一种用于防治梨炭疽病和梨轮纹病的保鲜剂及其应用
阅读说明：本技术 一种用于防治梨炭疽病和梨轮纹病的保鲜剂及其应用 (Preservative for preventing and treating pear anthracnose and pear ring rot and application thereof ) 是由 吴祥为 张召贤 李晓萌 郭玉瑞 于 2021-10-11 设计创作，主要内容包括：本发明提供一种用于防治梨炭疽病和梨轮纹病的保鲜剂,保鲜剂中活性成分是由药剂A、B和竹醋液组成,药剂A和B组合为甲基硫菌灵和戊唑醇组合。可有效控制炭疽病、轮纹病对梨储藏期的危害,有效减少药剂的使用量,延缓炭疽病、轮纹病对抗药剂的抗药性,提高保鲜效果,降低贮藏损失,具有显著的经济和社会效益。(The invention provides a preservative for preventing and treating anthracnose and pear ring rot, active ingredients in the preservative consist of A, B medicaments and bamboo vinegar, and the combination of A medicaments and B medicaments is the combination of thiophanate methyl and tebuconazole. The method can effectively control the damage of anthracnose and ring spot to the pear storage period, effectively reduce the using amount of the medicament, delay the drug resistance of the anti-medicament of anthracnose and ring spot, improve the fresh-keeping effect, reduce the storage loss, and have remarkable economic and social benefits.)
技术领域
本发明属于植物保鲜剂领域，具体涉及一种用于防治梨炭疽病和梨轮纹病的保鲜剂及其应用。
背景技术
梨炭疽病又称苦腐病，是由盘长孢状刺盘孢侵染所引起的、发生在梨上的病害。病原为盘长孢状刺盘孢(Colletrichum gloeosporioidesPenz.)。病原菌以菌丝体在僵果或病枝上越冬，第二年条件适宜时对梨树产生侵染。采摘后随梨子生活力降低而逐渐发病，往往在贮藏期间继续扩大甚至造成大量果实腐烂，造成一定的经济损失。梨炭疽病发生普遍，在世界各地梨产区均有发生。
梨轮纹病又称粗皮病，轮纹病菌是一种真菌，有性阶段属于子囊菌亚门，无性阶段属于半知菌亚门Physalospora piricola Nose、(Macrophoma kuwatsukai Hara)，梨轮纹病菌和苹果轮纹病菌是同一种可以互相侵染。果实染病后，于果面以皮孔为中心发生水渍状、褐色、近圆形的小斑点，迅速向四周扩展，形成深褐与浅褐色相间的轮纹型病斑，病斑不凹陷，呈软腐状，后期于病部散生小黑点，此为病菌的分生孢子器。病果很快腐烂，可流出茶色汁液，但仍保持果形不变，失水干缩后变僵果。病菌潜育期较长，从幼果期侵染，到近成熟期和贮藏期才表现出症状。是一种较为严重的贮藏期病害。
目前，梨贮藏保鲜方法有化学保鲜剂、天然保鲜剂、生物保鲜剂、气调贮藏等。使用化学保鲜剂具有低成本、高防效等优势，目前仍是一种重要的保鲜防腐手段。化学保鲜剂虽然能起到防腐保鲜作用，但大多具有不同程度的毒性和残留，对人体具有潜在的危害。
竹醋液属于天然保鲜剂，是竹材碳化、热解过程中产生的副产品，由有机酸、酚类、酮类、醇类及脂类等多种组分组成，对多种细菌和真菌具有较强的抑制作用，是一种良好的天然源防腐保鲜剂的开发材料。因此通过竹醋液与化学保鲜剂的复配，开发研制防治梨炭疽病的保鲜剂，对化学保鲜剂使用量的降低，增强保鲜效果起到积极的作用。
发明内容
本发明提供一种可用于防治梨炭疽病和梨轮纹病的保鲜剂及其应用。本发明提供如下技术方案：
一种用于防治梨炭疽病和梨轮纹病的保鲜剂，保鲜剂中活性成分是由药剂A、B和竹醋液组成，药剂A和B组合为甲基硫菌灵和戊唑醇组合。本发明所述的保鲜剂中药剂A和药剂B的质量配比为25∶1～1∶10，化学农药质量百分含量为1～5％，竹醋液质量百分含量在60～80％。优选的药剂A和药剂B的质量配比为10∶1-1∶10、5∶1-1∶5。
本发明所述剂型为水悬浮剂，各组分的重量百分含量为：
本药剂组合物水悬浮剂的加工步骤为：先将助剂及水混合，经高速剪切混合均匀，加入药剂A和药剂B原药，在砂磨机中磨0.5～2小时，使微粒粒径全部在5μm以下，制得本发明所述的组合物水悬浮剂。
本发明所述的溶剂是环己烷、二氯乙烷、正己烷、乙酸乙酯、三氯甲烷、环己烷、丙酮、N，N-二甲基甲酰胺、甲苯、四氯化碳、乙二醇中的一种或几种。
本发明所述的增稠剂是硅酸镁铝、黄原胶、羟甲基纤维素、阿拉伯树胶、聚乙烯吡咯烷酮、黄原胶中的一种或是几种。
本发明所述的乳化剂是烷基酚聚氧乙烯醚磷酸盐、烷基酚聚氧乙烯醚甲醛缩合物、二苯基酚聚氧乙烯聚甲醛缩合物、二苯基酚聚氧乙烯聚氧丙烯醚、吐温-60、NNO、MOA-7、601、A-110、TX-10、宁乳700#、5202中的一种或几种。
本发明有益技术效果：
本发明制备得到的保鲜剂可有效控制炭疽病、轮纹病对梨储藏期的危害，有效减少药剂的使用量，延缓炭疽病、轮纹病对抗药剂的抗药性，提高保鲜效果，降低贮藏损失，具有显著的经济和社会效益。
附图说明
图1：复配组合2对梨炭疽病的保鲜效果图
图2：复配组合4对梨轮纹病的保鲜效果图
具体实施方式
下面通过实施例来具体说明本发明的内容。在本发明中，以下实施例是为了更好地阐述本发明，并不是用来限制本发明的范围。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
实施例1竹醋液及杀菌剂对供试植物病原菌的毒力
供试作物病菌：梨炭疽病、轮纹病
测定方法：采用菌丝生长速率法测定竹醋液及杀菌剂对供试植物病原菌的毒力。
将供试竹醋液用无菌水稀释到适当浓度。取稀释后的竹醋液1mL，加入24mL PDA培养基中混合均匀，倒入培养皿中制成含竹醋的培养平板。以加入同量无菌水的PDA培养基平板作为空白对照(CK)。
供试杀菌剂以乙腈溶解并稀释至适当浓度，分别取杀菌剂溶液1mL，与24mLPDA培养基混合均匀，倒入培养皿中制成不同浓度的含药培养基。以加入同量乙腈的PDA培养基平板作为空白对照(CK)。
无菌环境下，用打孔器将固体PDA培养基培养的供试菌种制成直径为5.0mm的菌饼。接种供试病原菌菌饼(菌丝面朝下)。将接种后的PDA培养基平板倒置，放于28℃恒温箱中培养。培养至CK菌丝长至培养皿85％左右，用抗游标卡尺测量菌落直径。计算菌丝生长抑制率，求得各单剂毒力回归方程、相关系数和EC50。
表1各单剂与竹醋液对梨炭疽病、轮纹病的毒力
实施例2复配组合联合作用测试
根据各单剂和竹醋液的EC50，通过正交试验，设计各种配比组合，将各配比组合用无菌水稀释到适当浓度。取稀释后的竹醋液1mL，加入24mL PDA培养基中混合均匀，倒入培养皿中制成含竹醋的培养平板。以加入同量无菌水的PDA培养基平板作为空白对照(CK)。
无菌环境下，用打孔器将固体PDA培养基培养的供试菌种制成直径为5.0mm的菌饼。接种供试病原菌菌饼(菌丝面朝下)。将接种后的PDA培养基平板倒置，放于28℃恒温箱中培养。培养至CK菌丝长至培养皿85％左右，用抗游标卡尺测量菌落直径。计算菌丝生长抑制率，求得各单剂毒力回归方程、相关系数、EC 50和共毒系数。
以共毒系数CTC值评判复配剂的联合毒力作用。CTC值小于80为拮抗作用，80-120之间时为相加作用，120-200具有一定增效作用，大于200为明显增效。
表2正交实验设计表
实验号
竹醋液
药剂A
药剂B
1
1
1
1
2
1
2
3
3
1
3
4
4
1
4
2
5
2
1
2
6
2
2
4
7
2
3
3
8
2
4
1
9
3
1
3
10
3
2
1
11
3
3
2
12
3
4
4
13
4
1
4
14
4
2
2
15
4
3
1
16
4
4
3
注：列表中的1、2、3、4代表EC50的倍数，以1号实验组为例A1B1C1表示实验各组分浓度比＝1倍竹醋液EC50∶1倍药剂AEC50∶1倍药剂B EC50；A、B为甲基硫菌灵或戊唑醇。
表3复配组合(甲基硫菌灵·戊唑醇·竹醋液)对梨炭疽病的毒力
通过表3可以看出，复配组合(甲基硫菌灵·戊唑醇·竹醋液)联合毒力指数CTC大多大于120，说明复配剂具有明显的增效作用。
表4复配组合(甲基硫菌灵·戊唑醇·竹醋液)对梨轮纹病的毒力
通过表4可以看出，复配联合毒力指数CTC基本都大于120，说明复配剂4具有明显的增效作用。
实施例3活体抑菌活性测定
测试方法：实施例中配方与不同药剂进行浸果处理，晾干后每个果子扎孔(3mm深)，每个果子扎孔3个。每个孔中贴上5mm菌饼，每组处理6个梨子。室温培养6天，测定病斑直径，验证了药剂对炭疽病和轮纹病的防治效果。
测试药剂：
表5复配剂成分组成(1L)及防治对象
复配组名称
竹醋液
甲基硫菌灵
戊唑醇
吡唑醚菌酯
助剂
剂型
防治对象
(复配剂2)甲基硫菌灵戊唑醇竹醋液
876.5m1
43.8g
9.7g
/
70g
悬浮剂
炭疽病
(复配剂4)甲基硫菌灵·戊唑醇·竹醋液
854.5ml
74.3g
2.9g
/
68.3g
悬浮剂
轮纹病
对比药剂：43％戊唑醇乳油、70％甲基硫菌灵可湿性粉剂
测试结果
表6：复配剂2及对照组活体实验防治效果分析表
通过表6可以看出，复配剂2按照800稀释时，在防治效果上与70％甲基硫菌灵800倍和43％戊唑醇4000倍相当；按照800倍稀释时，防治效果略高于于43％戊唑醇5000倍。
复配剂2的800倍稀释药液，每升中含0.055g甲基硫菌灵和0.012g戊唑醇，相对于单剂甲基硫菌灵800倍稀释药液，每升含0.875g甲基硫菌灵，化学农药有效成分总量减少了92.4％；相对于单剂戊唑醇4000倍稀释药液，每升含0.107g戊唑醇，化学农药有效成分总量减少了37.8％；
复配剂2的1000倍稀释药液，每升中含0.044g甲基硫菌灵和0.010g戊唑醇，相对于单剂甲基硫菌灵1200倍稀释药液，每升含0.583g甲基硫菌灵，化学农药有效成分总量减少了90.8％；相对于单剂戊唑醇5000倍稀释药液，每升含0.107g戊唑醇，化学农药有效成分总量减少了37.8％；
说明复配剂2对梨炭疽病具有良好的防治效果的同时达到农药减量化的目的。
表7：复配剂4及对照组活体实验防治效果分析表
通过表7可以看出，复配剂4按照100稀释时，在防治效果上与70％甲基硫菌灵800倍和43％戊唑醇4000倍相当；按照200倍稀释时，防治效果略高于于43％戊唑醇5000倍。
复配剂4的100倍稀释药液，每升中含0.743g甲基硫菌灵和0.029g戊唑醇，相对于单剂甲基硫菌灵800倍稀释药液，每升含0.875g甲基硫菌灵，化学农药有效成分总量减少了11.8％；
复配剂4的200倍稀释药液，每升中含0.372g甲基硫菌灵和0.015g戊唑醇，相对于单剂甲基硫菌灵1200倍稀释药液，每升含0.583g甲基硫菌灵，化学农药有效成分总量减少了33.8％；说明复配剂4对梨轮纹病具有良好的防治效果。
实施例4竹醋液对杀菌组合联合作用测试
表8：复配2中加竹醋液与不加竹醋液对梨炭疽病的毒力对比
实验组
回归方程
相关系数
共毒系数
加竹醋液
Y＝2.15X-2.0638
0.9774
295.40
不加竹醋液
Y＝1.5582x-0.3274
0.97993
217.25
竹醋液EC50∶甲基硫菌灵EC50∶戊唑醇EC50＝4∶3∶1
本研究发明首次以竹醋液为主体配置的农药，通过表8可以看出，在复配2中竹醋液的使用明显提高了农药的共毒系数。
表9：复配4中加竹醋液与不加竹醋液对梨炭疽病的毒力对比
实验组
回归方程
相关系数
共毒系数
加竹醋液
Y＝2.644X-3.5886
0.9929
226.47
不加竹醋液
Y＝1.4893x-0.1461
0.9681
140.59
竹醋液EC50∶甲基硫菌灵EC50∶戊唑醇EC50＝1∶1∶3
本研究发明首次以竹醋液为主体配置的农药，通过表9可以看出，在复配4中竹醋液的使用明显提高了农药的共毒系数。
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