16、24、40、48、64、72、88和96h的时间点。
(4)确定脂肪酸相关指标发生突变的时间点。
采用大豆磷脂作为食品乳化剂，通过对本发明实施例1的食品级乳化剂联合均质处理得到的母乳(记作：均质+乳化剂)以及对照例1的未处理直接冷藏得到的母乳(记作未处理)的冷藏过程的脂肪酸相关指标进行监测，试验结果参见图1～8。
对照例1：参见图1-2，对照例1的母乳酸臭味在冷藏16h时就开始突变，产生酸臭味；从pH值看，参见图3-4，对照例1的母乳在冷藏24h后pH就发生显著下降，到40h时pH降至6.5左右，随后继续保持下降趋势；从可滴定酸度看，参见图5-6，对照例1的母乳酸度在冷藏96h以内始终远高于实施例1处理的母乳；从游离脂肪酸含量来看，参见图7-8，冷藏起始阶段(0-40h)对照例1的母乳中游离脂肪酸初始值较低，但是在16h以后，游离脂肪酸含量就开始显著升高，72h时可达到最高值3900μmol/L左右，此时母乳已经发生显著劣变。综合分析，对照例1的母乳的冷藏保质期为16h。
实施例1：如图1-2所示，本发明实施例1的母乳酸臭味在冷藏72h时开始突变，产生轻微的酸臭味；如图3-4所示，实施例1的均质+乳化剂处理后的母乳在冷藏期间pH值较对照例1未处理直接冷藏的母乳下降缓慢，在冷藏72h时，pH值依旧维持在7左右；如图5-6所示，从可滴定酸度看，本发明实施例1的均质+乳化剂处理后的母乳酸度极低且在88h时才开始出现突变；如图7-8所示，采用本发明实施例1的均质+乳化剂处理后的母乳游离脂肪酸初始值较对照例1高，但在冷藏40h时游离脂肪酸才开始出现较为显著性变化，但在0-24h和48-96h这两个时间段内均较为稳定，并且96h时的游离脂肪酸含量与对照例1冷藏64h时相当。综合分析，实施例1的母乳的冷藏保质期至少为72h(3天)。
说明本发明实施例1处理后的母乳冷藏保质期相较未经处理直接冷藏的母乳显著延长。
对实施例1与对照例1的母乳冷藏的脂肪酸相关指标进行监测的数据进行线性拟合分析并汇总如表1，其中实施例1与对照例1的相关拟合数据参见图2、4、6和8。
分析表1可知，实施例1的方法的所有指标劣变延缓率均在40％以上，平均延缓率在70％以上。因此，本发明可以将冷藏母乳时间提升至3天以上。
表1对照例1与实施例1的母乳4℃下冷藏过程中品质劣变关键指标的变化
注：劣变减缓率(％)＝(对照组斜率-均质+乳化剂组斜率)/对照组斜率×100。
对对照例1与实施例1的母乳4℃下冷藏过程中母乳中风味成分含量(ug/kg)的变化进行了监测。
表2对照例1与实施例1的母乳4℃下冷藏过程中母乳中风味成分含量(ug/kg)的变化
从表2数据分析并结合酸臭味结果(图1-2)可知，母乳中的风味成分变化主要是为丁酸、己酸含量急剧增加，醋酸、肉豆蔻酸和壬醛也有所增加。在冷藏过程中，醋酸含量整体上变化趋势为先增加后减小，在实施例1的24h时达到最大为1.54ug/kg，而对照例1为5.97uk/kg，减少了74.20％；并且在96h时，对照例1醋酸含量也高于实施例1在冷藏期间的最大值。丁酸和己酸含量在冷藏过程中整体上看一直增加，但试验拟合得到的实施例1中丁酸增加曲线斜率为0.0415，而对照例1为0.097，实施例1相较对照例1减缓了57.22％；实施例1中己酸增加曲线斜率为0.1749，而对照例1为0.4574，实施例1相较对照例1减缓了61.76％；实施例1中壬酸、苯甲酸、肉豆蔻酸、葵酸和壬醛总体几乎保持不变或有所下降，而对照例1中肉豆蔻酸和壬醛的含量有所上升。母乳在冷藏过程中的味道差异与中短链游离脂肪酸含量有很大相关性，因为中短链脂肪酸易挥发，对母乳风味贡献最大如丁酸和己酸，随着储存时间的延长，甘油三酯发生水解，并且长链脂肪酸可能发生断链，造成丁酸、己酸含量越来越高，是造成母乳酸臭味的重要原因。由此表明，实施例1的母乳在冷藏3天内尚未发生明显劣变，保质效果良好。说明本发明的方法有利于维持母乳的冷藏新鲜度；同时冷藏后的母乳还能保持风味和营养价值。表2数据能够进一步验证本发明实施例1的母乳的冷藏保质期至少为3天。
实施例2
一种新鲜母乳的长期冷藏方法，参照实施例1，区别仅在于，将食品乳化剂由大豆磷脂替换为蛋黄磷脂。具体地：
一种新鲜母乳的长期冷藏方法，包括如下步骤：
(1)哺乳期志愿者提供2h内的新鲜母乳(新鲜母乳是指母乳在挤出后立即保藏于-1℃-10℃的环境中，至后续的加热处理的最长时间间隔为2h)。
(2)将所得新鲜母乳置于60℃的水浴中预热，并维持60℃恒温，得到恒温母乳。
(3)在恒温母乳中加入0.05％蛋黄磷脂(食品级乳化剂)，搅拌均匀。
(4)将步骤(3)所得母乳采用小型家用均质仪(规格800w，型号HB8020S，市售)均质，得到均质母乳：小型家用均质仪均质速度为25000rpm/min，均质时间为8min。
(5)将步骤(4)所得均质母乳采用流动自来水冷却到室温，密封。
(6)将步骤(5)所得母乳置于4℃冰箱中冷藏。
(7)冷藏过程中监测脂肪酸相关指标，所有指标均测定了母乳冷藏0、16、24、40、48、64、72、88和96h的时间点。
(8)确定脂肪酸相关指标发生突变的时间点。
采用蛋黄磷脂作为食品乳化剂，通过对本发明实施例2的食品级乳化剂联合均质处理得到的母乳的冷藏过程的脂肪酸相关指标进行监测，结果表明：
本发明实施例2的母乳酸臭味在冷藏72h时开始突变，产生轻微的酸臭味；实施例2的均质+乳化剂处理后的母乳在冷藏期间pH值较对照组下降缓慢，在冷藏72h时，pH值依旧维持在6.9左右；从可滴定酸度看，本发明实施例2的均质+乳化剂处理后的母乳酸度极低且在72h时才开始出现突变；采用本发明实施例2的均质+乳化剂处理后的母乳游离脂肪酸初始值较对照组高，但在冷藏48h时游离脂肪酸才开始出现较为显著性变化，但从总体上缓慢增加，比较稳定。综合分析，本发明实施例2的母乳的冷藏保质期至少为3天。
实施例3
一种新鲜母乳的长期冷藏方法，参照实施例1，区别仅在于，将食品乳化剂由大豆磷脂替换为柠檬酸脂肪酸甘油酯。具体地：
一种新鲜母乳的长期冷藏方法，包括如下步骤：
(1)哺乳期志愿者提供2h内的新鲜母乳(新鲜母乳是指母乳在挤出后立即保藏于-1℃-10℃的环境中，至后续的加热处理的最长时间间隔为2h)。
(2)将所得新鲜母乳置于60℃的水浴中预热，并维持60℃恒温，得到恒温母乳。
(3)在恒温母乳中加入0.05％柠檬酸脂肪酸甘油酯(食品级乳化剂)，搅拌均匀。
(4)将步骤(3)所得母乳采用小型家用均质仪(规格800w，型号HB8020S，市售)均质，得到均质母乳：小型家用均质仪均质速度为25000rpm/min，均质时间为8min。
(5)将步骤(4)所得均质母乳采用流动自来水冷却到室温，密封。
(6)将步骤(5)所得母乳置于4℃冰箱中冷藏。
(7)冷藏过程中监测脂肪酸相关指标，所有指标均测定了母乳冷藏0、16、24、40、48、64、72、88和96h的时间点。
(8)确定脂肪酸相关指标发生突变的时间点
采用柠檬酸脂肪酸甘油酯作为食品乳化剂，通过对本发明实施例3的食品级乳化剂联合均质处理得到的母乳的冷藏过程的脂肪酸相关指标进行监测，结果表明：
本发明实施例3的母乳酸臭味在冷藏72h时开始突变，产生轻微的酸臭味；实施例3的均质+乳化剂处理后的母乳在冷藏期间pH值较对照组下降缓慢，在冷藏64h时，pH值依旧维持在7左右；从可滴定酸度看，本发明实施例3的均质+乳化剂处理后的母乳酸度极低且在64h时才开始出现突变；采用本发明实施例3的均质+乳化剂处理后的母乳游离脂肪酸初始值较对照组高，但在冷藏40h时游离脂肪酸才开始出现较为显著性变化，但在40h前后均较为稳定。因此，本发明实施例3的母乳的冷藏保质期至少为3天。
实施例4
一种新鲜母乳的长期冷藏方法，参照实施例1，区别仅在于，将水浴温度调整为55℃。
具体地：
一种新鲜母乳的长期冷藏方法，包括如下步骤：
(1)哺乳期志愿者提供2h内的新鲜母乳(新鲜母乳是指母乳在挤出后立即保藏于-1℃-10℃的环境中，至后续的加热处理的最长时间间隔为2h)。
(2)将所得新鲜母乳置于55℃的水浴中预热，并维持60℃恒温，得到恒温母乳。
(3)在恒温母乳中加入0.05％大豆磷脂(食品级乳化剂)，搅拌均匀。
(4)将步骤(3)所得母乳采用小型家用均质仪(规格800w，型号HB8020S，市售)均质，得到均质母乳：小型家用均质仪均质速度为25000rpm/min，均质时间为8min。
(5)将步骤(4)所得均质母乳采用流动自来水冷却到室温，密封。
(6)将步骤(5)所得母乳置于4℃冰箱中冷藏。
(7)冷藏过程中监测脂肪酸相关指标，所有指标均测定了母乳冷藏0、16、24、40、48、64、72、88和96h的时间点。
(8)确定脂肪酸相关指标发生突变的时间点
通过对本发明实施例4的食品级乳化剂联合均质处理得到的母乳的冷藏过程的脂肪酸相关指标进行监测，结果表明：
本发明实施例4的母乳酸臭味在冷藏72h时开始突变，产生轻微的酸臭味；实施例4的均质+乳化剂处理后的母乳在冷藏期间pH值较对照组下降缓慢，在冷藏72h时，pH值依旧维持在7左右；从可滴定酸度看，本发明实施例4的均质+乳化剂处理后的母乳酸度极低且在72h时才开始出现突变；采用本发明实施例4的均质+乳化剂处理后的母乳游离脂肪酸初始值较对照组高，但在冷藏40h时游离脂肪酸才开始出现较为显著性变化，但在40h前后均较为稳定。综上，本发明实施例4的母乳的冷藏保质期至少为3天。
实施例5
一种新鲜母乳的长期冷藏方法，参照实施例1，区别仅在于，将均质时间调整为5min。
通过对本发明实施例5的食品级乳化剂联合均质处理得到的母乳的冷藏过程的脂肪酸相关指标进行监测，结果表明：
本发明实施例5的母乳酸臭味在冷藏72h时开始突变，产生轻微的酸臭味；实施例5的均质+乳化剂处理后的母乳在冷藏期间pH值较对照组下降缓慢，在冷藏64h时，pH值依旧维持在7左右；从可滴定酸度看，本发明实施例5的均质+乳化剂处理后的母乳酸度极低且在64h时才开始出现突变；采用本发明实施例5的均质+乳化剂处理后的母乳游离脂肪酸初始值较对照组高，但在冷藏40h时游离脂肪酸才开始出现较为显著性变化，但在40h前后均较为稳定。综上，本发明实施例5的母乳的冷藏保质期至少为3天。
实施例6
一种新鲜母乳的长期冷藏方法，参照实施例1，区别仅在于，将均质速度调整为20000rpm/min，均质时间调整为10min。
通过对本发明实施例6的食品级乳化剂联合均质处理得到的母乳的冷藏过程的脂肪酸相关指标进行监测，结果表明：
本发明实施例6的母乳酸臭味在冷藏72h时开始突变，产生轻微的酸臭味；实施例6的均质+乳化剂处理后的母乳在冷藏期间pH值较对照组下降缓慢，在冷藏64h时，pH值依旧维持在7左右；从可滴定酸度看，本发明实施例6的均质+乳化剂处理后的母乳酸度极低且在64h时才开始出现突变；采用本发明实施例6的均质+乳化剂处理后的母乳游离脂肪酸初始值较对照组高，但在冷藏40h时游离脂肪酸才开始出现较为显著性变化，但在40h前后均较为稳定。综上，本发明实施例6的母乳的冷藏保质期至少为3天。
实施例7
一种新鲜母乳的长期冷藏方法，参照实施例1，区别仅在于，将大豆磷脂的相对添加量调整为0.1％。
通过对本发明实施例8的食品级乳化剂联合均质处理得到的母乳的冷藏过程的脂肪酸相关指标进行监测，结果表明：
本发明实施例8的母乳酸臭味在冷藏72h时开始突变，产生轻微的酸臭味；实施例8的均质+乳化剂处理后的母乳在冷藏期间pH值较对照组下降缓慢，在冷藏88h时，pH值依旧维持在7左右；从可滴定酸度看，本发明实施例8的均质+乳化剂处理后的母乳酸度极低且在88h时才开始出现突变；采用本发明实施例8的均质+乳化剂处理后的母乳游离脂肪酸初始值较对照组高，但在冷藏48h时游离脂肪酸才开始出现较为显著性变化，但在48h前后均较为稳定。综上，本发明实施例8的母乳的冷藏保质期至少为3天。
实施例8
一种新鲜母乳的长期冷藏方法，参照实施例1，区别仅在于，将步骤(6)中冰箱冷藏温度调整为0℃、10℃。
通过对本发明实施例9的食品级乳化剂联合均质处理得到的母乳的冷藏过程的脂肪酸相关指标进行监测，结果表明：
当步骤(6)中冰箱冷藏温度调整为0℃时，本发明实施例9的母乳酸臭味在冷藏72h时开始突变，产生轻微的酸臭味；实施例9的均质+乳化剂处理后的母乳在冷藏期间pH值较对照组下降缓慢，在冷藏88h时，pH值依旧维持在7左右；从可滴定酸度看，本发明实施例9的均质+乳化剂处理后的母乳酸度极低且在88h时才开始出现突变；采用本发明实施例9的均质+乳化剂处理后的母乳游离脂肪酸初始值较对照组高，但在冷藏48h时游离脂肪酸才开始出现较为显著性变化，但在48h前后均较为稳定。因此，本发明实施例8的母乳的冷藏保质期至少为3天。
对照例2(单独均质)
一种新鲜母乳的长期冷藏方法，参照实施例1，区别仅在于，省略步骤(3)添加食品乳化剂。
对照例3(单独乳化剂)
一种新鲜母乳的长期冷藏方法，参照实施例1，区别仅在于，省略步骤(2)、(4)和(5)的均质过程，包括如下步骤：
(1)哺乳期志愿者提供2h内的新鲜母乳(新鲜母乳是指母乳在挤出后立即保藏于-1℃-10℃的环境中，至后续处理的最长时间间隔为2h)。
(2)在母乳中加入0.05％大豆磷脂(食品级乳化剂)，搅拌均匀。
(3)将步骤(2)所得母乳置于4℃冰箱中冷藏。
(4)冷藏过程中监测脂肪酸相关指标，所有指标均测定了母乳冷藏0、16、24、40、48、64、72、88和96h的时间点。
(5)确定脂肪酸相关指标发生突变的时间点。
对对照例2-3和实施例1的母乳冷藏的脂肪酸相关指标进行监测的数据进行线性拟合分析并汇总如表3。
表3对照例2-3与实施例1的母乳4℃下冷藏过程中品质劣变关键指标的变化
分析表3可知，实施例1中酸臭味、pH和酸度三个指标较对照例2和对照例3有明显改善。试验过程发现，对照例3酸臭味在16h时出现突变与对照例1相当，而对照例2中酸臭味在40h时才开始突变。结合表1和表3中的数据分析，可以发现均质处理对母乳品质的改善较为明显，但当均质处理和添加乳化剂相结合后的实施例1与对照例2相比较，酸臭味劣变减缓率为85.27％，pH劣变减缓率为61.71％，酸度劣变减缓率为88.63％.，游离脂肪酸较为接近。由此可见，本发明提供的新鲜母乳的长期冷藏方法，通过添加食品级乳化剂联合均质处理，组合后的技术方案对于延缓脂肪劣变，延长了母乳的冷藏保质期的技术效果比单独均质处理和单独添加食品级乳化剂的方法所能达到的冷藏效果的总和更优越。
综上可知，本发明采用添加食品级乳化剂联合均质的处理手法，通过二者的协同作用，能够显著延缓脂肪劣变，从而显著改善母乳冷藏期间的酸臭味、pH、酸度、和游离脂肪酸等指标，延长了母乳的保质期，能够很好地维持母乳的冷藏新鲜度；同时冷藏后的母乳还能保持风味和营养价值。
实施例9
实施例1-8的长期冷藏方法在人类母乳或动物鲜奶冷藏保存中的应用。能够显著提升人类母乳或动物鲜奶在冷藏环境中的保质期，冷藏后还能保持母乳的风味和营养价值。
最后应说明的是：以上各实施例仅用以帮助理解本发明的技术方案及核心思想，而幅度与非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换，而这些修改或者替换也落入本发明权利要求的保护范围内。
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