一种重组马立克病毒mdlv21株的构建及应用

文档序号:1856571 发布日期:2021-11-19 浏览:13次 >En<

阅读说明:本技术 一种重组马立克病毒mdlv21株的构建及应用 (Construction and application of recombinant Marek&#39;s virus MDLV21 strain ) 是由 苏帅 崔宁 成子强 王淑雯 李久庆 于 2021-08-23 设计创作,主要内容包括:本发明涉及一种重组马立克病毒MDLV21株的构建及应用。所构建的重组病毒同时缺失了MDV致病、致肿瘤相关的两个主要基因RLORF6、Meq和CmR基因,相比缺失单一基因,极大增加了疫苗安全性,降低了野外获得缺失基因的能力;重组病毒株基因组没有抗性基因,符合国内外生物制品行业的严格要求;重组病毒具有良好的生物安全性,具有更为有效的抗MDV的免疫保护效果,尤其适用我国鸡群MDV的免疫。重组病毒能够有效的与野毒进行区分,并且其水平传播能力较弱,不仅对鸡群MDV的免疫具有极大的应用价值,更是有利于推进MDV的净化,重组病毒株基因组没有FRT序列,减少了外源基因对病毒生物学活性的影响,避了FRT序列间病毒基因片段的任意剪切,更有利于研制重组活病毒载体疫苗。(The invention relates to construction and application of a recombinant Marek&#39;s virus MDLV21 strain. The constructed recombinant virus simultaneously deletes two main genes RLORF6, Meq and CmR related to MDV pathogenicity and tumorigenesis, compared with a deletion single gene, the vaccine safety is greatly improved, and the capacity of obtaining the deletion gene in the field is reduced; the recombinant virus genome has no resistance gene and meets the strict requirements of the biological product industry at home and abroad; the recombinant virus has good biological safety, has more effective immune protection effect against MDV, and is particularly suitable for the immunization of the MDV of chicken flocks in China. The recombinant virus can be effectively distinguished from wild virus, and has weaker horizontal transmission capability, thereby having great application value to the immunity of chicken MDV, being more beneficial to promoting the purification of MDV, reducing the influence of exogenous genes on the biological activity of the virus, avoiding the random shearing of virus gene segments among FRT sequences, and being more beneficial to developing recombinant live virus vector vaccines.)

一种重组马立克病毒MDLV21株的构建及应用

技术领域

本发明涉及一种重组马立克病毒MDLV21株的构建及应用,属于兽用生物制品分子生物学领域。

背景技术

鸡马立克病(Marek’s disease,MD)是由鸡马立克病病毒(Marek’s diseasevirus,MDV) 感染雏鸡引发的一种重要的免疫抑制与肿瘤病。MDV感染宿主后引起免疫抑制是导致其它疾病疫苗免疫失败的重要因素。疫苗的使用能够有效的预防鸡群MDV肿瘤的发生,但是随着免疫压力选择及MDV自身演化,目前临床广泛使用的商品化MDV疫苗CVI988/Rispens呈现不能完全保护的趋势。近年来,即使免疫MDV疫苗的鸡场也时常爆发MD疫情,表明我国鸡群 MDV野生毒株的毒力在不断增强。因此,研制免疫效果更好的MDV疫苗成为养禽业的迫切需求。

然而,利用传统的细胞传代致弱毒力的方法研制的MDV疫苗无法提供比现有的CVI988/Rispens更好的免疫效果。现代分子生物学技术的快速发展,有效的推进了MDV基因功能的研究。美国禽病学专家利用黏粒构建了MDV rMd5的Meq基因缺失株,研究结果证实Meq基因是MDV主要的致肿瘤基因,Meq基因缺失株对商品代蛋鸡具有良好的免疫保护效果。病毒普遍存在“准种”,MDV也不例外,英国学者证实同一株MDV毒株的两个克隆虽然基因组高度相似,但是病毒毒力差异显著。因此,构建MDV的感染性克隆具有非常重要的科研和应用价值,其中利用细菌人工染色体(BAC)技术构建MDV感染性克隆对于研究其基因功能以及生物学活性具有无可比拟的优势。构建的MDV感染性克隆可以在氯霉素抗性的液体细菌培养基里进行稳定的复制,对于维持MDV基因组的稳定以及大量保存具有重要意义。

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