阅读说明：本技术 一种树舌多糖提取物的制备方法和应用 (Preparation method and application of Ganoderma applanatum polysaccharide extract ) 是由 王丽娜 姜海涛 杨蕾 张译文 刘磊 潘睿 郭海乐 杨景杰 曹钰茜 郑辉 陶静宇 于 2021-10-22 设计创作，主要内容包括：一种树舌多糖提取物的制备方法和应用,它涉及医药健康领域,本发明目的是针对现有降血糖降血脂药物副作用多且疗效不显著的问题,为了得到既能辅助降血糖降血脂,毒副作用又小的保健品。本发明是将树舌子实体烘干、粉碎；水提,醇沉；沉淀用水溶解,去除蛋白质,上清液进行脱色除杂,收集洗脱液；干燥,得精制树舌多糖提取物。本发明的树舌多糖制备用于降血糖降血脂的药物。本发明用于降血糖降血脂的药物领域。(The invention discloses a preparation method and application of a glossogyne polysaccharide extract, relates to the field of medical health, and aims to solve the problems of more side effects and unobvious curative effect of the existing hypoglycemic and hypolipidemic drugs so as to obtain a health-care product which can assist in reducing blood sugar and blood fat and has small toxic and side effects. The invention is that oven drying Ganoderma Applanatum fruiting body, pulverizing; extracting with water, and precipitating with ethanol; dissolving the precipitate with water, removing protein, decolorizing the supernatant, removing impurities, and collecting eluate; drying to obtain refined Ganoderma Applanatum polysaccharide extract. The Ganoderma Applanatum polysaccharide of the invention is used for preparing medicines for reducing blood sugar and blood fat. The invention is used in the field of medicines for reducing blood sugar and blood fat.)

一种树舌多糖提取物的制备方法和应用

技术领域

本发明涉及医药健康领域，具体涉及一种树舌多糖提取物的制备方法和应用。

背景技术

高血脂：脂肪代谢或者运转异常使人体血液中的血脂含量超过正常范围，表现为血中胆固醇或甘油三酯过高或高密度脂蛋白过低，现代医学称“血脂异常”。高脂血症是常见病、多发病，更是导致心脑血管疾病的元凶，该病对身体的损害是隐匿、逐渐、进行性和全身性的，它的直接损害是加速全身动脉粥样硬化。高脂血症病程较长，需要通过他汀类、贝特类、烟酸、树脂类等药物长期治疗，如病情严重且药物治疗效果不理想的患者可进行手术治疗。但化学药物一般副作用较大，容易产生恶心，呕吐，食欲下降，体力下降等表现。

高血糖：当空腹(8小时内无糖及任何含糖食物摄入)血糖高于正常范围，称为高血糖，空腹血糖正常值4.0-6.1mmol/L，餐后两小时血糖高于正常范围7.8mmol/L，也可以称为高血糖。目前引起血糖升高的疾病主要有胰岛功能障碍或胰岛素抵抗造成的糖尿病，甲状腺功能亢进、肝炎、肝硬化等慢性疾病，长期糖皮质激素的使用以及许多遗传性疾病等。治疗方法包括药物治疗和手术治疗。药物治疗一般使用口服降糖药、胰岛素注射、GLP-1受体激动剂注射。

树舌：又名赤色老母菌、扁芝。为多孔菌科真菌平盖灵芝的子实体。广泛种植，分布于全国各地。味微苦，性平。归脾、胃经。具有消炎抗癌之功效。用于咽喉炎，食管癌，鼻咽癌。具有调节免疫功能、抗肿瘤、抑菌、调血压的药理作用。

树舌多糖：树舌多糖是树舌的次生代谢产物，主要存在于其子实体中。是一种大分子化合物，其分子量从数千到数十万。树舌多糖是树舌最有效成分之一。树舌多糖有多方面的药理活性：能提高机体免疫力，加速血液微循环，提高血液供氧能力，降低机体静止状态下的无效耗氧量，消除体内自由基，提高机体细胞膜的封闭度，抗放射，提高肝脏、骨髓、血液合成DNA、RNA，蛋白质的能力。

目前，多以树舌作为药物组分之一用于治疗高血脂、高血糖。并没有单独以树舌多糖进行使用的报道，且现有树舌多糖提取存在效果不佳的问题。

发明内容

本发明目的是针对现有降血糖降血脂药物副作用多且疗效不显著的问题，为了得到既能辅助降血糖降血脂，毒副作用又小的保健品。本发明提供了一种树舌多糖提取物的制备方法及其在辅助降血糖降血脂保健品中的应用。

本发明的一种树舌多糖提取物的制备方法，它是按照以下步骤进行的：

1)烘干：将树舌子实体在70～80℃温度下烘干4h；

2)粉碎：粉碎并过40目筛；

3)水提：加入饮片重量5～8倍量的纯水于100℃条件下加热回流，提取3次，每次1.5～2h，合并水提液；

4)醇沉：浓缩步骤3)中水提液，加入无水乙醇，使含醇量达80％，静置24h，离心得上清液和沉淀，沉淀为一次醇沉树舌粗多糖提取物；将第一次醇沉的树舌多糖提取物加水溶解使其浓度达到以生药量计为0.2～0.7g/mL，继续加入无水乙醇，使含醇量达80％，静置过夜，离心得上清液和沉淀，沉淀即为二次醇沉树舌粗多糖；

5)Savage法脱蛋白：将步骤4)中树舌粗多糖加纯水溶解，再与Sevage试剂混合，静置待分层，离心，取最上层多糖水溶液；

6)重复步骤5)操作3～5次，得脱蛋白之后的多糖溶液；

7)AB-8大孔树脂脱色除杂：A)大孔树脂预处理：大孔树脂经超纯水浸泡，无水乙醇多次浸泡洗涤，加入超纯水无浑浊现象，用超纯水再反复洗涤，备用；B)脱色除杂：将步骤6)中脱蛋白之后的多糖溶液采用处理后的大孔树脂进行吸附脱色，上柱流速为1.0mL/min，洗脱液为体积百分含量为75％的乙醇，洗脱体积为3倍柱体积；

8)干燥：将步骤7)脱色除杂后的多糖溶液减压干燥至比重1.08～1.12，得树舌多糖提取物。

进一步地，步骤5)中Sevag试剂为氯仿：正丁醇按照体积比为5：1的比例混合而成。

进一步地，步骤5)中用AB-8大孔树脂进行脱色除杂。

进一步地，步骤4)中所述的将第一次醇沉的树舌多糖提取物加水溶解使其浓度达到以生药量计为0.5g/mL。

本发明所述制备的一种树舌多糖提取物的应用，它制备用于降血糖降血脂的药物。

本发明包含以下有益效果：

本发明所提供的树舌多糖提取物具有辅助降血脂功能；该提取物可通过在体影响血压血脂代谢，影响机体免疫。本发明将树舌多糖提取物制备成一种具有辅助降血糖降血脂功能的保健品。

具体实施方式

本领域的普通技术人员可以理解，上述各实施方式是实现本发明的具体实施例，而在实际应用中，可以在形式上和细节上对其作各种改变，而不偏离本发明的精神和范围。

为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚明白，下面将详细叙述清楚说明本发明所揭示内容的精神，任何所属技术领域技术人员在了解本发明内容的实施例后，当可由本发明内容所教示的技术，加以改变及修饰，其并不脱离本发明内容的精神与范围。

本发明的示意性实施例及其说明用于解释本发明，但并不作为对本发明的限定。

实施例1

本实施例的一种树舌多糖提取物的制备方法，它是按照以下步骤进行的：

1)烘干：将树舌子实体在70～80℃温度下烘干4h；

2)粉碎：粉碎并过40目筛；

3)水提：加入饮片重量8倍量的纯水于100℃条件下加热回流，提取3次，每次1.5h，合并水提液；

4)醇沉：浓缩步骤3)中水提液，加入无水乙醇，使含醇量达80％，静置24h，离心得上清液和沉淀，沉淀为一次醇沉树舌粗多糖提取物；将第一次醇沉的树舌多糖提取物加水溶解使其浓度达到以生药量计为0.5g/mL，继续加入无水乙醇，使含醇量达80％，静置过夜，离心得上清液和沉淀，沉淀即为二次醇沉树舌粗多糖；

5)Savage法脱蛋白：将步骤4)中树舌粗多糖加纯水溶解，再与Sevage试剂混合，静置待分层，离心，取最上层多糖水溶液；重复3～5次；

6)AB-8大孔树脂脱色除杂：A)大孔树脂预处理：大孔树脂经超纯水浸泡，无水乙醇多次浸泡洗涤，加入超纯水无浑浊现象，用超纯水再反复洗涤，备用；B)脱色除杂：将步骤5)中脱蛋白之后的多糖溶液采用处理后的大孔树脂进行吸附脱色，上柱流速为1.0mL/min，洗脱液为体积百分含量为75％的乙醇，洗脱体积为3倍柱体积；

7)干燥：将步骤6)脱色除杂后的多糖溶液减压干燥至比重1.08～1.12，得树舌多糖提取物。

实施例2

验证实施例1提取的树舌多糖对高血糖的效果

实验材料：取大鼠60只，其中40只建立糖尿病大鼠动物模型。第一组为正常对照组20只，第二组使用成功早模的糖尿病大鼠20只为糖尿病对照组，第三组使用成功早模的糖尿病大鼠20只为树舌多糖组。

实验方法：树舌多糖组按照0.2g/kg*d用溶解于水的树舌多糖灌胃给药，正常组与糖尿病对照组给予相同体积的蒸馏水。

试验结果如下：

表1树舌多糖对糖尿病大鼠血糖影响血糖浓度mmol/L

分组	第1天	第7天	第14天
				正常组	4.22±0.21	4.34±0.19	4.57±0.23
糖尿病组	18.21±0.37	19.05±0.32	18.97±0.64
				树舌多糖组	18.21±0.51	9.12±0.46	7.29±0.49

试验开始时，糖尿病组与树舌多糖组之间，无显著性差异，实验中期及后期树舌多糖组能显著降低造模大鼠的高血糖。

表2树舌多糖对糖尿病大鼠胰岛素影响血糖浓度mU/L

分组	第1天	第7天	第14天
				正常组	4.19±0.51	4.25±0.36	4.12±0.41
糖尿病组	0.91±0.24	0.93±0.45	0.89±0.72
				树舌多糖组	0.87±0.24	1.54±0.26	2.01±0.42

试验开始时，糖尿病组与树舌多糖组之间，无显著性差异，实验中期及后期树舌多糖组能显著升高造模大鼠的胰岛素。

表3树舌多糖对糖尿病大鼠肝脏葡萄糖激酶、TC、TG影响葡萄糖激酶比活性mIU/min·mgpro.

分组	第14天葡萄糖激酶	第14天TC	第14天TG
				正常组	20.10±0.22	1.51±0.22	1.47±0.35
糖尿病组	2.15±0.46	1.68±0.41	1.59±0.28
				树舌多糖组	10.28±0.47	1.14±0.56	0.98±0.39

试验后期树舌多糖组能显著升高造模大鼠的肝脏葡萄糖激酶，TC、TG显著降低。