具体实施方式

下面将结合实施例对本发明中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。尽管已经详细描述了本发明的代表性实施例，但是本发明所属技术领域的普通技术人员将理解，在不脱离本发明范围的情况下可以对本发明进行各种修改和改变。因此，本发明的范围不应局限于实施方案，而应由所附权利要求及其等同物来限定。

本发明提供了一种复合防腐剂，包括：独立包装的A组分、B组分、C组分和D组分；其中所述A组分包括80-90％溶菌酶和10-20％抗菌肽；所述B组分包括10-20％抗坏血酸和80-90％柠檬酸；所述C组分包括100％pH调节剂，优选为甲酸；所述D组分包括50-70％氯化钠、10-20％丙酸钙和10-20％乙二胺四乙酸二钠。上述百分比为各成分在各独立包装组份中的质量百分比，例如，A组分包括占A组分总质量80-90％的溶菌酶和占A组分总质量10-20％的抗菌肽。

其中，溶菌酶主要通过破坏细胞壁中的N-乙酰胞壁酸和N-乙酰氨基葡糖之间的β-1,4糖苷键，使细胞壁不溶性黏多糖分解成可溶性糖肽，导致细胞壁破裂内容物逸出而使细菌溶解。溶菌酶还可与带负电荷的病毒蛋白直接结合，与DNA、RNA、脱辅基蛋白形成复盐，使病毒失活，具有抗菌、消炎、抗病毒等作用；具体的，A组分中溶菌酶的酶活为1.0×10⁵-2.0×10⁵U/g。

抗菌肽是一类具有抗菌活性的碱性多肽物质，抗菌肽可直接作用于几乎所有种类的微生物，发挥抗菌活性，而其本身是多肽物质，不会造成有害影响；

抗坏血酸作为抗氧化剂可防止鱼溶浆中的不饱和脂肪酸氧化，保存更长的时间；柠檬酸可作为酸度调节剂、抗氧化剂和金属离子螯合剂等对抗坏血酸的作用起到一定的增效，同时有一定的防腐作用。

甲酸可以使鱼溶浆保持低pH值，抑制革兰氏阴性菌假单胞菌和希瓦氏菌等微生物的生长，同时甲酸还可作为饲料中的酸化剂组分；

氯化钠溶液浓度较高时，高渗透压可使微生物脱水导致细胞死亡；

乙二胺四乙酸二钠是一种非常强的金属离子螯合剂，而部分常见的金属离子是溶菌酶的抑制剂，使用乙二胺四乙酸二钠可将金属离子螯合，对溶菌酶起到一定的保护作用。

本发明还提供了一种复合防腐剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)按比例称取溶菌酶和抗菌肽，将其混合后进行密封包装，制得所述A组分；

(2)按比例称取抗坏血酸和柠檬酸，将其混合后进行密封包装，制得所述B组分；

(3)称取PH调节剂量并进行密封包装，制得所述C组分；

(4)按比例称取氯化钠、丙酸钙和乙二胺四乙酸二钠，加入到搅拌机中常温搅拌均匀后，倒出进行密封包装，制得所述D组分。

具体的，所述A组分、B组分、C组分和D组分可以集中包装统一封口，其中A组分和B组分采用避光材质进行包装。

本发明还提供了一种复合防腐剂在饲料原料中的使用方法，包括以下步骤：

(1)将制备好的饲料原料，例如鱼溶浆，放入聚乙烯桶中，低温长时间灭菌后，冷却至室温；

其中灭菌温度为50℃-60℃，灭菌时间为30min-60min；

(2)制备上述复合防腐剂，得到独立包装的A组分、B组分、C组分和D组分；

(3)使用所述C组分调节饲料原料的pH，将饲料原料的pH控制在3.0-3.5；

(4)将A组分、B组分、D组分依次加入到调好pH的饲料原料中；

具体的，以饲料原料质量计，A组分的添加量为1-3％，B组分的添加量为0.5-2％，D组分的添加量为3-5％；

(5)将所述步骤(4)中的饲料原料密封，避光保存。

下面通过具体实施例对本发明的复合防腐剂的效果进行研究。

实施例1：

本实施例提供了一种复合防腐剂，包括：独立包装的A组分、B组分、C组分和D组分；A组分包括80％溶菌酶和20％抗菌肽；B组分包括10％抗坏血酸和90％柠檬酸；C组分包括100％固体甲酸；D组分包括60％氯化钠、20％丙酸钙和20％乙二胺四乙酸二钠。

上述复合防腐剂的制备方法为：

(1)称取80％溶菌酶和20％抗菌肽，将其混合后使用避光材料进行密封包装，制得所述A组分；溶菌酶酶活为2.0×10⁵U/g；

(2)称取10％抗坏血酸和90％柠檬酸，将其混合后使用避光材料进行密封包装，制得所述B组分；

(3)称量100％固体甲酸并进行密封包装，制得所述C组分；

(4)称取60％氯化钠、20％丙酸钙和20％乙二胺四乙酸二钠，加入到搅拌机中常温搅拌，搅拌时若有发热现象，停止搅拌并冷却至室温，再搅拌至均匀，倒出进行密封包装，制得所述D组分。

将上述复合防腐剂添加到鱼溶浆中，具体步骤如下：

(1)称取新鲜制作出来的100g鱼溶浆，放入聚乙烯瓶中，低温长时间灭菌后，冷却至室温；其中灭菌温度为50℃，灭菌时间为60min；

(2)使用C组分调节鱼溶浆的pH，将pH控制在3.0-3.5；

(3)按鱼溶浆质量计算，将1％的A组分，0.5％的B组分，3％的D组分依次加入到调好pH的鱼溶浆中；

(4)将添加有复合防腐剂的鱼溶浆密封，放置在室温(25℃)下，避光保存。

对放置过程中鱼溶浆的粗脂肪、粗蛋白质、气味、菌落总数、挥发性盐基氮(TVB-N)、酸价进行定期监测，结果如表1所示。

实施例2：

本实施例提供了一种复合防腐剂，包括：独立包装的A组分、B组分、C组分和D组分；A组分包括90％溶菌酶和10％抗菌肽；B组分包括20％抗坏血酸和80％柠檬酸；C组分包括100％固体甲酸；D组分包括70％氯化钠、10％丙酸钙和20％乙二胺四乙酸二钠。

上述复合防腐剂的制备方法为：

(1)称取90％溶菌酶和10％抗菌肽，将其混合后使用避光材料进行密封包装，制得所述A组分；溶菌酶酶活为1.0×10⁵U/g；

(2)称取20％抗坏血酸和80％柠檬酸，将其混合后使用避光材料进行密封包装，制得所述B组分；

(3)称量100％固体甲酸并进行密封包装，制得所述C组分；

(4)称取70％氯化钠、10％丙酸钙和20％乙二胺四乙酸二钠，加入到搅拌机中常温搅拌，搅拌时若有发热现象，停止搅拌并冷却至室温，再搅拌至均匀，倒出进行密封包装，制得所述D组分。

将上述复合防腐剂添加到鱼溶浆中，具体步骤如下：

(1)称取新鲜制作出来的100g鱼溶浆，放入聚乙烯桶中，低温长时间灭菌后，冷却至室温；其中灭菌温度为55℃，灭菌时间为45min；

(2)使用C组分调节鱼溶浆的pH，将pH控制在3.0-3.5；

(3)按鱼溶浆质量计算，将2％的A组分，1％的B组分，4％的D组分依次加入到调好pH的鱼溶浆中；

(4)将添加有复合防腐剂的鱼溶浆密封，放置在室温(25℃)下，避光保存。

对放置过程中鱼溶浆的粗脂肪、粗蛋白质、气味、菌落总数、挥发性盐基氮(TVB-N)、酸价进行定期监测，结果如表1所示。

实施例3：

本实施例提供了一种复合防腐剂，包括：独立包装的A组分、B组分、C组分和D组分；A组分包括90％溶菌酶和10％抗菌肽；B组分包括10％抗坏血酸和90％柠檬酸；C组分包括100％固体甲酸；D组分包括80％氯化钠、10％丙酸钙和10％乙二胺四乙酸二钠。

上述复合防腐剂的制备方法为：

(1)称取90％溶菌酶和10％抗菌肽，将其混合后使用避光材料进行密封包装，制得所述A组分；溶菌酶酶活为1.0×10⁵U/g；

(2)称取10％抗坏血酸和90％柠檬酸，将其混合后使用避光材料进行密封包装，制得所述B组分；

(3)称量100％固体甲酸并进行密封包装，制得所述C组分；

(4)称取80％氯化钠、10％丙酸钙和10％乙二胺四乙酸二钠，加入到搅拌机中常温搅拌，搅拌时若有发热现象，停止搅拌并冷却至室温，再搅拌至均匀，倒出进行密封包装，制得所述D组分。

将上述复合防腐剂添加到鱼溶浆中，具体步骤如下：

(1)称取新鲜制作出来的100g鱼溶浆，放入聚乙烯桶中，低温长时间灭菌后，冷却至室温；其中灭菌温度为60℃，灭菌时间为30min；

(2)使用C组分调节鱼溶浆的pH，将pH控制在3.0-3.5；

(3)按鱼溶浆质量计算，将3％的A组分，2％的B组分，5％的D组分依次加入到调好pH的鱼溶浆中；

(4)将添加有复合防腐剂的鱼溶浆密封，放置在室温(25℃)下，避光保存。

对放置过程中鱼溶浆的粗脂肪、粗蛋白质、气味、菌落总数、挥发性盐基氮(TVB-N)、酸价进行定期监测，结果如表1所示。

实施例4：

制备与实施例1相同的复合防腐剂，并按照实施例1的方法添加到100g鱼溶浆中，区别在于按鱼溶浆质量计算，A组分的添加量为2％，B组分的添加量为1％，D组分的添加量为4％。

对放置过程中鱼溶浆的粗脂肪、粗蛋白质、气味、菌落总数、挥发性盐基氮(TVB-N)、酸价进行定期监测，结果如表1所示。

实施例5：

制备与实施例1相同的复合防腐剂，并按照实施例1的方法添加到100g鱼溶浆中，区别在于按鱼溶浆质量计算，A组分的添加量为3％，B组分的添加量为2％，D组分的添加量为5％。

对放置过程中鱼溶浆的粗脂肪、粗蛋白质、气味、菌落总数、挥发性盐基氮(TVB-N)、酸价进行定期监测，结果如表1所示。

实施例6：

制备与实施例1相同的复合防腐剂，并按照实施例1的方法添加到100g鱼溶浆中，区别在于按鱼溶浆质量计算，A组分的添加量为4％，B组分的添加量为3％，D组分的添加量为6％。

对放置过程中鱼溶浆的粗脂肪、粗蛋白质、气味、菌落总数、挥发性盐基氮(TVB-N)、酸价进行定期监测，结果如表1所示。

比较例1：

(1)称取新鲜制作出来的100g鱼溶浆，放入聚乙烯桶中，低温长时间灭菌后，冷却至室温；其中灭菌温度为60℃，灭菌时间为30min；

(2)密封后放置在室温(25℃)下，避光保存。

对放置过程中鱼溶浆的粗脂肪、粗蛋白质、气味、菌落总数、挥发性盐基氮(TVB-N)、酸价进行定期监测，结果如表1所示。

比较例2：

(1)称取新鲜制作出来的100g鱼溶浆，放入聚乙烯桶中，低温长时间灭菌后，冷却至室温；其中灭菌温度为60℃，灭菌时间为30min；

(2)按鱼溶浆质量计算，将实施例1中制备的A组分以3％的添加量加入到灭菌后的鱼溶浆中；

(3)将添加有A组分的鱼溶浆密封，放置在室温(25℃)下，避光保存。

对放置过程中鱼溶浆的粗脂肪、粗蛋白质、气味、菌落总数、挥发性盐基氮(TVB-N)、酸价进行定期监测，结果如表1所示。

比较例3：

(1)称取新鲜制作出来的100g鱼溶浆，放入聚乙烯桶中，低温长时间灭菌后，冷却至室温；其中灭菌温度为60℃，灭菌时间为30min；

(2)按鱼溶浆质量计算，将实施例1中制备的B组分以2％的添加量加入到灭菌后的鱼溶浆中；

(3)将添加有B组分的鱼溶浆密封，放置在室温(25℃)下，避光保存。

对放置过程中鱼溶浆的粗脂肪、粗蛋白质、气味、菌落总数、挥发性盐基氮(TVB-N)、酸价进行定期监测，结果如表1所示。

比较例4：

(1)称取新鲜制作出来的100g鱼溶浆，放入聚乙烯桶中，低温长时间灭菌后，冷却至室温；其中灭菌温度为60℃，灭菌时间为30min；

(2)使用实施例1中制备的C组分调节鱼溶浆的pH，将pH控制在3.0-3.5；

(3)将添加有C组分的鱼溶浆密封，放置在室温(25℃)下，避光保存。

对放置过程中鱼溶浆的粗脂肪、粗蛋白质、气味、菌落总数、挥发性盐基氮(TVB-N)、酸价进行定期监测，结果如表1所示。

比较例5：

(1)称取新鲜制作出来的100g鱼溶浆，放入聚乙烯桶中，低温长时间灭菌后，冷却至室温；其中灭菌温度为60℃，灭菌时间为30min；

(2)按鱼溶浆质量计算，将实施例1中制备的D组分以5％的添加量加入到灭菌后的鱼溶浆中；

(3)将添加有D组分的鱼溶浆密封，放置在室温(25℃)下，避光保存。

对放置过程中鱼溶浆的粗脂肪、粗蛋白质、气味、菌落总数、挥发性盐基氮(TVB-N)、酸价进行定期监测，结果如表1所示。

表1放置过程中鱼溶浆各指标测定结果

由表1可知，与未添加任何防腐试剂的比较例1相比，比较例2-4可以在较短时间内起防腐作用，但其效果远远无法与实施例1-6相比，表明本发明提供的复合防腐剂中各组分单独使用时并不能延长鱼溶浆的保质期。实施例1-6的复合防腐剂均对粗脂肪和粗蛋白营养指标有很好的保存作用，对气味、菌落总数、TVB-N和酸价等质量指标有很好的控制，但各实施例之间的效果均有差异，表明本发明提供的复合防腐剂中各组分之间存在协同作用；实施例6分别和实施例1、实施例4-5相比，对质量指标的控制没有显著的差异，而增大添加量会导致保存成本的增加，因此，添加量优选为A包1％～3％，B包0.5％～2％，D包3％～5％。

综上所述，采用本发明提供的这种复合防腐剂后，鱼溶浆原料的粗蛋白和粗脂肪营养指标能较好的保持，气味、菌落总数、TVB-N和酸价等质量指标均能很好的抑制，可以有效抑制微生物的生长，延长鱼溶浆的储存时间，产品使用安全、方便，为生产和销售提供更多可能，具有广阔的实际应用价值。

以上例举仅仅是对本发明的举例说明，并不构成对本发明的保护范围的限制，凡是与本发明相同或相似的设计均属于本发明的保护范围之内。