单羰基姜黄素类似物及其制备方法和应用
阅读说明：本技术 单羰基姜黄素类似物及其制备方法和应用 (Mono-carbonyl curcumin analogue and preparation method and application thereof ) 是由 董金华 赵轩 房吉庆 夏明钰 张美慧 徐莉英 于 2021-11-23 设计创作，主要内容包括：单羰基姜黄素类似物及其制备方法和应用,属于医药技术领域,涉及一系列单羰基姜黄素类似物及其制备和应用,具有如式Ⅰ结构特征。本发明还包括所述单羰基姜黄素类似物药学上可接受的盐,含有所述单羰基姜黄素类似物或其药学上可接受的盐作为活性成分的药物组合物,并用于制备抗肿瘤药物中。本发明所述的单羰基姜黄素类似物具有较好的抗肿瘤活性,其制备方法简单可行,易操作。(A monocarbonyl curcumin analogue, a preparation method and an application thereof belong to the technical field of medicines, and relate to a series of monocarbonyl curcumin analogues, and a preparation method and an application thereof, and have the structural characteristics as shown in a formula I. The invention also comprises the monocarbonyl curcumin analogue drugPharmaceutically acceptable salts, pharmaceutical compositions containing the mono-carbonyl curcumin analogues or pharmaceutically acceptable salts thereof as active ingredients and used for preparing antitumor drugs. The mono-carbonyl curcumin analogue has better anti-tumor activity, and the preparation method is simple and feasible and is easy to operate.)
技术领域
本发明属于医药技术领域，具体涉及一系列新的单羰基姜黄素类似物及其盐和以该化合物或其盐为活性成分的药物，用于制备治疗癌症及炎症类疾病。
背景技术
姜黄素是从姜黄Curcuma longa L.中分离出来的一种多酚类化合物，大量研究表明姜黄素具有多种生物和药理活性，如抗氧化、抗炎、抗病毒、抗菌，对各种恶性肿瘤、糖尿病、关节炎和其他慢性疾病具有显著的疗效(Zhou W,Liu Q.F,Zang X.H,etal.Combination use of tolfenamic acid with curcumin improves anti-inflammatory activity and reduces toxicity in mice[J].J Food Biochem,2020,44(6)13240-13250)。但生物利用度低和体内代谢快的缺陷，限制了其临床应用(Garcea G,Jones D,Singh R,et al.Detection of curcumin and its metabolites in hepatictissue and portal blood of patients following oral administration[J].Brit JCancer,2004,90(5):1011-1015)。
研究表明，姜黄素结构中的β-二酮结构是一系列体内醛酮还原酶的特定底物，由此导致姜黄素在体内快速代谢失活(Azzi E,Alberti D,Parisotto S,et al.Design,synthesis and preliminary in-vitro studies of novel boronated monocarbonylanalogues of Curcumin(BMAC)for antitumor and beta-amiloyd disaggregationactivity[J].Bioorg Chem,2019,93:103324)。因此，近年来，许多学者致力于对姜黄素中的β-二酮基团进行修饰改造，采用单羰基结构替换姜黄素的β-二酮部分，制备含有1,4-庚二烯-3-酮共轭结构的单羰基姜黄素类似物，与姜黄素相比，此类化合物表现出了更高的代谢稳定性，并具有较好的抗炎活性和细胞毒性(Liang G,Shao L,Wang Y,etal.Exploration and synthesis of curcumin analogues with improved structuralstability both in vitro and in vivo as cytotoxic agents[J].Bioorg Med Chem,2009,17(6):2623-2631.Zhao C,Cai Y,He X,et al.Synthesis and anti-inflammatoryevaluation of novel mono-carbonyl analogues of curcumin in LPS-stimulated RAW264.7macrophages[J].Eur J Med Chem,2010,45(12):5773-5780)。ZhiG.Yu等人从槲寄生中分离出两个苯环之间具有7个碳原子连接链的1,7-双(4-羟基苯基)-1,4-庚二烯-3-酮，其对人肿瘤细胞具有一定的细胞毒活性(Zhao Y.L,Wang X.Y,Sun L.X,et al.CytotoxicConstituents of Viscum coloratum[J].Z Naturforsch C,2012,67(3):129-134)。Changtam.C.将姜黄素还原并脱水，得到具有7个碳原子连接链的1,7-双(4-羟基-3-甲氧基苯基)-1,4-庚二烯-3-酮，其对锥虫和利什曼原虫具有很好的生物活性(Changtam C,Koning H.P,Ibrahim H,et al.Curcuminoid analogs with potent activity againstTrypanosoma and Leishmania species[J].Eur J Med Chem,2010,45(3):941-956)。因此，本发明的重点是在保留7个碳原子的连接链基础上，将姜黄素中的β-二酮替换为单羰基，设计在两个苯环之间引入1,4-庚二烯-3-酮的连接链，并在两侧苯环上引入各种取代基，合成了一系列新的单羰基姜黄素类似物，并研究其抗肿瘤活性。
发明内容
本发明以姜黄素为先导化合物，为提高化合物的稳定性及抗肿瘤活性，将姜黄素中的β-二酮替换为单羰基，并保留7个碳原子的连接链设计并合成了一系列单羰基姜黄素类似物，并经药理试验证明可抑制多种肿瘤细胞增殖，它们的主要作用为抗肿瘤。
本发明提供的单羰基姜黄素类似物结构如下通式I：
其中，R1和R2分别独立的表示无或者苯环上的1-5个取代基，所述取代基分别独立的选自C1-C4的烷基、C1-C4的烷酰基、C1-C4的烷氧基、羟基、卤素。
优选地，R1和R2分别独立的表示无或者苯环上的1-3个取代基，所述取代基分别独立的选自-CH3、-OCH3、羟基、卤素。
所述卤素为F、Cl或Br。
更进一步的，本发明所述化合物为如下化合物15a～27l中的任一个：
本发明还提供所述单羰基姜黄素类似物的制备方法：
含有酚羟基的化合物合成路线如下：
优选的R1、R2各自独立的选自H,-OH,-OCH3,-CH3中一个或多个；其中，R1、R2至少有一个取代基含有-OH，R1’和R2’至少有一个含有保护基(甲氧基次甲基)，如果R1或者R2为H，则省略对应的与溴甲基甲基醚的一步反应。
不含酚羟基的化合物合成路线如下：
优选的R1、R2各自独立的选自H,-OCH3,-CH3,Cl中一个或多个。
上述制备过程中：
所用溶剂为常规的反应溶剂，无特殊要求。
本发明还提供一种药物组合物，所述组合物由所述的单羰基姜黄素类似物或其盐和药学上可被接受的赋形剂组成。所述的盐指与常规的碱形成的盐，所述的碱为无机碱。
本发明还提供所述单羰基姜黄素类似物或其药用盐及其组合物在制备抗肿瘤药物中的用途。所述的肿瘤包括宫颈癌、肝癌、纤维肉瘤、结肠癌、黑色素瘤、乳腺癌、肺癌、淋巴癌、慢性髓原白血病、原髓细胞白血病。
本发明有益效果：
本发明所述的单羰基姜黄素类似物，是为改善姜黄素的稳定性及抗肿瘤活性，将姜黄素中的β-二酮替换为单羰基，这些衍生物有更强的生理活性和稳定性。
本发明的单羰基姜黄素类似物及其药用盐类具有较好的抗癌活性，其制备方法简单可行，易操作。
具体实施方式
下面通过实施例来说明本发明的可实施性，本领域的技术人员应当理解，根据现有技术的教导，对相应的技术特征进行修改或替换，仍然属于本发明要求保护的范围。
实施例1
中间体化合物2的合成
将0.1mol起始化合物1和0.12mol DIPEA溶于100ml二氯甲烷中，冰浴下滴加0.11mol MOMBr，加毕后室温反应1h。向反应液中加入100ml水，分离出有机相，水相用二氯甲烷萃取3次，每次100ml，合并有机相，用5％盐酸洗一次，5％NaOH洗一次，饱和食盐水洗一次，无水硫酸钠干燥。浓缩后得无色透明液体中间体化合物2。
实施例2
中间体化合物3的合成
将0.1mol实施例1制得的中间体化合物2溶于30ml甲苯中，加入丙二酸0.15mol、吡啶0.2mol、苯胺0.01mol和哌啶0.0025mol，升温至90℃反应1h。减压蒸去溶剂，用10％盐酸调至pH 1，析出大量固体，抽滤，水洗，烘干得白色固体中间体化合物3。
实施例3
中间体化合物4的合成
向250ml三口瓶中，加入0.06mol实施例2制得的中间体化合物3并溶于100ml二氯甲烷中，加入草酰氯0.12mol，并通入N2，室温反应1h。减压蒸去溶剂，并转移到滴液漏斗中备用。
向三颈瓶中加入丙二酸二乙酯0.12mol，四氢呋喃80ml，氢化钠0.12mol，室温反应30min。滴加上述制好的酰氯。加毕，将反应置于室温下反应30min。减压蒸去溶剂。加入200ml水，用10％盐酸调节溶液pH 5，用乙酸乙酯萃取3次，每次100ml，合并有机相，用饱和NaHCO3洗一次，饱和食盐水洗一次，无水硫酸钠干燥。浓缩后得淡黄色透明液体中间体化合物4。
实施例4
中间体化合物5的合成
将0.2mol实施例3制得的中间体化合物4溶于50ml DMSO中，加入水0.4mol，120℃反应4h，将反应液倒入100ml水中，用乙酸乙酯萃取，合并有机相，用饱和NaHCO3洗一次，饱和食盐水洗一次，无水硫酸钠干燥。浓缩后得淡黄色透明液体中间体化合物5。
实施例5
中间体化合物8的合成
采用实施例1和实施例2的制备方法制得。
实施例6
中间体化合物9的合成
将0.05mol实施例5制得的中间体化合物8溶于50ml甲醇中，并加入钯碳0.0025mol，与氢气50℃反应4h，抽滤去钯碳，滤液减压整干，得到白色固体中间体化合物9。
实施例7
中间体化合物10的合成
向250ml三口瓶中加入0.05mol实施例6制得的中间体化合物9、100ml二氯甲烷和草酰氯0.10mol，通入N2，室温反应1h。减压蒸去溶剂得到中间体化合物10，并转移到滴液漏斗中备用。
实施例8
中间体化合物11的合成
将0.05mol实施例4制得的中间体化合物5溶于50ml四氢呋喃中，冰浴下加入乙醇镁0.05mol，室温下反应30min，冰浴下滴加实施例7制得的中间体化合物10的四氢呋喃溶液，滴毕，室温下反应30min。减压蒸去溶剂，用10％盐酸调节溶液pH 5，用乙酸乙酯萃取，合并有机相，用饱和NaHCO3洗一次，饱和食盐水洗一次，无水硫酸钠干燥。浓缩后得淡黄色透明液体中间体化合物11。
实施例9
中间体化合物12的合成
将0.03mol实施例8制得的中间体化合物11溶于30ml DMSO中，并加入水0.06mol，120℃反应4h，将反应液倒入100ml水中，用乙酸乙酯萃取3次，合并有机相，用饱和NaHCO3洗一次，饱和食盐水洗一次，无水硫酸钠干燥。浓缩后得淡黄色透明液体中间体化合物12。
实施例10
中间体化合物13的合成
将0.02mol实施例9制得的中间体化合物12溶于20ml四氢呋喃中，冰浴下滴加1M硼烷四氢呋喃溶液20ml，控制滴速，滴毕，室温下反应30min。加入10ml 10％NaOH溶液淬灭反应，减压蒸去溶剂，加入60ml水，用10％盐酸调节溶液pH 5，用乙酸乙酯萃取，合并有机相，用饱和NaHCO3洗一次，饱和食盐水洗一次，无水硫酸钠干燥。浓缩后得淡黄色透明液体中间体化合物13。
实施例11
中间体化合物14的合成
将0.01mol实施例10制得的中间体化合物13溶于30ml乙酸乙酯中，加入0.0005mol对甲苯磺酸，50℃反应6h，加入50ml水，分离出有机相，水相用乙酸乙酯萃取，合并有机相，用饱和NaHCO3洗一次，饱和食盐水洗一次，无水硫酸钠干燥。浓缩后得淡黄色透明液体中间体化合物14。
实施例12
目标化合物15a～15k的合成
将0.01mol实施例11制得的中间体化合物14溶于30ml乙酸乙酯中，加入0.05mol6M盐酸，并于50℃下反应1h，用10％NaOH溶液调至pH 5，加入50ml水，分离出有机相，水相用乙酸乙酯萃取3次，每次30ml，合并有机相，用饱和NaHCO3洗一次，饱和食盐水洗一次，无水硫酸钠干燥。浓缩后得到目标化合物15a～15k。
化合物15a:熔点:134-136℃。1H-NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm):10.21(s,1H,Ar-OH),7.84(d,J＝16.1Hz,1H,1-CH＝),7.67(d,J＝7.7Hz,1H,Ar-H),7.30(t,J＝7.5Hz,2H,Ar-H),7.23-7.27(m,3H,Ar-H),7.17-7.21(m,2H,Ar-H and 2-CH＝),7.00(dt,J＝15.7,6.8Hz,1H,5-CH＝),6.91(d,J＝8.1Hz,1H,Ar-H),6.85(t,J＝7.5Hz,1H,Ar-H),6.49(d,J＝15.7Hz,1H,4-CH＝),2.80(t,J＝7.7Hz,2H,7-CH2),2.55-2.61(m,2H,6-CH2).13C-NMR(151MHz,CDCl3)δ191.37,156.45,147.53,140.83,140.55,131.92,129.36,129.15,128.53,128.40,126.22,125.32,121.95,120.48,116.78,34.52,34.51.ESI-HRMS(m/z):[M+H]+279.1390。
化合物15b:熔点:94-96℃。1H-NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm):9.62(s,1H,Ar-OH),7.53(d,J＝15.9Hz,1H,1-CH＝),7.30(t,J＝7.5Hz,2H,Ar-H),7.24(m,3H,Ar-H),7.21–7.16(m,2H,Ar-H),7.09-7.12(m,2H,Ar-H and 2-CH＝),7.05(dt,J＝15.4,6.8Hz,1H,5-CH＝),6.85(d,J＝7.8Hz,1H,Ar-H),6.55(d,J＝15.7Hz,1H,4-CH＝),2.81(t,J＝7.7Hz,2H,7-CH2),2.56-2.60(m,2H,6-CH2).13C-NMR(151MHz,CDCl3)δ190.01,156.54,147.87,143.88,140.72,136.08,130.14,129.48,128.55,128.38,126.26,124.89,120.78,118.02,115.04,34.48,34.43.ESI-HRMS(m/z):[M+H]+279.1399。
化合物15c:熔点:122-124℃。1H-NMR(600MHz,CDCl3)δ(ppm):7.58(d,J＝15.9Hz,1H,1-CH＝),7.48(d,J＝8.6Hz,2H,Ar-H),7.30(t,J＝7.6Hz,2H,Ar-H),7.21(t,J＝7.8Hz,3H,Ar-H),7.02(dt,J＝15.4,6.8Hz,1H,5-CH＝),6.86(d,J＝8.5Hz,2H,Ar-H),6.82(d,J＝15.9Hz,1H,2-CH＝),6.44(d,J＝15.7Hz,1H,4-CH＝),5.32(s,1H,Ar-OH),2.83(t,J＝7.8Hz,2H,7-CH2),2.58-2.63(m,2H,6-CH2).13C-NMR(151MHz,Chloroform-d)δ190.13,158.76,147.20,144.15,140.79,130.48,129.53,128.53,128.39,127.02,126.22,122.27,116.15,34.49,34.47.ESI-HRMS(m/z):[M-H]-277.1247。
化合物15d:熔点:72-74℃。1H-NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm):9.16(s,1H,Ar-OH),7.50(d,J＝15.9Hz,1H,1-CH＝),7.23-7.36(m,4H,Ar-H),7.13-7.23(m,3H,Ar-H),6.96-7.07(m,2H,Ar-H and 5-CH＝),6.94(d,J＝16.0Hz,1H,2-CH＝),6.54(d,J＝15.7Hz,1H,4-CH＝),3.83(s,3H,Ar-OCH3),2.81(t,J＝7.6Hz,2H,7-CH2),2.54-2.63(m,2H,6-CH2).13C-NMR(151MHz,Chloroform-d)δ189.11,148.62,146.31,145.81,143.06,140.78,129.74,128.41,128.34,128.29,126.10,123.08,122.30,112.94,110.49,55.94,34.46,34.32.ESI-HRMS(m/z):[M+Na]+331.1319。
化合物15e:熔点:115-117℃。1H-NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm):9.66(s,1H,Ar-OH),7.56(d,J＝15.9Hz,1H,1-CH＝),7.36(d,J＝2.0Hz,1H,Ar-H),7.31(t,J＝7.5Hz,2H,Ar-H),7.26(d,J＝6.6Hz,2H,Ar-H),7.20(t,J＝7.2Hz,1H,Ar-H),7.18(dd,J＝8.2,2.0Hz,1H,Ar-H),6.98-7.07(m,2H,2-CH＝and 5-CH＝),6.83(d,J＝8.1Hz,1H,Ar-H),6.54(d,J＝15.7Hz,1H,4-CH＝),3.84(s,3H,Ar-OCH3),2.81(t,J＝7.7Hz,2H,7-CH2),2.56-2.61(m,2H,6-CH2).13C-NMR(151MHz,Chloroform-d)δ189.22,148.25,146.40,143.58,140.88,129.50,128.51,128.40,127.32,126.19,123.40,122.83,114.87,109.70,55.98,34.55,34.40.ESI-HRMS(m/z):[M+Na]+331.1317。
化合物15f:熔点:132-134℃。1H-NMR(600MHz,CDCl3)δ(ppm):7.51(d,J＝15.9Hz,1H,1-CH＝),7.41(d,J＝8.6Hz,2H,Ar-H),7.00-7.06(m,4H,Ar-H),6.94(dt,J＝15.5,6.8Hz,1H,5-CH＝),6.79(d,J＝8.6Hz,2H,Ar-H),6.75(d,J＝15.8Hz,1H,2-CH＝),6.37(d,J＝15.7Hz,1H,4-CH＝),5.31(s,1H,Ar-OH),2.72(t,J＝7.8Hz,2H,7-CH2),2.48-2.54(m,2H,6-CH2),2.25(s,3H,Ar-CH3).13C-NMR(151MHz,Chloroform-d)δ190.16,158.76,147.38,144.11,137.71,135.69,130.47,129.49,129.20,128.26,127.03,122.26,116.14,34.61,34.06,21.04.ESI-HRMS(m/z):[M+Na]+315.1360。
化合物15g:熔点:136-138℃。1H-NMR(600MHz,CDCl3)δ(ppm):7.59(d,J＝15.9Hz,1H,1-CH＝),7.46(d,J＝8.5Hz,2H,Ar-H),7.11(d,J＝8.5Hz,2H,Ar-H),7.02(dt,J＝15.6,6.9Hz,1H,5-CH＝),6.89(d,J＝8.5Hz,2H,Ar-H),6.84(d,J＝8.5Hz,2H,Ar-H),6.81(d,J＝15.9Hz,1H,2-CH＝),6.45(d,J＝15.6Hz,1H,4-CH＝),3.78(s,3H,Ar-OCH3),2.76(t,J＝7.7Hz,2H,7-CH2),2.53-2.60(m,2H,6-CH2).13C-NMR(151MHz,Chloroform-d)δ190.08,158.72,157.97,147.27,144.05,130.46,129.55,129.33,122.29,116.13,113.93,55.30,34.73,33.62.ESI-HRMS(m/z):[M+Na]+331.1319。
化合物15h:熔点:152-154℃。1H-NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm):9.17(s,1H,Ar-OH),9.15(s,1H,Ar-OH),7.50(d,J＝15.9Hz,1H,1-CH＝),7.15-7.17(m,2H,Ar-H),7.03(d,J＝8.4Hz,2H,Ar-H),6.96-7.00(m,2H,Ar-H and 5-CH＝),6.94(d,J＝16.0Hz,1H,2-CH＝),6.68(d,J＝8.4Hz,2H,Ar-H),6.52(d,J＝15.7Hz,1H,4-CH＝),3.82(s,3H,Ar-OCH3),2.68(t,J＝7.6Hz,2H,7-CH2),2.48-2.52(m,2H,6-CH2).13C-NMR(151MHz,DMSO-d6)δ188.51,155.84,150.49,147.06,147.01,143.28,131.38,129.79,129.50,127.85,123.04,121.97,115.45,114.70,112.29,56.00,34.48,33.35.ESI-HRMS(m/z):[M+Na]+347.1261。
化合物15i:熔点:70-72℃。1H-NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm):9.27(s,1H,Ar-OH),7.74–7.77(m,2H,Ar-H),7.62(d,J＝16.0Hz,1H,1-CH＝),7.43-7.44(m,3H,Ar-H),7.23(d,J＝15.8Hz,1H,2-CH＝),7.04-7.09(m,2H,Ar-H and 5-CH＝),6.66(d,J＝7.4Hz,1H,Ar-H),6.63(s,1H,Ar-H),6.58(d,J＝8.0Hz,1H,Ar-H),6.54(d,J＝15.9Hz,1H,4-CH＝),2.70(t,J＝8.1Hz,2H,7-CH2),2.53-2.57(m,2H,6-CH2).13C-NMR(151MHz,Chloroform-d)δ189.96,156.16,147.65,143.89,142.53,134.64,130.60,129.70,129.52,128.96,128.43,124.76,120.50,115.47,113.37,34.32,34.23.ESI-HRMS(m/z):[M+Na]+301.1279。
化合物15j:熔点:76-78℃。1H-NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm):9.16(s,1H,Ar-OH),7.75-7.76(m,2H,Ar-H),7.62(d,J＝16.1Hz,1H,1-CH＝),7.44–7.46(m,3H,Ar-H),7.23(d,J＝16.0Hz,1H,2-CH＝),7.02-7.08(m,3H,Ar-H and 5-CH＝),6.67-6.69(m,2H,Ar-H),6.52(d,J＝15.7Hz,1H,4-CH＝),2.69(t,J＝8.0Hz,2H,7-CH2),2.51-2.54(m,2H,6-CH2).13C-NMR(151MHz,Chloroform-d)δ189.72,154.24,147.58,143.65,130.52,129.56,129.48,128.95,128.38,124.79,115.42,34.73,33.62.ESI-HRMS(m/z):[M+Na]+301.1315。
化合物15k:熔点:72-74℃。1H-NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm):8.80(s,1H,Ar-OH),7.75(dd,J＝6.7,2.9Hz,2H,Ar-H),7.62(d,J＝16.1Hz,1H,1-CH＝),7.43-7.46(m,3H,Ar-H),7.22(d,J＝16.1Hz,1H,2-CH＝),7.05(dt,J＝15.7,6.7Hz,1H,5-CH＝),6.83(d,J＝8.2Hz,1H,Ar-H),6.67(d,J＝2.1Hz,1H,Ar-H),6.62(dd,J＝8.2,2.1Hz,1H,Ar-H),6.54(d,J＝15.8Hz,1H,4-CH＝),3.73(s,3H,Ar-OCH3),2.67(t,J＝7.6Hz,2H,7-CH2),2.52-2.55(m,2H,6-CH2).13C-NMR(151MHz,Chloroform-d)δ147.03,145.61,145.03,143.17,134.82,134.12,130.39,129.65,128.92,128.32,124.88,119.75,114.55,110.71,56.01,34.52,33.89.ESI-HRMS(m/z):[M+Na]+331.1316。
实施例13
中间体化合物17的合成
采用实施例2的制备方法进行合成。
实施例14
中间体化合物18的合成
将实施例13制得的中间体化合物17 0.06mol溶于100ml二氯甲烷中，加入草酰氯0.12mol，室温反应1h。减压蒸去溶剂，并用四氢呋喃转移到滴液漏斗中。
将丙二酸二乙酯0.12mol溶于四氢呋喃80ml，加入氢化钠0.12mol，室温反应30min。滴加上述制好的酰氯，室温下反应30min。减压蒸去溶剂。加入水，用10％盐酸调节溶液pH5，用乙酸乙酯萃取3次，用饱和NaHCO3洗一次,饱和食盐水洗一次，无水硫酸钠干燥。浓缩后得淡黄色透明液体中间体化合物18。
实施例15
中间体化合物19的合成
采用实施例4的制备方法进行合成。
实施例16
中间体化合物21的合成
采用实施例2的制备方法进行合成。
实施例17
中间体化合物22的合成
采用实施例6的制备方法进行合成。
实施例18
中间体化合物23的合成
将0.05mol实施例17制得的中间体化合物22并溶于100ml二氯甲烷中，加入草酰氯0.10mol，室温反应1h。减压蒸去溶剂和没有反应完的草酰氯得到中间体化合物23，并用四氢呋喃转移到滴液漏斗中。
实施例19
中间体化合物24的合成
将0.05mol实施例15制得的中间体化合物19溶于50ml四氢呋喃中，冰浴下加入乙醇镁0.05mol，室温下反应30min，冰浴下滴加实施例18制得的中间体化合物23的四氢呋喃溶液，室温下反应30min。减压蒸去溶剂，加入200ml水，用10％盐酸调节溶液pH 5，用乙酸乙酯萃取3次，用饱和NaHCO3洗一次，饱和食盐水洗一次，无水硫酸钠干燥。浓缩后得淡黄色透明液体中间体化合物24。
实施例20
中间体化合物25的合成
采用实施例9的制备方法进行合成。
实施例21
中间体化合物26的合成
采用实施例10的制备方法进行合成。
实施例22
目标化合物27a-27l的合成
目标化合物27a-27l采用实施例11的制备方法进行合成。
按此合成方法得到目标化合物27a-27l：
化合物27a:熔点:46-48℃。1H-NMR(600MHz,CDCl3)δ(ppm):7.59(d,J＝15.9Hz,1H,1-CH＝),7.46(d,J＝7.9Hz,2H,Ar-H),7.31(t,J＝7.5Hz,2H,Ar-H),7.20-7.23(m,5H,Ar-H),7.02(dt,J＝15.4,6.8Hz,1H,5-CH＝),6.90(d,J＝15.9Hz,1H,2-CH＝),6.45(d,J＝15.7Hz,1H,4-CH＝),2.83(t,J＝7.8Hz,2H,6-CH2),2.57-2.66(m,2H,7-CH2),2.38(s,3H,Ar-CH3).13C-NMR(151MHz,CDCl3)δ189.29,146.56,143.29,140.93,140.86,132.06,129.69,128.53,128.40,128.35,126.21,124.00,34.55,34.42,21.54.ESI-HRMS(m/z):[M+Na]+299.1413。
化合物27b:熔点:48-50℃。1H-NMR(600MHz,CDCl3)δ(ppm):7.59(d,J＝15.9Hz,1H,1-CH＝),7.52(d,J＝8.7Hz,2H,Ar-H),7.31(t,J＝7.6Hz,2H,Ar-H),7.18-7.24(m,3H,Ar-H),7.01(dt,J＝15.6,6.8Hz,1H,5-CH＝),6.92(d,J＝8.7Hz,2H,Ar-H),6.82(d,J＝15.9Hz,1H,2-CH＝),6.44(d,J＝15.6Hz,1H,4-CH＝),3.85(s,3H,Ar-OCH3),2.83(t,J＝7.8Hz,2H,7-CH2),2.51-2.68(m,2H,6-CH2).13C-NMR(151MHz,CDCl3)δ189.19,161.57,146.27,143.03,140.90,130.06,129.74,128.51,128.40,127.50,126.19,122.79,114.41,55.41,34.57,34.41.ESI-HRMS(m/z):[M+Na]+315.1354。
化合物27c:熔点:95-97℃。1H-NMR(600MHz,Chloroform-d)δ7.53(d,J＝15.8Hz,1H,1-CH＝),7.31(t,J＝7.6Hz,2H,Ar-H),7.21(t,J＝7.4Hz,3H,Ar-H),7.03(dt,J＝15.6,6.8Hz,1H,5-CH＝),6.83(d,J＝15.9Hz,1H,2-CH＝),6.79(s,2H,Ar-H),6.47(d,J＝15.6Hz,1H,4-CH＝),3.90(s,6H,Ar-OCH3),3.89(s,3H,Ar-OCH3),2.84(t,J＝7.8Hz,2H,7-CH2),2.58-2.64(m,2H,6-CH2).13C-NMR(151MHz,CDCl3)δ188.97,153.45,146.74,143.26,140.81,140.29,130.27,129.44,128.51,128.39,126.20,124.44,105.49,60.99,56.18,34.51,34.39.ESI-HRMS(m/z):[M+Na]+375.1567。
化合物27d:熔点:70-72℃。1H-NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm):7.79(dd,J＝8.8,2.0Hz,2H,Ar-H),7.61(d,J＝16.0Hz,1H,1-CH＝),7.48-7.53(m,2H,Ar-H),7.24-7.31(m,5H,2-CH＝andAr-H),7.19(t,J＝7.2Hz,1H,Ar-H),7.09(dt,J＝15.7,6.8Hz,1H,5-CH＝),6.52(d,J＝15.8Hz,1H,4-CH＝),2.81(t,J＝7.7Hz,2H,7-CH2),2.57-2.61(m,2H,6-CH2).13C-NMR(151MHz,Chloroform-d)δ188.92,147.19,141.70,140.75,136.29,133.30,129.70,129.45,129.22,128.54,128.38,126.24,125.19,34.49,34.42.ESI-HRMS(m/z):[M+H]+297.1039。
化合物27e:熔点:65-67℃。1H-NMR(600MHz,CDCl3)δ(ppm):7.58(d,J＝15.9Hz,1H,1-CH＝),7.52(d,J＝8.7Hz,2H,Ar-H),7.12(d,J＝8.6Hz,2H,Ar-H),6.99(dt,J＝15.6,6.9Hz,1H,5-CH＝),6.91(d,J＝8.8Hz,2H,Ar-H),6.84(d,J＝8.6Hz,2H,Ar-H),6.82(d,J＝15.9Hz,1H,2-CH＝),6.43(d,J＝15.6Hz,1H,4-CH＝),3.85(s,3H,Ar-OCH3),3.79(s,3H,Ar-OCH3),2.77(t,J＝7.7Hz,2H,7-CH2),2.55-2.58(m,2H,6-CH2).13C-NMR(151MHz,Chloroform-d)δ189.10,161.47,146.31,142.90,132.85,129.96,129.64,129.23,127.41,122.70,114.31,113.82,55.31,55.17,34.59,33.59.ESI-HRMS(m/z):[M+Na]+345.1466。
化合物27f:黄色油状液体。1H-NMR(600MHz,CDCl3)δ(ppm):7.57(d,J＝15.9Hz,1H,1-CH＝),7.29-7.32(m,2H,Ar-H),7.20-7.23(m,3H,Ar-H),7.15(dd,J＝8.3,2.0Hz,1H,Ar-H),7.09(d,J＝2.0Hz,1H,Ar-H),7.02(dt,J＝15.6,6.9Hz,1H,5-CH＝),6.88(d,J＝8.3Hz,1H,Ar-H),6.81(d,J＝15.9Hz,1H,2-CH＝),6.47(dt,J＝15.6,1.6Hz,1H,4-CH＝),3.93(s,3H,Ar-OCH3),3.92(s,3H,Ar-OCH3),2.84(t,J＝7.3Hz,2H,7-CH2),2.59-2.63(m,2H,6-CH2).13C-NMR(151MHz,Chloroform-d)δ189.09,146.36,143.29,140.77,129.40,128.41,128.30,127.64,126.09,123.00,111.01,109.73,55.90,55.83,34.44,34.31.ESI-HRMS(m/z):[M+Na]+345.1480。
化合物27g:熔点:97-99℃。1H-NMR(600MHz,CDCl3)δ(ppm):7.57(d,J＝15.9Hz,1H,1-CH＝),7.15(d,J＝8.3Hz,1H,Ar-H),7.09(s,1H,Ar-H),7.02(dt,J＝14.6,6.8Hz,1H,5-CH＝),6.88(d,J＝8.3Hz,1H,Ar-H),6.79-6.82(m,2H,Ar-H and 2-CH＝),6.72-6.75(m,2H,Ar-H),6.47(d,J＝15.5Hz,1H,4-CH＝),3.93(s,6H,Ar-OCH3),3.88(s,3H,Ar-OCH3),3.86(s,3H,Ar-OCH3),2.78(t,J＝7.7Hz,2H,7-CH2),2.57–2.61(m,2H,6-CH2).13C-NMR(151MHz,Chloroform-d)δ188.87,151.26,149.17,148.81,147.35,146.33,143.19,133.43,129.48,127.64,123.02,120.19,111.72,111.28,111.05,109.78,55.87,55.82,55.81,55.76,34.53,34.08.ESI-HRMS(m/z):[M+Na]+405.1693。
化合物27h:熔点:58-60℃。1H-NMR(600MHz,CDCl3)δ(ppm):7.57(d,J＝15.9Hz,1H,1-CH＝),7.15(d,J＝8.3Hz,1H,Ar-H),7.09(s,1H,Ar-H),7.02(dt,J＝14.6,6.8Hz,1H,5-CH＝),6.88(d,J＝8.3Hz,1H,Ar-H),6.79-6.82(m,2H,Ar-H and 2-CH＝),6.72-6.75(m,2H,Ar-H),6.47(d,J＝15.5Hz,1H,4-CH＝),3.93(s,6H,Ar-OCH3),3.88(s,3H,Ar-OCH3),3.86(s,3H,Ar-OCH3),2.78(t,J＝7.7Hz,2H,7-CH2),2.57–2.61(m,2H,6-CH2).13C-NMR(151MHz,Chloroform-d)δ189.14,146.90,143.08,132.78,130.31,129.58,129.22,128.84,128.22,124.80,113.83,55.18,34.61,33.55.ESI-HRMS(m/z):[M+Na]+405.1693。
化合物27i:熔点:62-64℃。1H-NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm):7.77–7.73(m,2H,Ar-H),7.62(d,J＝16.0Hz,1H,1-CH＝),7.42-7.45(m,3H,Ar-H),7.23(d,J＝16.1Hz,1H,2-CH＝),7.13(d,J＝8.0Hz,2H,Ar-H),7.04-7.11(m,3H,Ar-H and 5-CH＝),6.53(d,J＝15.7Hz,1H,4-CH＝),2.76(t,J＝7.6Hz,2H,7-CH2),2.54-2.58(m,2H,6-CH2),2.26(s,3H,Ar-CH3).13C-NMR(151MHz,Chloroform-d)δ189.28,147.08,143.19,137.74,135.69,134.83,130.41,129.65,129.21,128.94,128.32,128.27,124.88,34.57,34.09,21.05.ESI-HRMS(m/z):[M+H]+277.1584。
化合物27j:黄色油状物。1H-NMR(600MHz,CDCl3)δ(ppm):7.62(d,J＝16.0Hz,1H,1-CH＝),7.56–7.57(),7.39-7.41(m,3H,Ar-H),7.03(dt,J＝15.7,6.9Hz,1H,5-CH＝),6.94(d,J＝16.0Hz,1H,2-CH＝),6.81(d,J＝8.1Hz,1H,Ar-H),6.72-6.75(m,2H,Ar-H),6.45(d,J＝15.7Hz,1H,4-CH＝),3.87(m,6H,Ar-OCH3),2.79(t,J＝7.7Hz,2H,7-CH2),2.58-2.61(m,2H,6-CH2).13C-NMR(151MHz,Chloroform-d)δ189.14,148.80,146.88,143.17,133.32,130.34,129.56,128.84,128.22,124.77,120.15,111.63,111.21,55.85,55.77,34.57,34.07.ESI-HRMS(m/z):[M+Na]+345.1467。
化合物27k:黄色油状物。1H-NMR(600MHz,CDCl3)δ(ppm):7.63(d,J＝16.0Hz,1H,1-CH＝),7.57(dd,J＝6.7,3.0Hz,2H,Ar-H),7.40-7.41(m,3H,Ar-H),7.04(dt,J＝15.6,6.9Hz,1H,5-CH＝),6.95(d,J＝15.9Hz,1H,2-CH＝),6.48(d,J＝15.7Hz,1H,4-CH＝),6.42(s,2H,Ar-H),3.85(s,6H,Ar-OCH3),3.83(s,3H,Ar-OCH3),2.78(t,J＝7.7Hz,2H,7-CH2),2.59-2.63(m,2H,6-CH2).13C-NMR(151MHz,Chloroform-d)δ153.10,146.81,143.32,136.26,134.61,130.41,129.54,128.86,128.60,128.23,127.19,124.72,105.24,60.76,56.01,34.86,34.41.ESI-HRMS(m/z):[M+Na]+375.1569。
化合物27l:熔点:48-50℃。1H-NMR(600MHz,CDCl3)δ(ppm):7.61(d,J＝16.0Hz,1H,1-CH＝),7.57(dd,J＝6.7,2.9Hz,2H,Ar-H),7.39-7.41(m,3H,Ar-H),7.27(d,J＝8.4Hz,2H,Ar-H),7.13(d,J＝8.3Hz,2H,Ar-H),6.99(dt,J＝15.6,6.8Hz,1H,5-CH＝),6.93(d,J＝16.0Hz,1H,2-CH＝),6.44(d,J＝15.6Hz,1H,4-CH＝),2.81(t,J＝7.7Hz,2H,7-CH2),2.57-2.60(m,2H,6-CH2).13C-NMR(151MHz,Chloroform-d)δ189.05,151.33,149.24,147.43,146.42,143.31,133.48,129.48,127.72,123.16,123.04,120.24,111.74,111.30,111.09,109.81,34.65,34.19.ESI-HRMS(m/z):[M+Na]+319.0875。
实施例23
用MTT法测定了目标化合物15a～27l对人结肠癌细胞HCT116，人乳腺癌细胞MCF-7，人黑色素瘤细胞A375三类肿瘤细胞的增殖抑制作用。
选用对数生长期的贴壁肿瘤细胞，用胰酶消化后，HCT116、MCF7、A375用含10％胎牛血清的培养基配成5×104/ml(后续药物处理48h)的细胞悬液，接种在96孔培养板中，每孔100ml，37℃，5％CO2培养24h。实验组更换新的含不同浓度被测样品的培养液，对照组则更换含等体积溶剂的培养液，每组设3个平行孔，37℃，5％CO2分别培养48h。弃去上清液，用PBS小心洗2次，每孔加入100ml新鲜配制的含0.5mg/ml MTT的培养基，37℃继续培养4h。小心弃去上清，并加入150ml DMSO，用微型振荡器混匀10min后，用酶标仪在492nm处测定光密度值(OD)。
按下式计算药物对肿瘤细胞生长的抑制率(Inhibition Rate，IR％)：
＝[A492(阴性对照)-A492(加药组)]/A492(阴性对照)×100％
用Graphpad Prism 6.02软件求出样品的半数抑制浓度(IC50)。
结果见下表，对于HCT116和A375细胞，大部分目标化合物抑制肿瘤细胞株的IC50值均小于姜黄素，因此，将姜黄素结构中的β-二酮替换为单羰基可提高化合物的体外抗肿瘤活性。
表1化合物15a～27l和姜黄素对肿瘤细胞的IC50值
以上实施例描述了本发明的基本原理、主要特征及优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明原理的范围下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进均落入本发明保护的范围内。